應(yīng)利俠 尚玲 馮瑞雪

（淅川縣人民醫(yī)院病理科，河南 南陽 474450）

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一。乳腺癌病因比較復(fù)雜，包括遺傳、激素、生殖、營養(yǎng)、環(huán)境等各個(gè)方面。乳腺癌早期癥狀不明顯，多數(shù)患者確診時(shí)已達(dá)到中晚期，發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，錯(cuò)過手術(shù)最佳治療時(shí)機(jī)，影響治療效果，增加病死風(fēng)險(xiǎn)。腫瘤細(xì)胞浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等病理特征與預(yù)后有關(guān)。因此，尋找可準(zhǔn)確評(píng)估乳腺癌臨床特征的指標(biāo)十分必要。

王陽等報(bào)道，新生血管的形成可為腫瘤細(xì)胞生長提供所需的營養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)腫瘤形成、增殖、浸潤、轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)，與腫瘤預(yù)后有關(guān)[1]。血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）是一種促血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子，可促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)蛋白水解酶、組織因子等的形成，為血管新生創(chuàng)造良好的前提條件[2]。缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）是具有轉(zhuǎn)錄活性的核蛋白，可調(diào)控VEGF 的合成與分泌，進(jìn)而促進(jìn)新生血管的形成[3]。

因此，推測VEGF、HIF-1α 可能與乳腺癌臨床病理特征有關(guān)。本研究主要分析VEGF、HIF-1α 蛋白在乳腺癌患者組織中的表達(dá)及臨床意義?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018 年9 月至2021 年3 月期間于本院經(jīng)病理組織確診的78 例乳腺癌患者組織標(biāo)本及其癌旁正常乳腺組織標(biāo)本作為研究對(duì)象，研究內(nèi)容符合醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)相關(guān)規(guī)范，且病例資料查閱經(jīng)患者及家屬知情同意。

納入標(biāo)準(zhǔn)：乳腺癌符合《中國抗癌協(xié)會(huì)乳腺癌診治指南與規(guī)范（2015 版）》[4]中相關(guān)規(guī)定，且經(jīng)病理學(xué)檢查確診；術(shù)前未接受相關(guān)放化療、內(nèi)分泌治療；病理組織保存完好；病例資料完整，包括本研究所需資料。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他惡性腫瘤；合并乳腺炎、乳腺囊性增生等其他乳腺疾??；腫瘤復(fù)發(fā)。

1.2 方法

1.2.1 VEGF、HIF-1α 蛋白檢測與結(jié)果判定

收集患者手術(shù)切除的病灶組織及距病灶5 cm的正常乳腺組織標(biāo)本，用10%的中性緩沖福爾馬林固定后，常規(guī)脫蠟至水、透明、包埋、切片（厚4 μm），采用免疫組化法對(duì)切片進(jìn)行染色，檢測標(biāo)本中VEGF、HIF-1α 蛋白表達(dá)情況，試劑盒選自上海長島生物技術(shù)有限公司，所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說明進(jìn)行。

結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：免疫組化染色切片由2 名經(jīng)驗(yàn)豐富的檢驗(yàn)科醫(yī)生獨(dú)立判讀，并綜合判斷得出一致結(jié)果；VEGF、HIF-1α 蛋白陽性判定標(biāo)準(zhǔn)：①染色強(qiáng)度計(jì)分：無著色計(jì)0 分，淺黃色計(jì)1 分，棕黃色計(jì)2 分，棕褐色計(jì)3 分；②染色數(shù)目計(jì)分：1%以下計(jì)0 分，1%-10%計(jì)1 分，11%-50%計(jì)2分，51%-75%計(jì)3 分，＞75%計(jì)4 分。將染色強(qiáng)度與染色數(shù)目計(jì)分乘積作為最后結(jié)果，≤2 分為陰性，＞2 分為陽性。

