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        藥用植物有效成分提取傳統(tǒng)技術(shù)比較研究

        2022-10-02 06:34:12廖成松韓陽陽陳志婧趙靜漪石華玉
        中國野生植物資源 2022年9期
        關(guān)鍵詞:藥用植物升華藥材

        廖成松,韓陽陽,陳志婧,趙靜漪,石華玉

        (1.錫林郭勒職業(yè)學院,內(nèi)蒙古 錫林浩特市 026000;2.錫林郭勒盟農(nóng)畜產(chǎn)品檢驗檢測中心,內(nèi)蒙古 錫林浩特市 026000;3.錫林郭勒土壤肥料和節(jié)水農(nóng)業(yè)工作站,內(nèi)蒙古 錫林浩特市 0260001;4.內(nèi)蒙古綠草堂藥業(yè)有限責任公司,內(nèi)蒙古 太卜寺旗 027000)

        藥用植物是指醫(yī)學上用來防御和治療疾病的天然植物,《本草綱目》、《黃帝內(nèi)經(jīng)》、《傷寒雜病論》等著作中詳細記載了多種藥用植物的生長環(huán)境、形態(tài)、功效等參數(shù)。在我國醫(yī)學水平和醫(yī)療條件均不發(fā)達的年代,各類疾病的治療幾乎都依賴于藥用植物配制成的中藥,而中藥制作中最為關(guān)鍵的步驟就是其有效成分的提取,提取的工藝與方法會直接影響中藥的藥效[1]。藥用植物的有效成分通常位于植物的根、莖、葉、花、果、種子等不同部位中,在中藥發(fā)展歷程中,人們一直致力于從這些部位中最大限度地獲取活性有效成分。本文就煎煮法、滲漉法、浸漬法、回流法、蒸餾法、升華法、壓榨法等傳統(tǒng)提取技術(shù)的原理、特點和應用進行了全面的歸納總結(jié),并對其進行了綜合比較,且針對彌補各自缺點提出了相應的建議,旨在為我國中藥傳統(tǒng)提取技術(shù)的改進和新技術(shù)的開發(fā)提供借鑒和參考。

        1 傳統(tǒng)技術(shù)

        1.1 煎煮法

        煎煮法是藥用植物采收后將入藥部位分離,再經(jīng)過清洗、分揀、晾曬、浸泡之后,進行熬制的提取方法[2]。其原理是通過溶劑高溫加熱使植物細胞壁被動破裂,有效成分溶于溶劑中,最終達到細胞壁內(nèi)外濃度飽和。因其適用范圍大,簡便易行,一度成為利用率最高的傳統(tǒng)制藥方法,并一直沿用至今。

        煎煮法中浸泡方法、熬制器具、兌水量、煎煮時間會直接影響藥物有效成分的提取質(zhì)量和效率。藥用植物大多經(jīng)過晾曬,水分所剩無幾,細胞液干涸,為了使細胞中可溶性物質(zhì)被充分提取,應先浸泡再煎煮。研究表明,為了避免中藥中大部分苷類成分被酶解,需要合理規(guī)定浸泡時間,花、莖、葉入藥的植物,需浸泡20~30 min,以根、種子、果實入藥的植物,可浸泡60 min[3]。楊蓉等提出煎煮前浸泡30~60 min可使細胞重新膨脹,有利于有效成分的提取[4]。通過對茵陳蒿湯和白頭翁湯的浸泡與未浸泡煎液進行比較,得出浸泡后的煎液所含有效成分含量明顯高于未浸泡者[5]。藥用植物的有效成分普遍具有酸堿性,所以在選擇煎煮工具時要特別注意材質(zhì),切勿使植物成分與工具發(fā)生化學反應。例如植物中的鞣酸成分與鐵元素可發(fā)生化合反應生成黑色的鞣酸鐵;訶子、蘇木、地榆含有酚羥基化合物,在鐵鍋中煎煮時,易與鐵產(chǎn)生化學反應,形成深紫色、黑紫色、黑綠色沉淀[5];黃皮屬植物中含有的香豆素類成分遇鐵會產(chǎn)生顏色反應;某些含有碳酸成分的植物在銅器中煎煮會產(chǎn)生碳酸銅,因此,鐵、銅、鋁等金屬器具不宜用來煎煮中藥。砂鍋、陶瓷、玻璃等器具因價格低廉、穩(wěn)定性較好、受熱均勻、保溫性好等優(yōu)點,是煎煮中藥的主要工具。藥用植物煎煮過程中時間和水量的控制是提高藥用成分提取質(zhì)量的重要手段,煎煮時間太長,會使水量蒸發(fā)過多,錯過藥物最佳提取時機,有效成分被破壞;煎煮時間過短,又可能導致有效成分不能充分溶解和提取出來。中藥在煎煮過程中會發(fā)生中和、降解、氧化等化學反應,不同中藥材的最佳煎煮時間也不盡相同。單味藥材根據(jù)其自身需要分為先煎和后下兩種方法,先煎是指一些難溶于水的藥材需要打碎煎煮,待溶解到一定程度之后再放入其他藥材,另一個原因是部分藥材毒副作用較強,需在飲用前煎煮降低毒性[6];后下是指針對有效成分極易揮發(fā)的藥材,煎煮時選擇最后放入,有利于保全藥效[7]。一般來說,滋補類藥材需要更多的時間來進行煎煮,如黨參、當歸等,需要煎煮的時間至少達到3 h[8],而大黃的煎煮時間以50 min為最佳[9]。對于沒有特殊性的單味藥材來說,可以選擇通用的煎煮方法,復方藥的煎煮時間與水量沒有常規(guī)方法,必須依據(jù)不同植物藥用特性進行多種組合從而確定最佳煎煮時間和用水量。

