梁云香，徐 容，趙穎瓊，唐碧璽

新生兒肺炎(NP)是新生兒階段常見的呼吸系統(tǒng)疾病之一，據(jù)統(tǒng)計(jì)因肺炎死亡的新生兒占所有死亡兒童的10%左右[1]。既往研究表明，若未及時(shí)給予治療或治療效果不好，NP易發(fā)展為重癥肺炎，甚至導(dǎo)致氣胸、肺不張等，使得患兒預(yù)后不良[2]?，F(xiàn)階段病原菌培養(yǎng)仍是診治NP的重要依據(jù)，但因培養(yǎng)所需時(shí)間長(zhǎng)，存在一定局限性。隨著學(xué)者對(duì)NP發(fā)生機(jī)制的深入研究，發(fā)現(xiàn)NP的發(fā)生發(fā)展與炎癥反應(yīng)、免疫功能密切相關(guān)[3]?？扇苄运铇蛹?xì)胞觸發(fā)性受體-1(sTREM-1)是與炎癥相關(guān)的免疫球蛋白超家族成員，可促進(jìn)炎性因子的產(chǎn)生，是激發(fā)、放大炎癥反應(yīng)的重要介質(zhì)[4]?？扇苄园准?xì)胞介素-2受體(sIL-2R)是活化淋巴細(xì)胞膜IL-2R的主要成分，通過競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合白細(xì)胞介素-2發(fā)揮免疫抑制作用，已被證實(shí)與炎癥性疾病、病毒感染等病情進(jìn)展相關(guān)[5]。瘦素(leptin)屬于內(nèi)分泌代謝激素，近年來研究發(fā)現(xiàn)其除可抑制進(jìn)食、增加代謝外，還與炎癥反應(yīng)應(yīng)答、修復(fù)、免疫功能等相關(guān)[6]。目前少有研究將外周血sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平與NP相聯(lián)系?；诖?，本研究探討上述血清學(xué)指標(biāo)與NP患兒病情嚴(yán)重程度及預(yù)后的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇本院2017年4月—2020年6月診治的109例NP。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；②無其他呼吸系統(tǒng)疾病；③患兒臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在循環(huán)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)等合并癥或其他感染癥狀；②存在免疫系統(tǒng)缺陷疾病或先天性疾?。虎劢谟刑瞧べ|(zhì)激素或免疫球蛋白等免疫制劑使用史者。所有患兒中，男57例、女52例；日齡5～17(12.43±2.15)d；胎齡35～39(37.84±0.93)周；出生體質(zhì)量2.3～4.5(3.15±0.46)kg；分娩方式：順產(chǎn)50例，剖宮產(chǎn)59例。

1.2研究方法 收集所有患兒臨床資料，包括性別、胎齡、疾病類型等。抽取患兒晨起空腹靜脈血3 ml，3000 r/min離心15 min，留取上清液儲(chǔ)存于-20 ℃環(huán)境保存?zhèn)溆谩２捎妹嘎?lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平。具體操作：將待測(cè)標(biāo)本與試劑盒置于室溫下解凍，在酶標(biāo)板上分設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、試驗(yàn)組待測(cè)樣品孔、對(duì)照組待測(cè)樣品孔，其中前兩者分別加樣品稀釋液100 μl、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100 μl，后兩者分別加試驗(yàn)組、對(duì)照組血清樣本各100 μl，混勻后封閉，37 ℃溫育2 h；棄液體，甩干，每孔分別加檢測(cè)溶液A 100 μl，37 ℃溫育1 h；棄液體，甩干，每孔加洗滌液400 μl，洗板3次；每孔加檢測(cè)溶液B 100 μl，37 ℃溫育1 h；洗板5次，每孔加底物溶液90 μl，避光顯色15～20 min，然后加終止液50 μl，終止反應(yīng)。測(cè)量光密度值。根據(jù)患兒疾病嚴(yán)重程度分為輕癥組和重癥組[8]，根據(jù)治療2周后預(yù)后情況分為預(yù)后不良組和預(yù)后良好組。預(yù)后判斷標(biāo)準(zhǔn)參照《兒科住院醫(yī)師手冊(cè)》[8]，將治療效果欠佳，生命體征不穩(wěn)定，且出現(xiàn)心力衰竭、肺不張、呼吸衰竭等并發(fā)癥或死亡者視為預(yù)后不良，否則視為預(yù)后良好。

