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        五倍子單寧酸凝膠對仔豬生長性能、血液生化指標(biāo)及免疫指標(biāo)的影響

        2022-09-29 04:40:46陳亞強彭津津
        中國飼料 2022年14期
        關(guān)鍵詞:單寧酸五倍子凝膠

        陳亞強,彭津津

        (重慶三峽職業(yè)學(xué)院,重慶 404100)

        隨著國內(nèi)禁止在畜禽生產(chǎn)中添加促生長類飼料添加劑以來,其替代品研究受到越來越廣泛的關(guān)注,如何制備能提高動物生產(chǎn)性能、增強免疫力的替代品是畜牧業(yè)健康發(fā)展亟待解決的問題。五倍子是我國傳統(tǒng)中藥,占世界總產(chǎn)量的95%,其最多的活性成分為單寧酸(GTA),具有顯著的抗氧化、抗炎癥、抗病毒、抗腫瘤和改善腸道微生態(tài)環(huán)境等多種作用(茍昌勇,2021)。近年來,國內(nèi)外多個研究表明,以GTA作為飼料添加劑能提高動物生產(chǎn)性能及免疫力水平(童玉鑫等,2022)。此外,五倍子對口腔疾病有多方面功能,由此制成五倍子凝膠有利于口腔保?。▌⒂衩泛托祆o舒,2017)。因此,本試驗以斷奶仔豬為研究對象,探討前期研制的GTA凝膠對仔豬生長性能、血液生化指標(biāo)及免疫指標(biāo)的影響,以期為GTA凝膠作為新型添加劑在動物養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供理論支撐。

        1 材料與方法

        1.1 試驗材料 GTA購自西安西奧生物科技有限公司,水解單寧酸含量為50%;28日齡斷奶仔豬(杜×長×大)購自重慶萬州德康農(nóng)牧科技有限公司;牙齦卟啉單胞菌(ATCC33277)、具核梭桿菌(ATCC23276)由華南農(nóng)業(yè)大學(xué)提供;牛心腦浸液肉湯購自Sigma公司。

        1.2 凝膠制備 將N-甲基吡咯烷酮、三乙酸甘油酯按7∶3配成混合溶劑,加入35%濃度的聚乳酸-羥基乙酸共聚物,靜置,待完全溶解后加入GTA,攪拌均勻,制成含GTA終末濃度為80 g/kg的凝膠,常溫避光,連續(xù)緩慢攪拌5 d,4℃避光保存。

        1.3 試驗設(shè)計 制備終濃度為8%的GTA凝膠;采用單因素完全隨機試驗設(shè)計,將72頭體重相近健康斷奶仔豬分為4組,每組3個重復(fù),每重復(fù)6頭豬(公母各半),分別為空白組(不飼喂凝膠),對照組(飼喂空白凝膠),凝膠1組(GTA凝膠300 mg/kg·bw),凝膠2組(GTA凝膠600 mg/kg·bw),均在采食后飼喂給仔豬。試驗周期28 d。

        參照NRC(2012)豬營養(yǎng)需要和《中國飼料成分及營養(yǎng)價值表》(2018)設(shè)計玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧,營養(yǎng)水平參考發(fā)表文獻(xiàn)(茍昌勇,2021;鄧文等,2018)。

        1.4 飼養(yǎng)管理 在重慶和厚農(nóng)牧發(fā)展有限公司進(jìn)行動物試驗。試驗豬均在同一圈舍,每個重復(fù)組在同一欄,圈舍通風(fēng)采光良好,每日上午7:30(使用凝膠)、11:00和下午 2:00、7:30(使用凝膠)進(jìn)行4次飼喂,向采食后仔豬口腔注入終濃度為8%的GTA凝膠,自由采食飲水。按照常規(guī)操作進(jìn)行飼養(yǎng)管理,每日觀察豬群健康。

        1.5 測定指標(biāo)

        1.5.1 生長性能 在試驗開始前和結(jié)束當(dāng)天清晨,空腹稱重試驗豬,記錄初重、末重,并記錄日耗料量,計算平均日增重、平均日采食量和耗料增重比,具體公式如下:

        平均日增重=(末重-初重)/試驗天數(shù);

        平均日采食量=耗料量/(試驗天數(shù)×試驗頭數(shù));

        耗料增重比=耗料量/增重;

        1.5.2 血液生化指標(biāo) 試驗結(jié)束時,每個重復(fù)選取中等體重的3頭豬,采血10 mL,3 000 r/min離心10 min,-20℃保存,試劑盒測定血清中總蛋白、總膽固醇、尿素氮、血糖等指標(biāo)。

        1.5.3 免疫指標(biāo) ELISA法測定上述血清的IgA、IgM、IgG、IFN-γ、IL-1。

        1.5.4 體外抑菌試驗 取牙齦卟啉單胞菌、具核梭桿菌菌株分別接種于牛心腦浸液肉湯培養(yǎng)基,37 ℃ 厭氧(80%N2、10%H2、10%CO2)培 養(yǎng) 48 h,將細(xì)菌密度調(diào)整為1.5×108CFU/mL,均勻涂布培養(yǎng)基,厭氧培養(yǎng)48 h。

