梁云香,徐 容,趙穎瓊,唐碧璽
新生兒肺炎(NP)是新生兒階段常見的呼吸系統(tǒng)疾病之一,據(jù)統(tǒng)計因肺炎死亡的新生兒占所有死亡兒童的10%左右[1]。既往研究表明,若未及時給予治療或治療效果不好,NP易發(fā)展為重癥肺炎,甚至導(dǎo)致氣胸、肺不張等,使得患兒預(yù)后不良[2]。現(xiàn)階段病原菌培養(yǎng)仍是診治NP的重要依據(jù),但因培養(yǎng)所需時間長,存在一定局限性。隨著學(xué)者對NP發(fā)生機制的深入研究,發(fā)現(xiàn)NP的發(fā)生發(fā)展與炎癥反應(yīng)、免疫功能密切相關(guān)[3]??扇苄运铇蛹毎|發(fā)性受體-1(sTREM-1)是與炎癥相關(guān)的免疫球蛋白超家族成員,可促進炎性因子的產(chǎn)生,是激發(fā)、放大炎癥反應(yīng)的重要介質(zhì)[4]??扇苄园准毎樗?2受體(sIL-2R)是活化淋巴細胞膜IL-2R的主要成分,通過競爭性結(jié)合白細胞介素-2發(fā)揮免疫抑制作用,已被證實與炎癥性疾病、病毒感染等病情進展相關(guān)[5]。瘦素(leptin)屬于內(nèi)分泌代謝激素,近年來研究發(fā)現(xiàn)其除可抑制進食、增加代謝外,還與炎癥反應(yīng)應(yīng)答、修復(fù)、免疫功能等相關(guān)[6]。目前少有研究將外周血sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平與NP相聯(lián)系?;诖?,本研究探討上述血清學(xué)指標與NP患兒病情嚴重程度及預(yù)后的相關(guān)性。
1.1一般資料 選擇本院2017年4月—2020年6月診治的109例NP。納入標準:①符合肺炎診斷標準[7];②無其他呼吸系統(tǒng)疾?。虎刍純号R床資料完整。排除標準:①存在循環(huán)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等合并癥或其他感染癥狀;②存在免疫系統(tǒng)缺陷疾病或先天性疾??;③近期有糖皮質(zhì)激素或免疫球蛋白等免疫制劑使用史者。所有患兒中,男57例、女52例;日齡5~17(12.43±2.15)d;胎齡35~39(37.84±0.93)周;出生體質(zhì)量2.3~4.5(3.15±0.46)kg;分娩方式:順產(chǎn)50例,剖宮產(chǎn)59例。
1.2研究方法 收集所有患兒臨床資料,包括性別、胎齡、疾病類型等。抽取患兒晨起空腹靜脈血3 ml,3000 r/min離心15 min,留取上清液儲存于-20 ℃環(huán)境保存?zhèn)溆谩2捎妹嘎?lián)免疫吸附試驗檢測sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平。具體操作:將待測標本與試劑盒置于室溫下解凍,在酶標板上分設(shè)空白孔、標準孔、試驗組待測樣品孔、對照組待測樣品孔,其中前兩者分別加樣品稀釋液100 μl、標準品稀釋液100 μl,后兩者分別加試驗組、對照組血清樣本各100 μl,混勻后封閉,37 ℃溫育2 h;棄液體,甩干,每孔分別加檢測溶液A 100 μl,37 ℃溫育1 h;棄液體,甩干,每孔加洗滌液400 μl,洗板3次;每孔加檢測溶液B 100 μl,37 ℃溫育1 h;洗板5次,每孔加底物溶液90 μl,避光顯色15~20 min,然后加終止液50 μl,終止反應(yīng)。測量光密度值。根據(jù)患兒疾病嚴重程度分為輕癥組和重癥組[8],根據(jù)治療2周后預(yù)后情況分為預(yù)后不良組和預(yù)后良好組。預(yù)后判斷標準參照《兒科住院醫(yī)師手冊》[8],將治療效果欠佳,生命體征不穩(wěn)定,且出現(xiàn)心力衰竭、肺不張、呼吸衰竭等并發(fā)癥或死亡者視為預(yù)后不良,否則視為預(yù)后良好。
1.3治療方法 清理患兒呼吸道并保持通暢;給予抗感染治療,對于早發(fā)性肺炎患兒予革蘭陰性菌敏感抗生素治療,晚發(fā)性肺炎患兒予革蘭陽性菌敏感抗生素治療,必要時考慮呼吸機治療。
1.4觀察指標 比較不同程度NP患兒sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平;比較不同預(yù)后NP患兒sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平;采用受試者工作特征(ROC)曲線評估sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平預(yù)測NP患兒預(yù)后的價值;采用Cox單因素及多因素分析探討影響NP患兒預(yù)后的相關(guān)因素。
2.1不同程度NP患兒sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平比較 重癥組患兒sTREM-1、sIL-2R水平顯著高于輕癥組,leptin水平顯著低于輕癥組(P<0.01)。見表1。
表1 不同程度NP患兒sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平比較
2.2不同預(yù)后患兒sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平比較 預(yù)后良好組患兒sTREM-1、sIL-2R水平顯著低于預(yù)后不良組,leptin水平顯著高于預(yù)后不良組(P<0.01)。見表2。
表2 不同預(yù)后NP患兒sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平比較
2.3sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平對NP患兒預(yù)后的預(yù)測價值 sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平預(yù)測NP患兒預(yù)后的最佳截斷值分別為>96.07 ng/L、>335.44 ng/L和≤4.33 ng/ml,三者聯(lián)合預(yù)測的曲線下面積(AUC)及特異度均高于單一指標預(yù)測。見表3和圖1。
