郭 峰，宗志權(quán)

1 汝南縣動物衛(wèi)生監(jiān)督所，河南駐馬店 463300

2 定邊縣林草病蟲害防治防火工作站，陜西榆林 718699

0 引言

奶牛附紅細(xì)胞體?。‥perythrozoonosis of Dairy Cows，EDC）是一種由寄生于奶牛紅細(xì)胞、血漿內(nèi)的牛附紅細(xì)胞體引起的，臨床表現(xiàn)以發(fā)熱、貧血和黃疸等為主要癥狀的傳染病[1]，是奶牛養(yǎng)殖業(yè)中的常見病。該病多發(fā)于春夏季節(jié)，既可通過血液接觸（吸血昆蟲等）水平傳播，也可以垂直傳播[2]。該病通常表現(xiàn)隱性感染[3]，不容易發(fā)現(xiàn)病情，但是隨著病情發(fā)展，也會表現(xiàn)明顯的臨床癥狀，并繼發(fā)其他疫病，導(dǎo)致奶牛泌乳量和乳品質(zhì)下降，嚴(yán)重影響其繁殖性能和經(jīng)濟(jì)價值。

河南省汝南縣地處豫南，多年來大力發(fā)展奶牛養(yǎng)殖業(yè)，以規(guī)?；曫B(yǎng)方式為主，成為拉動畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)增長的新熱點。但是隨著奶牛養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，該病在汝南縣每年也有7%～10%的發(fā)病率，且大多是混合感染，增加了診治難度和飼養(yǎng)成本，給養(yǎng)牛場（戶）帶來了經(jīng)濟(jì)損失。為摸清汝南縣奶牛附紅細(xì)胞體病的流行情況，降低該病發(fā)病率，減少奶牛養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)損失，

本研究于2020年3月到2021年2月通過實地調(diào)查疫病診療檔案、詢問有關(guān)發(fā)病信息，并通過實驗室診斷等方法對全縣規(guī)?；膛龊蜕B(yǎng)奶牛戶進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，為有效開展防控工作提供參考。

1 試驗材料與方法

1.1 待檢奶牛血液

2020年3月到2021年2月，選取全縣規(guī)模奶牛場、奶牛散養(yǎng)戶共748 頭奶牛，包括犢牛、青年牛和泌乳牛。

1.2 調(diào)查方法

采取實地調(diào)查，查看奶牛疾病防控檔案、診療記錄，詢問每年該病流行情況；觀察臨床癥狀，剖檢部分病死牛，統(tǒng)計有關(guān)數(shù)據(jù)和信息；現(xiàn)場采集血樣，做好采集時間、場點等記錄，進(jìn)行血液鏡檢、吉姆薩染色等實驗室診斷。

1.3 實驗室診斷

1.3.1 血液壓片鏡檢

耳靜脈采集血液1 滴，置于載玻片上，再滴1 滴生理鹽水混合均勻后，蓋上蓋玻片，100×1 000 倍油鏡鏡檢。

1.3.2 染色鏡檢

采集耳靜脈血液制作成抗凝血片，吉姆薩染色，100×1 000 倍油鏡下鏡檢。

1.3.3 紅細(xì)胞溶解后鏡檢

在壓片鏡檢和染色鏡檢為陽性的血液樣品中加入0.1%稀鹽酸，1～2 min后鏡檢。

1.3.4 碘制動試驗

取陽性血液1 滴制作血片，先加入1 滴生理鹽水鏡檢，觀察蟲體運動情況，然后滴入0.1%碘液，鏡檢再觀察蟲體運動情況是否發(fā)生變化。

1.4 判定標(biāo)準(zhǔn)

每份血液樣品觀察200 個視野，有1 個蟲體者即判定陽性，否則判定為陰性。根據(jù)紅細(xì)胞感染率（Erythrocyte infection rate，EIR）進(jìn)行感染強度判斷[4]，見表1。紅細(xì)胞感染率（%）＝（陽性視野個數(shù)/200）×100%。

