趙瑋，郭龍宗，李燕，張孝蘭，王雪梅，石海春，侯珍珍，徐東紅

（山東益生畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究院，山東 煙臺(tái) 264680）

沙門氏菌在自然界中分布十分廣泛，能夠引起家畜、家禽以及其它動(dòng)物發(fā)生急性、慢性或隱性感染。在公共衛(wèi)生學(xué)中，沙門氏菌也占有重要地位，能夠感染人并導(dǎo)致嘔吐、腹瀉等中毒癥狀，重癥者甚至死亡。因此，沙門氏菌可嚴(yán)重威脅人類健康，給養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展埋下重大隱患。近幾年來沙門氏菌感染越來越嚴(yán)重，存在于養(yǎng)殖、產(chǎn)品銷售等各個(gè)環(huán)節(jié)，造成很大經(jīng)濟(jì)損失，因此及早發(fā)現(xiàn)沙門氏菌并采取防治措施，有利于提高畜禽養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。

在養(yǎng)殖場(chǎng)中控制沙門氏菌感染，首先要保證它的上一代種雞處于沙門氏菌陰性狀態(tài)，因此維持種雞場(chǎng)沙門氏菌陰性狀態(tài)至關(guān)重要，這就需要我們對(duì)種雞場(chǎng)進(jìn)行程序化的監(jiān)控，及時(shí)掌握種雞群的健康狀態(tài)。雞群感染沙門氏菌的途徑有兩個(gè)，一個(gè)是經(jīng)種蛋傳播，即垂直傳播；另一個(gè)是經(jīng)呼吸道或者消化道進(jìn)入雞體內(nèi)，即水平傳播。在種雞場(chǎng)，較為常見的致病性沙門氏菌群主要是B、C、D群沙門氏菌，例如：D群的雞白痢沙門氏菌，垂直傳播能力較強(qiáng)，也能夠水平傳播，垂直傳播能力大于水平傳播；D群的腸炎沙門氏菌，具備較強(qiáng)的水平與垂直傳播能力，水平傳播能力大于垂直傳播；B群的鼠傷寒沙門氏，既能夠垂直傳播也能夠水平傳播；C群的肯塔基沙門氏菌，在種雞場(chǎng)環(huán)境、種雞泄殖腔拭子中較為常見，垂直傳播能力相對(duì)較弱。在種雞場(chǎng)監(jiān)測(cè)時(shí)，我們主要關(guān)注對(duì)雞群影響較大的雞白痢沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌及肯塔基沙門氏菌，通過合理的監(jiān)測(cè)和防控來維持種雞場(chǎng)沙門氏菌的陰性狀態(tài)。

1 種雞場(chǎng)沙門氏菌監(jiān)測(cè)的主要方法

1.1 血清學(xué)檢測(cè)

沙門氏菌抗體檢測(cè)可以使用平板凝集或者ELISA方法進(jìn)行。不同品種的雞血清可能對(duì)沙門氏菌抗原有一定干擾，造成假陽性。我們把血清稀釋后平板凝集與ELISA檢測(cè)結(jié)果相對(duì)比，發(fā)現(xiàn)血清8倍稀釋后與ELISA檢測(cè)結(jié)果吻合度較高，也可排除一部分假陽性的干擾，因此可以采用血清8倍稀釋后進(jìn)行平板凝集的方法對(duì)雞群沙門氏菌進(jìn)行評(píng)估，檢測(cè)頻率一般為3周一次。對(duì)檢測(cè)為陽性的雞再進(jìn)行病原分離、培養(yǎng)、鑒定，最后確定血清型。

1.2 與垂直性傳播相關(guān)樣品檢測(cè)

主要通過檢測(cè)種雞泄殖腔、公雞精液和種雞產(chǎn)品來評(píng)估種雞的健康狀況。以上樣品采用常規(guī)生化鑒定方法或PCR方法進(jìn)行病原檢測(cè)，一般以常規(guī)生化鑒定法為主，將常規(guī)生化鑒定法的結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于污染性樣本如泄殖腔、胎糞、死胚等，可再用PCR方法檢測(cè)存在假陽性和假陰性結(jié)果。若有陽性將追溯種雞。

