王玉紅，張忠強(qiáng)，盧靜，張卉，王常燕

(1.邯鄲市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科，邯鄲 056000；2.邯鄲市第一醫(yī)院胸外科，邯鄲 056000)

多囊卵巢綜合征(PCOS)為育齡女性最常見的生殖內(nèi)分泌疾病，其在女性中的發(fā)病率較高，約為5%～10%[1]。其臨床特征主要表現(xiàn)為雄激素過(guò)高、持續(xù)無(wú)排卵或稀發(fā)排卵以及卵巢多囊樣改變等，并且PCOS一旦出現(xiàn)則終身存在，癥狀和體征可隨著治療逐漸減輕[2]。因此，尋找與PCOS發(fā)生發(fā)展相關(guān)的影響因子，分析其表達(dá)水平對(duì)PCOS的診斷以及臨床治療具有重要意義。網(wǎng)膜素(Omentin)是一種由313個(gè)氨基酸組成的新型脂肪細(xì)胞因子，在內(nèi)臟脂肪、間皮細(xì)胞、血管細(xì)胞、結(jié)腸、卵巢和血漿中均有表達(dá)，在維持機(jī)體代謝和胰島素敏感性方面發(fā)揮著重要作用[3]。腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白9(CTRP9)作為一種新型脂肪因子，具有促進(jìn)脂質(zhì)代謝、提高胰島素敏感性、抗心血管疾病的作用，對(duì)于體內(nèi)糖代謝也有影響[4]。絲氨酸蛋白酶抑制劑(Vaspin)也是由脂肪組織合成的脂肪細(xì)胞因子，在動(dòng)脈粥樣硬化的形成中具有調(diào)節(jié)內(nèi)分泌的作用[5]。上述研究表明這3種血清指標(biāo)與機(jī)體糖脂代謝及胰島素等激素水平相關(guān)。PCOS患者通常也會(huì)出現(xiàn)激素水平異常，導(dǎo)致內(nèi)分泌紊亂，進(jìn)而出現(xiàn)高血脂、高血糖及胰島素抵抗等并發(fā)癥[6]。因此，本研究通過(guò)檢測(cè)PCOS患者血清中Omentin、CTRP9、Vaspin水平變化及臨床代謝指標(biāo)，并分析它們之間的相關(guān)性及診斷價(jià)值來(lái)探討其臨床意義，以期為PCOS患者的診斷和預(yù)后提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

材料及方法

一、研究對(duì)象

選取2020年1～12月于邯鄲市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科就診的62例PCOS患者(PCOS組)，另選擇同期在本院進(jìn)行常規(guī)體檢的65例正常育齡女性作為對(duì)照組。

納入標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)發(fā)布的PCOS中國(guó)診療指南標(biāo)準(zhǔn)[7]確診為PCOS的患者；患者檢測(cè)前3個(gè)月內(nèi)未服用任何降脂、降糖及激素類藥物；無(wú)遲發(fā)型先天性腎上腺皮質(zhì)增生、柯興氏綜合征、低促性腺激素、卵巢或腎上腺分泌雄激素腫瘤、甲狀腺功能異常及高催乳素血癥等疾病。

排除標(biāo)準(zhǔn)：患有自身免疫及內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病者；合并有心、腎、肝等嚴(yán)重功能器官損傷者；因其它原因引起的月經(jīng)不規(guī)則及排卵異常者。

本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)后進(jìn)行，所有研究對(duì)象均知情并簽署同意書。

二、研究方法

1.主要試劑和儀器：Omentin、CTRP9和Vaspin酶聯(lián)免疫試劑盒(浙江藍(lán)森生物科)；雌二醇(E2)和睪酮(T)化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒(武漢默沙克生物)；AU2700 全自動(dòng)生化分析儀(奧林巴斯，日本)；MK3酶標(biāo)儀(賽默飛世爾科技)；胰島素釋放檢測(cè)儀(深圳市威斯比生物)。

2.血液樣本收集及保存：于月經(jīng)周期的第2～5天清晨采所有研究對(duì)象的空腹外周靜脈血加入裝有 EDTA-Na2的抗凝管，在4℃、12 000 r/min條件下離心后取上清，置于-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

3.檢測(cè)/分析指標(biāo)：收集所有研究對(duì)象的年齡、身高、體重等一般資料；采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法測(cè)定激素E2和T水平；采用全自動(dòng)生化儀測(cè)定脂代謝相關(guān)指標(biāo)，包括總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)及低密度脂蛋白(LDL)水平；采用酶聯(lián)比色法測(cè)空腹血糖(FPG)水平；采用胰島素釋放實(shí)驗(yàn)測(cè)定空腹胰島素(FINS)水平，并根據(jù)FPG和FINS計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)HOMA-IR；采用酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)測(cè)定血清Omentin、CTRP9、Vaspin水平，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒步驟進(jìn)行。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié) 果

