林紅麗 盧曉慶 李有杰 孫允霄

1濱州醫(yī)學(xué)院煙臺(tái)附屬醫(yī)院兒科，煙臺(tái) 264100；2濱州醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室，煙臺(tái) 264003

急性髓系白血?。ˋML）是成人中最常見的白血病，約占80%，兒童AML約占20%［1-2］。其特征是骨髓中未分化和無(wú)功能造血細(xì)胞（白血病母細(xì)胞）異常增殖［3］。幾十年來(lái)，AML標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)化治療一直是“7+3”方案，但由于診斷年齡中位數(shù)在60～70歲之間，許多AML患者沒(méi)有資格接受強(qiáng)化治療。另外，25%～55% AML患者會(huì)出現(xiàn)造血干細(xì)胞移植（HSCT）后復(fù)發(fā)。AML患者5年生存率令人沮喪，只有28.3%，2019年約有10 920人死于AML。AML預(yù)后通常被描述為“可怕”或“差”。作為一種異質(zhì)性疾病，AML具有廣泛細(xì)胞遺傳學(xué)和分子異常［4-6］。因此，迫切需要尋找準(zhǔn)確、安全、可靠的生物標(biāo)志物或治療靶點(diǎn)協(xié)助AML早期診斷、治療以及預(yù)后監(jiān)測(cè)。

人類基因組最終序列于2003年公布，科學(xué)界感到驚訝的是，只有一小部分（1.2%）人類遺傳物質(zhì)信使RNA（mRNA）被發(fā)現(xiàn)編碼蛋白質(zhì)，其余的RNA都屬于非編碼RNA（ncRNA）［7-8］。ncRNA參與了細(xì)胞內(nèi)無(wú)數(shù)調(diào)節(jié)過(guò)程，例如調(diào)節(jié)基因表達(dá)、保護(hù)基因組免受外源DNA影響、控制DNA合 成 等［9-10］。ncRNA根 據(jù) 長(zhǎng) 度 分 為 小 非 編 碼RNA（sncRNA）和長(zhǎng)鏈非編碼RNA（lncRNA）［11］。lncRNAs是指長(zhǎng)度超過(guò)200個(gè)核苷酸非蛋白質(zhì)編碼RNA轉(zhuǎn)錄本［12］。它們可以在表觀遺傳學(xué)（如DNA甲基化、組蛋白修飾）、轉(zhuǎn)錄（如轉(zhuǎn)錄因子的募集）、轉(zhuǎn)錄后［如微小RNA（miRNA）和mRNA穩(wěn)定性的調(diào)節(jié)］水平上調(diào)節(jié)基因表達(dá)［13］。lncRNAs在各種類型的人類疾病中表達(dá)失調(diào)或異常，尤其與各種腫瘤發(fā)生密切相關(guān)，血液系統(tǒng)惡性腫瘤也不例外［14-15］。研究表明，lncRNAs如HOX轉(zhuǎn)錄反義基因間RNA（HOTAIR）、小核仁RNA宿主基因5（SNHG5）、小核仁RNA宿主基因12（SNHG12）、牛磺酸上調(diào)基因1（TUG1）、HOXA簇反義RNA 2（HOXA-AS2）、鋅指同源框2反義RNA 1（ZEB2-AS1）、CDKN1A反義DNA損傷激活RNA啟動(dòng)子（PANDAR）、母系表達(dá)基因3（MEG3）、轉(zhuǎn)移相關(guān)肺腺癌轉(zhuǎn)錄物1（MALAT-1）、生長(zhǎng)停滯特異性轉(zhuǎn)錄本5（GAS5）、IGF1R反義基因內(nèi)非編碼RNA（IRAIN）都參與了AML發(fā)生和發(fā)展，并影響其預(yù)后。但lncRNAs異常表達(dá)與AML患者預(yù)后關(guān)系仍存在爭(zhēng)議，并缺乏詢證學(xué)證據(jù)支持。因此，本研究采用meta分析方式評(píng)估異常表達(dá)lncRNAs在AML中預(yù)后價(jià)值。

