馮 瑤，樊一鳴，任洪利，許賀然，夏榕嶸，侯振山，李昀婷，馬世宇，楊 鎮(zhèn)，辛 廣,

（1.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110161；2.葫蘆島農(nóng)函大玄宇食用菌野馴繁育有限公司，遼寧 興城 125100）

黑皮雞樅菌（）是一種珍貴的藥食兩用食用菌，其味道鮮美、香氣濃郁、營(yíng)養(yǎng)豐富，有降血糖、抗氧化等作用，與松茸、羊肚、黑虎掌同為我國(guó)四大名菌。相關(guān)研究主要集中在種質(zhì)資源、遺傳多樣性、栽培技術(shù)、深層發(fā)酵技術(shù)以及生物活性評(píng)價(jià)等方面。黑皮雞樅菌作為一種中偏高溫型菇類(lèi)，其采后呼吸作用強(qiáng)烈，易腐敗變質(zhì)。為提高其附加值，對(duì)黑皮雞樅菌進(jìn)行精深加工尤為重要，風(fēng)味醬是目前最常見(jiàn)的加工產(chǎn)品。

醬類(lèi)食品起源于中國(guó)，具有種類(lèi)多、營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美、食用方便等優(yōu)點(diǎn)，廣受消費(fèi)者喜愛(ài)。近年來(lái)，具有營(yíng)養(yǎng)和保健功能的食用菌風(fēng)味醬具有廣闊的發(fā)展前景。由于黑皮雞樅菌生產(chǎn)環(huán)境復(fù)雜，人工栽培技術(shù)難度較大，導(dǎo)致其市場(chǎng)銷(xiāo)售價(jià)格昂貴，以其為原料的加工制品難以走進(jìn)大眾視野。平菇風(fēng)味獨(dú)特、營(yíng)養(yǎng)豐富、價(jià)格低廉，在世界范圍內(nèi)被廣泛種植和消費(fèi)。研究發(fā)現(xiàn)平菇中游離氨基酸總含量、1-辛烯-3-酮、1-辛烯-3-醇和3-辛酮含量高于香菇、雙孢蘑菇和金針菇等食用菌，平菇多糖具有抗氧化、免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤等多種生物活性。平菇風(fēng)味醬由于豐富的營(yíng)養(yǎng)和鮮美的風(fēng)味已得到人們的廣泛關(guān)注。因此將其與黑皮雞樅菌按一定比例復(fù)配制作復(fù)合型食用菌調(diào)味醬，既可降低原料成本，又豐富了黑皮雞樅菌醬的營(yíng)養(yǎng)、風(fēng)味和口感。然而菌醬風(fēng)味會(huì)受不同原料復(fù)配比例的影響。

近年來(lái)，人們對(duì)食用菌醬風(fēng)味的研究較多，如粟立丹等通過(guò)氣相色譜-質(zhì)譜鑒定芳樟醇、4-萜烯醇、苯乙醛、壬醛、-蒎烯、茴香腦等為羊肚菌牛肉醬中主要的揮發(fā)性風(fēng)味物質(zhì)。Qing Zhenglong等研究發(fā)現(xiàn)加入食用菌的牛肉醬，游離氨基酸含量和揮發(fā)性成分的種類(lèi)顯著高于純牛肉醬。風(fēng)味是食用菌調(diào)味醬品質(zhì)評(píng)價(jià)的一個(gè)重要指標(biāo)，其中鮮味和香味是食用菌最典型的風(fēng)味特征：鮮味主要來(lái)源于游離氨基酸、5′-核苷酸、肽和有機(jī)酸等；香味由揮發(fā)性化合物產(chǎn)生。炒制工序是食用菌醬特征風(fēng)味形成的關(guān)鍵，產(chǎn)品風(fēng)味除了受原料品種和數(shù)量差異的影響之外，也會(huì)受炒制時(shí)間等因素影響。

對(duì)于食用菌調(diào)味醬，已有很多關(guān)于復(fù)合菌醬研制、制作工藝優(yōu)化及其不同配方產(chǎn)品風(fēng)味品質(zhì)的研究，然而炒制過(guò)程中產(chǎn)品風(fēng)味的動(dòng)態(tài)變化是一個(gè)新的研究方向。本實(shí)驗(yàn)分析不同炒制時(shí)間下不同復(fù)配比例的黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合調(diào)味醬的鮮味及香味品質(zhì)，篩選出最佳炒制時(shí)間和兩種原料的最佳配比，旨在為改善該復(fù)合調(diào)味醬的風(fēng)味品質(zhì)提供一定理論支撐，也可推動(dòng)食用菌深加工產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