        1.2 滲漉法

        滲漉法是藥用植物細胞內(nèi)的可溶性物質(zhì)浸入溶劑,使溶劑的濃度升高、比重下降,造成濃度差后將原始溶劑與浸出溶劑分離并提取有效藥物成分的過程[1]。此方法通用工具為滲漉器,一般操作步驟為:粉碎、潤濕、裝筒、排氣、浸漬、滲漉[10]。先將研磨好的藥粉充分浸濕,均勻裝入儀器內(nèi)部(滲漉筒或滲漉罐),再排空儀器內(nèi)部的空氣,從頂部放入溶劑,使溶劑充分浸入藥材粉末,最后從儀器下部出口滲出有效成分,所得浸出液稱為“滲漉液”。根據(jù)以上操作步驟,滲漉法在使用時需要注意以下3個方面[11]:首先,藥材粉碎須均勻一致,為了使溶劑充分浸入藥材,切勿將疏密不一的幾種粉末放在一起,避免出現(xiàn)部分藥材未能壓緊的現(xiàn)象。其次,滲漉前須將藥材完全潤濕,充分膨脹,防止?jié)B漉器在運轉(zhuǎn)過程中堵塞。第三,裝入藥材需要分多次進行,且每次藥材量都不宜過多,裝一層壓一次,以保證均勻壓緊而不留空隙。

        滲漉法常用溶劑為無水乙醇、甲醇、水、石油醚等,浸漬時間根據(jù)不同藥材特性具體設置。洪燕等研究表明,干姜中姜酚類成分的提取以12倍量80%的乙醇溶液為溶劑,冷浸2 h后再加入4倍量80%的乙醇溶液,按5 mL·min-1的速度滲漉為最佳[12]。研究表明,紅花中HSYA(羥基紅花黃色素A)和紅花黃色素的最佳提取條件是以60%乙醇浸漬12 h,25倍量進行滲漉,滲漉流速為1 mL·min-1[13]。王文軍等研究表明以石油醚為提取溶劑,料液比1:60(g:mL),滲漉速度為1 mL·min-1,浸泡時間為12 h,銀杏葉中銀杏酸提取率為1.24%,銀杏酸提取回收率達到85.52%,且銀杏葉中銀杏黃酮和銀杏內(nèi)酯含量幾乎無損耗[14]。干燥黃蜀葵花有效成分滲漉法提取結(jié)果表明,用10倍量90%甲醇滲漉效果佳,滲漉液經(jīng)減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),濃縮至無醇味得總浸膏[15]。