表3 sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平對NP患兒預(yù)后的預(yù)測價值
2.4影響NP患兒預(yù)后的相關(guān)因素 將預(yù)后良好與預(yù)后不良作為因變量,將分娩方式、日齡、性別、出生體質(zhì)量等指標作為自變量,分別賦值(表4)行Cox單因素及多因素分析,結(jié)果顯示sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平均是NP患兒預(yù)后不良的獨立危險因素(P<0.05,P<0.01)。見表5。
表4 NP患兒預(yù)后影響因素賦值表
NP在新生兒疾病中發(fā)病率和病死率均占首位,其發(fā)生多因低體質(zhì)量、呼吸中樞或器官發(fā)育不成熟、肺表面活性物質(zhì)少、免疫功能低下等原因引起,極易引起呼吸衰竭、心力衰竭等并發(fā)癥[9]。因NP臨床表現(xiàn)多樣,癥狀、體征缺乏特異性,且日齡越小新生兒臨床癥狀越不典型,給疾病的診斷及病情監(jiān)測帶來較大困難,導(dǎo)致貽誤病情,造成不良預(yù)后。既往通常經(jīng)X線片、病原學(xué)檢查診斷NP,但存在所需時間長、特異度低等局限性,且難以用于疾病監(jiān)測和預(yù)后評估。近年來,為快速高效診斷NP,已有多個生物學(xué)標志物被證實不僅在NP診斷方面具有較高的效能,還在疾病監(jiān)測和預(yù)后評估方面也有一定的指導(dǎo)意義。
sTREM-1是新近發(fā)現(xiàn)的一個受體家族,鄭瑜等[10]研究發(fā)現(xiàn)其在銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌等細菌或真菌感染時明顯升高;相反,在非感染性疾病中無明顯升高。sTREM-1可釋放進入血液、體液,并與膿毒癥、肺炎等多種疾病密切相關(guān),現(xiàn)已成為早期診斷炎癥性疾病的新指標[11]。sIL-2R由活化的T淋巴細胞及單核細胞產(chǎn)生,是一種重要的免疫抑制物質(zhì),可較好反映機體細胞免疫功能,其在血清及其他體液中水平變化與臨床多種疾病程度密切相關(guān)。leptin是一種ob基因編碼的以脂肪細胞合成的與代謝密切相關(guān)的蛋白激素,以單體形式存在于血漿中。最初多數(shù)學(xué)者認為leptin可通過抑制神經(jīng)肽Y的分泌參與食物攝入與能量代謝調(diào)節(jié),但近年研究發(fā)現(xiàn)其與感染性疾病的發(fā)生發(fā)展也存在一定的相關(guān)性[12-13]。本研究對NP患兒根據(jù)病情嚴重程度分組,結(jié)果顯示重癥組患兒sTREM-1、sIL-2R水平顯著高于輕癥組,leptin水平顯著低于輕癥組,提示外周血sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平與NP患兒病情嚴重程度密切相關(guān)。分析其原因,重癥NP發(fā)生時,常伴有缺氧、酸中毒,加之內(nèi)毒素作用,抗原呈遞細胞分泌的前炎性因子會促進內(nèi)皮細胞、成纖維細胞等釋放更多、更強烈的炎性介質(zhì),導(dǎo)致劇烈的炎癥反應(yīng),嚴重破壞機體組織和功能。上述諸多因素可能會抑制leptin水平,從而導(dǎo)致重癥患兒體內(nèi)leptin水平降低[14]。NP發(fā)生感染的同時T淋巴細胞活化增殖,并釋放IL-2,從而增強T淋巴細胞的殺傷能力,當IL-2R高表達時,因親和力降低,血清中sIL-2R水平也會升高,降低IL-2活性,阻礙T淋巴細胞活化增殖,影響其殺傷能力,從而導(dǎo)致NP患兒病情加重[15]。NP的發(fā)生會刺激機體細胞合成和釋放多種細胞因子,sTREM-1作為細菌和真菌急性炎癥反應(yīng)的觸發(fā)器和放大劑,會放大炎癥反應(yīng),觸發(fā)瀑布級聯(lián)反應(yīng),導(dǎo)致組織器官炎性損傷,加重病情[16]。當NP患兒病情進展至重癥時,預(yù)后情況較輕癥患兒差。
本研究對不同預(yù)后患兒外周血sTREM-1、sIL-2R、leptin水平進行分析,結(jié)果顯示預(yù)后良好組患兒sTREM-1、sIL-2R水平顯著低于預(yù)后不良組,leptin水平顯著高于預(yù)后不良組,提示外周血sTREM-1、sIL-2R水平較高及l(fā)eptin水平較低的患兒病情更為嚴重,預(yù)后也更差。為明確上述各外周血指標對患兒預(yù)后的評估價值,筆者通過繪制ROC曲線進行分析,結(jié)果顯示三者聯(lián)合預(yù)測的AUC值及特異度均高于單一指標預(yù)測,提示sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平均對NP患兒預(yù)后有一定的預(yù)測價值,其中三者聯(lián)合預(yù)測效能最高。此外,本研究結(jié)果還顯示,sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平均是NP患兒預(yù)后不良的獨立危險因素,進一步證實了sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平異常變化與NP患兒預(yù)后不良的相關(guān)性。
綜上,外周血sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平與NP患兒病情嚴重程度相關(guān),是影響患兒預(yù)后的重要因素,其水平高低可作為評估患兒病情、預(yù)測預(yù)后的重要指標,且三者聯(lián)合檢測可提高對預(yù)后的預(yù)測效能。但本研究也存在局限性,未從生物學(xué)角度探討sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平在NP中的變化情況,可能會影響結(jié)果判斷,故今后仍有待于論證本研究結(jié)果。