大小、顏色、形狀均一、沒(méi)有機(jī)械損傷的黑皮雞樅菌和平菇均采自遼寧省葫蘆島農(nóng)函大玄宇食用菌野訓(xùn)繁育有限公司。

鹽酸、磺基水楊酸（均為色譜純） 天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司；磷酸二氫鉀（色譜純）、5′-鳥(niǎo)苷酸、5′-肌苷酸、5′-黃苷酸、5′-腺苷酸 上海源葉生物科技有限公司；鄰二氯苯（色譜純） 濟(jì)南榮廣化工有限公司；二氯甲烷（色譜純） 山東聞韶化工有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

LGJ-12冷凍干燥機(jī) 北京松原華星科技發(fā)展有限公司；L-8900氨基酸自動(dòng)分析儀 日本日立公司；SA402B 電子舌 北京盈生恒泰科技有限公司；600型高效液相色譜儀（包含2996 二極管陣列檢測(cè)器）美國(guó)Waters公司；7890A-5975C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（包含氫火焰離子化檢測(cè)器） 美國(guó)安捷倫公司。

1.3 方法

1.3.1 不同比例復(fù)合醬的制備

將平菇與黑皮雞樅菌按質(zhì)量比7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、3∶7混合（每份混合食用菌為300 g），清洗干凈后切塊。在鍋中熱油，油溫控制在160 ℃。分別向鍋中加入不同比例混合的食用菌翻炒，加入復(fù)合醬質(zhì)量30%的豆瓣醬和50%的水，再加入5%的白砂糖和50%的水，按上述工藝分別炒制2、3、4、5、6 min。炒制完畢后取樣裝瓶，經(jīng)密封滅菌、冷凍干燥后制得粉末樣品，備用。

1.3.2 鮮味氨基酸的測(cè)定

按照Li Xiaobei等的方法并稍作修改。取1.3.1節(jié)中粉末樣品各0.3 g，分別加入50 mL 0.1 mol/L鹽酸溶液，超聲45 min，10 000 r/min離心15 min。取5 mL上清液，加入等體積的5%磺基水楊酸溶液，混勻后靜置15 min，10 000 r/min離心15 min。取上清液，過(guò)0.22 μm微孔膜，使用氨基酸自動(dòng)分析儀進(jìn)行測(cè)定。

1.3.3 5′-核苷酸的測(cè)定

參照Feng Yao等的方法并稍作修改。取1.3.1節(jié)中粉末樣品各0.5 g，分別加入50 mL蒸餾水，煮沸1 min，過(guò)0.45 μm微孔濾膜，使用高效液相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。

色譜條件：LiChrospher RP-18 色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：pH 4.2 0.1 mol/L磷酸二氫鉀緩沖液；柱溫30 ℃；進(jìn)樣量20 μL；波長(zhǎng)254 nm。以5′-鳥(niǎo)苷酸、5′-肌苷酸、5′-黃苷酸、5′-腺苷酸為標(biāo)準(zhǔn)品。

1.3.4 等價(jià)鮮味濃度（equivalent umami concentration，EUC）的計(jì)算

根據(jù)游離氨基酸和5′-核苷酸含量計(jì)算EUC：

式中：EUC以每克樣品中所含味精當(dāng)量表示；12.18為協(xié)同作用常數(shù)；a為鮮味氨基酸含量/（mg/g）；a為樣品鮮味核苷酸含量/（mg/g）；b為鮮味氨基酸相對(duì)呈鮮系數(shù)（谷氨酸為1；天冬氨酸為0.077）；b為鮮味核苷酸相對(duì)呈鮮系數(shù)（5′-肌苷酸為1；5-鳥(niǎo)苷酸為2.3；5′-黃苷酸為0.61；5′-腺苷酸為0.18）。

1.3.5 電子舌味覺(jué)值的測(cè)定

取1.3.1節(jié)中冷凍干燥后的樣品各10 g，分別加入30 mL蒸餾水混勻，6 000 r/min離心30 min，取上清液，使用電子舌進(jìn)行測(cè)定。