        1.3 浸漬法

        浸漬法也屬于溶劑提取,與上文2種方法的提取原理相同,都是通過細胞壁內(nèi)外濃度飽合進行有效提取。在操作步驟上,浸漬法與煎煮法更為相似,但在提取過程中,浸漬法不需要將植物持續(xù)煮沸,使用常溫或溫熱溶劑(60~80℃)加熱即可。根據(jù)溶劑溫度以及浸漬次數(shù)的不同,使用常溫溶劑的方法稱為冷浸法,使用溫熱溶劑提取的方法稱為熱浸法,使用溶劑進行多次提取的方法稱為重浸法。每種藥材的機理成分各不相同,所以在選取方法時要全面考慮植物特性,選擇最適宜植物機理的操作。冷浸法將濾液濃縮,可進一步制備流浸膏、浸膏、片劑、沖劑等[16]。重浸法適用于有效成分不能一次充分浸出的藥材,利用一次浸出液對新藥粉再浸漬,可減少溶劑吸收浸提液所引起的藥物成分的損失。秦晶晶等使用回流提取法、微波輔助萃取法、索氏提取法、超聲提取法、冷浸法5種方法提取到菟絲子中總黃酮含量分別為31.24、16.84、12.82、9.74、8.88 mg·g-1,可見冷浸法回收率最低[17]。張蕊發(fā)現(xiàn)采用浸漬法對柯子中有抑菌功效的鞣質(zhì)類成分進行提取,提取液對試驗菌株的抑制效果普遍優(yōu)于回流法提取液[18]。

        浸漬法使用的溶劑有甲醇、乙醇、白酒、水及其它親脂性有機溶劑,如乙醚、氯仿、石油醚等,浸漬時間與溶劑用量因藥材不同而不同。因為該方法耗時較長,用水作溶劑易發(fā)生質(zhì)變,所以醇類溶劑使用較多,浸漬過程中應注意密封,以免有效成分揮發(fā)。采用熱浸法提取花生殼中多酚類物質(zhì),結(jié)果表明最佳條件為:65%乙醇作為溶劑,藥粉與溶劑體積比為1:30(g:mL),浸提溫度為75℃,浸提時間為5 h[19]。王亞萍等對胡黃連浸膏提取技術(shù)研究表明,浸漬法簡便易行,適用于該藥材,最優(yōu)浸漬條件為:藥材粒度20目,溶劑為80%濃度乙醇,料液比1:25(g:mL),時間75 min,溫度80℃[20]。黃四平等用浸漬法提取苦皮藤素,結(jié)果表明,以甲醇作為提取劑,料液比1:6(g:mL),60℃浸提3次,每次6 h,提取效果最佳[21]。

        1.4 回流法

        回流法是指使用具有揮發(fā)性的有機溶劑和回流加熱裝置提取浸出液后再進行蒸餾、冷卻,使溶劑重新凝聚,重復流回裝置內(nèi)再次浸提,以此往復,直至藥用有效成分被完全提出[22]。回流法在實驗室中常用儀器為多功能提取罐和索氏提取器[23],生產(chǎn)中采用索氏提取濃縮機組[24]。此方法類型包括常壓回流提取法、減壓回流提取法,熱回流法、冷回流法。常用提取溶劑包括乙醇、甲醇等具有揮發(fā)性的有機溶劑,操作參數(shù)具體依據(jù)植物本身特點制定。劉美琳等利用回流法對波棱瓜子多糖進行提取時發(fā)現(xiàn)最佳條件為100℃的水浴,1:40(g:mL)的料液比,共提取2次,總用時3 h[25]。崔譯戈采用熱回流法提取芹菜中黃酮類化合物,篩選出最優(yōu)條件為80%的乙醇溶液60 mL,提取1 h,黃酮類化合物的提取率最高達到3.31%[26]。溫玲蓉等在研究中發(fā)現(xiàn),在相同溶劑提取條件下,常壓回流提取法所浸提的溪黃草提取物抗氧化性及總酚、黃酮、單寧提取率明顯高于減壓回流提取物[27]。

        1.5 蒸餾法

        蒸餾法指將含揮發(fā)性成分的藥材的粗粉或碎片,浸泡濕潤后,加熱蒸餾或通入水蒸氣蒸餾,樣品中的揮發(fā)性成分隨水蒸氣蒸餾而帶出,操作簡單,且不存在溶劑污染,但加熱溫度過高易造成活性成分損失[28]。此方法也適用于易揮發(fā)性物質(zhì)如精油類的提取,常用工具為傳統(tǒng)水蒸氣蒸餾裝置,由水蒸氣發(fā)生器、氣化、冷凝和接收4個部分組成[29]。薩如拉等使用高壓水蒸氣蒸餾法提取厚樸有效精油成分時發(fā)現(xiàn),厚樸在2.1 MPa壓力下回收率極高[30]。運用水蒸氣蒸餾和乙醇提取兩種方法分別提取茭白中的化學成分,結(jié)果顯示水蒸氣蒸餾提取物中共分離出106種組分,乙醇提取物中只分離出89種組分[29]。

