周瑩瑩，魏江平，陳麗云，3，陽(yáng) 勇，王計(jì)瑞，高思佳，王云紅，趙 領(lǐng)，張小梅*，王 森

（1.重慶市中藥研究院國(guó)家中醫(yī)藥管理局中藥化學(xué)三級(jí)實(shí)驗(yàn)室，川渝共建慢病中藥新藥瀘州市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，重慶 400065；2.遵義醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴州 遵義 563000；3.西南大學(xué)藥學(xué)院，重慶 北碚 400799；4.西南醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院川渝共建慢病中藥新藥瀘州市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 瀘州 646000）

雷公藤首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》［1］，為衛(wèi)矛科植物［2］雷公藤根的木質(zhì)部，又名斷腸草、黃藤等。藥用歷史悠久，具有神經(jīng)保護(hù)，活血通絡(luò)，解毒殺蟲(chóng)之功效［3］。雷公藤含有生物堿類(lèi)、二萜類(lèi)、三萜類(lèi)及多糖［4-7］等多種活性成分，其中的生物堿類(lèi)、二萜類(lèi)及三萜類(lèi)既是有效成分也被認(rèn)為是有毒成分［8］，致使雷公藤毒副作用較大［9-10］，對(duì)內(nèi)臟、胃腸以及生殖系統(tǒng)的均有不同程度的損害［11］，又以胃腸道反應(yīng)最為明顯，故有斷腸草之名［12］。查閱歷代典籍可知，雷公藤以其優(yōu)良的藥用價(jià)值和嚴(yán)重的毒性反應(yīng)為人們所熟知。《神農(nóng)本草經(jīng)》中記述：“莽草，味辛溫。主治風(fēng)頭，癰腫乳癰，疝瘕，除結(jié)氣，疥瘙疽瘡。殺蟲(chóng)魚(yú)。生山谷?！薄侗静菥V目》中記述：“此物有毒，食之令人迷惘，故名。山人以毒鼠，為（謂）之鼠莽［9］。”

炮制是一種由古傳承至今且應(yīng)用廣泛的中藥減毒方法，可通過(guò)破壞或改變中藥有毒成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)藥物的療效，降低中藥毒性成分的含量，保證用藥安全。中藥的物質(zhì)基礎(chǔ)研究使得炮制減毒的方法得到了理論支持和更廣泛的發(fā)展［13］。本研究就雷公藤炮制方法及炮制現(xiàn)狀進(jìn)行綜述，為雷公藤的臨床應(yīng)用、研究及開(kāi)發(fā)提供一定參考。

1 炮制方法

《雷公炮炙論》是中藥炮制學(xué)最早的專(zhuān)著之一，其記載的炮、炙、炒、煅、煨、水飛等常用的炮制方法沿用至今。炮制方法主要可分為水制、火制、水火共制和其他制法［14］。雷公藤所使用的炮制方法如下（分類(lèi)見(jiàn)表1）。

表1 雷公藤炮制分類(lèi)及參考文獻(xiàn)Tab.1 Classification and reference of processing of T.wilfordii

1.1 傳統(tǒng)炮制

1.1.1 凈制

雷公藤傳統(tǒng)藥用需去根皮，切制成厚片，干燥［16］。

1.1.2 酒蒸

將凈選后的雷公藤飲片用黃酒潤(rùn)2 h后，隔水蒸4 h后取出，60℃烘干，打粉過(guò)10目篩［15］。

1.1.3 清炒

取雷公藤厚片置于鍋內(nèi)，文火炒至表面顏色加深，并逸出固有氣味，取出，置陰涼處晾干［20］。

1.1.4 酒炙

雷公藤厚片加黃酒拌勻，悶潤(rùn)2 h，置炒鍋內(nèi)文火炒干，取出干燥［16］。

1.1.5 醋炙

雷公藤厚片加米醋拌勻，悶潤(rùn)2 h，用文火炒干，取出干燥［16］。

1.1.6 水煮

雷公藤厚片加水沒(méi)過(guò)藥面，浸泡至內(nèi)無(wú)干心，武火煮沸后改用文火，煮至無(wú)白心，置40℃烘干?；蛉±坠俑?，置蒸氣煎藥鍋夾層中，加水淹過(guò)藥面，煮沸一段時(shí)間（煮沸過(guò)程保持水適量），取出根皮曬干［16］。