1.3.6 揮發(fā)性成分的測(cè)定

1.3.6.1 頂空固相微萃取條件

取5 g 1.3.1節(jié)中粉末樣品于15 mL頂空瓶中，加入10 μL 1 mg/L鄰二氯苯作為內(nèi)標(biāo)物，在45 ℃條件下水浴10 min，用50/30 μm CAR/DVB/PDMS萃取頭萃取。將在270 ℃老化30 min的萃取頭插入頂空瓶中并推出纖維頭，在45 ℃下萃取30 min，萃取完成后收回纖維頭，立即插入氣相色譜進(jìn)樣口，270 ℃解吸5 min。

1.3.6.2 氣相色譜-質(zhì)譜條件

參考李拂曉等的方法稍作修改。

氣相色譜條件：HP-5MS毛細(xì)管柱（60 m×250 μm，0.25 μm）；載氣為氦氣，載氣流速1.0 mL/min；進(jìn)樣流速1.00 mL/min，不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣口溫度270 ℃；升溫程序：初始溫度40 ℃，保持5 min，以6 ℃/min升溫至230 ℃，保持6 min。

質(zhì)譜條件：電子電離源；電子能量70 eV；離子源溫度230 ℃；進(jìn)樣口溫度280 ℃；質(zhì)量掃描范圍/10～450；溶劑延遲時(shí)間10 min。

1.3.6.3 揮發(fā)性成分的定性和定量

根據(jù)揮發(fā)性成分總離子流圖，使用NIST 11標(biāo)準(zhǔn)譜庫(kù)進(jìn)行比對(duì)檢索（選擇匹配度大于85的化合物）并結(jié)合人工圖譜解析及保留指數(shù)資料的查詢，確認(rèn)各個(gè)化學(xué)成分。保留指數(shù)通過(guò)C～C正構(gòu)烷烴計(jì)算，采用內(nèi)標(biāo)法對(duì)揮發(fā)性成分進(jìn)行定量分析。

1.4 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果與分析

2.1 炒制時(shí)間對(duì)黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬鮮味氨基酸的影響

天冬氨酸和谷氨酸有助于形成蘑菇的典型鮮味。如圖1所示，各復(fù)配比例下，不同炒制時(shí)間的復(fù)合醬中鮮味氨基酸含量具有一定差異；天冬氨酸和谷氨酸分別在炒制3 min和4 min含量最高，在炒制3 min和4 min鮮味氨基酸總含量顯著高于其他炒制時(shí)間（＜0.05）。同一復(fù)配比例的復(fù)合醬在不同炒制時(shí)間下最高的鮮味氨基酸總含量是最低的1.41～1.69 倍。各炒制時(shí)間下，平菇和黑皮雞樅菌以4∶6復(fù)配時(shí)，天冬氨酸含量、谷氨酸含量、鮮味氨基酸總含量均高于其他復(fù)配比例。

圖1 不同炒制時(shí)間、不同復(fù)配比例下黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬的鮮味氨基酸含量Fig.1 Contents of umami amino acids in mixed mushroom sauce with different cooking times and different blending ratios

2.2 炒制時(shí)間對(duì)黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬5′-核苷酸的影響

5′-鳥(niǎo)苷酸、5′-肌苷酸和5′-黃苷酸與鮮味成分的協(xié)同作用會(huì)大大增加蘑菇的鮮味，其中5′-鳥(niǎo)苷酸和5′-肌苷酸是鮮味的主要貢獻(xiàn)者。如圖2所示，復(fù)合醬中5′-鳥(niǎo)苷酸和5′-腺苷酸的含量相對(duì)高于5′-肌苷酸和5′-黃苷酸。各復(fù)配比例下，5′-鳥(niǎo)苷酸、5′-黃苷酸和5′-腺苷酸的含量整體均隨炒制時(shí)間的延長(zhǎng)而增加；5′-肌苷酸含量隨炒制時(shí)間的延長(zhǎng)先升高后降低，其含量在炒制4 min時(shí)最高。5′-肌苷酸含量的下降可能是因?yàn)樵诔粗坪笃诘南牧看笥诋a(chǎn)生量。不同復(fù)配比例復(fù)合醬的5′-核苷酸含量具有一定差異；在多數(shù)炒制時(shí)間下，當(dāng)平菇和黑皮雞樅菌以4∶6復(fù)配時(shí)，4 種5′-核苷酸含量高于其他復(fù)配比例。