資料與方法

1、檢索策略

檢索美國(guó)國(guó)立醫(yī)學(xué)圖書館（PubMed）、荷蘭醫(yī)學(xué)文摘數(shù)據(jù)庫(kù)（Embase）、循證醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)（Cochrane）中與lncRNAs表達(dá)與AML預(yù)后相關(guān)的公開發(fā)表所有文獻(xiàn)，時(shí)間截至2021年10月6日。采取主題詞與自由詞相結(jié)合的方式，檢索的關(guān)鍵詞包括“l(fā)eukemia，myeloid，acute”“RNA，long noncoding”“prognosis”等，具體檢索策略：（leukemia，myeloid，acute或acute myeloid leukemia或acute myeloid leukemias或leukemias，acute myeloid或myeloid leukemias，acute等）和（RNA，long noncoding或long untranslated RNA或noncoding RNA，long或lncRNA或long ncRNA或ncRNA，long或RNA，long non-translated等）和（prognosis或predictor或death或diagnosed等）。為避免相關(guān)文獻(xiàn)的遺漏，同時(shí)對(duì)所獲取文獻(xiàn)的參考文獻(xiàn)做進(jìn)一步檢索。搜索僅限于以英文發(fā)表的人類研究。

2、納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

（1）文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn)：①納入研究人員確診為AML。②分析了lncRNA的表達(dá)與AML預(yù)后之間的關(guān)系，包括總體生存率（OS）、無(wú)白血病生存率（LFS）、無(wú)事件生存率（EFS）、無(wú)復(fù)發(fā)生存率（RFS）、無(wú)病生存率（DFS）。③實(shí)時(shí)熒光定量多聚核苷酸鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-qPCR）等方法測(cè)定lncRNAs表達(dá)。④文獻(xiàn)清楚列出lncRNAs具體類型。⑤文獻(xiàn)中l(wèi)ncRNAs由高表達(dá)和低表達(dá)組成，且有具體截點(diǎn)值。⑥統(tǒng)計(jì)分析中納入了根據(jù)主要臨床因素調(diào)整的多變量比例風(fēng)險(xiǎn)模型。⑦提供了足夠的數(shù)據(jù)來(lái)提取或計(jì)算危險(xiǎn)比（HRs）和95%置信區(qū)間（CIs）。⑧提供具體的隨訪時(shí)間。⑼無(wú)國(guó)籍、種族、性別、年齡等限制。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①重復(fù)發(fā)表文獻(xiàn)（數(shù)據(jù)重復(fù)文獻(xiàn)選擇最新報(bào)道）。②系統(tǒng)評(píng)價(jià)、會(huì)議記錄、報(bào)告、meta分析。③細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。④數(shù)據(jù)不足以提取或計(jì)算HRs和95%CIs。⑤未報(bào)告AML結(jié)局，或不能從文獻(xiàn)中提取結(jié)局?jǐn)?shù)據(jù)。⑥不能獲取全文或全文信息不足的文獻(xiàn)。⑦無(wú)原始數(shù)據(jù)文獻(xiàn)。⑧文獻(xiàn)語(yǔ)種非英文。

3、納入文獻(xiàn)特點(diǎn)

在數(shù)據(jù)庫(kù)中共檢索到268篇文獻(xiàn)，經(jīng)過(guò)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)篩選后，最終納入13篇文獻(xiàn)，篩選流程圖見圖1。共1 591例，其中1 354例來(lái)自中國(guó)，64例來(lái)自伊朗，173例來(lái)自癌癥基因組譜圖（TCGA），涵蓋了白種人、黃種人、黑種人等，包含13種lncRNA，涵蓋3種亞型。其中1項(xiàng)研究納入的為急性白血?。ˋL）患者，包含73例AML和23例急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL），考慮到本文獻(xiàn)中的大多數(shù)患者是AML患者，在衡量后將此文獻(xiàn)納入本研究。12項(xiàng)研究納入的為新診斷患者，1項(xiàng)研究則為難治/復(fù)發(fā)患者。13項(xiàng)研究都報(bào)道了lncRNA和OS之間的關(guān)系，其中2項(xiàng)研究報(bào)道了lncRNA和EFS之間關(guān)系，3項(xiàng)研究報(bào)道了lncRNA和RFS之 間 關(guān) 系，1項(xiàng)研究報(bào)道了lncRNA和DFS之間關(guān)系，1項(xiàng)研究報(bào)道了lncRNA和LFS之間關(guān)系。12項(xiàng)研究以中值作為截點(diǎn)值，僅1項(xiàng)研究將HOTAIR/GAPDH作為截點(diǎn)值。用于檢測(cè)lncRNA的樣本來(lái)源于外周血（PB）和/或骨髓（BM）。評(píng)估研究質(zhì)量的紐卡斯?fàn)?渥太華質(zhì)量評(píng)估量表（NOS）評(píng)分在7～8分之間，均大于6分。