1.3治療方法 清理患兒呼吸道并保持通暢；給予抗感染治療，對(duì)于早發(fā)性肺炎患兒予革蘭陰性菌敏感抗生素治療，晚發(fā)性肺炎患兒予革蘭陽性菌敏感抗生素治療，必要時(shí)考慮呼吸機(jī)治療。

1.4觀察指標(biāo) 比較不同程度NP患兒sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平；比較不同預(yù)后NP患兒sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平；采用受試者工作特征(ROC)曲線評(píng)估sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平預(yù)測(cè)NP患兒預(yù)后的價(jià)值；采用Cox單因素及多因素分析探討影響NP患兒預(yù)后的相關(guān)因素。

2 結(jié)果

2.1不同程度NP患兒sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平比較 重癥組患兒sTREM-1、sIL-2R水平顯著高于輕癥組，leptin水平顯著低于輕癥組(P<0.01)。見表1。

表1 不同程度NP患兒sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平比較

2.2不同預(yù)后患兒sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平比較 預(yù)后良好組患兒sTREM-1、sIL-2R水平顯著低于預(yù)后不良組，leptin水平顯著高于預(yù)后不良組(P<0.01)。見表2。

表2 不同預(yù)后NP患兒sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平比較

2.3sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平對(duì)NP患兒預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值 sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平預(yù)測(cè)NP患兒預(yù)后的最佳截?cái)嘀捣謩e為>96.07 ng/L、>335.44 ng/L和≤4.33 ng/ml，三者聯(lián)合預(yù)測(cè)的曲線下面積(AUC)及特異度均高于單一指標(biāo)預(yù)測(cè)。見表3和圖1。

表3 sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平對(duì)NP患兒預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值

2.4影響NP患兒預(yù)后的相關(guān)因素 將預(yù)后良好與預(yù)后不良作為因變量，將分娩方式、日齡、性別、出生體質(zhì)量等指標(biāo)作為自變量，分別賦值(表4)行Cox單因素及多因素分析，結(jié)果顯示sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平均是NP患兒預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05，P<0.01)。見表5。

表4 NP患兒預(yù)后影響因素賦值表

3 討論

NP在新生兒疾病中發(fā)病率和病死率均占首位，其發(fā)生多因低體質(zhì)量、呼吸中樞或器官發(fā)育不成熟、肺表面活性物質(zhì)少、免疫功能低下等原因引起，極易引起呼吸衰竭、心力衰竭等并發(fā)癥[9]。因NP臨床表現(xiàn)多樣，癥狀、體征缺乏特異性，且日齡越小新生兒臨床癥狀越不典型，給疾病的診斷及病情監(jiān)測(cè)帶來較大困難，導(dǎo)致貽誤病情，造成不良預(yù)后。既往通常經(jīng)X線片、病原學(xué)檢查診斷NP，但存在所需時(shí)間長(zhǎng)、特異度低等局限性，且難以用于疾病監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)估。近年來，為快速高效診斷NP，已有多個(gè)生物學(xué)標(biāo)志物被證實(shí)不僅在NP診斷方面具有較高的效能，還在疾病監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)估方面也有一定的指導(dǎo)意義。