圖2 不同炒制時(shí)間、不同復(fù)配比例下黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬的5′-核苷酸含量Fig.2 5′-Nucleotide content in mixed mushroom sauce with different cooking times and different blending ratios

2.3 炒制時(shí)間對(duì)黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬EUC的影響

EUC是評(píng)價(jià)5′-核苷酸和鮮味氨基酸協(xié)同作用的等效鮮味指標(biāo)。如圖3所示，各復(fù)配比例下，復(fù)合醬的EUC均隨炒制時(shí)間的延長(zhǎng)先升高后降低，這與上述鮮味氨基酸的變化趨勢(shì)相似；炒制4 min時(shí)，復(fù)合醬的EUC均高于其他炒制時(shí)間下的EUC。通過(guò)Mau等對(duì)EUC水平的分級(jí)可知：不同復(fù)配比例的復(fù)合醬在炒制2～6 min時(shí)的EUC均屬于二級(jí)水平（100～1 000 g/100 g）。在各炒制時(shí)間下，平菇和黑皮雞樅菌以4∶6復(fù)配時(shí)，復(fù)合醬的EUC高于其他復(fù)配比例下的EUC；樣品中最高的EUC為最低EUC的1.45～1.62 倍。

圖3 不同炒制時(shí)間、不同復(fù)配比例下黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬的EUCFig.3 EUC of mixed mushroom sauce with different cooking times and different blending ratios

2.4 炒制時(shí)間對(duì)黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬電子舌味覺(jué)值的影響

電子舌確定的感官評(píng)分與人類(lèi)感官評(píng)估之間存在顯著相關(guān)性，可以表征蘑菇的味道。如圖4所示，各復(fù)配比例下，復(fù)合醬的鮮味值整體隨炒制時(shí)間的延長(zhǎng)先升高后降低，且明顯高于甜味和苦味味覺(jué)值。不同復(fù)配比例復(fù)合醬的鮮味值均在炒制4 min時(shí)明顯高于其他炒制時(shí)間，這與EUC的測(cè)定結(jié)果一致；甜味味覺(jué)值先升高后降低，炒制4 min和5 min時(shí)的甜味值明顯高于其他炒制時(shí)間；苦味味覺(jué)值與鮮味和甜味相反，隨著炒制時(shí)間先降低后升高，在炒制4 min時(shí)最低。食用菌的復(fù)配比例對(duì)風(fēng)味也有明顯影響，各炒制時(shí)間下，當(dāng)比例為4∶6時(shí)，該復(fù)合醬鮮味和甜味值明顯高于其他復(fù)配比例。

圖4 不同炒制時(shí)間、不同復(fù)配比例下黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬的電子舌味覺(jué)值Fig.4 Electronic tongue taste values of mixed mushroom sauce with different cooking times and different blending ratios

2.5 炒制時(shí)間對(duì)黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬揮發(fā)性成分的影響

2.5.1 揮發(fā)性成分的定性和定量分析

圖5a為不同炒制時(shí)間下黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬揮發(fā)性成分聚類(lèi)熱圖，共檢測(cè)出醇類(lèi)6 種、醛類(lèi)4 種、酮類(lèi)5 種、酯類(lèi)3 種、酸類(lèi)2 種、含氮化合物3 種、烴類(lèi)5 種。在炒制2、3、4、5、6 min時(shí)分別檢測(cè)出24、26、28、28、28 種揮發(fā)性成分；同一復(fù)配比例下，不同炒制時(shí)間下?lián)]發(fā)性成分的含量也存在顯著差異（＜0.05），多數(shù)醇類(lèi)、酮類(lèi)和吡嗪類(lèi)物質(zhì)的含量隨著炒制時(shí)間的延長(zhǎng)先升高后降低，在炒制4 min和5 min時(shí)，大多數(shù)揮發(fā)性成分的含量達(dá)到了最高水平。同一炒制時(shí)間下不同復(fù)配比例復(fù)合醬的揮發(fā)性成分種類(lèi)和含量也具有顯著差異（＜0.05），當(dāng)平菇和黑皮雞樅菌的復(fù)配比例為4∶6時(shí)，揮發(fā)性成分的種類(lèi)（28 種）、八碳化合物的總含量（15.12～23.33 mg/g）以及含氮化合物的總含量（6.55～8.90 mg/g）均相對(duì)較高。