1.2.1 種雞泄殖腔檢測(cè) 一般用棉拭子采集泄殖腔，對(duì)泄殖腔拭子進(jìn)行常規(guī)生化鑒定方法檢測(cè)病原。該方法與雞只是否排毒、樣品采集是否合格息息相關(guān)，雞只不排毒的時(shí)候一般檢測(cè)不到，樣品采集不合格的時(shí)候也會(huì)呈現(xiàn)一個(gè)陰性結(jié)果，所以通過泄殖腔拭子檢測(cè)容易出現(xiàn)假陰性結(jié)果。為有效評(píng)估雞群感染狀況，必須要保證泄殖腔樣品合格并要經(jīng)過多次采樣檢測(cè)。

1.2.2 種公雞精液檢測(cè) 產(chǎn)蛋雞群中，精液檢測(cè)較為重要。如果精液檢測(cè)為陽性，則產(chǎn)蛋期母雞在人工受精或自然交配時(shí)很容易感染，因此雞群開產(chǎn)前對(duì)精液進(jìn)行沙門氏菌檢測(cè)是有必要的。

1.2.3 種蛋檢測(cè) 主要是檢測(cè)蛋黃，蛋表面也可以檢測(cè)，但是首先要排除是否為環(huán)境污染造成。

1.2.4 種雞后代1日齡雛雞和孵化18 d落盤死胚（也稱為毛蛋）檢測(cè) 主要是檢測(cè)卵黃囊，能夠有效評(píng)估種雞的沙門氏菌感染狀況。

1.2.5 種雞后代1日齡雛雞胎糞檢測(cè)，同時(shí)也可以檢測(cè)雛雞運(yùn)輸盒的墊紙 檢測(cè)胎糞、墊紙時(shí)要排除外界環(huán)境污染的可能性。

上述與垂直性傳播相關(guān)樣品檢測(cè)中，從檢出率高低來看：毛蛋檢出率較高，依次是泄殖腔拭子、胎糞，雛雞卵黃囊、種蛋、精液中檢出沙門氏菌的比例最低。毛蛋、胎糞、泄殖腔拭子能夠較早的檢測(cè)到沙門氏菌，因此能夠及時(shí)對(duì)種雞發(fā)出預(yù)警。一般雞群陽性比例較高時(shí)，才能在雛雞卵黃囊中檢測(cè)到沙門氏菌。從我們分離到的沙門氏菌菌株血清分型結(jié)果來看：毛蛋、雛雞、種蛋中使用常規(guī)生化鑒定方法能夠檢測(cè)到雞白痢、腸炎沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌，主要是以腸炎沙門氏菌為主。胎糞、泄殖腔拭子中沙門氏菌的類別較多，B、C、D群都有，以B、D群中的腸炎沙門氏菌、鼠傷寒沙門氏菌為主，C群沙門氏菌少一些，主要以肯塔基沙門氏菌為主；白痢在污染物如泄殖腔拭子、胎糞中很難檢測(cè)到，特別是白痢在泄殖腔拭子、胎糞中不是優(yōu)勢(shì)菌群時(shí)，容易被其它細(xì)菌掩蓋，不易分離到，這與白痢的生長特性有關(guān)。在對(duì)垂直性傳播樣品中檢測(cè)沙門氏菌的方法能夠有效識(shí)別出正在排毒的雞只。

1.3 日常病死雞的病料檢測(cè)

雞場(chǎng)每天都會(huì)對(duì)死亡雞只進(jìn)行剖檢，在剖檢過程中將有疑似沙門氏菌病變（如肝臟有白色壞死點(diǎn)、卵巢液化或卵巢炎等）的病死雞，無菌取肝、卵巢等組織進(jìn)行沙門氏菌分離鑒定。該方法能夠有效確定感染的陽性雞舍，特別是籠養(yǎng)雞舍，能夠識(shí)別出感染沙門氏菌的陽性區(qū)域。

1.4 種雞場(chǎng)環(huán)境檢測(cè)

