周 琳，李夢莎，王 化，沈 光，呂 品，周麗萍

（黑龍江省科學(xué)院自然與生態(tài)研究所/中-芬漿果研究技術(shù)中心，哈爾濱 150040）

0 引言

藍靛果(Loniceracaerulea)為忍冬科(Caprifoliaceae)、忍冬屬(LoniceraL.)落葉灌木[1]，在俄羅斯東北部、中國、日本和加拿大均有野生資源分布。中國野生資源主要分布在大、小興安嶺及長白山地區(qū)[2]。藍靛果果實中富含多酚、黃酮和花色苷等活性物質(zhì)，具有抗氧化[3-4]、抗炎[5]、抗癌[6-8]、減肥降脂[9]等多種功效。由于藍靛果活性物質(zhì)含量高、栽培容易、耐寒等特點，成為繼藍莓、沙棘等之后新興的小漿果樹種。

隨著人們對藍靛果營養(yǎng)和功效的關(guān)注，中國有多個科學(xué)家團隊從事藍靛果新品種選育研究工作[10]。在以往的藍靛果品種選育過程中，品種選育專家更多關(guān)注的是品種在各地區(qū)的適應(yīng)性[11-12]、抗旱性[13]、產(chǎn)量[14-15]和果實大小[16-17]等指標(biāo)。隨著人們對藍靛果果實保健作用的認識不斷深入和藍靛果產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，人們對藍靛果品種的要求也越來越高。單純的以抗性及果實大小等為指標(biāo)的品種，已遠遠不能滿足市場的需求。近幾年，在藍靛果品種選育的時候，選育專家除了關(guān)注以前選育時的指標(biāo)外，同時也開始關(guān)注果實的活性物質(zhì)含量以及口感等品質(zhì)，以期培育出適宜鮮食和不同適用性的藍靛果品種。

本試驗以哈爾濱栽培的‘蓓蕾’、‘藍精靈’以及正在選育的3個藍靛果L品系為研究對象，以果實大小、感官評價、可溶性固形物含量、礦物質(zhì)元素含量和活性物質(zhì)含量為指標(biāo)，對不同品種藍靛果果實品質(zhì)進行比較研究，旨在為藍靛果品種選育過程中指標(biāo)的篩選提供借鑒，為藍靛果果實的綜合開發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 原材料 試驗材料采集于哈爾濱，選育出的藍靛果新品系（L系）、品種：‘L32’、‘蓓蕾’、‘藍精靈’、‘L54’和‘L63’。采集成熟的果實，進行果實大小、可溶性固形物含量測定、感官評價、各種礦物質(zhì)含量及活性物質(zhì)含量的檢測。實驗于2020年7—8月在黑龍江省科學(xué)院自然與生態(tài)研究所分析實驗室內(nèi)進行。

1.1.2 主要試劑 無水乙醇、氯化鉀、乙酸鈉、鹽酸、無水碳酸鈉、無水三氧化鋁和福林酚試劑，天津市東麗區(qū)天大化學(xué)試劑廠；鉀、鈉、鎂、鐵、銅、鋅、鈣和錳標(biāo)品，國家鋼鐵材料測試中心鋼鐵研究總院；矢車菊-3-葡萄糖苷標(biāo)品、沒食子酸標(biāo)品和蘆丁標(biāo)品，Sigma公司。

1.2 主要儀器

日立/U-2910紫外可見分光光度計，日本島津公司生產(chǎn)；iCE 3500原子吸收分光光度計，美國賽默飛公司生產(chǎn)；KQ3200DE超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)；FA1104電子分析天平，上海精科公司生產(chǎn)。

1.3 試驗方法

1.3.1 果實大小和可溶性固形物指標(biāo)的測定 單果重量采用電子分析天平稱量。果實縱徑和果實橫徑采用游標(biāo)卡尺進行測量。果形指數(shù)采用公式(1)進行計算。可溶性固形物含量采用阿貝折射儀進行測定。