為進(jìn)一步比較不同炒制時(shí)間下復(fù)合醬揮發(fā)性成分的差異，以同一炒制時(shí)間下5 種比例的復(fù)合醬為一組，共分成5 組進(jìn)行聚類(lèi)分析。由圖5b可知，不同炒制時(shí)間下的復(fù)合醬可總體分為兩大類(lèi)：炒制4 min和5 min下的復(fù)合醬揮發(fā)性成分相似；炒制2、3 min和6 min時(shí)的復(fù)合醬揮發(fā)性成分相似。

圖5 不同炒制時(shí)間、不同復(fù)配比例的黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬揮發(fā)性成分熱圖（a）和聚類(lèi)熱圖（b）Fig.5 Heat map (a) and cluster heat map (b) of volatile compounds in mixed mushroom sauce with different cooking times and different blending ratios

八碳化合物是食用菌最重要的風(fēng)味物質(zhì)，其中醇類(lèi)通常具有植物香氣。1-辛烯-3-醇被鑒定為一種類(lèi)似蘑菇的風(fēng)味化合物，具有獨(dú)特的泥土味和甜味，存在于大多數(shù)食用菌中。在炒制初期，1-辛烯-3-醇的含量升高，在炒制4 min時(shí)含量最高，之后隨著炒制時(shí)間的延長(zhǎng)，逐漸降低（圖5b）。由圖5a可知，炒制5 min，平菇和黑皮雞樅菌以4∶6復(fù)配的樣本中醇類(lèi)物質(zhì)的種類(lèi)（6 種）最多、總含量（11.35 mg/g）最高。

醛類(lèi)和酮類(lèi)是脂肪酸降解的主要產(chǎn)物，美拉德反應(yīng)、氨基酸和碳水化合物的熱降解是其重要的產(chǎn)生途徑，二者閾值較低，對(duì)風(fēng)味影響較大。由圖5a可知，在炒制5 min、復(fù)配比例為4∶6的復(fù)合醬中醛類(lèi)物質(zhì)的種類(lèi)（4 種）最多、總含量（12.85 mg/g）最高；在炒制4 min、復(fù)配比例為5∶5的復(fù)合醬中，酮類(lèi)種類(lèi)最多（5 種）、總含量（14.69 mg/kg）最高。

吡嗪類(lèi)物質(zhì)是脂肪氧化后又參與美拉德反應(yīng)的產(chǎn)物，具有肉香和烤香味，是加熱產(chǎn)品中一種重要的香氣物質(zhì)。由圖5可知，2,5-二甲基吡嗪和四甲基吡嗪分別在炒制5 min和4 min時(shí)最高，當(dāng)炒制時(shí)間為4 min、復(fù)配比例為4∶6時(shí)，二者總含量相對(duì)最高，為9.22 mg/g。

前人研究表明，美拉德反應(yīng)中可能發(fā)生氧乙?；?，催化還原糖氧化成相應(yīng)的酯類(lèi)，在水性介質(zhì)中酯類(lèi)進(jìn)一步水解為酸。由圖5可知，酯類(lèi)、酸類(lèi)和一些雜環(huán)化合物在炒制后期含量顯著高于炒制前期，它們分別在復(fù)配比例為4∶6、3∶7和4∶6的復(fù)合醬中最高。

這些結(jié)果表明：該復(fù)合醬在炒制4～5 min且復(fù)配比例為4∶6時(shí)檢測(cè)出的揮發(fā)性香氣物質(zhì)的種類(lèi)最多，其含量也相對(duì)較高。

2.5.2 黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬香味品質(zhì)的綜合評(píng)價(jià)

為篩選香味品質(zhì)最佳的炒制溫度及香氣品質(zhì)最佳的復(fù)配比例，分別對(duì)5 種復(fù)配比例下不同炒制時(shí)間的復(fù)合醬中揮發(fā)性成分進(jìn)行PCA并計(jì)算其綜合得分。綜合評(píng)價(jià)得分越高，香味綜合品質(zhì)越好。由表1可知，復(fù)配比例為7∶3、5∶5、3∶7的復(fù)合醬均是在炒制5 min時(shí)具有最高綜合得分；復(fù)配比例為6∶4和4∶6時(shí)，均是在炒制4 min時(shí)具有最高綜合得分。由表2可知，在5 個(gè)炒制時(shí)間下，均是平菇和黑皮雞樅菌以4∶6復(fù)配時(shí)，綜合得分最高。這些結(jié)果表明：炒制時(shí)間為4～5 min、復(fù)配比例為4∶6的復(fù)合醬香味品質(zhì)最好。

