阮穩(wěn)穩(wěn)，陳永軍，黃咪

1.安康市人民醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，陜西 安康 725000；

2.空軍軍醫(yī)大學第一附屬醫(yī)院整形外科，陜西 西安 710000；

3.安康市人民醫(yī)院消化內(nèi)科，陜西 安康 725000

胃癌常發(fā)于胃黏膜上皮，居于消化道惡性腫瘤首位，在胃各個部位均能發(fā)生病變[1]。胃癌早期多無明顯癥狀，只有輕微上腹部疼痛，多數(shù)患者表現(xiàn)出食欲減退，部分患者進食過多腹部脹痛明顯[2]。病癥到達晚期時，癌腫擴散，患者會出現(xiàn)持續(xù)性劇烈疼痛，可放射至腰背部，患者全身癥狀進一步加重，日漸消瘦、疲乏、貧血，嚴重危害機體健康[3-4]。膜聯(lián)蛋白A2(annexin A2，ANXA2)在外周血中分泌，是一種外分泌形式蛋白，在病毒感染與膽囊腺癌診斷中有一定價值[5]。膜聯(lián)蛋白A7(annexin A7，ANXA7)為具有相結(jié)合型的蛋白，能夠與Ca2+相結(jié)合產(chǎn)生對磷脂的依賴性，其亞細胞水平異常結(jié)合與很多腫瘤發(fā)生、轉(zhuǎn)移以及浸潤有著密切關(guān)系，其能夠促進癌細胞增生，癌腫的分化程度越低，ANXA7表達水平越少[6]。腫瘤標志物是細胞在血液里釋放出來的物質(zhì)，每一種腫瘤都有相關(guān)的腫瘤標志物，當人體內(nèi)出現(xiàn)惡性腫瘤時，其水平會升高，對于癌腫的預測有很好的價值?；诖耍狙芯繉ξ赴┗颊逜NXA2、ANXA7表達水平的變化及其與臨床病理因素和腫瘤標志物水平的關(guān)系進行研究，以期為胃癌的診斷與后續(xù)治療提供參考，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料選取安康市人民醫(yī)院2019年6月至2021年6月收治的80例胃癌患者作為觀察組。納入標準：(1)經(jīng)過臨床診斷，病理組織檢查確診為胃癌者；(2)既往從未治療，首次在本院開始治療者；(3)臨床資料完整者；(4)患者及其家屬均簽署知情同意書。排除標準：(1)合并其他惡性腫瘤者；(2)精神異常無法配合者；(3)不同意提供其癌旁組織標本者；(4)合并有感染性疾病者。80例胃癌患者中男性46例，女性34例；年齡54～75歲，平均(58.46±6.20)歲；癌腫直徑≥5 cm 35例，＜5 cm 45例；組織分化程度：高分化12例，中分化25例，低分化43例；TNM分期Ⅰ～Ⅱ期32例，Ⅲ～Ⅳ期48例。所有患者均行手術(shù)治療，術(shù)中取胃癌癌腫組織標本作為癌癥組，同時取癌旁組織標本作為癌旁組。另選取同時間來我院體檢的健康者80例作為對照組。對照組中男性45例，女性35例；年齡53～76歲，平均(57.64±7.01)歲。觀察組和對照組受檢者的性別和年齡比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 ANXA2、ANXA7表達水平測定觀察組檢測癌組織標本與癌旁組織標本，對照組健康群體僅檢測血清。癌組織標本、癌旁組織標本經(jīng)過4%的中性緩沖甲醛浸泡，浸泡之后用常規(guī)的石蠟包埋，所有標本均要裹上石蠟，包埋之后加入多克隆抗體進行克隆，按照1∶400的比例進行稀釋后用免疫組SP法染色試劑盒相關(guān)操作說明進行染色，以磷酸鹽緩沖液(PΒS)替代一抗作為陰性去對照。結(jié)果判讀：利用顯微鏡隨機用5個視野來觀察，利用陽性表達細胞的著色強度，計數(shù)陽性細胞百分率。陽性表達細胞著色強度：沒有著色-0分，淺黃色-1分，棕黃色-2分，棕褐色-3分；百分率：陽性細胞＜25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，76%以上為4分，兩種標準相乘結(jié)果＞1為陽性，≤1為陰性。

1.2.2 腫瘤標志物水平測定在清晨空腹抽取所有患者(治療前)外周血5 mL，對照組于體檢當日清晨空腹狀態(tài)下抽取外周血5 mL，所有血液標本通過離心分離出血清，用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清中ANXA2、ANXA7、癌胚 抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)、甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)、糖抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9，CA19-9)及 糖抗原24-2(carbohydrate antigen 24-2，CA24-2)。

1.3 觀察指標(1)比較癌癥組和癌旁組標本的ANXA2、ANXA7表達水平；(2)分析胃癌組織ANXA2、ANXA7表達與臨床病理因素的關(guān)系；(3)比較觀察組和對照組血清ANXA2、ANXA7表達水平及腫瘤標志物水平的差異；(4)分析胃癌患者血清ANXA2、ANXA7水平與腫瘤標志物的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計學方法應(yīng)用SPSS22.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，等級資料比較采用秩和檢驗；計量資料符合正態(tài)分布，以均數(shù)±標準差(±s)表示，組間比較采用t檢驗；血清ANXA2、ANXA7與腫瘤標志物的關(guān)系采用Pearson相關(guān)性分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組標本的ANXA2、ANXA7表達水平比較癌癥組標本ANXA2、ANXA7的陽性率明顯高于癌旁組，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組標本的ANXA2、ANXA7表達水平比較[例(%)]