1.3.2 感官評價方法 以果實風(fēng)味、酸味、甜味、苦味和澀味為指標(biāo)，對不同藍靛果果實進行感官評價。果實口感評定采用定量描述法(QDA)，評定實驗小組人員共10人，篩選與培訓(xùn)方法參照國家標(biāo)準(zhǔn)[18-19]。對同濃度藍靛果果汁口感進行品嘗評分，評分標(biāo)準(zhǔn)參照感官評分尺度表（表1）。為了真實反應(yīng)品種之間的差異，評分結(jié)果參照葡萄酒感官評價方法中置信區(qū)間法轉(zhuǎn)換[20]，然后再進行數(shù)據(jù)處理和分析。

表1 感官評分尺度表

1.3.3 礦物質(zhì)元素含量的測定 礦物質(zhì)元素含量測定方法參照文獻[21]，采用原子吸收分光光度計法。

樣品處理：取藍靛果凍果5 g，用勻漿機打碎后，取1 g樣品于三角瓶中，加入酸混合液（硝酸:高氯酸=3:1）20 mL后進行消解，消解到剩約1 mL無色透明液體，冷卻后用水溶解并用容量瓶定容至50 mL，用慢速定性濾紙過濾后，備用。同時做空白。重復(fù)3次。

1.3.4 活性物質(zhì)含量的測定 采用福林酚比色法測定總多酚含量[22]，采用三氧化鋁比色法測定總黃酮含量[23]，采用pH示差法測定花色苷含量[24]。

樣品處理：分別取不同藍靛果凍果100 g，低溫下用勻漿機打碎后，每個處理取10 g勻漿（精確到0.0001 g），加入70%乙醇100 mL，放入超聲波中，室溫下100 W超聲功率提取1 h，然后過濾備用。重復(fù)3次。

1.3.5 統(tǒng)計分析方法 采用SPASS19.0軟件中的OnewayANOVA單因素方差分析對試驗數(shù)據(jù)進行分析，多重比較采用鄧肯法，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(Se)表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 藍靛果果實性狀分析

以藍靛果縱徑、橫徑、果形指數(shù)以及單果重為指標(biāo)，評價不同藍靛果果實性狀。方差分析結(jié)果表明，不同藍靛果果實縱徑、橫徑、果形指數(shù)及平均單果重之間具有極顯著差異(P≤0.01)。

圖1表明，‘L63’的縱徑最長，達到(19.62±0.57)mm，除了與‘藍精靈’無顯著差異(P≥0.05)外，與‘L32’、‘蓓蕾’和‘L54’相比均具有極顯著性差異(p≤0.01)；‘蓓蕾’的縱徑最短為(12.45±0.23)mm，并且與其余各組之間具有極顯著差異(p≤0.01)，但是‘蓓蕾’的橫徑最大為(9.11±0.23)mm，與‘L32’和‘L54’具有顯著差異(p≤0.05)，而與‘藍精靈’和‘L63’無顯著差異(p≥0.05)。‘蓓蕾’果形指數(shù)最小為1.39±0.04，與其余4組具有極顯著性差異(p≤0.01)，說明‘蓓蕾’的果實比較小，從單果重指標(biāo)也可以看出‘蓓蕾’的單果重最輕，僅為(0.54±0.03)g，‘L63’的果形指數(shù)最大為2.23±0.07，說明‘L63’的果實比較大，‘L63’的單果重達到(0.77±0.03)g，與單果重最高的‘藍精靈’的(0.79±0.04)g無顯著差異(p≤0.05)。單果重由高到低的順序為：‘藍精靈’、‘L63’、‘L32’、‘L54’、‘蓓蕾’，說明‘藍精靈’的果實最大，其次是‘L63’，‘蓓蕾’的果實最小。

圖1 藍靛果果實性狀比較結(jié)果

2.2 藍靛果可溶性固形物含量分析

不同藍靛果果實可溶性固形物含量之間具有極顯著差異(p≤0.01)（表2）?？扇苄怨绦挝锖孔罡叩氖恰砝佟?，與其余4個品種具有極顯著差異(p≤0.01)?！{精靈’果實雖然最大，但是可溶性固形物含量最低。