1.1.7 蒸制

稱(chēng)取雷公藤厚片裝入蒸鍋內(nèi)隔水蒸制4 h后取出置40℃烘干［16］。

1.1.8 萊菔子汁煮

雷公藤厚片加入2倍量萊菔子汁，武火煮沸后改為文火煮至藥透汁盡，取出置40℃烘干［16］。

1.1.9 甘草汁煮

稱(chēng)取雷公藤厚片加入2倍量甘草汁，武火煮沸后用文火煮至藥透汁盡，取出置40℃烘干［16］。

1.1.10 漂水法

（1）將適量雷公藤于水中浸泡2～3 d后撈出，瀝干，需徹底剝?nèi)ジo中的內(nèi)、外二層皮，使用專(zhuān)用藥刀將上述藥材趁濕切成2～3 cm的條狀。每條雷公藤根莖對(duì)半破開(kāi)，直徑較大的雷公藤需破2次及以上。剝下的二層皮倒入化糞池防止污染。（2）紗網(wǎng)布袋盛裝破開(kāi)的藥材，清水浸泡2 d，取出瀝干，暴曬2 d或烤干。反復(fù)浸泡、暴曬6次，至無(wú)原液出現(xiàn)［22］。

1.1.11 煙燒法

取適量雷公藤置于專(zhuān)用的鍋內(nèi)燃燒成炭，潑水，使其不化灰，曬干，用專(zhuān)用粉碎機(jī)研成粉［22］。

1.1.12 羊血炮制

取雷公藤飲片加新鮮羊血以蓋過(guò)藥面為度，文火燉煮4 h，羊血呈蜂窩狀時(shí)將羊血取出，將得到的藥材于60℃下烘干，打粉過(guò)10目篩［15］。

1.2 今法炮制

根據(jù)中外學(xué)者的現(xiàn)代研究，雷公藤起效成分復(fù)雜，含有萜類(lèi)（二萜類(lèi)、三萜類(lèi)、倍半萜）、生物堿類(lèi)以及糖類(lèi)等多種物質(zhì)［4-7］。雷公藤具有抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗癌等作用［43］，Zhao［40］等研究表明雷公藤多苷可改善咪喹莫特誘導(dǎo)的皮膚損傷。雷公藤的毒理研究顯示其具有肝毒性、腎毒性、血液系統(tǒng)毒性和心臟毒性等不良反應(yīng)［41］，極大限制了臨床應(yīng)用，對(duì)其進(jìn)行炮制主要目的就是減毒增效。

現(xiàn)代科技的進(jìn)步及對(duì)雷公藤藥效研究使得雷公藤炮制技術(shù)得到改善。如酒炙在原有方法基礎(chǔ)上由悶潤(rùn)2 h改為悶透后浸泡5 min?，F(xiàn)將傳統(tǒng)炮制方法中改善部分列于表2。

表2 現(xiàn)代對(duì)于部分傳統(tǒng)雷公藤炮制方法的改善Tab.2 Improvement of some traditional processing methods of T.wilfordii in modern times

2 不同炮制方法現(xiàn)代研究

現(xiàn)代的雷公藤炮制對(duì)原有炮制方法進(jìn)行改善的同時(shí)也研究出了其他融合現(xiàn)代科學(xué)的雷公藤炮制方法。

2.1 煨法炮制

以濕紙或濕潤(rùn)黃泥等包裹藥物，埋于熱火灰中緩慢升溫的炮制方法。藥材粉碎后過(guò)篩，烘干，得藥材樣品。稱(chēng)藥材樣品，用70%乙醇回流提取3次，每次2 h，濾過(guò)，合并濾液，減壓抽干，再經(jīng)70℃烘干，干燥器中干燥2 d，得浸膏樣品。藥渣晾干后經(jīng)70℃烘干即得［21］。

2.2 含氯離子溶液浸泡

雷公藤樣品加氯仿浸泡，超聲提取，抽濾。濃縮濾液，濃縮液上氧化鋁柱，用氯仿∶甲醇洗脫，洗脫液減壓回收至干［24］。

2.3 微波炮制

取雷公藤根用黃泥（10%鹽水與黃土按體積比1：4混勻）均勻包裹，置微波爐內(nèi)炮制12 min即得［25］。劉建群［25］等的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，相較于雷公藤生品，采用40%功率的微波炮制后雷公藤肝毒性有所增加，但用80%功率的微波炮制后其肝毒性減少，且在炮制前后雷公藤甲素含量變化不大。

2.4 雙向發(fā)酵解毒

運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)將藥用真菌發(fā)酵菌種與中藥材在特定條件下進(jìn)行發(fā)酵，藥材為菌種生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)的同時(shí)，菌種也影響藥材產(chǎn)生新的藥性菌質(zhì)，該藥性菌質(zhì)主要用于增效、擴(kuò)用、解毒等方面。何欒櫻［26］等以雙向發(fā)酵工程為基礎(chǔ)進(jìn)行了常規(guī)的肝毒性試驗(yàn)、抗炎試驗(yàn)等毒性和藥效學(xué)研究。將于55℃干燥粉碎后的雷公藤，過(guò)篩后接種靈芝菌種，置于室溫下，相對(duì)濕度60%且黑暗條件下培養(yǎng)，定期補(bǔ)充一定水分，每天嚴(yán)密觀察靈芝的生長(zhǎng)情況，進(jìn)行肝毒性評(píng)價(jià)、抗炎評(píng)價(jià)以及發(fā)酵前后成分變化的對(duì)比實(shí)驗(yàn)分析其藥效［26-28］，急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)過(guò)靈芝發(fā)酵后的菌質(zhì)的半數(shù)致死量（medianlethaldose，LD50）低于生藥［27］。