一、兩組研究對(duì)象臨床資料比較

本研究納入62例確診PCOS患者(PCOS組)，以及同期在本院進(jìn)行常規(guī)體檢的65例正常育齡女性(對(duì)照組)。與對(duì)照組比較，PCOS患者BMI以及血清T、FPG、FINS水平、HOMA-IR、TC及TG水平等指標(biāo)值均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)(表1)，說(shuō)明PCOS患者可能會(huì)同時(shí)出現(xiàn)高雄激素、高血糖及高血脂等并發(fā)癥。

表1 兩組研究對(duì)象臨床相關(guān)資料比較(-±s)

二、兩組研究對(duì)象血清Omentin、CTRP9、Vaspin水平比較

ELISA試劑盒檢測(cè)血清中Omentin、CTRP9、Vaspin水平，結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，PCOS組Omentin、CTRP9水平顯著下降(P<0.05)，Vaspin水平顯著升高(P<0.05)(表2)。

三、血清Omentin、CTRP9、Vaspin表達(dá)水平與臨床指標(biāo)的相關(guān)性

采用Pearson法進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，PCOS患者血清Omentin表達(dá)水平與BMI、T、FPG、HOMA-IR、TG呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)；血清CTRP9表達(dá)水平與BMI、T、FPG、FINS、HOMA-IR、TC呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)；血清Vaspin表達(dá)水平與BMI、T、FINS、HOMA-IR、TC及TG呈正相關(guān)(P<0.05)(表3)。

表2 兩組研究對(duì)象血清Omentin、CTRP9、Vaspin表達(dá)水平比較(-±s)

四、Omentin、CTRP9、Vaspin表達(dá)水平對(duì)PCOS診斷價(jià)值

ROC曲線結(jié)果顯示，單獨(dú)檢測(cè)時(shí)，血清Omentin水平對(duì)應(yīng)AUC為0.715，CTRP9水平對(duì)應(yīng)AUC為0.805，Vaspin水平對(duì)應(yīng)AUC為0.832，而三項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)時(shí)AUC為0.911，比單獨(dú)檢測(cè)具有更高的診斷價(jià)值，結(jié)果均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(圖1，表4)。

表3 血清Omentin、CTRP9、Vaspin表達(dá)水平與臨床指標(biāo)的相關(guān)性分析

圖1 血清Omentin、CTRP9、Vaspin單獨(dú)檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)診斷PCOS的ROC曲線

表4 血清Omentin、CTRP9、Vaspin單獨(dú)檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)ROC曲線參數(shù)比較

討 論

隨著醫(yī)學(xué)科技的不斷進(jìn)步，我們認(rèn)識(shí)到PCOS并非一種特定的疾病，而是一類病因復(fù)雜、表現(xiàn)極不均一的臨床綜合征[8]。目前關(guān)于PCOS的發(fā)病機(jī)理仍未闡明，相關(guān)研究者指出PCOS的發(fā)生是由于某些遺傳因素與機(jī)體自身肥胖、體內(nèi)脂代謝、糖代謝水平異常以及胰島素抵抗等協(xié)同作用的結(jié)果[9]。PCOS的發(fā)生發(fā)展與脂肪因子的調(diào)控也密切相關(guān)，脂肪因子作為脂肪細(xì)胞分泌的主要活性因子，可以通過(guò)調(diào)節(jié)新陳代謝來(lái)維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的平衡，如果這種代謝紊亂則會(huì)導(dǎo)致內(nèi)分泌環(huán)境失調(diào)，進(jìn)而對(duì)PCOS的發(fā)生起到催化作用[10]。因此，探究PCOS患者體內(nèi)脂肪因子與肥胖、脂代謝指標(biāo)、糖代謝指標(biāo)和胰島素抵抗之間的相關(guān)性，能對(duì)后期PCOS的預(yù)防和治療提供一定的科學(xué)依據(jù)。

Omentin是由脂肪組織分泌的一種主要的內(nèi)臟(網(wǎng)膜)脂肪因子，廣泛參與調(diào)節(jié)和維持各種生理病理過(guò)程，包括胰島素敏感性、能量消耗、葡萄糖穩(wěn)態(tài)、脂質(zhì)代謝、炎癥活性、體內(nèi)平衡、血管生成等，涉及到繁殖和骨代謝、內(nèi)分泌生殖系統(tǒng)軸的所有功能，已經(jīng)成為近年來(lái)研究的熱點(diǎn)[11-12]。Elsaid等[13]研究了2型糖尿病肥胖女性的血清Omentin-1水平，并評(píng)估其與血糖控制，胰島素抵抗和代謝參數(shù)的關(guān)系，結(jié)果表明，與健康受試者相比，肥胖2型糖尿病女性的血清Omentin-1水平明顯偏低，并且其水平與肥胖、胰島素抵抗和收縮壓呈明顯負(fù)相關(guān)，但與血糖控制和空腹血脂無(wú)顯著相關(guān)性。Zengi等[14]通過(guò)分析Omentin-1與葡萄糖、胰島素、脂質(zhì)分布、甲狀腺成分和代謝指標(biāo)之間的相關(guān)性，來(lái)評(píng)估Omentin-1水平對(duì)兒童肥胖的影響，結(jié)果顯示肥胖兒童Omentin-1水平明顯低于對(duì)照組，且Omentin-1水平與空腹血糖、甘油三酸酯、總膽固醇、無(wú)血清甲狀腺素、胰島素抵抗、體重、腰圍和BMI均呈負(fù)相關(guān)，可用作兒童和青少年的代謝生物標(biāo)志物。

