郭子記,趙湖北，王 平，劉 帥，孫明坤，趙 余，從志鵬，包鵬國，華 松*

(1.陜西省榆林市榆陽區(qū)畜牧技術(shù)推廣站,陜西榆林 719000；2.陜西三原星火養(yǎng)羊?qū)I(yè)合作社，陜西咸陽 713800；3.西北農(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，陜西楊凌 712100；4.乾縣奶山羊良種繁育示范場,陜西咸陽 713300)

乳房炎(mastitis)是奶山羊養(yǎng)殖過程中常見的疾病，每年給奶產(chǎn)業(yè)帶來較大的經(jīng)濟損失，一般發(fā)病率從2%到19%不等，其發(fā)病率受奶山羊自身年齡、胎次、乳房構(gòu)造、產(chǎn)奶量、自身抵抗力以及飼養(yǎng)管理水平、飼養(yǎng)環(huán)境的影響[1]，并且90%的奶山羊乳房炎主要是由金黃色葡萄球菌和無乳鏈球菌的感染所致[2]。其他致病菌還有停乳鏈球菌、溶血葡萄球菌、大腸埃希氏菌、銅綠假單胞菌、巴氏桿菌等[3]。發(fā)病原因之一是病原菌由乳頭孔侵入乳管,沿此蔓延到乳腺組織，引起乳房炎發(fā)生，另外是由于擠乳或羔羊吮乳造成的乳房損傷，引起感染，從而引起乳房炎。根據(jù)疾病發(fā)展的快慢可將奶山羊乳房炎分為急性乳房炎和慢性乳房炎，根據(jù)臨床癥狀是否明顯可分為臨床性乳房炎和隱性乳房炎。而生產(chǎn)過程中隱性乳房炎的發(fā)生率要遠遠大于臨床性乳房炎。臨床性乳房炎的臨床特征表現(xiàn)為紅、腫、熱、痛典型的炎癥特征，乳汁也會發(fā)生相應(yīng)理化性質(zhì)的改變，而隱性乳腺炎不表現(xiàn)明顯的臨床癥狀，乳汁發(fā)生肉眼無法看見的變化，常常被忽視，錯過了最佳的治療時機，繼而轉(zhuǎn)變?yōu)槁匀榉垦?，出現(xiàn)乳房萎縮、變黑，乳房組織纖維化，最后被淘汰[4]，甚至有些羊發(fā)生乳房炎后，引起敗血癥，造成死亡[5]，給奶山羊養(yǎng)殖業(yè)帶來了一定的經(jīng)濟損失。

目前對于乳房炎的治療主要采用抗生素療法，由于養(yǎng)殖業(yè)抗菌藥長時間、大劑量不規(guī)范使用，甚至常在飼料中添加抗生素，用于預(yù)防乳房炎的發(fā)生，極大地損害了動物機體健康，同時導(dǎo)致致病菌耐藥性由單一耐藥轉(zhuǎn)變?yōu)槎嘀啬退?，由低度耐藥轉(zhuǎn)變?yōu)楦叨饶退?，甚至出現(xiàn)了“超級耐藥菌”[6]。有研究發(fā)現(xiàn)，金黃色葡萄球菌已經(jīng)對氨芐西林、鏈霉素、青霉素產(chǎn)生嚴(yán)重耐藥，無乳鏈球菌對氨芐西林、四環(huán)素、慶大霉素產(chǎn)生嚴(yán)重耐藥，其他病原菌對不同抗菌藥也存在不同程度的耐藥[7-8]。此外，各種抗生素的不合理使用，造成動物產(chǎn)品抗生素殘留以及造成環(huán)境污染，在人體內(nèi)蓄積損害人類機體健康。從2020年開始，我國全面要求飼料端禁抗，養(yǎng)殖端減抗、限抗，因此，探索綠色、高效抗生素的替代品十分必要?？咕木哂锌咕V廣，不易產(chǎn)生耐藥性，無殘留，提高機體免疫力等優(yōu)點[9]，通過2年時間利用抗菌肽對奶山羊乳房炎進行預(yù)防和治療，現(xiàn)總結(jié)如下，以期為防治奶山羊乳房炎提供有效的技術(shù)方法。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗用動物 成年奶山羊7 809只，1歲～4歲。

1.1.2 主要試劑 十二烷基磺酸鈉，廣州市益滿生物科技有限公司產(chǎn)品；氫氧化鈉，北京生物試劑公司產(chǎn)品；溴甲酚紫，南京化學(xué)試劑股份有限公司產(chǎn)品；復(fù)合納米抗菌肽，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部動物生物技術(shù)重點實驗室贈送。