3 炮制對(duì)雷公藤化學(xué)成分及藥理作用的影響

3.1 炮制對(duì)化學(xué)成分含量的影響

研究表明炮制方法的改變會(huì)造成雷公藤中不同成分的含量發(fā)生變化，試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 炮制對(duì)雷公藤化學(xué)成分含量影響Tab.3 Influence of processing on chemical composition content of T.wilfordii

雙向發(fā)酵過(guò)程中雷公藤內(nèi)部化學(xué)成分的測(cè)定結(jié)果表明，雙向發(fā)酵對(duì)于雷公藤內(nèi)總生物堿的含量影響較小，對(duì)總二萜類(lèi)化合物含量影響較大［28］。需要強(qiáng)調(diào)的是，這些炮制方法雖能夠降低雷公藤中的毒性成分但其原理并不清楚。通常認(rèn)為炮制過(guò)程中的加熱可破壞或減少毒性物質(zhì)、經(jīng)水處理可調(diào)整或緩和藥性、輔料配制則可通過(guò)其吸附作用或輔料成分與毒性成分結(jié)合而減毒［20］。雷公藤中的萜類(lèi)成分如雷公藤內(nèi)酯甲、雷公藤甲素等和生物堿類(lèi)成分多含內(nèi)酯、羥基和羧酸等結(jié)構(gòu)或基團(tuán)，它們遇水加熱、遇含羥基或堿性基團(tuán)等易發(fā)生水解和酯化反應(yīng)等使其含量下降，但這需要進(jìn)一步的驗(yàn)證。

3.2 炮制對(duì)藥理作用的影響

雷公藤的藥理作用可受炮制方法的影響而改變，總結(jié)見(jiàn)表4。

表4 炮制對(duì)雷公藤藥理作用的影響Tab.4 Effect of processing on the pharmacological action of T.wilfordii

炮制解毒機(jī)理往往與降低毒性成分的含量有關(guān)，如高功率微波煨制或發(fā)酵后毒性降低可能與化學(xué)成分雷公藤甲素的含量比例變化有關(guān)［25-26，35］。其次，配伍減毒多與調(diào)控/介導(dǎo)雷公藤毒性靶器官中生理途徑相聯(lián)系，如甘草炮制雷公藤可減少肝臟中炎癥因子釋放而實(shí)現(xiàn)降低肝毒性［30，32］；雷公藤經(jīng)甘草炮制后可加速雷公藤甲素和雷公藤內(nèi)酯酮的體內(nèi)代謝［32］，并且雷公藤甲素的半衰期延長(zhǎng)而最大血藥濃度降低，作用時(shí)間延長(zhǎng)，達(dá)到增效減毒的目的，炮制解毒多基于中藥“七情”配伍理論，如金錢(qián)草炮制雷公藤毒屬中藥“相殺”配伍范疇，二者合用以達(dá)到“異效相制”之法［39］，這都是中藥配伍的現(xiàn)代科學(xué)內(nèi)涵。白芍炮制雷公藤可加速誘導(dǎo)氧自由基的清除而起到對(duì)肝臟的保護(hù)作用［32］；金錢(qián)草炮制雷公藤可通過(guò)Nrf2/HO-1抗氧化途徑抑制脂質(zhì)過(guò)氧化損傷而降低心臟毒性［39］。與凈制去毒、水煮去毒、經(jīng)蒸制減毒及靈芝雙向發(fā)酵解毒的炮制方法相比，羊血炮制減毒效果較好［31］，但其機(jī)制還需要進(jìn)一步的研究。以上結(jié)果表明炮制對(duì)雷公藤實(shí)現(xiàn)解毒主要依靠1）降低毒性成分含量而減輕其對(duì)機(jī)體生理功能的影響；2）改變毒性成分在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征；3）調(diào)控/介導(dǎo)毒性成分誘導(dǎo)毒性反應(yīng)的生理信號(hào)/過(guò)程來(lái)實(shí)現(xiàn)。

