張媛媛 彭智祥 陳超 胡燕珍 楊海燕 黃斌 虞金寶 陳樂#（江西省中醫(yī)藥研究院中藥所 南昌 330046；2江西道地特色中藥材標(biāo)準(zhǔn)化重點(diǎn)研究室 南昌 330046）

吳茱萸為蕓香科植物吳茱萸Euodia rutaecarpa（Juss.）Benth.、石虎Euodia rutaecarpa（Juss.）Benth.var.officinalis（Dode）Huang或疏毛吳茱萸Euodia rutaecarpa（Juss.）Benth.var.bodinieri（Dode）Huang的干燥近成熟果實(shí)。味辛、苦，性熱，有小毒；具散寒止痛、助陽止瀉、降逆止嘔等功能[1]?，F(xiàn)代研究表明，吳茱萸中含有多種化學(xué)成分，主要為生物堿類、檸檬苦素類、揮發(fā)油類、木質(zhì)素類、黃酮、多糖等[2]。其中生物堿類和檸檬苦素類是其主要活性成分，具有鎮(zhèn)痛、抗炎、抗氧化等功效[3]。

2020 年版《中國(guó)藥典》以吳茱萸堿、吳茱萸次堿和檸檬苦素為指標(biāo)對(duì)吳茱萸進(jìn)行質(zhì)量控制，規(guī)定含吳茱萸堿和吳茱萸次堿的總量不得少于0.15%，檸檬苦素不得少于0.20%[1]，現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道以吳茱萸堿、吳茱萸次堿、吳茱萸新堿、去氫吳茱萸堿、二氫吳茱萸堿、吳茱萸卡品堿、檸檬苦素等多成分指標(biāo)含量控制吳茱萸的質(zhì)量[4～6]，但這仍然停留在“唯含量論”的水平。本研究基于中醫(yī)藥理論的整體觀認(rèn)為中藥復(fù)方是一個(gè)整體，通過藥物的有機(jī)配伍，多靶點(diǎn)、多途徑發(fā)揮療效，而單味中藥也是一個(gè)小整體，物質(zhì)基礎(chǔ)之間相互協(xié)同、相互制約，多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)地發(fā)揮療效，發(fā)揮藥效的各成分貢獻(xiàn)率不同，各單體成分之間均存在一種量的關(guān)系，當(dāng)這種量的關(guān)系存在一個(gè)最佳比例關(guān)系時(shí)，可以使中藥整體達(dá)到最大效應(yīng)[7]。賈曉斌等采用細(xì)胞模型對(duì)多個(gè)產(chǎn)地夏枯草屬藥材進(jìn)行活性成分篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)江蘇和安徽夏枯草中咖啡酸、迷迭香酸等6種成分含量雖然較低，但藥效最好，且結(jié)構(gòu)比相似，說明夏枯草屬藥材治療肺癌的有效成分具有穩(wěn)定、有序的整體結(jié)構(gòu)[8]。夏昀卿等以“組分結(jié)構(gòu)”理論為指導(dǎo)，分析道地牡丹皮的物質(zhì)基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)特征，結(jié)果發(fā)現(xiàn)道地牡丹皮與非道地牡丹皮特征成分中氧化芍藥苷、芍藥苷、苯甲酰芍藥苷之間量與量的配比關(guān)系具有差異性，道地牡丹皮的特征成分結(jié)構(gòu)比具有獨(dú)特性[9]。劉丹等將銀杏內(nèi)酯組分中活性成分進(jìn)行配比，并結(jié)合藥效實(shí)驗(yàn)，初步確定了銀杏內(nèi)酯優(yōu)化組分結(jié)構(gòu)[10]。