        1.6 升華法

        升華是指固體物質(zhì)受熱后直接氣化,遇冷空氣后又凝聚為固體化合物的過程。中藥中一些成分具有升華的性質(zhì),因此可以利用該特性從中藥中提取出來,如生物堿類物質(zhì)咖啡因、游離羥基蒽醌類成分、一些香豆素類及有機酸類成分(七葉內(nèi)酯及苯甲酸)、茶多酚等的提取。升華法的提取過程雖然簡單易行,但易炭化,中藥炭化后會產(chǎn)生揮發(fā)性的焦油狀物,粘附在升華物上,不易精制除去。其次,中藥容易升華不完全、產(chǎn)率低,在升華過程中伴隨著一定的分解現(xiàn)象。陶永元等[31]比較研究了有機溶劑浸提法和減壓升華法對茶多酚的提取效果,結(jié)果表明升華法提取的茶多酚純度高于有機浸提法提取的茶多酚,提取成本低,無化學物質(zhì)殘留。

        1.7 壓榨法

        壓榨法是利用螺旋壓榨機依靠旋轉(zhuǎn)的螺旋體在榨籠中的推進作用,使藥材不斷被壓縮,細胞中的汁液被壓榨出來,去除雜質(zhì)即可得到有效成分。壓榨法適用于有效成分含量較高且存在于植物的液汁中的中藥,壓榨法在常溫下進行,防止中藥中不耐熱的有效成分分解或變性,降低藥效。陳穎慧[32]在研究5種不同方法對茶油的影響時發(fā)現(xiàn),壓榨過程中榨腔內(nèi)溫度和壓力不斷升高,會使提取的茶油呈微濁狀態(tài),不澄清,并且導致茶油酸值和過氧化值過高,影響其品質(zhì)。

        2 傳統(tǒng)技術(shù)之間的比較

        2.1 適用范圍

        如表1所示,相對而言,7種方法中煎煮法和壓榨法是中藥提取最為傳統(tǒng)的方法,具有傳承時間長、適用范圍廣、對環(huán)境要求低等特點。然而,由于工具簡單和環(huán)境的簡陋,浸出液質(zhì)量也會受影響[2-4]。滲漉法和浸漬法適用范圍也比較廣,而且二者的適用條件恰好相反,可以達到互補的效果[11,22]。壓榨法是用物理壓榨方式,而浸漬法是用化工原理,用食用級溶劑提取油脂的一種方法。回流法較上述幾種方法而言,適用范圍比較窄,但該方法能有效節(jié)省了溶劑用量,減少雜質(zhì),但因溶劑循環(huán)利用,導致操作過程用時較多,并且不能及時更換新溶劑。蒸餾法因其適用范圍小,相對其他4種方法而言使用率較低。升華法應用于固體與固體的提純,可以除去不揮發(fā)的雜質(zhì)或分離揮發(fā)度不同的固體物質(zhì),且要求固態(tài)物質(zhì)有足夠大的蒸汽壓力。

        表1 不同提取技術(shù)比較列表Tab.1 Comparison list of different extraction techniques

        2.2 提取物質(zhì)量

        煎煮法往往雜質(zhì)較多,給精制帶來不利,且煎出液易霉敗變質(zhì),因此,煎煮法提取質(zhì)量不高[8-9]。粘性藥材、無組織結(jié)構(gòu)、新鮮、易膨脹的藥材存在水分不宜滲入,體積較大等特點,適合于浸漬法,在高溫和多倍量水或醇存在的情況下,浸漬法能有效提高提取效率[20-22]。同時,由于溶媒量是固定的,所以浸漬法可以獲得較高濃度的提取液。滲漉法通常是在常溫條件下,對于粘性藥材和無組織結(jié)構(gòu)的藥材其滲透性較差,因此提取效果不佳,提取質(zhì)量一般。另外,滲漉法是靠有效成分在溶媒和藥材組織中的濃度差實現(xiàn)提取的,所以大量的滲漉液會導致提取濃度比較低[11,16]。因此,從浸出液質(zhì)量來看,浸漬法優(yōu)于滲漉法。回流法往往與乙醇等揮發(fā)性有機溶劑一起浸提,需要反復操作,浸提液受熱時間長,不適合熱不穩(wěn)定的有效成分,因此,提取物質(zhì)量一般。蒸餾法通常針對中藥中具揮發(fā)性、難溶或不溶于水、與水不發(fā)生反應的成分的提取,具有提取質(zhì)量高、雜質(zhì)少等特點。壓榨法和升華法的提取物質(zhì)量都較低,不適于大量產(chǎn)品的提取和提純。