圖1 文獻(xiàn)篩選流程圖

4、數(shù)據(jù)提取和質(zhì)量評(píng)價(jià)

數(shù)據(jù)提取由2名研究者按照數(shù)據(jù)提取表獨(dú)立進(jìn)行，如遇分歧，由第3名研究者最終決定。數(shù)據(jù)提取內(nèi)容包括：第一作者、年份、研究區(qū)域、研究人數(shù)、年齡、lncRNA種類、lncRNA測(cè)定方法、表達(dá)截點(diǎn)值、隨訪時(shí)間、結(jié)局指標(biāo)、階段、疾病類型、標(biāo)本來(lái)源，OS、EFS、RFS、DFS、LFS的HR及其95%CI，其中OS為主要結(jié)局指標(biāo)，具體見表1。以O(shè)S、EFS、RFS、DFS、LFS 作為 meta 分析的終點(diǎn)指標(biāo)。HR及 95%CI從文獻(xiàn)中直接提取，若未直接提供，則運(yùn)用Engauge Digitizer4.1 提取所需數(shù)據(jù)再通過(guò)計(jì)算間接獲得OS、EFS、RFS、DFS、LFS 的HR及其 95%CI［29］。使用紐卡斯?fàn)?渥太華量表（NOS）對(duì)所納入研究進(jìn)行文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)［30］。NOS 量表評(píng)分≥6分的文獻(xiàn)被認(rèn)為是高質(zhì)量研究（表2）。

表1 納入文獻(xiàn)基本信息

表2 納入文獻(xiàn)的紐卡斯?fàn)?渥太華質(zhì)量評(píng)估

5、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件Review Manager 5.3 合并效應(yīng)量，繪制森林圖進(jìn)行meta分析，對(duì)納入13項(xiàng)研究的HRs及其95%CIs統(tǒng)計(jì)分析，評(píng)估lncRNAs 異常表達(dá)水平與AML 預(yù)后之間的關(guān)系。LogHR和標(biāo)準(zhǔn)誤（SE）用于生存結(jié)果匯總。Q 檢驗(yàn)和I2用來(lái)對(duì)各項(xiàng)研究進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)，若Q 檢驗(yàn)P＞0.1 且I2＜50%，證明各項(xiàng)研究之間無(wú)顯著異質(zhì)性，可使用固定效應(yīng)模型合并效應(yīng)量；若Q 檢驗(yàn)P≤0.1 且I2≥50%，研究之間具有顯著異質(zhì)性，需用隨機(jī)效應(yīng)模型合并效應(yīng)量，進(jìn)行亞組分析或敏感性分析對(duì)異質(zhì)性原因進(jìn)行查找，包括納入研究人員種族、年齡、樣本量、樣本來(lái)源、lncRNA 類型、結(jié)局指標(biāo)、疾病類型等。根據(jù)I2值行異質(zhì)性分度，I2超過(guò)25%、50%、75%時(shí)，提示分別有低度、中度、高度異質(zhì)性，一般認(rèn)為I2＞50%存在實(shí)質(zhì)性異質(zhì)性。敏感性分析判定合并結(jié)果是否穩(wěn)定。P＜0.05 認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。繪制漏斗圖考察本次研究是否存在發(fā)表偏倚，漏斗圖對(duì)稱意味著不存在發(fā)表偏倚。