表1 不同復(fù)配比例的黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬在不同炒制時(shí)間下?lián)]發(fā)性成分的各PC得分及綜合得分Table 1 Principal component scores and comprehensive scores of volatile components of mixed mushroom sauce with each blending ratio at different cooking times

續(xù)表1

表2 不同炒制時(shí)間下不同復(fù)配比例的黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬揮發(fā)性成分的各PC得分及綜合得分Table 2 Principal component scores and comprehensive scores of volatile components of mixed mushroom sauce at each cooking time with different blending ratios

2.6 黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬風(fēng)味成分的PLS-DA

為比較不同炒制時(shí)間下復(fù)合醬鮮味和香味成分的差異，對(duì)復(fù)合醬的非揮發(fā)性和揮發(fā)性成分進(jìn)行PLS-DA。

如圖6a所示，PC1和PC2的貢獻(xiàn)率分別為64.8%和21.6%，二者累計(jì)貢獻(xiàn)率為86.4%。在PLS-DA模型中觀察到不同炒制時(shí)間下復(fù)合醬的非揮發(fā)性化合物和揮發(fā)性化合物數(shù)據(jù)矩陣的明顯區(qū)分。炒制4、5 min的處理組均在PC1的負(fù)側(cè)和PC2的正側(cè)，說(shuō)明二者差異較?。怀粗?、3 min均在PC1的正側(cè)，說(shuō)明這兩組處理也較為相似；炒制6 min的樣本均位于PC1和PC2的負(fù)側(cè)，與其他4 組相距較遠(yuǎn)，說(shuō)明它們之間差異較大。每一聚類(lèi)中5 個(gè)點(diǎn)比較分散，說(shuō)明同一炒制時(shí)間下不同復(fù)配比例的樣本風(fēng)味間也具有差異。

圖6 不同炒制時(shí)間下不同復(fù)配比例的黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬的風(fēng)味成分的PLS-DA得分圖（a）及VIP得分（b）Fig.6 PLS-DA score plot (a) and variable importance in the projection (VIP) scores (b) for flavor components in mixed mushroom sauce with different blending ratios at different cooking times

為篩選出對(duì)區(qū)分5 組不同炒制時(shí)間的樣品組具有顯著貢獻(xiàn)的成分，計(jì)算變量重要性投影（variables important in the projection，VIP）值。VIP值＞1.0說(shuō)明該成分可作為差異標(biāo)志物。由圖6b可知，共識(shí)別出14 個(gè)VIP值＞1.0的成分，數(shù)值從小到大依次為-檸檬烯、苯乙酮、1-辛烯-3-醇、異戊酸、6-甲基-5-庚烯-2-醇、2,5-二甲基吡嗪、金合歡基丙酮、苯并噻唑、甲基庚烯酮、四甲基吡嗪、芳樟醇、苯乙醛、谷氨酸和香葉基丙酮。這些化合物是導(dǎo)致不同炒制時(shí)間下，復(fù)合醬風(fēng)味具有顯著差異的原因。接下來(lái)可從這14 種化合物入手進(jìn)一步揭示炒制時(shí)間對(duì)該復(fù)合醬風(fēng)味的影響機(jī)制。