表2 藍靛果果實可溶性固形物含量方差分析及多重比較結(jié)果

2.3 藍靛果果實感官綜合評價

根據(jù)藍靛果果實口感特點，以風(fēng)味（果香味）、酸味、甜味、苦味和澀味為指標(biāo)，對藍靛果果實進行感官評價。感官評價結(jié)果如圖2。‘蓓蕾’的果香味最濃，‘L63’的果香味最淡。果香味由濃到淡的順序為：‘蓓蕾’、‘L32’、‘藍精靈’、‘L54’、‘L63’?！{精靈’的甜味最高為1.80±0.20，其次是‘蓓蕾’，‘L63’的甜味最低為0.50±0.17?！甃32’的酸味最重?！甃63’的苦味和澀味最大，其次是‘L54’的苦澀味也比較重?！甃32’的苦澀味最低，其次是‘藍精靈’?！{精靈’的各項指標(biāo)最趨于中心位置，說明‘藍精靈’的綜合口感最好，其次是‘蓓蕾’，而‘L32’偏酸，‘L63’不但苦澀重且藍靛果果實特有的風(fēng)味評價也較低。感官評價綜合來看，口感由好到次的順序為：‘藍精靈’、‘蓓蕾’、‘L32’、‘L54’、‘L63’。

圖2 不同藍靛果感官評價圖

2.4 藍靛果果實礦物質(zhì)元素含量分析

藍靛果果實中含有鈣、鐵、鎂等礦物質(zhì)元素。不同品種不同來源的藍靛果中礦物質(zhì)元素含量不同。本試驗采用原子吸收光譜法對藍靛果中的鈣、鐵、鎂、鋅、錳、銅、鉀和鈉等礦物質(zhì)元素進行了檢測。表3可見不同藍靛果果實中鈣、鎂、鐵、錳、鉀和鈉含量均具有極顯著差異(p≤0.01)。

由表3可以看出，藍靛果的5個品種中，鈣含量由高到低的順序為：‘L54’、‘藍精靈’、‘L32’、‘L63’、‘蓓蕾’；鎂含量由高到低的順序均為：‘L63’、‘L32’、‘L54’、‘藍精靈’、‘蓓蕾’；鐵含量由高到低的順序均為：‘藍精靈’、‘蓓蕾’、‘L54’、‘L32’、‘L63’；錳含量由高到低的順序為：‘L32’、‘L63’、‘藍精靈’、‘L54’、‘蓓蕾’；鉀含量由高到低的順序為：‘L63’、‘L32’、‘L54’、‘藍精靈’、‘蓓蕾’；鈉含量由高到低的順序為：‘L32’、‘L63’、‘L54’、‘藍精靈’、‘蓓蕾’。5個品種中均未檢出鋅和銅。

表3 藍靛果果實中礦物質(zhì)元素方差分析及多重比較結(jié)果 mg/kg

新培育的L系藍靛果果實礦物質(zhì)含量，除鐵含量較低以外，其他含量均比2個品種（‘藍精靈’和‘蓓蕾’）高。其中‘L63’鎂含量和鉀含量最高；‘L32’錳含量和鈉含量最高，‘L54’鈣含量最高；各品種之間含量達到極顯著水平(p≤0.01)；‘藍精靈’的鐵含量最高，鎂含量、鉀含量和鈉含量高于‘蓓蕾’，但低于L系藍靛果，并且達到顯著水平(p≤0.05)?！砝佟牡V物質(zhì)含量除了鐵含量較高外，其他含量均低于其他品種。