根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，去氫吳茱萸堿[11～14]對(duì)阿爾茨海默病和胃潰瘍等疾病具有良好的療效，檸檬苦素[15～18]具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗胃癌、抑制人類免疫缺陷病毒1型（HIV-1）、抗動(dòng)脈粥樣硬化和殺蟲等作用，且在藥材中的含量高達(dá)約2%，吳茱萸堿和吳茱萸次堿[19～22]具有明顯的治療心血管和抗腫瘤的療效。由此，本研究將以去氫吳茱萸堿（Dehydroevodiamine）、檸檬苦素（Limonin）、吳茱萸堿（Evodiamine）、吳茱萸次堿（Rutaecarpine）作為有效成分配比關(guān)系研究的研究對(duì)象，建立吳茱萸藥材主要有效成分含量測(cè)定和配比關(guān)系研究的實(shí)驗(yàn)方法，并對(duì)江西境內(nèi)及省外吳茱萸藥材主要有效成分含量及配比關(guān)系進(jìn)行初步探討，為吳茱萸道地性研究提供新思路與新方法，以期為道地吳茱萸質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供科學(xué)依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)道如下：

1 儀器與試藥

1.1 儀器Waters e2695高效液相色譜儀（包括四元泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、UV/Vis檢測(cè)器）；Agilent1260型高效液相色譜儀（美國(guó)Agilent公司，DAD檢測(cè)器）；Dikmatech Diamonsil Plus C18（5 μm,250 mm×4.6 mm，柱 號(hào)：2509215，Dikma Technologies）；Agilent HC-C18（5 μm,250 mm×4.6 mm，柱 號(hào)：538639，Agilent Technologies）；Waters Symmetry Shiled RP18色譜柱（5 μm,4.6 mm×250 mm）；Mettler AG 135電 子 天 平（瑞 士Metter TOLEDO，感量：0.01 mg/0.1 mg）；YP5001型電子天平（上海光正醫(yī)療儀器有限公司，感量：0.1 g）；KQ-250DE型數(shù)控超聲波清洗器（江蘇省昆山市超聲儀器有限公司）；DHG-9101-2SA型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海三發(fā)科學(xué)儀器有限公司）；FY-1H型旋片式真空泵（浙江飛越機(jī)電有限公司）；103B型200 g高速中藥粉碎機(jī)（浙江省瑞安市永歷制藥機(jī)械有限公司）。

1.2 材料

1.2.1 實(shí)驗(yàn)用藥材 經(jīng)江西省中醫(yī)藥研究院虞金寶研究員鑒定為吳茱萸Euodia rutaecarpa（Juss.）Benth.。藥材信息見表1。

表1 實(shí)驗(yàn)用吳茱萸藥材信息

1.2.2 試藥 去氫吳茱萸堿（批號(hào)：Q-068-170426，純度為＞98%）、吳茱萸堿（批號(hào)：W-012-161216，純度為＞98%）、吳茱萸次堿（批號(hào)：W-013-161216，純度為＞98%）購(gòu)于成都瑞芬思生物科技有限公司，檸檬苦素（批號(hào)：CF202002，純度≥98%）購(gòu)于Chem Faces公司；乙腈和甲醇（色譜純）；磷酸、三乙胺、甲酸均為分析純，娃哈哈純凈水（杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：Dikmatech Diamonsil Plus C18（5 μm,250 mm×4.6 mm）；流動(dòng)相：乙腈（A）-緩沖鹽（0.02%磷酸，B）；檢測(cè)波長(zhǎng)：215 nm；流速：1 ml/min；柱溫：25℃；進(jìn)樣量10 μl；梯度洗脫（0～15 min，33%～35% A；15～46 min，35%～35% A；46～54 min，35%～100% A；54～66 min，100%～100% A；66～69 min，100%～33%A；69～75 min，33%～33%A）。

