車曉菲，王紅志,2 ，汪 令,2，趙雙志 ，王 露,2 ，趙兵令,2★

（1.河北維爾利動物藥業(yè)集團(tuán)有限公司 050200；2.河北省中獸藥產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院 050200；3.河北省功能性添加劑技術(shù)創(chuàng)新中心 050200）

清肺排毒湯由《傷寒雜病論》中的麻杏石甘湯、射干麻黃湯、小柴胡湯、五苓散等經(jīng)典方優(yōu)化組合而來，在抗擊新冠疫情中發(fā)揮了重要作用。獸用清肺排毒湯是受清肺排毒方對中獸藥的啟發(fā)，考慮到相應(yīng)病癥對組方進(jìn)行調(diào)整而得[1]。其組方在清肺排毒湯的基礎(chǔ)上，結(jié)合了普濟(jì)消毒飲[2]、宣白承氣湯[3]、苓桂術(shù)甘湯[4]等經(jīng)典方劑，由麻黃、黃芩、連翹、大黃、厚樸、山藥、白術(shù)、魚腥草、石膏等24種藥材按規(guī)定工藝制備而成，用于黑肺、爛肺、肺熱、痰熱壅肺證?？紤]到獸用清肺排毒湯組方復(fù)雜，為科學(xué)有效的控制產(chǎn)品質(zhì)量，我們通過檢索相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，制定了如下研究方案：（1）參考《中國獸藥典》[5]中藿香正氣口服液的“鑒別”方法，通過TLC法定性鑒別厚樸。（2）參考《中國獸藥典》中大黃藥材的“鑒別”方法，通過TLC法定性鑒別大黃。（3）參考《中國獸藥典》中黃芩藥材的“含量測定”方法，測定黃芩苷含量。（4）參考《中國獸藥典》麻杏石甘口服液的“含量測定”方法，測定鹽酸麻黃堿與鹽酸偽麻黃堿的總含量。（5）參考《中國獸藥典》中連翹藥材的“含量測定”方法，測定連翹苷含量。

1 儀器與材料

1.1 儀器

1260 Infinity II高效液相色譜儀（美國安捷倫公司），DAD檢測器，OpenLab CDS VL 工作站 ；AUW120D型電子天平（日本SHIMADZU公司）；DK-98-Ⅱ電子恒溫水浴鍋（天津市泰斯特儀器有限公司）；ZF-1型三用紫外分析儀（上海市安亭電子儀器廠）。

1.2 對照品與試劑

厚樸酚對照品（批號110729-202015 含量99.0%）；和厚樸酚（批號19032102 含量99.96%）；厚樸對照藥材（批號121285-201303）；大黃對照藥材（批號120984-201202）；大黃酸對照品（批號110757-201607 含量99.3%）；黃芩苷對照品（批號110715-201821 含量95.4%）；鹽酸麻黃堿對照品（批號171241-201809 含量100.0%）；鹽酸偽麻黃堿對照品（批號171237-201510 含量99.8%）；連翹苷對照品（批號110821-201816 含量95.1%），上述對照品及對照藥材除和厚樸酚購于成都普菲德生物技術(shù)有限公司外，均來自中國食品藥品檢定研究院。HPLC法中，甲醇、乙腈、磷酸為色譜純，水為娃哈哈水。其他試劑均為分析純。

1.3 藥材與樣品制備

1.3.1 藥材

麻黃、黃芩、連翹、大黃、厚樸、山藥、白術(shù)、魚腥草、石膏、苦杏仁、水半夏、瓜蔞、生姜、茯苓、射干、紫苑、桑白皮、枳殼、陳皮、丹參、升麻、馬鞭草、仙鶴草、桔梗等均采買于河北華都藥業(yè)有限公司，質(zhì)量均符合《中華人民共和國獸藥典》2020版（二部）的有關(guān)規(guī)定。