1.4.1 雞舍內(nèi)環(huán)境檢測(cè) 主要包括墊料（主要針對(duì)平養(yǎng)雞群）、籠具、料槽、水線、風(fēng)機(jī)、糞道/帶等檢測(cè)。墊料取樣時(shí)要對(duì)雞舍進(jìn)行多點(diǎn)位采集，籠具、料槽、水線取樣點(diǎn)要分布到雞舍的前、中、后端，風(fēng)機(jī)、糞帶/道采集面積要盡可能大，雞舍環(huán)境一般用約（30×30）cm大小的無菌略濕潤的紗布進(jìn)行采樣，以保證大面積采樣。種雞場(chǎng)可1月檢測(cè)1次。

1.4.2 雞場(chǎng)內(nèi)蒼蠅、甲殼蟲、老鼠等有害生物檢測(cè) 有害生物作為傳播媒介，有攜帶和傳播沙門氏菌的可能，可以每半年抽檢1次，蒼蠅、甲殼蟲每次采集20只以上，老鼠視情況送檢，也可以清場(chǎng)后送檢老鼠3～5只。

1.4.3 雞場(chǎng)中水的檢測(cè) 可每半年對(duì)雞場(chǎng)的水源抽檢沙門氏菌一次。

總之，從目前來看，環(huán)境中沙門氏菌的種類較多，分離到的沙門氏菌以C、D群為主，C群的比例稍高，D群比例稍低于C群，同時(shí)還分離到B、E、F群沙門氏菌以及未知型沙門氏菌；其中D、C、B群沙門氏菌在目前檢測(cè)結(jié)果來看與雞群健康密切相關(guān)。從整體來看，環(huán)境中沙門氏菌檢測(cè)結(jié)果與泄殖腔拭子及毛蛋中沙門氏菌檢測(cè)結(jié)果存在一定的相關(guān)性，但是由于環(huán)境中沙門氏菌類別較為復(fù)雜，當(dāng)雞群中感染沙門氏菌比例較低時(shí)，沙門氏菌不是優(yōu)勢(shì)菌群，加之采樣抽檢的局限性，可能檢測(cè)不到沙門氏菌，造成環(huán)境與毛蛋或泄殖腔拭子沙門氏菌檢測(cè)結(jié)果不一定同步，存在差異。因此，環(huán)境采樣點(diǎn)要盡可能廣泛。我們通過大量的環(huán)境檢測(cè)工作發(fā)現(xiàn)風(fēng)機(jī)、墊料檢出沙門氏菌的比例較高，其次是籠具、糞帶/道。種雞場(chǎng)日常環(huán)境監(jiān)測(cè)中，我們可以通過檢測(cè)風(fēng)機(jī)、墊料、籠具、糞帶/道這些高風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)來評(píng)估雞群健康狀態(tài)。

1.5 孵化環(huán)境檢測(cè)

孵化環(huán)境經(jīng)常存在沙門氏菌污染的現(xiàn)象，特別是孵化陽性雞群的種蛋時(shí)很容易對(duì)孵化環(huán)境造成污染，并污染其它陰性雞群的種蛋，造成后代雛雞感染沙門氏菌。我們可以每半月進(jìn)行1次孵化器、出雛器、孵化廳、出雛廳的環(huán)境監(jiān)測(cè)，來評(píng)估孵化環(huán)境；陽性雞場(chǎng)出、入孵化場(chǎng)的物資也是重點(diǎn)抽檢對(duì)象，特別是要對(duì)陽性雞場(chǎng)轉(zhuǎn)入孵化場(chǎng)的種蛋蛋筐、蛋盤進(jìn)行抽檢，采樣頻率最好是每月1～2次,使用面積大小為（30×30）cm略濕潤的無菌紗布采樣。采集蛋盤時(shí)注意應(yīng)采集到蛋盤的內(nèi)側(cè)與種蛋接觸的地方。

1.6 種雞場(chǎng)周轉(zhuǎn)物資環(huán)節(jié)檢測(cè)

1.6.1 飼料檢測(cè) 對(duì)不同批次的飼料進(jìn)行抽檢，使用常規(guī)生化鑒定方法進(jìn)行沙門氏菌分離鑒定。

1.6.2 車輛檢測(cè) 來往雞場(chǎng)的運(yùn)輸次品蛋車、飼料車檢測(cè)，可以每月2次，車內(nèi)車外都采用（30×30）cm略濕潤無菌紗布涂抹采樣，使用常規(guī)生化鑒定方法進(jìn)行沙門氏菌分離鑒定。