2.2 混合對(duì)照品溶液的配制 精密稱取去氫吳茱萸堿12.26 mg和吳茱萸次堿6.54 mg，分別置于10 ml量瓶中，加甲醇溶解并定容，搖勻，得去氫吳茱萸堿和吳茱萸次堿對(duì)照品貯備液；精密稱取檸檬苦素16.18 mg和吳茱萸堿8.14 mg，分別置于25 ml量瓶中，加甲醇溶解并定容，搖勻，得檸檬苦素和吳茱萸堿對(duì)照品貯備液。再分別精密吸取上述對(duì)照品貯備液各2 ml置于10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成混合對(duì)照品母液。再精密吸取混合對(duì)照品母液5 ml置于10 ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成每1毫升分別含去氫吳茱萸堿122.60 μg、吳茱萸次堿65.40 μg、檸檬苦素64.72 μg和吳茱萸堿32.56 μg的混合對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的制備 分別取過3號(hào)篩的吳茱萸粉末約0.3 g，精密稱定，置于具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇50 ml，稱定重量，浸泡1 h，超聲處理（功率：250 W，頻率：40 kH）60 min，放冷，再稱定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 線性關(guān)系考察 將“2.2”項(xiàng)下混合對(duì)照品母液逐步稀釋成5份，得到去氫吳茱萸堿質(zhì)量濃度分別為245.20 μg/ml、122.60 μg/ml、61.30 μg/ml、30.65 μg/ml、15.32 μg/ml、7.66 μg/ml，檸檬苦素質(zhì)量濃度分 別 為258.88 μg/ml、129.44 μg/ml、64.72 μg/ml、32.36 μg/ml、16.18 μg/ml、8.09 μg/ml，吳茱萸堿質(zhì)量濃度分別為65.12 μg/ml、32.56 μg/ml、16.28 μg/ml、8.14 μg/ml、4.07 μg/ml、2.04 μg/ml，吳茱萸次堿質(zhì)量濃 度 分 別 為119.00 μg/ml、59.50 μg/ml、29.75 μg/ml、14.88 μg/ml、7.44 μg/ml、3.72 μg/ml的對(duì)照品溶液。各取10 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以對(duì)照品峰面積為縱坐標(biāo)（y），以對(duì)照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性。見表2。

表2 吳茱萸中4個(gè)對(duì)照品的線性關(guān)系和范圍

2.4.2 定量限與檢測(cè)限考察 精密吸取“2.2”項(xiàng)下的去氫吳茱萸堿、檸檬苦素、吳茱萸堿和吳茱萸次堿對(duì)照品貯備液適量，分別倍比稀釋，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以信噪比10：1、3：1分別計(jì)算定量限和檢測(cè)限。結(jié)果去氫吳茱萸堿、檸檬苦素、吳茱萸堿和吳茱萸次堿定量限為0.071 2 μg/ml、0.759 0 μg/ml、0.202 1 μg/ml、0.321 6 μg/ml，檢測(cè)限0.022 5 μg/ml、0.256 0 μg/ml、0.098 6 μg/ml、0.122 3 μg/ml。

2.4.3 精密度試驗(yàn) 精密吸取“2.2”項(xiàng)下的混合對(duì)照品溶液10 μl，注入液相色譜儀，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄色譜峰面積，結(jié)果去氫吳茱萸堿、檸檬苦素、吳茱萸堿和吳茱萸次堿峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別為1.07%、1.59%、1.16%、1.18%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.4.4 重復(fù)性試驗(yàn) 取江西新余吳茱萸藥材（批號(hào)：H1）粉末6份，分別按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，測(cè)定其含量，結(jié)果去氫吳茱萸堿、檸檬苦素、吳茱萸堿和吳茱萸次堿峰面積的RSD分別為1.85%、1.96%、2.77%、2.93%（n=6）。結(jié)果表明，本法重復(fù)性良好。