1.3.2 樣品制備

1.3.2.1 獸用清肺排毒湯樣品制備：麻黃30g，連翹45g，大黃30g，厚樸30g，山藥30g，白術(shù)30g，魚腥草45g，石膏150g，水半夏45g，瓜蔞45g，生姜30g，茯苓45g，射干45g，紫菀30g，桑白皮45g，枳殼30g，陳皮30g，丹參45g，升麻45g，馬鞭草30g，仙鶴草45g，桔梗30g，共計(jì)22味，加水煎煮，提取2次。第一次2h加水8倍量，煮沸后加入黃芩45g，苦杏仁30g，第二次提取1h，加水6倍量。煎煮過程中收集蒸餾液,藥液合并濾過，減壓濃縮，冷藏靜置24h，過濾，濾液加水至1000mL，即得。

1.3.2.2 厚樸對照藥材煎煮液：取厚樸對照藥材2g，加水30mL，加熱回流3h，濾過，濾液濃縮至5mL，備用。

1.3.2.3 藥材單提液溶液：大黃、黃芩、麻黃、連翹等藥材各自按“1.3.2.1”項(xiàng)下相關(guān)規(guī)定制備。

1.3.2.4 陰性樣品制備：除目標(biāo)藥材外，其余藥材按“1.3.2.1”制備工藝進(jìn)行處理。

2 試驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 TLC定性鑒別

2.1.1 厚樸的薄層鑒別

參考藿香正氣口服液進(jìn)行研究：取獸用清肺排毒湯（批號：20210401）樣品20mL，用石油醚（30℃～60℃）置分液漏斗中振搖提取2次，每次加入25mL，合并石油醚液，低溫蒸干（50℃以下），殘?jiān)右宜嵋阴?mL使溶解，作為供試品溶液。取厚樸對照藥材煎煮液，同法制成對照藥材溶液。另取厚樸酚對照品、和厚樸酚對照品，分別加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（2020版中國獸藥典附錄0502）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60℃～90℃）-乙酸乙酯-甲酸（17:3:0.4）為展開劑，展開，取出，晾干。顯色：噴以5%香草醛硫酸溶液，在100℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果：供試品色譜中，在與厚樸酚對照品、和厚樸酚對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，分離度良好；陰性樣品無干擾；對照藥材溶液上下沿斑點(diǎn)Rf值未達(dá)到要求，不作為參考依據(jù)。結(jié)果見圖1：

圖1 獸用清肺排毒湯中厚樸的TLC圖

結(jié)果表明：該方法中厚樸酚、和厚樸酚作為目標(biāo)成分專屬性符合要求，可作為厚樸的鑒別依據(jù)。

2.1.2 大黃的薄層鑒別

取獸用清肺排毒湯（批號：20210401）樣品20mL，蒸干，干膏加甲醇20mL，超聲處理10min進(jìn)行提取，濾過，濾液置水浴上蒸干，殘?jiān)铀?0mL使全部溶解，再加鹽酸1mL，加熱回流30min，立即冷卻，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，用乙醚分2次振搖提取，每次20mL，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)尤燃淄?mL使溶解，作為供試品溶液。對照藥材、對照品參照《中國獸藥典》中大黃藥材的薄層鑒別系統(tǒng)進(jìn)行檢驗(yàn)。結(jié)果：供試品色譜中，在與大黃對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；在與大黃酸對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)。同時，進(jìn)行大黃陰性樣品、大黃藥材的檢測。結(jié)果見圖2：

圖2 獸用清肺排毒湯中大黃TLC圖

結(jié)果表明：陰性樣品無干擾，該方法專屬性符合要求；供試品及藥材斑點(diǎn)清晰，可作為大黃的鑒別依據(jù)。

2.2 含量測定

2.2.1 黃芩含量測定（以黃芩苷含量計(jì)）

2.2.1.1 色譜條件

色譜柱：十八烷基硅烷鍵合硅膠柱；流動相：甲醇-水-磷酸（47:53:0.2）；流速：1.0mL/min；檢測波長：280nm；理論塔板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。柱溫：室溫；進(jìn)樣量：10μL。