1.1.3 主要儀器 乳房炎快速檢測儀(AH-4L)，中國深圳菲特立科技有限公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 乳房炎預(yù)防試驗 在14個家庭奶山羊養(yǎng)殖場，11個中等規(guī)模奶山羊養(yǎng)殖場，1個養(yǎng)殖小區(qū)共計26個養(yǎng)殖單元，通過CMT法檢測，共有7 809只健康奶山羊(1歲～4歲)進行試驗，所有試驗羊日常飼料都為自配，配方見表1。同一單元的羊隨機分為兩組，試驗組羊飼料添加0.05 g/kg復(fù)合納米抗菌肽，連續(xù)飼喂2年，飼喂1個月后開始檢測，每個月定期檢測1次。

1.2.2 乳房炎治療試驗 在2年的時間內(nèi)，對13個家庭奶山羊養(yǎng)殖場共126只患有臨床型乳房炎和25只患有慢性乳房炎(由臨床型乳房炎轉(zhuǎn)化而來)的羊進行乳房灌注，方法是先將乳汁手動擠干凈，將2.0 g復(fù)合納米抗菌肽溶于100 mL、40℃左右的溫水中，然后采用乳房灌注法將抗菌肽溶液分別灌注兩側(cè)乳房，間隔12 h灌注1次，連續(xù)灌注2 d～5 d，與此同時，日糧里添加0.05 g/kg抗菌肽，其他飼養(yǎng)管理方式不變。

1.2.3 乳汁采集 預(yù)防試驗：飼喂抗菌肽1個月后開始，對每個養(yǎng)殖場進行10%的抽檢，對抽檢羊進行擠奶。在擠奶前做好消毒，先用溫水將乳區(qū)擦拭干凈，之后用消毒酒精擦拭乳頭及周圍的部分，同時采樣者的雙手也要經(jīng)過消毒，每個乳頭的前3把奶棄去，之后乳樣放入已消毒的離心管中，做好標(biāo)記，冷藏保存帶回實驗室。

治療試驗：對226只患有急性乳房炎和48只患有慢性乳房炎的羊只進行治療后采樣，方法同上。

1.2.4 乳房炎檢測 診斷標(biāo)準(zhǔn)為加利福尼亞乳房炎檢測CMT法。乳房炎的判斷標(biāo)準(zhǔn)為，體細胞數(shù)<100萬/mL定為健康，100萬/mL<體細胞數(shù)<150萬/mL定為隱性乳房炎，體細胞數(shù)>150萬/mL為臨床性乳房炎。急性乳房炎的判定標(biāo)準(zhǔn)為，具有紅、腫、熱、痛，乳汁含有淡黃色或紅色絮狀或粒狀物；慢性乳房炎的判定標(biāo)準(zhǔn)為，羊無全身性癥狀，但是乳區(qū)組織彈性降低或僵硬，觸診乳房時，有大小不等的硬塊，或乳汁稀、清淡，或乳汁混有粒狀或絮狀凝塊。

2 結(jié)果

2.1 預(yù)防試驗結(jié)果

由表2可知，在試驗組，隱性乳房炎的發(fā)病率為2.0%。臨床性乳房炎發(fā)病率為1.2%，其中2只羊乳房有不明原因引起的外傷，另外3只為日常工擠奶造成的外傷。而在對照組，臨床性乳房炎發(fā)病率為7.1%，隱性乳房炎發(fā)病率為14.9%。說明復(fù)合納米抗菌肽對奶山羊乳房炎具有顯著的預(yù)防效果。

表2 抗菌肽預(yù)防乳房炎結(jié)果

2.2 治療試驗結(jié)果

由表3可知，對226只患有急性乳房炎的奶山羊進行治療，治愈率為98.2%，剩下的4只具有肉眼可見的外傷。而患有慢性乳房炎的奶山羊治愈率為88.5%，其中剩下的3只患病奶山羊由于一側(cè)或雙側(cè)乳房嚴(yán)重萎縮、變黑，乳腺發(fā)生纖維化，采用抗菌肽治療后仍然預(yù)后不良。治愈后各組隨機選擇8只羊進行乳汁體細胞計數(shù)，發(fā)現(xiàn)急性乳房炎羊治愈后乳汁體細胞數(shù)在50萬/mL～90萬/mL，而慢性乳房炎治愈后乳汁體細胞數(shù)為65萬/mL～110萬/mL，說明復(fù)合納米抗菌肽對奶山羊乳房炎的治療，無論是急性還是慢性，均具有理想的治療效果。