表1 感染強度標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié)果

2.1 奶牛附紅細(xì)胞體實驗室診斷結(jié)果

在血液壓片鏡檢下觀察，可見陽性血液中紅細(xì)胞在整個視野均勻分布，折射光能力比正常紅細(xì)胞較強，表面附著數(shù)量不等的蟲體，尤其以邊緣居多，形態(tài)多變，多呈圓形、月牙形和桿狀等。血漿中的蟲體多數(shù)為白色亮光點狀，偶見黑色，且運動自如，上下翻轉(zhuǎn)，游動靈活。

在吉姆薩染色鏡檢下觀察，可見蟲體染色后呈藍(lán)紫色，紅細(xì)胞凹陷成空泡。附著蟲體的紅細(xì)胞邊緣不規(guī)則，呈鋸齒狀，整體形態(tài)與血液壓片下觀察到的情況相似。部分陽性血片也可見大單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。

在溶解紅細(xì)胞后鏡檢觀察，可見視野內(nèi)游離分散的蟲體明顯多于上述觀察結(jié)果，且運動性增強。

在加入碘液后鏡檢觀察，可見在所有觀察的視野中，血漿中原來運動靈活的蟲體呈現(xiàn)靜止?fàn)顟B(tài)。

2.2 奶牛附紅細(xì)胞體病流行情況

表2 奶牛附紅細(xì)胞體流行情況

汝南縣被檢測的748 頭奶牛的附紅細(xì)胞病總陽性率為10.03%，泌乳牛陽性率最高，為13.02%，分別比青年牛陽性率和犢牛陽性率高2.82 個百分點和7.11個百分點，高于平均陽性率2.99 個百分點。

2.3 不同月份奶牛附紅細(xì)胞體病發(fā)病情況

從全年不同月份的奶牛附紅細(xì)胞體病發(fā)病率分布看，1月最低，為6.67%，隨著月份增大，感染率也隨之升高，7月達(dá)到最高值，為14.55%，8月與7月持平，隨后呈下降趨勢，到12月為7.35%。

圖1 不同月份奶牛附紅細(xì)胞體病感染率

3 討論

汝南縣奶牛附紅細(xì)胞體病的感染率為10.03%，遠(yuǎn)低于黃占欣等[5]對邯鄲地區(qū)報道的54.50%和李子平等[6]報道的冬季73.9%和夏季84.9%。泌乳牛感染率高于后備牛，感染率與奶牛年齡存在一定關(guān)系。全年感染率以7、8月為最高，以1、12月為最低，說明該病有明顯的季節(jié)性，夏季蚊、蠅、螨、蜱等活躍，奶牛感染機(jī)會增加，冬季蚊蠅和媒介昆蟲消失，感染率下降。關(guān)于附紅細(xì)胞體病的傳播途徑，已經(jīng)有試驗證實有接觸性傳播、血源性傳播、昆蟲媒介傳播和垂直傳播。由此表明，附紅細(xì)胞體病的感染率與體外寄生蟲密切相關(guān)，此結(jié)果與有關(guān)文獻(xiàn)報道[7，8]一致。

根據(jù)附紅細(xì)胞體病的季節(jié)性發(fā)病規(guī)律，建議在每年3月，給奶牛預(yù)防性用藥1 次，在5、6月感染高峰以前再用藥1 次。除此之外，也應(yīng)加強日常圈舍的衛(wèi)生清理及消毒工作，合理調(diào)配飼料營養(yǎng)，增強奶牛免疫力；夏季及時清除圈舍及周圍的糞尿和積水，防止蚊蠅及其他吸血昆蟲滋生；加強奶牛附紅細(xì)胞體病的監(jiān)控，發(fā)現(xiàn)帶蟲率普遍較高時，及時全群用藥治療，建議使用尼克蘇、血蟲凈、土霉素等藥物按預(yù)防劑量全群用藥1 次，間隔15天再用藥1 次。

4 結(jié)論

此次調(diào)查初步了解了汝南縣奶牛附紅細(xì)胞體病流行特點，該病平均陽性率為10.03%，從全年不同月份發(fā)病率來看，1月發(fā)病率最低，7、8月最高。盡管發(fā)病率不高，但是應(yīng)全面引起對該病的認(rèn)識，提高奶牛養(yǎng)殖場（戶）的防控意識，加強有效的綜合防控措施，減少奶牛養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)損失。