2.2.1.2 對照品溶液及供試品溶液的制備

對照品溶液的制備：取在60℃減壓干燥4h的黃芩苷對照品約15mg，精密稱定，加甲醇稀釋250倍，制成每1mL約含60μg的溶液，搖勻，即得。

供試品溶液的制備：精密量取供試品2mL，置25mL容量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻。精密量取5mL，置25mL容量瓶中，加甲醇定容，搖勻，即得。同時，按供試品溶液的制備方案，處理黃芩陰性樣品以及黃芩單提液。

上述對照品溶液及供試品溶液過0.45μm濾膜，濾液裝入液相小瓶，備用。

2.2.1.3 專屬性考察

分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液、黃芩陰性樣處理液、黃芩單提液處理液各10μL，按“2.2.1.1”項(xiàng)下規(guī)定的色譜條件進(jìn)行測定，考察此方法專屬性是否符合要求。結(jié)果見圖3。

圖3 黃芩含量測定

結(jié)果表明：陰性樣品對黃芩苷主峰無干擾，該方法專屬性符合要求。

2.2.1.4 線性關(guān)系考察

精密稱取在60℃減壓干燥4h的黃芩苷對照品15.08mg（含量95.4%），置50mL量瓶中，加甲醇定容，搖勻，作為對照品儲備液。精密量取6份對照品儲備液，每份5.0mL，分別置于200mL、100mL、50mL、25mL、10mL、5mL的容量瓶中，依次加甲醇定容，搖勻，作為對照溶液。依次精密量取對照溶液10μL，按“2.2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測定，記錄峰面積數(shù)值。以對照品濃度作為橫坐標(biāo)（X，μg/mL）,黃芩苷色譜峰的峰面積作為縱坐標(biāo)（Y，mAU*S），進(jìn)行線性回歸計(jì)算，考察線性關(guān)系范圍。

回歸方程為：Y=34.568X+53.18 （R2=0.9996）

結(jié)果表明：該方法在黃芩苷7.1932～287.73μg/mL的濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系符合要求。

2.2.1.5 準(zhǔn)確度考察

精密量取“2.2.1.4”項(xiàng)下制備的對照儲備液5.0mL，置25mL量瓶中，加甲醇定容，搖勻，作為對照溶液。取樣品3瓶（批次：20210401）作為供試品，每瓶取樣2.0mL組成1組。第一組加對照溶液1.0mL，第二組加對照溶液2.0mL，第三組加對照溶液5.0mL，按“2.2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，在“2.2.1.1”項(xiàng)下色譜條件下測定。記錄峰面積并計(jì)算回收率，考察方法的準(zhǔn)確度。測得黃芩苷的回收率均在98%～102%之間。詳見表1：

表1 黃芩苷回收率測定結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

結(jié)果表明該方法準(zhǔn)確度符合要求。

2.2.1.6 精密度考察

取同一液相小瓶中的供試品溶液，按規(guī)定的色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄黃芩苷色譜峰峰面積，計(jì)算峰面積的RSD值，考察此方法的精密度。

結(jié)果測得黃芩苷色譜峰峰面積RSD值為：0.16%，表明該方法精密度良好，符合要求。

2.2.1.7 重復(fù)性考察

取同一批樣品3瓶（批次：20210401）作為供試品，第一組分別取樣1.0mL，第二組分別取樣2.0mL，第三組分別取樣3.0mL，共計(jì)9份樣品。按“2.2.1.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，在“2.2.1.1”項(xiàng)下色譜條件下測定，計(jì)算黃芩苷的含量，考察方法的重復(fù)性。結(jié)果詳見表2.

表2 黃芩苷含量測定結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

結(jié)果表明：該方法測定黃芩苷含量重復(fù)性良好，符合要求。

2.2.1.8 穩(wěn)定性考察

取同一液相小瓶的供試品溶液，自其第一次進(jìn)樣起計(jì)時，間隔2h,4h,8h,12h,18h,24h各進(jìn)樣1次，記錄黃芩苷色譜峰峰面積，并計(jì)算其RSD值，考察方法的穩(wěn)定性。

結(jié)果測得黃芩苷色譜峰峰面積RSD值為：0.22%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.2 麻黃含量測定（以鹽酸麻黃堿與鹽酸偽麻黃堿的總量計(jì)）