4 小結(jié)與展望

炮制可導(dǎo)致中藥藥性不同程度的改變，“鹽制入腎”“酒制入心”等表明了炮制的功效，且炮制最大功效之一便是減毒。通過(guò)文獻(xiàn)的查閱，不難發(fā)現(xiàn)當(dāng)今的中藥的炮制傳承中醫(yī)思想的同時(shí)也具有現(xiàn)代研究思路，如雷公藤炮制運(yùn)用了現(xiàn)代發(fā)酵的生物技術(shù)，發(fā)酵炮制具有轉(zhuǎn)化原料中的化合物產(chǎn)生新的活性成分、降毒增效等優(yōu)點(diǎn)［42］。目前文獻(xiàn)中關(guān)于各朝代雷公藤炮制的文獻(xiàn)較少，現(xiàn)代的雷公藤研究中所使用的傳統(tǒng)炮制方法大同小異，后以現(xiàn)代科學(xué)改善傳統(tǒng)炮制方法、研究出新的炮制方法，如清炒、酒炙、蒸制在得到炮制品后還通過(guò)改善樣品的粉碎度如進(jìn)行超微粉碎及過(guò)篩裝袋后再進(jìn)一步操作處理。

分析技術(shù)的發(fā)展也促進(jìn)了雷公藤的質(zhì)量評(píng)價(jià)，高效液相色譜法（High performance liquid chromatography，HPLC）、紫外分光光度法及指紋圖譜可用于雷公藤中不同成分的檢測(cè)，達(dá)到定性或定量的目的。張奉蘇［44］等測(cè)定雷公藤成分時(shí)利用HPLC分析技術(shù)，得到結(jié)果與羅益遠(yuǎn)［16］等使用薄層色譜法所得結(jié)果不完全相同，可見(jiàn)分析技術(shù)也會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響。諸多學(xué)者從各方面對(duì)炮制后的雷公藤進(jìn)行評(píng)價(jià)，如化學(xué)成分和毒性的變化等，證實(shí)了炮制品與生品的不同，對(duì)于今后的雷公藤炮制研究具有積極意義。

炮制方法的不同會(huì)直接影響雷公藤的藥效。微波炮制中選擇不同功率所得的炮制品成分也會(huì)有所變化，而選擇另一完全不同的炮制方法則極有可能導(dǎo)致某一藥效的增強(qiáng)或減弱［25］。使用MTT法對(duì)白芍配伍雷公藤后的氧化調(diào)控和肝臟減毒進(jìn)行探究，發(fā)現(xiàn)炮制品可通過(guò)降低氧化作用以達(dá)到減毒目的［45］。王君明［30］等對(duì)不同藥物配伍雷公藤炮制后的抗氧化特性開(kāi)展實(shí)驗(yàn)，王錢(qián)［46］使用逍遙散解緩雷公藤毒性的研究，周學(xué)平［47］等運(yùn)用藥理毒理學(xué)和分子生物學(xué)等多學(xué)科的技術(shù)和方法對(duì)配伍炮制的減毒機(jī)制進(jìn)行了研究。陳琪［48］的雷公藤配伍炮制實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明單味中藥減毒效果排序?yàn)椋旱攸S＞白芍＞甘草＞三七＞菟絲子＞黃芪＞青風(fēng)藤＞僵蠶＞無(wú)干預(yù)對(duì)照。劉建群［49］等在煨制雷公藤的后續(xù)研究中指出，雷公藤煨制減毒增效的物質(zhì)基礎(chǔ)可能是生物堿、雷公藤紅素和去甲澤拉木醛等的成分變化。

對(duì)于炮制后仍可能存在較大毒性情況，部分炮制方法提出了解決辦法，如前文所提的煅燒法，若所制的炮制品仍具毒性，則將該木炭用布袋盛裝，按漂水法第2項(xiàng)程序漂曬1～2次［22］。通過(guò)總結(jié)和分析雷公藤的相關(guān)研究，當(dāng)今的雷公藤炮制研究仍有欠缺，已有文獻(xiàn)主要是關(guān)于雷公藤炮制后的減毒研究，對(duì)于雷公藤炮制后藥理作用及針對(duì)炮制后減毒機(jī)制類(lèi)研究相對(duì)尚少，特別是炮制過(guò)程中輔料所起的作用，如何發(fā)揮作用和其作用機(jī)制等值得廣大學(xué)者關(guān)注。作者認(rèn)為應(yīng)當(dāng)借助現(xiàn)代科學(xué)進(jìn)行深入探究雷公藤的藥理作用、減毒機(jī)制及輔料發(fā)揮的作用以獲得新的減毒存效（增效）理論基礎(chǔ)和途徑，以開(kāi)發(fā)新的減毒增效方法，批判性繼承發(fā)揚(yáng)雷公藤炮制，拓寬其臨床應(yīng)用，同時(shí)也應(yīng)制定合理的炮制規(guī)范以保證其安全有效。