2.5 藍靛果果實活性物質(zhì)含量分析

多酚、黃酮和花色苷類物質(zhì)是藍靛果果實中的主要活性物質(zhì)，具有抗氧化、抗癌、預(yù)防心腦血管疾病及保護視力等多種功效。幾個品種藍靛果果實活性物質(zhì)含量分析結(jié)果如圖3所示?！砝佟械目傸S酮含量極顯著高于其余4個品種(p≤0.01)；其多酚含量與‘L32’相差不大，無顯著性差異(p≥0.05)，但與其他3個品種均達到極顯著水平(p≤0.01)；其花色苷含量雖然與‘L32’和‘藍精靈’未達到顯著差異(p≥0.05)，但也是5個品種中含量最高的為(2.724±0.02)(mg/g)，說明這5種藍靛果果實中‘蓓蕾’活性物質(zhì)含量最高?！甃54’中總黃酮和花色苷的含量極顯著低于其余4個品種(p≤0.01)，總多酚含量雖然與‘L63’未達到顯著差異(p≥0.05)，但是也是5個品種中含量最低的為(2.54±0.07)(mg/g)，說明這5種藍靛果果實中‘L54’活性物質(zhì)含量最低。5個品種中，總多酚含量由高到低的順序為：‘蓓蕾’、‘L32’、‘藍精靈’、‘L63’、‘L54’；總黃酮含量由高到低的順序為：‘蓓蕾’、‘藍精靈’、‘L32’、‘L63’、‘L54’；花色苷含量由高到低的順序為：‘蓓蕾’、‘藍精靈’、‘L32’、‘L63’、‘L54’。通過3種活性物質(zhì)排序可以看出，‘L63’的活性物質(zhì)含量也比較低。

圖3 不同品種藍靛果活性物質(zhì)含量比較

3 結(jié)論

‘藍精靈’的單果重最大，極顯著高于‘L32’、‘蓓蕾’和‘L54’(p≤0.01)，并且‘藍精靈’的感官綜合評價最好，適宜鮮食?！砝佟墓沃笖?shù)和果縱徑都最小，并且極顯著低于其余4個品種(p≤0.01)，但是‘蓓蕾’的可溶性固形物含量、多酚、黃酮和花色苷活性物質(zhì)含量極顯著高于其余4個品種，并且‘蓓蕾’的風(fēng)味最佳，感官評價綜合指標(biāo)也僅次于‘藍精靈’，適宜鮮食和活性物質(zhì)開發(fā)加工利用。新培育的L系藍靛果果實礦物質(zhì)含量，除鐵含量較低以外，其他含量均比‘藍精靈’和‘蓓蕾’高，適合用于開發(fā)礦物質(zhì)飲料[25-26]。

4 討論

藍靛果果實營養(yǎng)豐富，具有多種保健功能，是國內(nèi)外公認的繼藍莓之后的又一極具開發(fā)價值的新興小漿果，是“十三五”國家重點研發(fā)計劃重點開發(fā)的小漿果之一。黑龍江省是藍靛果主產(chǎn)區(qū)，隨著產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，選育優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)且具有自主知識產(chǎn)權(quán)的藍靛果品種，是黑龍江省小漿果產(chǎn)業(yè)發(fā)展急需解決的關(guān)鍵問題[27-31]。現(xiàn)有藍靛果品種大多引進俄羅斯，對其評價集中在品種抗性、產(chǎn)量、果實性狀等單一或者這幾個的組合為指標(biāo)進行評價。隨著漿果產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，小漿果的藥用，營養(yǎng)保健作用和經(jīng)濟價值得到了專家的深度肯定和消費者的認可。小漿果不僅可以作為一種鮮食水果，同時作為優(yōu)良的開發(fā)原料，已應(yīng)用于食品、保健品、藥品及化妝品等多個領(lǐng)域[32]。這種單純的以果實產(chǎn)量或者抗性為目標(biāo)的育種已不能滿足市場需求。尤其在食品領(lǐng)域，市場對飲料功能分類[33-34]更專業(yè)化、精細化。藍靛果具有出汁率高、營養(yǎng)豐富、風(fēng)味好和多種功效，是作為飲料開發(fā)的優(yōu)良原料，所以根據(jù)市場需求培育不同適用性的果實品種已成為育種專家們的目標(biāo)。因此建立一套科學(xué)的評價體系，確定藍靛果各品種適用性，對產(chǎn)業(yè)化發(fā)展起到積極推進作用。