2.2.2.1 色譜條件

色譜柱：C18柱；流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液（含0.1%三乙胺）（3:97）；檢測波長：207nm；理論塔板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算應(yīng)不低于4000；柱溫：室溫；進(jìn)樣量：10μL。

2.2.2.2 混合對照品及供試品溶液的制備

混合對照品溶液的制備：分別取鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿對照品約10mg，精密稱定，置同一50mL量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液定容，搖勻；精密移取5.0mL，置50mL量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液至刻度，搖勻，即得。

供試品溶液的制備：精密量取供試品10mL，置150mL碘量瓶中，加濃氨試液10mL，精密加入三氯甲烷50mL，稱定重量，超聲處理20min，時時振搖，放冷，加三氯甲烷補(bǔ)足減失的重量，搖勻，精密量取下層三氯甲烷液25mL，加鹽酸乙醇溶液（1→20）4mL，減壓回收三氯甲烷至干，殘?jiān)?.1mol/L鹽酸溶液使溶解，轉(zhuǎn)移至25mL量瓶中，容器分次洗滌，洗液并入同一量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液定容，搖勻，即得。同時，按供試品溶液的制備方法，處理麻黃陰性樣品以及麻黃單提液。

上述溶液過0.45μm濾膜，濾液裝入液相小瓶，備用。

2.2.2.3 專屬性考察

分別精密吸取混合對照品溶液、供試品溶液、麻黃陰性樣品處理液、麻黃單提液處理液各10μL，按“2.2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜圖，對專屬性進(jìn)行考察。結(jié)果見圖4。

圖4 麻黃含量測定

結(jié)果表明：陰性樣品w對測定無干擾，該方法專屬性符合要求。

2.2.2.4 線性關(guān)系考察

精密稱取鹽酸麻黃堿對照品11.06mg（含量100.0%）、鹽酸偽麻黃堿對照品10.39mg（含量99.8%），置同一50mL量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液溶解并定容搖勻，作為混合對照品儲備液。精密量取儲備液5.0mL，分別置200mL、100mL、50mL、25mL、10mL、5mL容量瓶中，加0.1mol/L鹽酸溶液定容搖勻，作為對照溶液。按“2.2.2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，分別記錄鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿的峰面積。以濃度作為橫坐標(biāo)（X，μg/mL）,峰面積作為縱坐標(biāo)（Y，mAU*S），進(jìn)行線性回歸計(jì)算。

鹽酸麻黃堿的回歸方程為：Y=20.43X+8.3229 （R2=0.9999）

鹽酸偽麻黃堿的回歸方程為：Y=20.452X-4.5099（R2=0.9995）

結(jié)果表明：該方法在鹽酸麻黃堿濃度為5.5300～221.20μg/mL、鹽酸偽麻黃堿濃度為5.1846～207.38μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.2.5 準(zhǔn)確度考察

精密量取“2.2.2.4”項(xiàng)下對照儲備液5.0mL，加0.1mol/L鹽酸溶液稀釋并定容至50mL，作為混合對照溶液。取3瓶樣品（批次：20210401）作為供試品，每瓶平行取樣3份，每份精密量取10.0mL。3瓶各取1份組成一組，第一組加混合對照溶液1.0mL，第二組加混合對照溶液2.0mL，第三組加混合對照溶液5.0mL，分別按“2.2.2.2”、“2.2.2.1”項(xiàng)下規(guī)定進(jìn)行測定。記錄峰面積并計(jì)算回收率，考察方法的準(zhǔn)確度。測得鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿的回收率均在98%～102%之間。詳見表3、表4：

表3 鹽酸麻黃堿回收率測定結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

表4 鹽酸偽麻黃堿回收率測定結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

結(jié)果表明：此方法中鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿的回收率良好，準(zhǔn)確度均符合要求。

2.2.2.6 精密度考察

取同一液相小瓶的供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄鹽酸麻黃堿色譜峰、鹽酸偽麻黃堿色譜峰的峰面積，計(jì)算峰面積的RSD值，考察方法的精密度。