        將濾紙裁制成大小相同圓片,分別滴加GTA凝膠、生理鹽水、2%洗必泰,放置于3個上述制備的培養(yǎng)基,37℃厭氧培養(yǎng)4 d,測抑菌圈直徑。

        1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 采用SPSS 21.0進(jìn)行單因素方差分析,采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較,數(shù)據(jù)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,P<0.05表示組間差異顯著。

        2 結(jié)果

        2.1 對仔豬生長性能的影響 由表1可知,凝膠1組和凝膠2組能顯著提高仔豬日增重和平均日采食量(P<0.05),凝膠2組能顯著降低耗料增重比(P < 0.05)。

        表1 GTA凝膠對仔豬生長性能的影響

        2.2 對仔豬血清生化指標(biāo)的影響 由表2可知,凝膠1組能顯著降低血漿BUN濃度(P<0.05),凝膠2組能顯著提高血漿TP濃度(P<0.05)、極顯著降低血漿BUN濃度(P<0.01);對血漿TC、GLU濃度無顯著影響(P>0.05)。

        表2 GTA凝膠對仔豬血清生化指標(biāo)的影響

        2.3 對仔豬免疫指標(biāo)的影響 由表3可知,凝膠1組能顯著提高血漿IgA、IgM、IgG濃度(P<0.05);凝膠2組能顯著提高血漿IgA、IgG、IFN-γ濃度(P<0.05),極顯著提高血漿IgM濃度(P<0.01),極顯著降低血漿IL-1β濃度(P< 0.01)。

        表3 GTA凝膠對仔豬免疫指標(biāo)的影響

        2.4 體外抑菌試驗結(jié)果 由表4可知,GTA凝膠對牙齦卟啉單胞菌的抑菌圈大小為2.9 mm,對具核梭桿菌的抑菌圈大小為3.5 mm。

        表4 GTA凝膠體外抑菌試驗結(jié)果 mm

        3 討論

        凝膠制備飼料是目前仔豬飼料的發(fā)展趨勢之一(Miriam等,2012)。本研究制備的GTA凝膠在采食后直接注入口腔,主要考慮仔豬采食特點及口腔護(hù)理兩方面需求。

        單寧是單胃動物的“抗?fàn)I養(yǎng)因子”,能抑制動物生長(鄭翠玲,2022)。但近幾年研究表明,日糧添加GTA具有改善動物生長性能、調(diào)節(jié)腸道菌群及免疫促進(jìn)作用(Huang Q等,2018)。胡成等(2021)按照0.1%添加單寧酸至仔豬日糧,測得70日齡體重增加7.46 kg,且腹瀉率顯著降低。李建光等(2021)研究發(fā)現(xiàn),五倍子單寧酸能顯著提高仔豬日增重,且顯著優(yōu)于氧化鋅,并能減少腹瀉,提高仔豬生長性能。本研究發(fā)現(xiàn),凝膠2組不僅能顯著提高仔豬日增重和平均日采食量,且能顯著降低耗料增重比。

        血液生化指標(biāo)具有指示機體健康的作用,如TP反映蛋白質(zhì)吸收、TC反映脂代謝、BUN反映了腎臟代謝、GLU反映糖代謝。宋妍妍等(2021)研究發(fā)現(xiàn),0.51%的五倍子單寧酸添加能損傷仔豬肝臟,0.1%則無影響。鄭翠玲(2022)研究發(fā)現(xiàn),飼喂五倍子提取物能顯著提高仔豬血液總蛋白和球蛋白濃度,顯著降低尿素氮濃度。本研究同樣證實五倍子單寧酸對仔豬肝臟代謝有促進(jìn)作用,且使用劑量對仔豬肝臟無損害。

        當(dāng)機體受到抗原侵入時,IgG、IgA、IgM發(fā)揮著重要的免疫防御功能(Cheng Y等,2020)。解湧芳(2022)研究表明,添加2%或4%的單寧酸能使綿羊IgA、IgG、IgM含量顯著提高。IL-1β是一種促炎細(xì)胞因子,可加劇炎癥反應(yīng)。IFN-γ是抗炎因子,若IL-1β濃度降低、IFN-γ濃度提高能反映免疫應(yīng)答增強(范秋麗等,2022)。童玉鑫等(2022)研究表明,GTA顯著增加脾臟IFN-γ的mRNA表達(dá),從而提高免疫應(yīng)答。范秋麗等(2022)在研究發(fā)現(xiàn),添加250 mg/kg和500 mg/kg五倍子提取物能顯著提高空腸分泌型免疫球蛋白A和IFN-γ含量,且顯著降低IL-1β、IL-8和TNF-α濃度。本研究的兩個試驗組均能顯著提高血漿IgA、IgM、IgG濃度,且凝膠2組能顯著提高血漿IFN-γ濃度,極顯著提高IgM濃度,極顯著降低血漿IL-1β濃度,由于IFN-γ和IgM多在脾臟生成,因此,凝膠2組是否能增強脾臟功能有待于進(jìn)一步研究。

        本研究以2%洗必泰作為陽性對照,發(fā)現(xiàn)GTA凝膠對牙齦卟啉單胞菌和具核梭桿菌均有較好的抑菌效果,可同時作為預(yù)防口腔疾病的藥物使用。

        4 結(jié)論

        GTA凝膠可有效提高仔豬生長性能、代謝水平和免疫能力,最佳使用量為600 mg/kg·bw,且具備一定的預(yù)防口腔疾病作用。

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