sTREM-1是新近發(fā)現(xiàn)的一個(gè)受體家族，鄭瑜等[10]研究發(fā)現(xiàn)其在銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌等細(xì)菌或真菌感染時(shí)明顯升高；相反，在非感染性疾病中無明顯升高。sTREM-1可釋放進(jìn)入血液、體液，并與膿毒癥、肺炎等多種疾病密切相關(guān)，現(xiàn)已成為早期診斷炎癥性疾病的新指標(biāo)[11]。sIL-2R由活化的T淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞產(chǎn)生，是一種重要的免疫抑制物質(zhì)，可較好反映機(jī)體細(xì)胞免疫功能，其在血清及其他體液中水平變化與臨床多種疾病程度密切相關(guān)。leptin是一種ob基因編碼的以脂肪細(xì)胞合成的與代謝密切相關(guān)的蛋白激素，以單體形式存在于血漿中。最初多數(shù)學(xué)者認(rèn)為leptin可通過抑制神經(jīng)肽Y的分泌參與食物攝入與能量代謝調(diào)節(jié)，但近年研究發(fā)現(xiàn)其與感染性疾病的發(fā)生發(fā)展也存在一定的相關(guān)性[12-13]。本研究對(duì)NP患兒根據(jù)病情嚴(yán)重程度分組，結(jié)果顯示重癥組患兒sTREM-1、sIL-2R水平顯著高于輕癥組，leptin水平顯著低于輕癥組，提示外周血sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平與NP患兒病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。分析其原因，重癥NP發(fā)生時(shí)，常伴有缺氧、酸中毒，加之內(nèi)毒素作用，抗原呈遞細(xì)胞分泌的前炎性因子會(huì)促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等釋放更多、更強(qiáng)烈的炎性介質(zhì)，導(dǎo)致劇烈的炎癥反應(yīng)，嚴(yán)重破壞機(jī)體組織和功能。上述諸多因素可能會(huì)抑制leptin水平，從而導(dǎo)致重癥患兒體內(nèi)leptin水平降低[14]。NP發(fā)生感染的同時(shí)T淋巴細(xì)胞活化增殖，并釋放IL-2，從而增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞的殺傷能力，當(dāng)IL-2R高表達(dá)時(shí)，因親和力降低，血清中sIL-2R水平也會(huì)升高，降低IL-2活性，阻礙T淋巴細(xì)胞活化增殖，影響其殺傷能力，從而導(dǎo)致NP患兒病情加重[15]。NP的發(fā)生會(huì)刺激機(jī)體細(xì)胞合成和釋放多種細(xì)胞因子，sTREM-1作為細(xì)菌和真菌急性炎癥反應(yīng)的觸發(fā)器和放大劑，會(huì)放大炎癥反應(yīng)，觸發(fā)瀑布級(jí)聯(lián)反應(yīng)，導(dǎo)致組織器官炎性損傷，加重病情[16]。當(dāng)NP患兒病情進(jìn)展至重癥時(shí)，預(yù)后情況較輕癥患兒差。

本研究對(duì)不同預(yù)后患兒外周血sTREM-1、sIL-2R、leptin水平進(jìn)行分析，結(jié)果顯示預(yù)后良好組患兒sTREM-1、sIL-2R水平顯著低于預(yù)后不良組，leptin水平顯著高于預(yù)后不良組，提示外周血sTREM-1、sIL-2R水平較高及l(fā)eptin水平較低的患兒病情更為嚴(yán)重，預(yù)后也更差。為明確上述各外周血指標(biāo)對(duì)患兒預(yù)后的評(píng)估價(jià)值，筆者通過繪制ROC曲線進(jìn)行分析，結(jié)果顯示三者聯(lián)合預(yù)測(cè)的AUC值及特異度均高于單一指標(biāo)預(yù)測(cè)，提示sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平均對(duì)NP患兒預(yù)后有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值，其中三者聯(lián)合預(yù)測(cè)效能最高。此外，本研究結(jié)果還顯示，sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平均是NP患兒預(yù)后不良的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，進(jìn)一步證實(shí)了sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平異常變化與NP患兒預(yù)后不良的相關(guān)性。

綜上，外周血sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平與NP患兒病情嚴(yán)重程度相關(guān)，是影響患兒預(yù)后的重要因素，其水平高低可作為評(píng)估患兒病情、預(yù)測(cè)預(yù)后的重要指標(biāo)，且三者聯(lián)合檢測(cè)可提高對(duì)預(yù)后的預(yù)測(cè)效能。但本研究也存在局限性，未從生物學(xué)角度探討sTREM-1、sIL-2R及l(fā)eptin水平在NP中的變化情況，可能會(huì)影響結(jié)果判斷，故今后仍有待于論證本研究結(jié)果。