結(jié) 果

1、lncRNAs異常表達(dá)與OS之間關(guān)系

納入 13 項(xiàng)研究［16-28］都對(duì) lncRNAs 異常表達(dá)水平下的OS 進(jìn)行了報(bào)道，作了多變量分析評(píng)估，經(jīng)異質(zhì)性檢驗(yàn)，I2=36%，且Q 檢驗(yàn)的P=0.1，無(wú)顯著異質(zhì)性，結(jié)果可信度高，選擇固定效應(yīng)模型合并效應(yīng)量，進(jìn)行meta 分析（圖2），結(jié)果顯示，lncRNAs 異常表達(dá)與更差的 OS 相關(guān)（HR=1.81，95%CI1.55～2.12），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.000 01）。合并HR＞1 表明lncRNAs 異常表達(dá)與AML 的預(yù)后差相關(guān)。高表達(dá)SNHG5、SNHG12、HOTAIR、TUG1、HOXA-AS2、ZEB2-AS1、PANDAR、MALAT-1、GAS5 和低表達(dá) MEG3、IRAIN 與 AML預(yù)后不良相關(guān)。由此可推斷，lncRNA 可作為判斷AML預(yù)后差的生物學(xué)標(biāo)志物。

圖2 lncRNAs表達(dá)水平和AML患者OS關(guān)系的森林圖

納入研究中多篇文獻(xiàn)對(duì)HOTAIR 和TUG1進(jìn)行了報(bào)道、以EFS 和RFS 為結(jié)局指標(biāo)對(duì)AML 進(jìn)行了預(yù)后分析，有多篇文獻(xiàn)所研究疾病類型均為非-急性早幼粒細(xì)胞白血?。跘ML（non-M3）］，針對(duì)以上情況，我們分別進(jìn)行了相關(guān)亞組分析，以便更好地了解lncRNA 對(duì)AML 預(yù)后的影響和作為生物學(xué)標(biāo)志物的提示意義。

2、lncRNAs異常表達(dá)與EFS、RFS之間關(guān)系

2 篇文獻(xiàn)以EFS 為結(jié)局指標(biāo)報(bào)道了lncRNAs 表達(dá)與AML 預(yù)后關(guān)系，共 218 例，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性（P=0.07，I2=69%），采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行meta 分析（HR=1.62，95%CI0.90～2.91）（圖 3），MEG3 低表達(dá)和 HOTAIR 高表達(dá)之間EFS 差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.11）。因文獻(xiàn)數(shù)量較少，無(wú)法利用meta回歸、亞組分析和敏感性分析尋找異質(zhì)性來(lái)源，根據(jù)本次分析結(jié)果，認(rèn)為MEG3 低表達(dá)和HOTAIR 高表達(dá)與EFS不相關(guān)。

圖3 lncRNAs表達(dá)水平和AML患者EFS關(guān)系的森林圖

3 篇文獻(xiàn)以RFS 為結(jié)局指標(biāo)分析了lncRNAs 表達(dá)與AML 預(yù)后關(guān)系，共302 例，研究間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性（P=0.60，I2=0%），采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行meta 分析（圖4），結(jié)果顯示IRAIN、HOXA-AS2、TUG1的異常表達(dá)間RFS差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.000 01），故IRAIN上調(diào)和HOXA-AS2、TUG1下調(diào)可致AML的RFS降低（HR=2.03，95%CI1.48～2.77）。

圖4 lncRNAs表達(dá)水平和AML患者RFS關(guān)系的森林圖

3、HOTAIR、TUG1高表達(dá)與OS之間關(guān)系

2 篇文獻(xiàn)針對(duì)HOTAIR 高表達(dá)與AML 預(yù)后作了相關(guān)分析，共181例，研究間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性（P=0.60，I2=0%），采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行meta分析（圖5），結(jié)果示HOTAIR高表達(dá)的OS 低，預(yù)后較差（HR=2.64，95%CI1.51～4.60），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.000 6）。2篇文獻(xiàn)報(bào)道TUG1高表達(dá)與AML預(yù)后關(guān)系，共259 例，研究間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性（P=0.59，I2=0%），采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行meta 分析（圖6），結(jié)果示TUG1 高表達(dá)的患者 OS 低，預(yù)后較差（HR=2.49，95%CI1.64～3.78），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.000 1）。