2.4.5 穩(wěn)定性考察 取江西新余吳茱萸藥材（批號(hào)：H1）粉末，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，分別于0 h、3 h、6 h、12 h、16 h、20 h、26 h時(shí)進(jìn)樣10 μl測(cè)定，結(jié)果去氫吳茱萸堿、檸檬苦素、吳茱萸堿和吳茱萸次堿峰面積的RSD分別為0.98%、1.09%、1.39%、1.36%（n=6）。結(jié)果表明，供試品溶液在26 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.4.6 加樣回收率試驗(yàn) 取江西新余吳茱萸藥材（批號(hào)：H1）粉末6份，每份各0.15 g，精密稱定，分別置于具塞錐形瓶中，分別精密加入1.120 0 μg/ml的去氫吳茱萸堿，0.372 8 μg/ml的吳茱萸堿，0.181 2 μg/ml的吳茱萸次堿的對(duì)照品溶液各1 ml，0.660 8 μg/ml的檸檬苦素2 ml，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果：去氫吳茱萸堿、檸檬苦素、吳茱萸堿、吳茱萸次堿回收率分別為92.30%～95.30%（RSD=1.25%，n=6）、100.90%～106.90%（RSD=1.91%，n=6）、96.90%～103.30%（RSD=2.46%，n=6）、92.80%～98.20%（RSD=2.23%，n=6）。

2.5 吳茱萸中4種成分含量測(cè)定及含量配比 取36個(gè)不同產(chǎn)地不同批次的吳茱萸樣品粉末，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算樣品中4個(gè)成分的含量及含量配比。見表3、圖1。

表3 不同產(chǎn)地吳茱萸中4種成分平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)（mg/g）及配比關(guān)系

續(xù)表

圖1 混合對(duì)照品溶液和供試品溶液高效液相色譜圖

圖2 36批吳茱萸樣品含量測(cè)定結(jié)果聚類分析樹狀圖

2.6 含量測(cè)定結(jié)果聚類分析 將吳茱萸中4個(gè)成分的含量導(dǎo)入SPSS21.0軟件，以歐式平方距離為測(cè)度 進(jìn) 行 聚 類 分 析，H24、H27、H2、H8、H9、H3、H7、H19、H35、H6、H36、H4、H11、H5、H1、H14、H15號(hào)樣品聚為第1類，H22、H23、H31、H32、H33、H12、H25、H10號(hào)樣品聚為第2類，H21、H29、H28、H34、H13、H18、H26號(hào)樣品聚為第3類，H16、H30號(hào)樣品聚為第4類，H17號(hào)和H20分別單獨(dú)聚為1類。見圖2。

2.7 含量測(cè)定結(jié)果判別分析（1）江西省位于24°～30°N，南北長(zhǎng)、東西窄，地處亞熱帶，東西南三面環(huán)山，北部地區(qū)為鄱陽湖平原，中間以山地丘陵為主，復(fù)雜的地貌使江西的氣候資源的時(shí)空分布也差異明顯。根據(jù)緯度將江西至北向南分為4個(gè)板塊，板塊一緯度為29°30′～29°71′，主要包含上饒、九江、景德鎮(zhèn)；板塊二緯度為27°81′～28°69′，主要包含南昌、宜春、鷹潭；板塊三緯度為27°12′～27°60′，主要包含新余、吉安、撫州、萍鄉(xiāng)；板塊四緯度為24°29′～27°09′，為贛州[23]。（2）以聚類分析的分類結(jié)果作為判別分析的分組依據(jù)，采用SIMCA14.1對(duì)36批吳茱萸樣品中4個(gè)成分的含量進(jìn)行正交偏最小二乘判別分析（OPLS-DA），繪制OPLS-DA散點(diǎn)得分圖，結(jié)果顯示，36批樣品可聚為六類，其中第1類樣品包含H24、H27、H2、H8、H9、H3、H7、H19、H35、H6、H36、H4、H11、H5、H1、H14、H15號(hào)，產(chǎn)地主要集中在第三和第四板塊；第2類樣品包含H22、H23、H31、H32、H33、H12、H25、H10，產(chǎn)地主要集中在第一板塊；第3類樣品包含H21、H29、H28、H34、H13、H18、H26，產(chǎn)地主要集中在第二板塊；第4類樣品包含H16、H30，產(chǎn)地為廣西；第5類樣品包含H20，產(chǎn)地為重慶；第6類樣品包含H17，產(chǎn)地為四川；OPLS-DA分類結(jié)果與聚類分析的結(jié)果一致，在不同算法介導(dǎo)下的分類方法得到的分類結(jié)果一致，足見該分類結(jié)果是可信的。根據(jù)正交偏最小二乘判別分析VIP值可知，檸檬苦素、吳茱萸堿的VIP值＞1，對(duì)分類的貢獻(xiàn)比較大。由判別分析和聚類分析結(jié)果可知江西各地吳茱萸含量測(cè)定結(jié)果分布比較集中，但也存在區(qū)別，自北向南存在差異。其中湖北、湖南、浙江等江西周邊省份樣品測(cè)定結(jié)果與江西的聚在一起，而廣西、重慶、四川等距離江西較遠(yuǎn)省份樣品測(cè)定結(jié)果出現(xiàn)離群現(xiàn)象。見圖3、圖4。