1.6.3 轉(zhuǎn)雞籠 消毒后、使用前，對(duì)轉(zhuǎn)雞籠進(jìn)行抽檢，使用（30×30）cm無菌紗布采樣，采集點(diǎn)要覆蓋雞籠內(nèi)、外，使用常規(guī)生化鑒定方法進(jìn)行沙門氏菌分離鑒定。

1.6.4 蛋盤檢測(cè) 蛋盤在進(jìn)雞場(chǎng)消毒前后進(jìn)行抽檢，同樣使用上述紗布采樣檢測(cè)病原。

總之，以上6個(gè)方面的沙門氏菌檢測(cè)是相互補(bǔ)充的，血清學(xué)檢測(cè)、與垂直性傳播相關(guān)樣品檢測(cè)、日常病死雞的病料檢測(cè)這是針對(duì)種雞進(jìn)行的診斷性檢測(cè)，其它環(huán)境檢測(cè)是對(duì)群體的一個(gè)監(jiān)控，也是對(duì)現(xiàn)場(chǎng)管理的一個(gè)警示性檢測(cè)，防止外源性沙門氏菌進(jìn)入種雞場(chǎng)造成污染，達(dá)到一個(gè)切斷傳播途徑的目的。當(dāng)我們懷疑種雞場(chǎng)有沙門氏菌感染的時(shí)候，可以血清學(xué)檢測(cè)和病原學(xué)檢測(cè)同時(shí)進(jìn)行。

2 種雞場(chǎng)沙門氏菌防控措施

目的主要是保護(hù)易感雞群、切斷傳播途徑。

2.1 對(duì)于種雞群可以使用腸炎沙門氏菌疫苗免疫保護(hù)種雞群，對(duì)陽性雞只及時(shí)淘汰處理，日常使用保護(hù)腸道的抑菌產(chǎn)品，減少沙門氏菌在腸道定植的幾率。

2.2 雞場(chǎng)做好生物安全工作，防止外界沙門氏菌進(jìn)入種雞場(chǎng)，雞舍內(nèi)、外的環(huán)境做好消毒工作。

2.3 種雞場(chǎng)分凈區(qū)、污區(qū)，規(guī)定凈區(qū)與污區(qū)人員、物資的路線走向，并禁止飼養(yǎng)員之間亂串雞舍。

2.4 雞場(chǎng)水源保持干凈，可在雞舍飲水中添加二氧化氯進(jìn)行消毒。

2.5 飼料盡可能使用密封的罐裝車運(yùn)輸，直接打入場(chǎng)區(qū)料塔，避免中間接觸環(huán)節(jié)的污染，也避免漏撒而吸引鳥類、老鼠造成污染。

2.6 進(jìn)入雞場(chǎng)的墊料做好消毒，避免帶入沙門氏菌。

2.7 雞場(chǎng)做好有害生物控制，如滅鼠工作，并對(duì)雞舍內(nèi)的甲殼蟲、蒼蠅、蚊子做好消殺工作，雞場(chǎng)地面硬化，減少綠植，以減少鼠類、鳥類的活動(dòng)。

2.8 加強(qiáng)孵化環(huán)境衛(wèi)生的消毒控制，做好上孵前種蛋衛(wèi)生消毒工作，對(duì)蛋盤、蛋筐等物資做好消毒工作，避免污染后再流轉(zhuǎn)入其它種雞場(chǎng)。

3 小結(jié)

種雞場(chǎng)沙門氏菌防控涵蓋了種雞飼養(yǎng)管理和孵化管理的各個(gè)環(huán)節(jié)，做好生物安全是重中之重，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)對(duì)種雞場(chǎng)的沙門氏菌進(jìn)行監(jiān)控，能夠及時(shí)有效的對(duì)種雞群健康進(jìn)行評(píng)估，及早地發(fā)現(xiàn)問題、解決問題，才能維持種雞群沙門氏菌的陰性狀態(tài)。