CTRP9是脂聯(lián)素的旁系同源物，對(duì)脂質(zhì)和葡萄糖代謝具有已知的有利作用，在調(diào)節(jié)內(nèi)皮功能時(shí)發(fā)揮重要作用[15]。Moradi等[16]研究2型糖尿病和冠心病患者的血清CTRP9水平與粘附分子之間的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)血清CTRP9水平升高可增加患糖尿病和冠心病的風(fēng)險(xiǎn)，并且注意到糖尿病和冠心病患者血清CTRP9水平與黏附分子以及血清TNF-α水平相關(guān)，在糖尿病受試者中CTRP9循環(huán)水平還與HOMA-IR顯著相關(guān)，提示CTRP9循環(huán)水平對(duì)胰島素抵抗、炎性環(huán)境和內(nèi)皮功能障礙有代償性反應(yīng)。Jiang等[17]探討了CTRP9和正五聚蛋白-3(PTX-3)在急性冠狀動(dòng)脈綜合征(ACS)中的診斷價(jià)值和預(yù)后意義，結(jié)果表明ACS患者血清中CTRP9低表達(dá)、PTX-3高表達(dá)，且CTRP9與心肌肌鈣蛋白Ⅰ、肌酸激酶-MB和高敏C反應(yīng)蛋白呈負(fù)相關(guān)，而PTX-3與它們呈正相關(guān)，兩者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)ACS患者的診斷和預(yù)后具有重要價(jià)值。

Vaspin是一種新的與肥胖和胰島素敏感性受損相關(guān)的脂肪細(xì)胞因子。Yang等[18]為了評(píng)估了老年患者(>60歲)的血清Vaspin濃度與BMI的相關(guān)性，選取了227名老年患者分為正常組和肥胖組，另選150名糖尿病患者分為正常體重糖尿病組和肥胖糖尿病組，通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法測(cè)量所有研究者血清Vaspin濃度，結(jié)果表明，與健康人比較，糖尿病患者血清Vaspin濃度顯著升高，且糖尿病患者中肥胖組Vaspin濃度顯著高于正常體重組；此外，多元回歸分析顯示，Vaspin是影響所有參與者BMI的獨(dú)立因素，可能在老年人的肥胖和胰島素抵抗中起重要的補(bǔ)償作用。Tanriverdi等[19]研究發(fā)現(xiàn)由Vaspin引發(fā)的血管炎癥通過(guò)抑制巨噬細(xì)胞泡沫細(xì)胞形成以及血管平滑肌細(xì)胞遷移和增殖來(lái)抑制動(dòng)脈粥樣硬化形成，并且Vaspin還通過(guò)增加膠原蛋白含量和降低斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞與血管平滑肌細(xì)胞的比例來(lái)促進(jìn)斑塊穩(wěn)定，這說(shuō)明Vaspin濃度與冠狀動(dòng)脈疾病的嚴(yán)重程度相關(guān)。

基于上述文獻(xiàn)報(bào)道，本研究探討了PCOS患者血清Omentin、CTRP9、Vaspin水平與臨床指標(biāo)的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PCOS患者Omentin、CTRP9水平顯著下降，Vaspin水平顯著升高，并且與肥胖、激素水平、血糖血脂及胰島素抵抗等有關(guān)，提示PCOS患者可能會(huì)同時(shí)伴有高雄激素、高血糖、高血脂等并發(fā)癥，且這3種指標(biāo)有望成為診斷PCOS的生物標(biāo)志物；同時(shí)本研究還采用ROC曲線直觀、簡(jiǎn)單地比較了Omentin、CTRP9、Vaspin水平單獨(dú)和聯(lián)合檢測(cè)對(duì)PCOS的診斷價(jià)值，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合檢測(cè)比單獨(dú)檢測(cè)具有更高的準(zhǔn)確度。但本研究的樣本數(shù)量較少，后期可以通過(guò)納入更多樣本量來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證，為后期PCOS的診斷和預(yù)后提供更有力的參考依據(jù)。