1.2.2 臨床特征資料搜集分析

查閱資料，收集患者年齡（≤50 歲、＞50歲）、分化程度（低、中/高）、腫瘤直徑（≥3 cm、＜3 cm）、病理組織類型（非浸潤性癌、浸潤性癌）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（有、無）等資料。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比乳腺癌患者的病灶組織與癌旁正常乳腺組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)率；分析對(duì)比不同臨床特征的乳腺癌患者病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)情況；病灶組織中VEGF、HIF-1α蛋白陽性表達(dá)對(duì)乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的評(píng)估價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS24.0 軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，若期望值＜5，采用連續(xù)校正卡方檢驗(yàn)；繪制受試者工作特征曲線（ROC），并計(jì)算曲線下面積（AUC）值，以檢驗(yàn)VEGF、HIF-1α 蛋白對(duì)乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的評(píng)估價(jià)值，AUC 值＞0.9 表示評(píng)估價(jià)值較高，0.71-0.9 表示有一定評(píng)估價(jià)值，0.5-0.7 表示評(píng)估價(jià)值較差，＜0.5 表示無評(píng)估價(jià)值；檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 病灶組織與癌旁正常乳腺組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)率

病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)率均高于癌旁正常乳腺組織（P＜0.05）。見表1。

表1 病灶組織與癌旁正常乳腺組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)率（n(%),總例數(shù)=78）

2.2 不同臨床特征的乳腺癌患者病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)情況

有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者（P＜0.05）；其他不同臨床特征的患者VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)率對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

表2 不同臨床特征乳腺癌患者病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)情況

2.3 病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)對(duì)乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的評(píng)估價(jià)值

將乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況（“1”=有，“0”=無）作為狀態(tài)變量，將病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)情況作為自變量并賦值（“1”=陽性，“0”=陰性），繪制ROC 曲線（見圖1），結(jié)果顯示，病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)對(duì)乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移評(píng)估價(jià)值的AUC 分別為0.723、0.727，均有一定評(píng)估價(jià)值。見表3。

圖1 病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)對(duì)乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移評(píng)估價(jià)值的ROC 曲線

表3 病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)對(duì)乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的評(píng)估價(jià)值

3 討論

隨著腫瘤細(xì)胞的不斷增殖及癌細(xì)胞對(duì)周圍正常組織的侵襲，乳腺癌患者可能會(huì)引發(fā)全身惡病質(zhì)、呼吸困難、骨痛等嚴(yán)重并發(fā)癥，威脅患者生命安全。因此，盡早對(duì)乳腺癌病情做出準(zhǔn)確診斷具有重要意義[4]。

本研究結(jié)果顯示，VEGF、HIF-1α 蛋白在乳腺癌患者組織中陽性表達(dá)率較高，且有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)率更高，進(jìn)一步繪制ROC 曲線結(jié)果顯示，病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)對(duì)乳腺癌患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有一定診斷價(jià)值，提示VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)情況可能對(duì)評(píng)估患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況具有積極意義。分析原因?yàn)椋琕EGF 陽性表達(dá)可增加血漿酶原活化因子的mRNA表達(dá)，提高血漿酶原活化因子活性，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)水解，并能刺激非增殖血管內(nèi)皮細(xì)胞增生，促進(jìn)新生血管生成，為腫瘤發(fā)生、發(fā)展提供養(yǎng)分，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲與轉(zhuǎn)移，增加淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)[5-6]。HIF-1α 蛋白可與細(xì)胞DNA 中的缺氧反應(yīng)元件HIF-1α 蛋白結(jié)合位點(diǎn)相結(jié)合，促進(jìn)VEGF、一氧化氮、糖酵解酶等下游基因的轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)新生血管網(wǎng)的形成，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞形成、增殖與轉(zhuǎn)移，增加淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[7-8]。

綜上所述，VEGF、HIF-1α 蛋白在乳腺癌患者組織中陽性表達(dá)率較高，檢測病灶組織中VEGF、HIF-1α 蛋白陽性表達(dá)有助于評(píng)估患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況。