3 討論

奶山羊乳房炎是奶山羊產(chǎn)業(yè)非常普遍且危害巨大的一種疾病，嚴(yán)重影響泌乳機能，同時對奶山羊自身及新生羔羊的健康造成威脅，每年由于乳房炎造成的經(jīng)濟損失不可估量。傳統(tǒng)的治療乳房炎就是使用抗生素，結(jié)合對癥治療用藥，由于養(yǎng)殖業(yè)長期、大量的濫用抗生素，造成致病菌耐藥性十分嚴(yán)峻[10]。研究發(fā)現(xiàn)，95%以上的致病菌對90%的抗生素具有耐藥性，甚至部分致病菌對某些抗生素的耐藥性超過了90%，嚴(yán)重威脅著人類健康[11-12]。因此，“超級細菌”的生產(chǎn)不是空穴來風(fēng)，國內(nèi)外已經(jīng)多次發(fā)現(xiàn)某些細菌性疾病無藥可用?？咕氖巧矬w天然免疫防御系統(tǒng)的一部分，是動物免疫系統(tǒng)在誘導(dǎo)條件下產(chǎn)生的一類抵抗致病微生物入侵感染的小肽，分子量小、帶正電、熱穩(wěn)定性好、對細胞無毒副作用、無殘留、無污染、無免疫原性、不易產(chǎn)生耐藥性等特性?？咕耐ㄟ^膜殺傷作用發(fā)揮廣譜抗菌作用，而對正常的胃腸道菌群具有調(diào)節(jié)和促進作用，還能促進傷口愈合[13]。研究證明，抗菌肽對大腸埃希氏菌、巴氏桿菌、無乳鏈球菌、沙門氏菌和金黃色葡萄球菌均有抗菌作用，而且能提高動物機體免疫力，改善乳腺健康，提高產(chǎn)奶性能和降低乳汁體細胞數(shù)[14]。

表3 抗菌肽治療乳房炎結(jié)果

利用復(fù)合納米抗菌肽預(yù)防奶山羊乳房炎，能將臨床性乳房炎的發(fā)病率控制在1.2%，將隱性乳房炎的發(fā)病率控制在2.0%，還能顯著降低乳汁體細胞數(shù)。利用復(fù)合納米抗菌肽治療急性乳房炎的效果達到98.2%，治療慢性乳房炎的效果也達到了88.5%。這些結(jié)果與唐宇等[14]報道的一致，而顯著好于宋麗華等[15]報道的結(jié)果。有資料顯示，在飼料中添加抗菌肽，對畜禽有促進生長、提高免疫力、預(yù)防和治療疾病的作用。郭忠欣等[16]研究發(fā)現(xiàn)，添加不同濃度的抗菌肽能夠不同程度地增強機體免疫功能，顯著改善肉雞的屠宰及生長性能。李永新等[17]報道，添加抗菌肽可以顯著增加母豬產(chǎn)仔數(shù)、分娩率、斷奶成活率及經(jīng)濟效益，顯著降低仔豬的腹瀉率及弱仔率。楊顏銥等[18]發(fā)現(xiàn)，山羊飼糧中添加復(fù)合抗菌肽極大地提高了血清中免疫球蛋白含量，顯著提高抗氧化能力和紅細胞免疫能力。

此外，在預(yù)防試驗過程中，5只患臨床型乳房炎，其中2只具有明顯的外傷，可能是羔羊吮乳所致，另外3只為日常手工擠奶造成的，乳頭和乳池黏膜損傷繼發(fā)感染所致。對于乳房炎的治療，6只患慢性乳房炎的羊沒有治愈，出現(xiàn)雙側(cè)乳房嚴(yán)重萎縮、變黑，乳腺發(fā)生纖維化，可能原因是飼養(yǎng)員或獸醫(yī)巡舍時未能及時發(fā)現(xiàn)，錯過了最佳的治療時機，導(dǎo)致采用抗菌肽治療后仍然預(yù)后不良。而4只沒有治愈的急性乳房炎病例都具有明顯的肉眼可見的外傷。說明采用抗菌肽預(yù)防和治療奶山羊乳房炎的同時，一定要加強護理，避免各種原因造成的乳房外傷[19-20]。因此，采用復(fù)合納米抗菌肽對奶山羊進行防治，效果顯著，值得推廣應(yīng)用。