圖3 36批吳茱萸樣品正交偏最小二乘判別分析得分圖

圖4 吳茱萸樣品正交偏最小二乘判別分析VIP值

2.8 配比關(guān)系結(jié)果判別分析 在含量測(cè)定結(jié)果聚類分析和判別分析結(jié)果的基礎(chǔ)上，采用SIMCA14.1對(duì)36批吳茱萸樣品中4個(gè)成分的含量配比結(jié)果進(jìn)行正交偏最小二乘判別分析，繪制OPLS-DA散點(diǎn)得分圖。結(jié)果顯示，36批樣品大致可聚為4類，H21、H29、H28、H13、H18、H26、H34、H15號(hào) 樣 品 聚 為1類，含 量 配 比 為1：（2.83～4.19）：（1.42～2.24）：（0.50～0.67）產(chǎn)地主要為板塊二（南昌、宜春、鷹潭）；H10、H25、H31、H32、H22、H23、H12、H33號(hào)樣品聚為2類，含量配比為1：（1.72～2.49）：（1.00～1.40）：（0.38～0.57），產(chǎn)地主要為板塊一（上饒、九江、景德鎮(zhèn)）；H14、H36、H4、H6、H5、H35、H19號(hào)樣品聚為3類，含 量 配 比 為1：（1.46～1.90）：（0.16～0.25）：（0.09～0.13），產(chǎn)地主要為板塊四（贛州）；H1、H24、H27、H2、H7、H9、H3、H11、H8號(hào)樣品聚為4類，含量配比為1：（2.24～2.86）：（0.05～0.61）：（0.04～0.27），產(chǎn)地主要為板塊三（新余、吉安、撫州）；H16和H30、H20、H17離中心較遠(yuǎn)，產(chǎn)地主要為廣西、重慶和四川。由聚類結(jié)果可推出受南北生態(tài)差異的影響，自北向南成分之間的配比關(guān)系存在差異。見圖5。

圖5 36批吳茱萸樣品配比關(guān)系正交偏最小二乘判別分析得分圖

3 討論

本研究比較了40%～100%乙醇、純甲醇提取溶劑、超聲時(shí)間20～80 min、溶劑用量15～50 ml對(duì)吳茱萸藥材中去氫吳茱萸堿、檸檬苦素、吳茱萸堿、吳茱萸次堿的整體提取效果。結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)提取條件為70%乙醇50 ml浸泡1 h，超聲提取60 min時(shí)4種化學(xué)成分提取率最高。比較了0.1%三乙胺-乙腈、0.1%甲酸-乙腈、0.1%乙酸-乙腈、0.1%磷酸-乙腈（甲醇）等流動(dòng)相，結(jié)果發(fā)現(xiàn)以0.1%磷酸-乙腈作流動(dòng)相時(shí)基線平穩(wěn)，各成分達(dá)到基線分離。進(jìn)而比較不同濃度磷酸（0.02%～0.15%）對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響，結(jié)果顯示磷酸濃度的高低對(duì)基線和峰形的影響較小，磷酸的濃度最終定為0.02%，選用0.02%磷酸-乙腈為流動(dòng)相。

