黃錦殷

（佛山市食品藥品檢驗檢測中心，廣東佛山 528000）

我國是雞蛋生產(chǎn)和消費大國，雞蛋作為我國居民日常膳食的重要組成部分，其質(zhì)量安全應(yīng)當(dāng)引起重視。作為動物源性食品，雞蛋中的獸藥殘留一直是其主要安全風(fēng)險因素，但其農(nóng)藥殘留狀況同樣不可忽視。例如，2019年歐洲“毒雞蛋”事件是雞蛋因受農(nóng)藥氟蟲腈污染，致使大量蛋雞被宰殺[1]。雞蛋中的農(nóng)藥殘留主要是由飼料原料帶入，蛋雞采食后農(nóng)藥及代謝物在雞蛋內(nèi)沉積[2]。此外，農(nóng)藥和獸藥并無明顯的界限，一些常見的農(nóng)藥如敵敵畏、馬拉硫磷、氟胺氰菊酯、溴氰菊酯等也作為獸藥納入《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中獸藥最大殘留限量》（GB 31650—2019）[3]的管理。若養(yǎng)殖戶使用不規(guī)范，可能導(dǎo)致蛋雞和雞蛋受到污染。本文對雞蛋中的15種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留進(jìn)行探索，結(jié)合QuEChERS前處理和氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，建立了一種蛋類中農(nóng)藥多殘留的檢測方法，該方法簡便快捷，靈敏度高，定量準(zhǔn)確，能滿足食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)的檢測需求。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

雞蛋，于佛山市內(nèi)超市及農(nóng)貿(mào)市場分散采購。

標(biāo)準(zhǔn)品：外環(huán)氧七氯B（內(nèi)標(biāo)）；七氟菊酯；烯丙菊酯；聯(lián)苯菊酯；苯醚菊酯；胺菊酯；甲氰菊酯；氟丙菊酯；氯氟氰菊酯；氯菊酯；氟氯氰菊酯；氯氰菊酯；氟氰戊菊酯；氰戊菊酯；氟胺氰菊酯；溴氰菊酯。乙腈、乙酸乙酯，均為分析純；

QuEChERS萃 取 鹽 包（含4 g無 水 硫 酸 鎂、1 g氯化鈉、1 g檸檬酸鈉、1.5 g檸檬酸二鈉）；QuEChERS凈 化 管（含900 mg硫 酸 鎂 和150 mg PSA）；0.22 μm微孔有機(jī)濾膜。

1.2 儀器與設(shè)備

氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀；氮吹儀；電子天平；均質(zhì)器；離心機(jī)；渦旋振蕩器。

1.3 實驗方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

準(zhǔn)確稱取一定量的各農(nóng)藥和外環(huán)氧七氯B，用乙酸乙酯分別配制成1 000 mg·L-1的農(nóng)藥混合儲備液和100 mg·L-1的外環(huán)氧七氯B內(nèi)標(biāo)儲備液，再分別稀釋成10 mg·L-1的農(nóng)藥混合工作液和5 mg·L-1的內(nèi)標(biāo)溶液，-18 ℃避光儲存。各農(nóng)藥根據(jù)需要用空白樣品基質(zhì)逐步稀釋配成基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線以供使用。

1.3.2 試樣制備

取約1 kg新鮮雞蛋洗凈去殼后用組織勻漿機(jī)充分?jǐn)嚢杈鶆?，放入聚乙烯瓶中冷藏保存?/p>

1.3.3 樣品前處理

稱取10 g試樣于50 mL塑料離心管，加入 20 mL預(yù)先在4 ℃冷卻的乙腈，渦旋混合3 min。加1包萃取鹽包，蓋上離心管蓋，劇烈振蕩1 min， 5 000 r·min-1離 心5 min。吸 取10 mL上 清 液 到 一支凈化管中，渦旋混勻1 min，5 000 r·min-1離心 5 min，準(zhǔn)確吸取2 mL上清液于10 mL試管中，40 ℃水浴氮吹至近干。加入20 μL內(nèi)標(biāo)溶液（5 mg·L-1），加入1 mL乙酸乙酯復(fù)溶，過微孔濾膜，用于測定。