2.2 胃癌組織ANXA2、ANXA7表達與臨床病理因素的關(guān)系A(chǔ)NXA2、ANXA7表達與患者性別、年齡、腫瘤直徑均無關(guān)(P＞0.05)，與腫瘤分化程度、TNM分期有關(guān)(P＜0.05)，見表2。

表2 胃癌組織ANXA2、ANXA7表達與臨床病理因素的關(guān)系(例)

2.3 兩組受檢者的血清ANXA2、ANXA7和腫瘤標志物水平比較觀察組患者血清ANXA2、ANXA7水平與CEA、AFP、CA19-9、CA24-2水平明顯高于對照組，差異均具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表3。

表3 兩組受檢者的血清ANXA2、ANXA7和腫瘤標志物水平比較(±s)

表3 兩組受檢者的血清ANXA2、ANXA7和腫瘤標志物水平比較(±s)

組別觀察組對照組t值P值例數(shù)80 80 ANXA2(μg/L)23.1±6.2 4.3±1.8 26.046 0.001 ANXA7(ng/L)75.2±16.4 61.3±13.2 5.906 0.001 CEA(μg/L)9.7±2.4 2.8±1.3 22.611 0.001 AFP(μg/L)17.2±7.3 13.9±6.8 2.959 0.004 CA19-9(U/mL)48.4±6.3 27.5±5.4 22.529 0.001 CA24-2(U/L)3.3±1.5 2.1±1.6 4.894 0.001

2.4 血清ANXA2、ANXA7水平與腫瘤標志物的相關(guān)性將胃癌患者血清ANXA2、ANXA7與CEA、AFP、CA19-9、CA24-2水平進行Pearson相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，血清ANXA2、ANXA7水平與CEA、AFP、CA19-9、CA24-2呈正相關(guān)(P＜0.01)，見表4。

表4 ANXA2、ANXA7水平與腫瘤標志物的相關(guān)性

3 討論

胃癌多發(fā)于45歲以上人群，可按照其形態(tài)特點和浸潤方式分為四種類型：Ⅰ型，結(jié)節(jié)型，呈菜花樣；Ⅱ型，潰瘍局限性，似胃潰瘍；Ⅲ型：浸潤潰瘍型，占50%；Ⅳ型：彌漫浸潤型，胃壁顯著增厚變硬[7-8]。胃癌主要治療手段是手術(shù)切除，輔以化學療法和放射療法。免疫治療是臨床常用療法之一，能夠有效提高癌細胞擴散抵抗力[9-10]。由于胃癌早期無明顯癥狀，當疾病被檢出時，癌腫已發(fā)生擴散、轉(zhuǎn)移，導致手術(shù)療效差，蛋白水平變化在多種惡性腫瘤早期診斷與預后評估中發(fā)揮了重要作用，將蛋白水平與胃癌相關(guān)生物因素結(jié)合或可為疾病診斷與治療提供支撐[11-12]。

既往有研究發(fā)現(xiàn)ANXA2、ANXA7等蛋白生物分子可用于胃癌的診斷，而國內(nèi)對于蛋白類研究甚少[13-14]。ANXA7的表達缺失與腫瘤發(fā)展有著密切的關(guān)系，在胃癌中分化越差ANXA7表達越少[15]。ANXA2是一種有著多種生物效能的蛋白質(zhì)，能夠與細胞跨膜實現(xiàn)運輸，與細胞外受體產(chǎn)生一定活性，還有信號之間轉(zhuǎn)換傳導功能[16-17]；謝小龍等[18]研究胰腺癌患者血清ANXA2及與臨床病理特征和預后的關(guān)系時發(fā)現(xiàn)，胰腺癌患者血清ANXA2水平異常升高，血清ANXA2在評估病情程度和預后中具有一定價值，這與本研究結(jié)論相符合。本研究結(jié)果中，癌癥組的ANXA2、ANXA7的陽性率(62.5%、65.9%)高于癌旁組(21.3%、18.8%)，說明ANXA2、ANXA7在胃癌組織中陽性表達率占比很大。萬愛民等[19]研究提出臨床病理因素、癌腫的大小、其所在位置、組織學類型、病理分期以及淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移與胃癌標本的生存和預后有著密切關(guān)系。本研究中發(fā)現(xiàn)，ANXA2、ANXA7表達水平與患者性別、年齡、腫瘤直徑均沒有關(guān)系，與腫瘤分化程度、TNM分期有關(guān)，這說明腫瘤的分化程度越高，TNM分期越高，ANXA2、ANXA7越高，說明ANXA2、ANXA7高表達影響著胃癌發(fā)生、蔓延、浸潤和轉(zhuǎn)移。

此外，CEA、AFP、CA19-9、CA24-2是腫瘤明顯標志物。在本研究中，觀察組患者血清ANXA2、ANXA7水平高于對照組，進一步證實了ANXA2、ANXA7對早期胃癌的檢測有著極大的意義。同時，本研究采用Pearson相關(guān)結(jié)果顯示，胃癌患者血清ANXA2、ANXA7水平與CEA、AFP、CA19-9、CA24-2呈明顯正相關(guān)，這說明ANXA2、ANXA7或可與腫瘤標志物相同，在胃癌診斷與評估中發(fā)揮一定價值。

綜上所述，胃癌患者血清ANXA2、ANXA7存在異常高表達，與血清腫瘤標志物水平有一定聯(lián)系。同時，與癌旁組織相比，胃癌患者癌組織中ANXA2、ANXA7陽性率更高，其表達與腫瘤分化程度、TNM分期等臨床病理因素有關(guān)。但本研究不足之處在于未對ANXA2、ANXA7表達進行多因素分析，未排除其他影響ANXA2、ANXA7表達的因素，仍有待后期完善研究再進一步加以證實。