圖5 lncRNA HOTAIR 表達(dá)水平和AML患者OS關(guān)系的森林圖

圖6 lncRNA TUG1表達(dá)水平和AML患者OS關(guān)系的森林圖

4、lncRNAs異常表達(dá)與non-M3 OS之間關(guān)系

5篇文獻(xiàn)探討了lncRNAs 異常表達(dá)與non-M3患者預(yù)后間關(guān)系，共770 例，研究間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性（P=0.12，I2=45%），采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行meta 分析（圖7），結(jié)果示lncRNAs 異常表達(dá)與non-M3 患者不良預(yù)后相關(guān)（HR=1.69，95%CI1.34～2.12），lncRNAs 的上調(diào)或下調(diào)都可致 AML（non-M3）的OS降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.000 01）。

圖7 lncRNAs表達(dá)水平和AML（non-M3）患者OS關(guān)系的森林圖

5、敏感性分析和發(fā)表偏倚

通過(guò)任意剔除納入本次研究文獻(xiàn)進(jìn)行敏感性分析評(píng)價(jià)統(tǒng)計(jì)結(jié)果的穩(wěn)定性。結(jié)果顯示合并HR結(jié)果穩(wěn)定性好，任意刪除某篇文獻(xiàn)后不會(huì)影響本次研究結(jié)果，以上隨機(jī)效應(yīng)運(yùn)算結(jié)果是穩(wěn)定可靠的。漏斗圖可以比較直觀地目測(cè)納入文獻(xiàn)是否存在發(fā)表偏倚，利用統(tǒng)計(jì)軟件Review Manager 5.3 對(duì)OS 繪制漏斗圖評(píng)價(jià)納入文獻(xiàn)的發(fā)表偏倚情況，漏斗圖（圖8）上的點(diǎn)基本對(duì)稱地散開分布，表明納入本次研究的文獻(xiàn)不存在發(fā)表偏倚情況。

圖8 lncRNAs表達(dá)水平和AML患者OS相關(guān)性的漏斗圖

討 論

AML 是一種復(fù)雜血液系統(tǒng)惡性腫瘤，有遺傳和臨床異質(zhì)性，由于聯(lián)合化療、HSCT、靶向藥物應(yīng)用，AML 治療已經(jīng)取得很大進(jìn)展，仍有相當(dāng)數(shù)量AML 患者死于復(fù)發(fā)或?qū)σ痪€治療不耐受［31-32］。隨著診斷年齡增加，5 年生存率迅速下降［33］。AML 治療仍具挑戰(zhàn)性；迫切需要研究 AML 發(fā)生發(fā)展分子機(jī)制，探索AML預(yù)后、治療新靶點(diǎn)。

lncRNAs 在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中大量存在，主要由RNA 聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄，長(zhǎng)期存在于許多組織和液體中，如在血液和尿液等人體體液中可找到lncRNAs，因此lncRNAs可以用作廣泛篩查疾病生物標(biāo)志物［34-37］。lncRNAs 在過(guò)去幾十年中被認(rèn)為僅僅是轉(zhuǎn)錄“噪音”，最近研究表明，lncRNAs 是基因關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，參與包括AML 在內(nèi)多種癌癥發(fā)生和發(fā)展［28，34，38-40］。lncRNAs影響分裂、生長(zhǎng)和細(xì)胞分化途徑，參與細(xì)胞死亡過(guò)程，這些過(guò)程的修改可能會(huì)導(dǎo)致癌變。此外，一些lncRNAs 受癌基因產(chǎn)物或癌癥轉(zhuǎn)化抑制物調(diào)節(jié)，意味著它們有間接執(zhí)行致瘤功能［41］。我們的meta 分析研究了13 項(xiàng)隊(duì)列中1 591 人相關(guān)表達(dá)結(jié)果，與lncRNA 表達(dá)結(jié)果相關(guān)的 OS、RFS 和 EFS 合并HR值分別為 1.81（95%CI1.55～2.12）（I2=36%，P=0.1）、2.03（95%CI1.48～2.77）（I2=0%，P=0.60）、1.62（95%CI0.90～2.91）（I2=69%，P=0.07），OS 和RFS的異質(zhì)性低，表明lncRNA 的異常表達(dá)可能是AML 預(yù)后生物標(biāo)志物。lncRNA 異常表達(dá)提示AML（non-M3）不良預(yù)后，HR=1.69（95%CI1.34～2.12），異質(zhì)性較低（I2=45%，P=0.12）。