1.3.4 儀器條件

色 譜 柱：VF-1701ms色 譜 柱（30 m×0.25 mm× 0.25 μm）；色譜升溫程序：40 ℃保持1 min，然后以40 ℃·min-1升至120 ℃，再以5 ℃·min-1升至 240 ℃，再以12 ℃·min-1升至300 ℃，保持6 min；載氣：氦氣（≥99.999%）；流速：1.0 mL·min-1；進(jìn)樣口溫度：280 ℃；進(jìn)樣量：1 μL；不分流進(jìn)樣；電離能量：70 eV；離子源溫度：280 ℃；傳輸線溫度：280 ℃；掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；內(nèi)標(biāo)法定量。多反應(yīng)監(jiān)測條件見表1。

2 結(jié)果與分析

2.1 前處理選擇

傳統(tǒng)動物源性樣品檢測農(nóng)藥殘留時多采用有機(jī)溶劑提取，凝膠滲透色譜凈化的方式，我國多個動物源性食品中農(nóng)藥多殘留的檢測標(biāo)準(zhǔn)如GB/T 5009.19—2008[4]、GB/T 5009.162—2008[5]、GB/T 20772—2008[6]等也采用這一前處理方法。但凝膠滲透色譜一般來說普遍存在凈化時間長、溶劑用量大的缺點。QuEChERS法由于操作簡便、溶劑消耗少、速度快、效率高等優(yōu)點，已越來越多地用于動物源性樣品前處理中[7-9]。

目前主流的QuEChERS前處理法主要包括EN 15662：2018法（乙腈提取，萃取鹽包含檸檬酸和檸檬酸鈉）[10]以及AOAC 2007.01法（乙酸-乙腈提取，萃取鹽包含乙酸鈉）[11]。本文對兩種方法均進(jìn)行了實驗，結(jié)果表明兩者對擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的回收率、檢出限、精密度等的影響區(qū)別不大，沒有顯著 差異。

表1 多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）條件

2.2 線性范圍、檢出限和定量限

用空白樣品基質(zhì)配制成5.0～200.0 ng·mL-1系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，結(jié)果表明各化合物在此范圍內(nèi)線性均良好，線性系數(shù)R2均在0.997以上。15種化合物及內(nèi)標(biāo)的總離子流圖見圖1。以3倍信噪比法及10倍信噪比法確定各化合物的檢出限和定量限，各化合物的線性系數(shù)、檢出限與定量限結(jié)果見 表2。

圖1 擬除蟲菊酯類農(nóng)藥總離子流圖

表2 線性系數(shù)、檢出限和定量限

目前《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）[12]規(guī)定了蛋類的107項農(nóng)藥最大殘留限量，其中多種擬除蟲菊酯類如甲氰菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯等最大殘留限量均設(shè)為 0.01 mg·kg-1（ 氯 菊 酯 為0.1 mg·kg-1）； 而 GB 31650—2019則規(guī)定溴氰菊酯在蛋類中的最大殘留限量為30 μg·kg-1[3]，本方法檢出限、定量限均能滿足上述檢測需求。

2.3 回收率和精密度

在不含上述農(nóng)藥的雞蛋中添加混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在0.01 mg·kg-1、0.05 mg·kg-1、0.10 mg·kg-1這3個濃度水平下進(jìn)行加標(biāo)回收實驗，每個濃度平行測定6次，考察方法精密度。結(jié)果表明，各化合物回收率均在80%以上，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.5%～8.3%，詳見表3。

表3 加標(biāo)回收率和精密度

2.4 實際樣品測定

運用本方法對本市超市和農(nóng)貿(mào)市場售賣的10批次新鮮雞蛋進(jìn)行檢測，均未發(fā)現(xiàn)上述農(nóng)藥殘留。

3 結(jié)論

本文建立了QuEChERS前處理結(jié)合氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定雞蛋中多種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留的方法，與傳統(tǒng)凝膠滲透色譜的前處理方法相比，消耗溶劑更少，操作更便捷，效率更高，同時該方法靈敏度高，精密度和準(zhǔn)確度好，適用于大批量蛋類樣品的快速檢測。