3 討論

本研究結(jié)果顯示鮮味氨基酸和5′-核苷酸隨著炒制時(shí)間的延長(zhǎng)先升高后降低，炒制4 min時(shí)，樣本鮮味最佳。烹炒過(guò)程中加熱時(shí)間、加熱溫度和加熱速率均對(duì)食品風(fēng)味特征有重要影響，許多成分會(huì)隨著加熱時(shí)間和溫度而變化。Yu Min等指出，鮮味氨基酸在熱處理下表現(xiàn)出不同程度地下降，是由于氨基酸在美拉德反應(yīng)中的熱降解所引起。加熱過(guò)程中會(huì)同時(shí)發(fā)生兩種反應(yīng)，即蛋白質(zhì)或肽水解為氨基酸和作為風(fēng)味前體的游離氨基酸參與美拉德反應(yīng)轉(zhuǎn)化為揮發(fā)性化合物。炒制2～4 min時(shí)，鮮味氨基酸含量顯著上升或許是因?yàn)楦邷叵迈r味肽或蛋白質(zhì)發(fā)生了熱降解，使其產(chǎn)生量高于參與美拉德反應(yīng)的消耗量；在炒制后期鮮味氨基酸含量降低可能是由于更多的鮮味氨基酸參與了美拉德反應(yīng)，使其消耗量高于產(chǎn)生量，這也間接促進(jìn)了更多香味成分的產(chǎn)生。研究表明在烹炒等加熱過(guò)程中ATP代謝物會(huì)形成5′-核糖核苷酸，高溫加熱過(guò)程中核酸鏈也會(huì)降解為核苷酸，這些導(dǎo)致了隨炒制時(shí)間的延長(zhǎng)5′-核苷酸含量的升高?？辔栋被岬瓤辔痘衔锏奈兜揽梢员货r味物質(zhì)抑制，從而淡化苦味，提高鮮味，這解釋了當(dāng)鮮味值較高時(shí)，苦味值較低的原因。炒制過(guò)程中隨溫度的升高和時(shí)間的增加，會(huì)發(fā)生由游離氨基酸與還原糖（如葡萄糖、核糖、甘露糖）之間的美拉德反應(yīng)和脂類(lèi)、糖、氨基酸及其反應(yīng)中間體的熱降解與自氧化，從而形成該菌醬特有的香味品質(zhì)。本研究中香氣品質(zhì)在炒制4～5 min時(shí)較好，可能是因?yàn)榘l(fā)生了劇烈的上述化學(xué)反應(yīng)；在炒制6 min時(shí)，香味品質(zhì)略有降低，或許是由于長(zhǎng)時(shí)間的高溫加熱使一些不穩(wěn)定的揮發(fā)性物質(zhì)發(fā)生了降解。綜上，不同炒制時(shí)間對(duì)黑皮雞樅菌-平菇復(fù)合醬風(fēng)味成分的影響較大，其主要原因可能在于不同種類(lèi)化合物的來(lái)源與釋放速率不同，以及隨著時(shí)間的變化它們自身發(fā)生了氧化或降解。

不同原料的復(fù)配比例對(duì)產(chǎn)品的口感和風(fēng)味具有不同影響。成希祥的研究表明當(dāng)香菇和雞肉丁的配比為3∶7時(shí)，香菇雞肉醬風(fēng)味最佳。崔東波以香菇、黑木耳和牛肉為原料，制作了一種保健型復(fù)合調(diào)味醬，當(dāng)香菇和木耳比例為2∶1時(shí)，產(chǎn)品香氣濃郁、口感鮮美。本研究表明相同炒制時(shí)間下食用菌的復(fù)配比例對(duì)產(chǎn)品風(fēng)味品質(zhì)的影響也具有一定差異，當(dāng)平菇和黑皮雞樅菌以4∶6復(fù)配時(shí)，風(fēng)味品質(zhì)最佳，這大大降低了產(chǎn)品的生產(chǎn)成本，使該產(chǎn)品更能走進(jìn)大眾視野。

4 結(jié)論

在炒制時(shí)間為4 min、平菇和黑皮雞樅菌以4∶6復(fù)配時(shí)，復(fù)合醬鮮味水平最高；對(duì)風(fēng)味成分的定量和PCA表明，炒制時(shí)間4～5 min、復(fù)配比例4∶6的菌醬香味品質(zhì)最佳；PLS-DA表明-檸檬烯、苯乙酮、1-辛烯-3-醇、異戊酸、6-甲基-5-庚烯-2-醇、2,5-二甲基吡嗪、金合歡基丙酮、苯并噻唑、甲基庚烯酮、四甲基吡嗪、芳樟醇、苯乙醛、谷氨酸和香葉基丙酮導(dǎo)致不同炒制時(shí)間下菌醬風(fēng)味的顯著差異。然而炒制時(shí)間對(duì)其風(fēng)味的影響機(jī)制還有待進(jìn)一步探索。本研究不僅為改善該食用菌復(fù)合醬的風(fēng)味提供了理論基礎(chǔ)，也具有一定的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。