HOTAIR 是發(fā)現(xiàn)最早、研究最徹底的lncRNA，長(zhǎng)度 2 158 kb，位于HOXC 基因座反義鏈上［42］。它將多梳抑制復(fù)合物2（PRC2）招募到HOX 基因位點(diǎn)，通過(guò)染色質(zhì)修飾來(lái)調(diào)節(jié) HOX 基因表達(dá)［43］。越來(lái)越多證據(jù)表明，HOTAIR 與不同類型癌癥密切相關(guān)，如胃癌、肝癌、乳腺癌等［44］；與完全緩解AML 和正常對(duì)照組相比，新發(fā)AML 患者HOTAIR 顯著上調(diào)；小干擾 RNA（siRNA）介導(dǎo)對(duì) HL-60 和 K562 細(xì)胞中HOTAIR 的抑制導(dǎo)致細(xì)胞增殖顯著抑制，HOTAIR 基因敲除可以在體外抑制白血病細(xì)胞增殖；此外，在美國(guó)國(guó)家綜合癌癥網(wǎng)絡(luò)（NCCN）高危人群中，HOTAIR 表達(dá)明顯更高；高表達(dá)HOTAIR 與不良臨床病理預(yù)后分層有關(guān)［45］。我們亞組分析顯示，HOTAIR 過(guò)度表達(dá)與AML 較差預(yù)后相關(guān)，HR值為2.64（95%CI1.51～4.60），異質(zhì)性很低（I2=0%，P=0.60）。這些發(fā)現(xiàn)表明，HOTAIR 可能在AML 進(jìn)展調(diào)節(jié)中發(fā)揮直接作用，并可能作為AML 一種新的預(yù)后標(biāo)志物，有希望成為AML治療新靶點(diǎn)［45］。