結(jié)果測得鹽酸麻黃堿峰面積RSD值為：0.12%，鹽酸偽麻黃堿峰面積RSD值為：0.19%，表明該方法精密度良好。

2.2.2.7 重復(fù)性考察

取同一批樣品（批次：20210401）3瓶，分別取樣，分組如下：第一組取樣量5.0mL，第二組取樣量10.0mL，第三組取樣量15.0mL，按“2.2.2.2”、“2.2.2.1”項(xiàng)下規(guī)定進(jìn)行測定，分別計(jì)算含量及RSD值，考察方法的重復(fù)性。結(jié)果詳見表5、表6、表7。

表5 鹽酸麻黃堿含量測定結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

表6 鹽酸偽麻黃堿含量測定結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

表7 鹽酸麻黃堿與鹽酸偽麻黃堿總量測定結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

結(jié)果表明：該方法測定鹽酸麻黃堿含量、鹽酸偽麻黃堿含量及兩者的總量重復(fù)性良好。

2.2.2.8 穩(wěn)定性考察

取同一液相小瓶的供試品溶液，分別于0h，2h，4h，8h，12h，18h，24h進(jìn)樣1次，記錄鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿的峰面積，并計(jì)算峰RSD值，考察該方法的穩(wěn)定性。

結(jié)果測得鹽酸麻黃堿峰面積RSD值為：0.21%，鹽酸偽麻黃堿峰面積RSD值為：0.28%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.3 連翹含量測定（以連翹苷計(jì)）

2.2.3.1 色譜條件

色譜柱：C18柱；流動相：乙腈-水（25:75）；檢測波長：277nm；理論塔板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10μL。

2.2.3.2 對照品溶液及供試品溶液的制備

對照品溶液的制備：取連翹苷對照品約20mg，精密稱定，置100mL容量瓶中，加甲醇使溶解并定容，搖勻，即得。

供試品溶液的制備：精密量取供試品5mL，置25mL量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。同時，按供試品溶液的制備方案，處理連翹陰性樣品以及連翹單提液。

上述對照品溶液及供試品溶液過0.45μm濾膜，濾液裝入液相小瓶，備用。

2.2.3.3 專屬性考察

按“2.2.3.1”、“2.2.3.2”項(xiàng)下規(guī)定，進(jìn)行對照品溶液、供試品溶液、連翹陰性樣處理液、連翹單提液處理液測定，記錄色譜圖，對專屬性進(jìn)行考察。結(jié)果見圖5。

圖5 連翹含量測定

結(jié)果表明，陰性樣品對測定無干擾，該方法專屬性符合要求。

2.2.3.4 線性關(guān)系考察

精密稱取連翹苷對照品20.12mg（含量95.1%），加甲醇溶解并定容至10mL，搖勻，作為對照品儲備液。精密量取儲備液6份，每份1.0mL，依次加甲醇稀釋至100mL、50mL、25mL、10mL、5mL、2mL，作為對照溶液，按“2.2.3.1”、“2.2.3.2”進(jìn)行測定，記錄峰面積。以濃度作為橫坐標(biāo)（X，μg/mL）,峰面積作為縱坐標(biāo)（Y，mAU*S），進(jìn)行線性回歸計(jì)算。

回歸方程為：Y=6.3554X-9.7904 （R2=0.9997）

結(jié)果表明：該方法在連翹苷19.1341～956.706μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.3.5 準(zhǔn)確度考察

精密量取“2.2.3.4”項(xiàng)下對照儲備液1.0mL，加甲醇稀釋并定容至10mL，作為對照溶液。取同一批（批次：20210401）3瓶樣品作為供試品，每瓶平行取樣3份，每份精密量取2.0mL。3瓶各取1份組成1組，第一組加對照溶液1.0mL，第二組加對照溶液2.0mL，第三組加對照溶液5.0mL，按“2.2.3.2”、“2.2.3.1”項(xiàng)下規(guī)定進(jìn)行測定。記錄9份樣品的連翹苷峰面積，計(jì)算其回收率，考察方法的準(zhǔn)確度。結(jié)果詳見表8。