在其他色譜條件不變，只改變色譜柱（Dikmatech Diamonsil Plus C18、Agilent HC-C18、Waters RP18色譜柱）的情況下，分別測(cè)定供試品中有效成分的含量。結(jié)果顯示，去氫吳茱萸堿、檸檬苦素、吳茱萸堿和吳茱萸次堿峰與前后峰均達(dá)到基線分離，含量的RSD均＜3.0%（n=3）。說明不同色譜柱對(duì)測(cè)定結(jié)果影響較小。

采用二極管陣列檢測(cè)器，分別對(duì)4個(gè)待測(cè)成分在190～400 nm進(jìn)行紫外吸收全波長(zhǎng)掃描。結(jié)果去氫吳茱萸堿、檸檬苦素、吳茱萸堿、吳茱萸次堿的最大吸收波長(zhǎng)分別為210 nm、250 nm、370 nm；210 nm、270 nm；224 nm；220 nm、240 nm、340 nm，為了兼顧4個(gè)成分的均有較大吸收并具備良好的基線，最終檢測(cè)波長(zhǎng)確定為215 nm。

眾所周知，中藥的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)是一個(gè)穩(wěn)定有序的整體，物質(zhì)基礎(chǔ)具有穩(wěn)定、有序、整體性的結(jié)構(gòu)，在測(cè)定主要活性成分含量的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步分析主要活性成分的配比關(guān)系可以更好地控制中藥材質(zhì)量，這也將成為全面控制藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的新思路。

筆者基于中醫(yī)藥配伍理論，測(cè)定了江西區(qū)域及其他省份的吳茱萸藥材中去氫吳茱萸堿、檸檬苦素、吳茱萸堿和吳茱萸次堿含量，并計(jì)算配比關(guān)系，結(jié)果贛 州 含 量 配 比 為1：（1.46～1.90）：（0.16～0.25）：（0.09～0.13）；新余、吉安、撫州含量配比為1：（2.24～2.86）：（0.05～0.61）：（0.04～0.27）；南昌、宜春、鷹 潭 含 量 配 比 為1：（2.83～4.19）：（1.42～2.24）：（0.50～0.67）；上饒、九江、景德鎮(zhèn)含量配比為1：（1.72～2.49）：（1.00～1.40）：（0.38～0.57），廣西含量配比為1：（7.87～9.22）：（4.27～4.98）：（1.20～1.26）、重慶含量配比為1：5.50：2.97：0.99和四川含量配比為1：20.64：4.49：0.62，由以上數(shù)據(jù)可知不同區(qū)域吳茱萸均含去氫吳茱萸堿、檸檬苦素、吳茱萸堿、吳茱萸次堿4個(gè)有效成分，但量和量的配比關(guān)系有明顯區(qū)別，其中上饒、九江、景德鎮(zhèn)、南昌、宜春、鷹潭等江西中北部地區(qū)的配比關(guān)系比較接近，存在穩(wěn)定有序的結(jié)構(gòu)比，且距離該區(qū)域越遠(yuǎn)，其配比關(guān)系差異越明顯，這也正符合唐代陳藏器所指：“茱萸南北總有，但其效不同，入藥者以吳地為好?！眳堑丶礊榻髦斜辈康貐^(qū)。但其藥效最佳是否受配比關(guān)系影響有待后期的藥效試驗(yàn)加以驗(yàn)證。以上結(jié)果表明，不同區(qū)域吳茱萸藥材有效成分含量及量與量間的配比關(guān)系存在差異，造成此現(xiàn)象的原因可能是不同產(chǎn)區(qū)地理位置、氣候環(huán)境、土壤結(jié)構(gòu)等因素存在不同。此外，本研究只是初步分析比較了江西省內(nèi)不同區(qū)域及少量省外吳茱萸藥材中去氫吳茱萸堿、檸檬苦素、吳茱萸堿、吳茱萸次堿配比關(guān)系的特點(diǎn)和差異，后續(xù)還將繼續(xù)增加樣本量并開展藥效實(shí)驗(yàn)，優(yōu)選出藥效最佳的配比關(guān)系，為吳茱萸藥材道地性研究提供新思路與新方法，為道地吳茱萸藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供科學(xué)依據(jù)。