TUG1 被認(rèn)為是一種新的癌基因，位于染色體22q12 上，在各種癌癥中高度表達(dá)，與癌癥患者晚期疾病狀態(tài)相關(guān)［46-47］。Wang 等［21］最近發(fā)表一項(xiàng)研究表明 lncRNA TUG1表達(dá)水平與AML患者EFS和OS呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。AML患者中miR-193a-5p 表達(dá)明顯降低，且miR-193a-5p 具有抗白血病活性［48］。上調(diào)miR-193a-5p通過(guò)使PI3K/Akt通路失活而靶向Tspan3，從而抑制細(xì)胞增殖、侵襲和遷移能力，并導(dǎo)致 AML 細(xì)胞周期阻滯［49］。修復(fù)實(shí)驗(yàn)證明，TUG1 通過(guò)調(diào)節(jié)miR-193a-5p/Rab10 軸調(diào)節(jié)AML 細(xì)胞存活和死亡。lncRNA TUG1 在AML 骨髓和細(xì)胞中上調(diào)，負(fù)向調(diào)控miR-193a-5p 表達(dá)，miR-193a-5p 過(guò)度表達(dá)致 AML 細(xì)胞的細(xì)胞活力降低和細(xì)胞死亡增加。Rab10 是miR-193a-5p 直接靶標(biāo)，受到miR-193a-5p 反向調(diào)節(jié)，TUG1 通過(guò)上調(diào)Rab10 調(diào)節(jié)AML 細(xì)胞存活和死亡。lncRNA TUG1 沉默通過(guò)分泌miR-193a-5p和抑制Rab10對(duì)AML細(xì)胞系產(chǎn)生細(xì)胞毒性作用［50］。將TUG1 抑制劑模擬物和空白模擬物轉(zhuǎn)染到KG-1 細(xì)胞，評(píng)估細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡率，結(jié)果顯示，lncRNA TUG1 敲除抑制了KG-1 細(xì)胞增殖，加速了KG-1 細(xì)胞凋亡，表明lncRNA TUG1 通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖和凋亡參與AML 發(fā)病機(jī)制［46］。值得注意是，越來(lái)越多證據(jù)表明TUG1參與了癌癥化療耐藥性［51-52］。TUG1在包括AML在內(nèi)癌癥化療抵抗中作用已被證實(shí)。在阿霉素（ADR）耐藥AML組織和細(xì)胞中，TUG1 表達(dá)升高，通過(guò)表觀遺傳學(xué)調(diào)節(jié)miR-34a表達(dá)；TUG1基因敲除使AML細(xì)胞在體外和體內(nèi)對(duì)ADR 敏感［53］。本研究亞組分析顯示，TUG1 過(guò)度表達(dá)與AML 較差預(yù)后相關(guān)，HR值為2.49（95%CI1.64～3.78），異質(zhì)性較低（I2=0%，P=0.59）?？傊?，TUG1在AML中起著關(guān)鍵作用，可能成為AML 發(fā)展、治療、和預(yù)后新生物標(biāo)志物及治療靶點(diǎn)［53］。

SNHG5 位于染色體易斷點(diǎn)［54］。SNHG5 異常表達(dá)已在許多人類癌癥中被發(fā)現(xiàn)，并作為致癌基因或抑癌基因發(fā)揮作用。例如，SNHG5 促進(jìn)膠質(zhì)瘤進(jìn)展，但抑制胃癌進(jìn)展［55］。最近一項(xiàng)研究報(bào)道稱，與健康對(duì)照組相比，AML患者骨髓和血漿中SNHG5表達(dá)水平始終較高，可作為AML潛在預(yù)后生物標(biāo)志物［16］。全基因組lncRNA 表達(dá)研究也顯示，SNHG5 在AML 中異常過(guò)度表達(dá)。SNHG5 基因敲除可提高AML細(xì)胞對(duì)化療敏感性。SNHG5通過(guò)靶向AML中miR-32/DNAJB9 軸來(lái)調(diào)節(jié)化療耐藥，為AML 提供了一個(gè)新潛在靶點(diǎn)，揭示了化療耐藥重要機(jī)制［56］。

雖然制定了嚴(yán)格納入及排除標(biāo)準(zhǔn)，以下局限性不容忽視：（1）大多數(shù)AML 為中國(guó)人，研究結(jié)果不能代表所有人群；（2）不同lncRNAs 隨訪時(shí)間、疾病類型等不一致，這些因素可能會(huì)導(dǎo)致偏倚；（3）絕大多數(shù)研究偏向報(bào)道陽(yáng)性結(jié)果，本研究在一定程度上可能高估了lncRNAs對(duì)于AML預(yù)后的意義；（4）納入研究均為回顧性隊(duì)列研究，缺乏前瞻性、多中心詢證醫(yī)學(xué)證據(jù)；（5）納入文獻(xiàn)均為以英文發(fā)表研究，發(fā)表偏倚無(wú)法消除。

本研究meta分析顯示，lncRNAs異常表達(dá)，如HOTAIR、TUG1、SNHG（SNHG5 和 SNHG12）高表達(dá)，提示 AML 患者OS降低，預(yù)后不良，尤其對(duì)于AML（non-M3）患者而言，結(jié)果明顯。lncRNAs 有望成為潛在預(yù)測(cè)AML 預(yù)后生物標(biāo)志物，為AML 早期診斷、準(zhǔn)確風(fēng)險(xiǎn)分層、闡明AML 發(fā)病機(jī)制和分子靶向治療提供理論依據(jù)。