表8 連翹苷回收率測定結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

結(jié)果測得連翹苷的回收率均在98%～102%之間，表明該方法準(zhǔn)確度符合要求。

2.2.3.6 精密度考察

取同一液相小瓶的供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄連翹苷峰面積，計(jì)算其RSD值，考察此方法的精密度。

結(jié)果測得連翹苷峰面積RSD值為：0.22%，表明該方法精密度良好。

2.2.3.7 重復(fù)性考察

取同一批樣品（批次：20210401）3瓶，分別取樣。第一組分別取樣5.0mL，第二組分別取樣10.0mL，第三組分別取樣15.0mL，置于50mL量瓶中，加50%甲醇稀釋并定容。按“2.2.3.1”項(xiàng)下規(guī)定的進(jìn)行測定，計(jì)算連翹苷的含量及RSD值，考察方法的重復(fù)性。結(jié)果詳見表9。

表9 連翹苷含量測定結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

結(jié)果表明：該方法測定連翹苷含量重復(fù)性良好。

2.2.3.8 穩(wěn)定性考察

取同一液相小瓶的供試品溶液，自第一次進(jìn)樣計(jì)時，分別于2h,4h,8h,12h,18h,24h進(jìn)樣1次，記錄連翹苷峰面積并計(jì)算RSD值，考察方法的穩(wěn)定性。

結(jié)果測得連翹苷峰面積RSD值為：0.27%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.3 樣品測定

取6批樣品，每批平行樣個數(shù)n=3，分別按“2.2.1”、“2.2.2”、“2.2.3”項(xiàng)下規(guī)定制備供試品溶液，并按相應(yīng)色譜條件進(jìn)行測定，計(jì)算含量。結(jié)果見表10。

表10 各成分含量測定結(jié)果

3 討論

獸用清肺排毒湯組方中有24味藥材，作為大組方制劑，在制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時實(shí)驗(yàn)條件的篩選困難重重。在進(jìn)行TLC薄層色譜條件的摸索中，對山藥、白術(shù)、魚腥草也進(jìn)行嘗試，除藥材方法外，山藥嘗試了健脾肥兒口服液系統(tǒng)[6]、健胃消食片系統(tǒng)[7]；白術(shù)嘗試了五味健脾合劑[8]、五苓散系統(tǒng)[9]；魚腥草嘗試了魚腥草配方顆粒系統(tǒng)，但因重現(xiàn)性差、陰性樣品干擾、目標(biāo)成分與工藝不匹配等因素，未能篩選出符合要求的實(shí)驗(yàn)條件。

中藥復(fù)方制劑中化學(xué)成分復(fù)雜，所以其質(zhì)量評價應(yīng)進(jìn)行多組分含量檢測。在獸用清肺排毒湯處方中，黃芩具有清熱燥濕，瀉火解毒的功效；麻黃具有解表散寒，宣肺平喘，利水消腫的功效；連翹具有清熱解毒，消腫散結(jié)的功效。查閱文獻(xiàn)[10-15]發(fā)現(xiàn)三者在其他制劑中常作為目標(biāo)成分，HPLC分析條件較成熟，經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，篩選出了適用于黃芩苷、鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿、連翹苷含量測定的實(shí)驗(yàn)條件。

中醫(yī)藥理論強(qiáng)調(diào)的是整體觀念。通過對獸用清肺排毒湯的檢驗(yàn)方法研究，使得我們對大組方制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立有了進(jìn)一步的認(rèn)知，將繼續(xù)加深中藥復(fù)方制劑藥效與質(zhì)量之間的關(guān)系探索。

4 結(jié)論

獸用清肺排毒湯是優(yōu)秀的中獸醫(yī)藥工作者受“清肺排毒方”啟發(fā)，強(qiáng)化中獸醫(yī)藥經(jīng)書經(jīng)方的學(xué)習(xí)與研究，結(jié)合經(jīng)典方劑而制定。為了控制產(chǎn)品質(zhì)量，對厚樸、大黃的TLC定性鑒別和黃芩、麻黃、連翹的HPLC含量測定進(jìn)行研究，結(jié)果表明此方法符合“獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則”要求，可為獸用清肺排毒湯提供有效的質(zhì)量控制。