        2.3 有效性評價

        煎煮法適用于有效成分能溶于水且對濕熱較穩(wěn)定的藥材,有較大的局限性,對有效成分不溶于水或者加熱易揮發(fā)等不適用,整體有效性偏低[8-9]。滲漉法雖然提取液濃度較低,但是提取的比較徹底,對于有效成分含量較小的貴重藥材比較適合,有效性較高[11,16,22]。浸漬法對有效成分遇熱易揮發(fā)或易被破壞的藥材比較適用,但對于低溶解率或難溶性物質(zhì)其有效性較差[20-22]。回流法通常用乙醇等有機溶劑提取,對易溶于有機溶劑的成分提取效率高,質(zhì)量好。蒸餾法用于揮發(fā)油提取,適用于芳香水劑及注射劑制備中藥材揮發(fā)性成分的提取,通常無污染、成本較低,對揮發(fā)油的提取充分,提取質(zhì)量較好。壓榨法和升華法對于有效成分的提取損失率都較高,提取率偏低。

        綜上所述,中藥提取傳統(tǒng)技術(shù)各有特點、各有優(yōu)勢,在中藥材提取實踐中選擇方法時,必須根據(jù)中藥材植物的自身特點,目標有效成分的理化性質(zhì),結(jié)合人力物力,確定最適宜的技術(shù)方法,達到高效且高質(zhì)量的目的。

        3 展望

        藥用植物有效成分傳統(tǒng)提取技術(shù)經(jīng)過長期的檢驗并沿用至今,有其獨特的優(yōu)勢,然而,隨著時代的發(fā)展,特別是工業(yè)革命之后,標準化、規(guī)模化的設備和可控的生產(chǎn)工藝逐步誕生和發(fā)展,繼而有取代傳統(tǒng)技術(shù)的趨勢。傳統(tǒng)技術(shù)在原有的基礎上,進行現(xiàn)代化的革新是繼續(xù)生存下去的必由之路。針對其不足之處,可以從以下5個方面進行優(yōu)化和改進:(1)煎煮法的器具應增加過濾裝置。因某些藥材的煎煮過程時間略長,所以容器底部的藥渣會產(chǎn)生長時間堆積的現(xiàn)象。為避免質(zhì)變腐爛,應使用過濾裝置將煎煮液與廢棄的藥渣分離開并及時清理。(2)減少滲漉法和浸漬法溶劑消耗。溶劑消耗量大是這兩種方法的通病,對于使用過的溶劑可以考慮回收再利用。(3)縮短滲漉法和回流法的用時。對于耗時長的問題,建議通過其他操作手法,比如增加壓力、加大力度等,在不影響浸出液質(zhì)量的同時,盡量減少操作用時。(4)傳統(tǒng)提取技術(shù)與現(xiàn)代技術(shù)相結(jié)合。隨著科學的發(fā)展,以傳統(tǒng)技術(shù)原理為基礎,結(jié)合現(xiàn)代儀器,人們開發(fā)出一系列的新興技術(shù),具有高效、節(jié)能、環(huán)保等優(yōu)點??梢詫鹘y(tǒng)技術(shù)與現(xiàn)代技術(shù)相結(jié)合,填補缺陷,增加優(yōu)勢。(5)研發(fā)、改進傳統(tǒng)技術(shù)提取工具?,F(xiàn)在通用的提取工具大多是該項技術(shù)剛被研發(fā)時所發(fā)明的儀器,在使用過程中存在操作繁瑣、對設備參數(shù)要求高等問題,嚴重時會影響提取藥物的質(zhì)量。針對此類問題應結(jié)合現(xiàn)代技術(shù)積極研發(fā),改進傳統(tǒng)技術(shù)的提取工具,使中藥產(chǎn)業(yè)向現(xiàn)代化、科學化、產(chǎn)業(yè)化、精細化、標準化的方向邁進。

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