謝小兵,趙 明,王 斌,虎 威
(1.甘肅省祁連山水源涵養(yǎng)林研究院,甘肅 張掖 734000;2.甘肅省祁連山特有珍稀樹(shù)種保護(hù)繁育工程研究中心,甘肅 張掖 734000;3.祁連山特有植物繁育及推廣國(guó)家地方聯(lián)合工程研究中心,甘肅 張掖 734000)
茶藨子又被叫作麥粒醋栗,落葉灌木,生長(zhǎng)高度為1~2 m,幼枝光滑并帶有部分紅色,老枝呈現(xiàn)灰黑色。茶藨子在我國(guó)西北部廣泛分布,例如甘肅、新疆和青海等地[1]。
目前,茶藨子通常被稱為第三代新型果樹(shù),不但具有非常高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,還具有非常高的藥用價(jià)值[2]。不僅如此,茶藨子的果實(shí)具有豐富的維生素,可以將其果實(shí)制作成飲料和釀酒。其果實(shí)可以入藥,使用水進(jìn)行煎服可以治療感冒,對(duì)月經(jīng)不調(diào)起到作用,具有降血脂、補(bǔ)血、補(bǔ)腦等功效。使用沸水將茶藨子芽、花或嫩葉進(jìn)行浸泡,可以替代茶,不僅可以清熱,還可以明目、潤(rùn)干等[3-4]。茶藨子的果實(shí)、葉子和根中還含有很多黃酮類(lèi)活性物質(zhì),具有降低血脂、調(diào)整血壓、軟化血管等作用。研究顯示,每100 g 茶藨子中有74 mg 的黃酮。除此以外,茶藨子中含有的豆素類(lèi)化合物和黃酮類(lèi)化合物可以在農(nóng)藥殺蟲(chóng)領(lǐng)域發(fā)揮作用[5]。
茶藨子不僅可以當(dāng)作藥材進(jìn)行食用,同時(shí)還可以預(yù)防其他植物的病蟲(chóng)害。茶藨子具有巨大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和生態(tài)價(jià)值[6-8]。因此,研究茶藨子的種植和應(yīng)用具有非常重要的意義。
本次試驗(yàn)材料選擇了五裂茶藨子,插條來(lái)自青海某地,挑選生長(zhǎng)健壯、表現(xiàn)優(yōu)良、沒(méi)有病蟲(chóng)害的不同枝齡。插條長(zhǎng)度為8~12 cm,粗細(xì)均勻,而插條上面必須保留1~2 個(gè)頂芽。切口應(yīng)平滑,上切口要距離上芽0.5~1 cm,下切口要距離芽的下方1 cm 左右,切口上端和下端分為斜切和正切。
試驗(yàn)主要研究茶藨子扦插生根過(guò)程中其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的含量變化。研究分為兩種,第一種為同一條插條在不同時(shí)間營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)處理測(cè)定,第二種為不同條插條在同一時(shí)間營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的測(cè)定。設(shè)定試驗(yàn)組和對(duì)照組,從而針對(duì)兩組不同處理進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量的測(cè)定。
1.2.1 可溶性糖測(cè)定
本次試驗(yàn)中可溶性糖的測(cè)定使用蒽酮比色法。取得茶藨子的韌皮部分放進(jìn)烤箱中,110 ℃烘烤15 min,后將烤箱的溫度調(diào)節(jié)到70 ℃儲(chǔ)存12 h。將韌皮部分磨碎并稱取50 mg,將其作為樣品放到容量為10 mL 的離心管中,同時(shí)加入濃度為80%的酒精4 mL,進(jìn)行離心。將上清液收集,剩下的殘?jiān)俅渭尤霛舛葹?0%的酒精4 mL。重復(fù)兩次后提取,并且將上清液進(jìn)行合并。
在上清液中加入10 mg 活性炭,將其放入到溫度為80 ℃的水中,脫色30 min,定容到10 mL 的容器中,將得到的混合物進(jìn)行過(guò)濾,測(cè)定濾液。提取1 mL 濾液,加入5 mL 蒽酮試劑混合,經(jīng)過(guò)10 min 的沸水浴煮,自然冷卻。選取OD 值625 nm 波長(zhǎng)處進(jìn)行測(cè)定,將等量濃度為80%的酒精溶液作為對(duì)照組,記錄兩組的糖含量,記錄為標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1.2.2 淀粉含量測(cè)定
使用蒽酮比色法測(cè)定淀粉含量。提取可溶性糖的殘?jiān)?,加? mL 蒸餾水?dāng)嚢杈鶆颍糜诜兴‘?dāng)中進(jìn)行15 min 的糊化處理。待試樣冷卻后,加入2 mL 濃度為9.2 mol/L 的高氯酸充分?jǐn)嚢?。提?5 mL 攪拌均勻的溶液,進(jìn)行10 min 的離心操作。將離心處理后的上清液導(dǎo)入到25 mL 的容量瓶中,加入3 mL 蒸餾水,置于沸水浴中進(jìn)行15 min 的糊化護(hù)理。待冷卻以后加入2 mL 濃度為4.6 mol/L 的高氯酸溶液,繼續(xù)攪拌直至溶液均勻后,提取15 mL 溶液,再次進(jìn)行10 min 的離心處理。經(jīng)過(guò)離心后的上清液加入到容量瓶中,使用水對(duì)沉淀物洗滌1~2 次,再次離心。將合并離心之后溶液放到容量為25 mL 的容量瓶中,此時(shí)使用蒸餾水進(jìn)行定容,為測(cè)定淀粉含量完成試液準(zhǔn)備。
提取1 mL 待測(cè)定樣品放入到試管中,加入5 mL蒽酮試劑,快速搖勻,然后在沸水浴中煮泡10 min,煮泡完畢取出來(lái)冷卻。在波長(zhǎng)為625 nm 下測(cè)量OD 值,測(cè)得淀粉含量數(shù)據(jù),繪制曲線。
將原始數(shù)據(jù)錄入Excel,并根據(jù)數(shù)據(jù)繪制相關(guān)圖表。
使用DPS 軟件針對(duì)已經(jīng)記錄到的數(shù)據(jù)信息分析方差和顯著性,根據(jù)分析結(jié)果記錄試驗(yàn)結(jié)果。
茶藨子扦插生根過(guò)程中可溶性糖的含量變化如表1 所示。
根據(jù)表1 可知,針對(duì)試驗(yàn)組和對(duì)照組在進(jìn)行處理的過(guò)程中可溶性糖含量的變化規(guī)律如下。從開(kāi)始進(jìn)行扦插試驗(yàn)到第28 天,兩組數(shù)據(jù)間的差異呈現(xiàn)降低的趨勢(shì);第28 天到第56 天,對(duì)照組呈現(xiàn)出緩慢下降的趨勢(shì),而試驗(yàn)組則呈現(xiàn)出先升高后降低的變化趨勢(shì),這段時(shí)間的差異比較明顯;第56 天至第70 天,對(duì)照組和試驗(yàn)組可溶性糖含量的變化呈現(xiàn)出升高的趨勢(shì),對(duì)照組呈現(xiàn)的差異更為明顯,而試驗(yàn)組差異不明顯。
表1 茶藨子扦插過(guò)程中可溶性糖含量變化
通過(guò)對(duì)于扦插生根過(guò)程中植物形態(tài)的觀察可以得出,可溶性糖在急速下降時(shí),愈傷組織和根正在形成。
茶藨子插條在不同時(shí)間可溶性糖含量的方差分析如表2 所示。從表2 分析數(shù)據(jù)可知,不同的時(shí)間條件下,兩組中茶藨子插條的可溶性糖含量均呈現(xiàn)出顯著的差異(P<0.01)。
表2 茶藨子插條不同時(shí)間可溶性糖含量的方差分析
針對(duì)茶藨子扦插生根過(guò)程中淀粉含量的變化如表3 所示。
根據(jù)表3 可知,在扦插過(guò)程中,不論是對(duì)照組還是試驗(yàn)組,淀粉含量的變化規(guī)律如下。從開(kāi)始進(jìn)行扦插到第28 天,淀粉含量呈現(xiàn)逐漸減少的趨勢(shì),并且在第28 天的時(shí)候降低到最低點(diǎn),由此可以判斷出,當(dāng)愈傷組織正在形成時(shí)需要大量養(yǎng)分,而這些養(yǎng)分通過(guò)淀粉的降解所提供。
表3 茶藨子扦插過(guò)程中插條淀粉含量變化
茶藨子插條在不同時(shí)間淀粉含量方差分析如表4所示。
表4 茶藨子插條在不同時(shí)間淀粉含量的方差分析
無(wú)論是什么植物,在生根過(guò)程中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)會(huì)產(chǎn)生變化,因此營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是扦插生根過(guò)程中必要的條件。可溶性糖主要在植物進(jìn)行細(xì)胞分裂和呼吸代謝時(shí)為其提供能量和物質(zhì)基礎(chǔ)。植物細(xì)胞原生質(zhì)的主要組成部分是淀粉。淀粉在植物不定根發(fā)育過(guò)程中,可以將自身降解,從而轉(zhuǎn)化為單糖,為插條提供所需要的能量,起到間接調(diào)節(jié)的作用。
通過(guò)茶藨子扦插生根的試驗(yàn)表明,在插條的生長(zhǎng)過(guò)程中,茶藨子每一個(gè)生長(zhǎng)階段,插條的淀粉含量試驗(yàn)組都會(huì)高于對(duì)照組,而對(duì)于可溶性糖則正好相反,試驗(yàn)組會(huì)低于對(duì)照組;在整個(gè)試驗(yàn)周期內(nèi),愈傷組織形成期和根的誘導(dǎo)期,兩種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)都會(huì)呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。