郭 美，馬麗娟

（定西市人民醫(yī)院病理科，甘肅 定西74300）

宮頸癌是嚴(yán)重危害女性健康的惡性腫瘤，據(jù)世界衛(wèi)生組織報道，2018年全球有大約近57萬人新發(fā)宮頸癌，其中發(fā)展中國家和欠發(fā)達(dá)國家占76.2%[1]。人乳頭狀瘤病毒（Human papilloma virus，HPV）感染是公認(rèn)的導(dǎo)致宮頸癌的重要因素，其中至少有13種HPV 高危亞型感染可能引起宮頸癌前病變和宮頸癌[2]。一般情況下，HPV 感染并沒有明顯的臨床癥狀，且在有限的時間內(nèi)會被機(jī)體的免疫功能清除，但若高危型HPV 感染持續(xù)存在則會逐步發(fā)展為癌前病變甚至為癌。有文獻(xiàn)報道，由于地區(qū)、種族差異，HPV 總感染率及HPV 感染亞型分布存在明顯的地域差異性，即不同地區(qū)感染的亞型分布不同[3∕4]。目前尚未查到關(guān)于定西地區(qū)女性HPV 感染亞型分布的研究報道。所以，通過對定西地區(qū)女性HPV 感染狀況進(jìn)行統(tǒng)計分析，了解HPV 亞型分布特征，對于篩查高風(fēng)險人群，及早對高危HPV 感染人群進(jìn)行干預(yù)治療具有指導(dǎo)意義，為當(dāng)?shù)剡m齡女性選擇接種合適的HPV 疫苗降低該地區(qū)宮頸癌的發(fā)病率提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2017—2020 年在定西市人民醫(yī)院進(jìn)行高危人乳頭狀瘤病毒檢測女性（包括門診、住院及體檢人群）的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，共計10 322例，年齡16～90歲。所有樣本均由婦產(chǎn)科醫(yī)師使用宮頸刷采集宮頸脫落細(xì)胞，置于宮頸細(xì)胞保存液中，立即送檢。

1.2 儀器與試劑

杭州博日科技有限公司基因擴(kuò)增儀，型號TC-25∕H，潮州凱普醫(yī)用核酸分子快速雜交儀，型號YYZ1005040，潮州凱普生物化學(xué)有限公司人乳頭狀瘤病毒（HPV）21 分型檢測試劑盒（PCR+膜雜交法）。

1.3 方法

1.3.1 DNA分離提取

取保存有宮頸細(xì)胞的細(xì)胞保存液0.5 mL，以14，000 rpm 離心1 min，棄上清，嚴(yán)格按照試劑盒說明書使用裂解液提取DNA。取1 ul 抽提好的DNA樣本作為模板進(jìn)行PCR 擴(kuò)增，剩余DNA 樣品存儲于-20℃?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 PCR擴(kuò)增

將PCR 混合液、DNA 聚合酶和DNA 模板按試劑盒要求混勻，擴(kuò)增反應(yīng)體系為25 ul∕反應(yīng)，混勻，上機(jī)擴(kuò)增。

1.3.3 雜交

嚴(yán)格按照試劑盒說明操作，檢測結(jié)果陽性點(diǎn)為清晰可見的藍(lán)紫色圓點(diǎn)，根據(jù)膜條HPV 分型分布圖判斷感染類型。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS 23.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，各年齡組之間的樣本率比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 高危型HPV總體感染情況

在10 322 例檢測樣本中，檢出高危型HPV 感染2 210例，感染率為21.41%（2210∕10322）。以單一感染為主，共1699 例，占高危型HPV 感染率的76.88%（1699∕2210）。雙重及多重感染511 例，占高危型HPV總感染率的23.12%（511∕2210）。

2.2 高危型HPV各亞型感染情況

在10 322 例檢測樣本中，HPV16 感染者共483例，占總樣本量的4.68%（483∕10 322），感染率最高，其次分別為HPV58（4.53%，468∕10 322）、HPV52（4.10%，423∕10 322），見表1。

表1 定西地區(qū)女性高危型HPV各亞型感染情況[例（%）]

2.3 高危型HPV感染年齡分布情況

將10 322 例檢測病例分為6 個年齡段，分析高危型HPV 感染情況。由表2 可見，高危HPV 感染的高發(fā)年齡段為60～69 歲，總感染率為30.30%（110∕363），其次是≥70 歲（24.78%，29∕117）和50～59 歲（22.70%，422∕1 859）。各年齡段之間總感染率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=2211，P＜0.05），見表2。

表2 高危型HPV感染的年齡分布情況[例（%）]

3 討論

人乳頭狀瘤病毒（HPV）是一種含雙鏈DNA、無包膜、20 面體對稱的核殼病毒，是最常見的性接觸傳播病原微生物之一。通過皮膚或黏膜微小損傷進(jìn)入接觸者皮膚黏膜，刺激上皮細(xì)胞增生，引起人類惡性腫瘤和疣。20 世紀(jì)70 年代，Zur Hausen 提出HPV 與子宮頸癌發(fā)病可能有關(guān)的假設(shè)。2008 年10月6 日，Zur Hausen 獲諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎。世界衛(wèi)生組織已確認(rèn)，宮頸癌的主要致病原因是HPV，幾乎所有的宮頸癌標(biāo)本中都可以找到HPV，使宮頸癌成為目前人類所有癌癥中唯一病因明確、唯一可以早期預(yù)防和治療、唯一可以消滅的癌癥。正常宮頸受到高危型HPV 持續(xù)感染之后才會發(fā)生病變，從癌前病變發(fā)展為癌要經(jīng)過5～10 年的時間，所以定期檢測HPV，及早注射HPV 疫苗是預(yù)防宮頸癌的可靠方法。

研究表明，HPV 的感染率、感染型別和模式特征具有地域差異性[5]。本研究對10 322 例采集的HPV 樣本進(jìn)行回顧性分析，統(tǒng)計出定西地區(qū)婦女高危型HPV的感染率為21.41%，接近多省市統(tǒng)計的女性高危型HPV 感染率23.20%[6]。其中以單一感染為主，占76.88%，明顯低于呂靜等[7]研究報道的高危型HPV 單一感染率80.55% 和高超等[8]報道的81.80%。感染率最高的基因型是HPV16，其次是HPV58 和HPV52，與國內(nèi)眾多研究結(jié)果相似，楊赟平等[9]研究報道高危型HPV16 檢出率最高，其次為HPV52 和HPV58；李冬梅等[10]研究報道HPV16 和HPV52 檢出率最高；LI 等[11]研究報道四川地區(qū)HPV52、HPV58、HPV16 和HPV51 檢出率最高；高超等[8]研究發(fā)現(xiàn)吉林長春地區(qū)體檢人群中HPV16 和HPV52 檢出率最高。此結(jié)論說明定西地區(qū)婦女高危型HPV 感染率與全國大多數(shù)地區(qū)感染率及感染型別地域差異性不大，HPV16、HPV58 和HPV52 仍然是定西地區(qū)女性感染的常見亞型。

通過對樣本不同年齡段分組結(jié)果顯示，50 歲以上是感染高危型HPV 的高峰年齡，尤其60～69 歲感染率最高，各年齡段之間感染率差異有統(tǒng)計學(xué)意義，但與國內(nèi)多省市報道的不同年齡段HPV 檢出率呈雙峰分布的結(jié)論有差異[12-14]，此結(jié)論體現(xiàn)了高危型HPV分布年齡段的地域差異性。

4 結(jié)論

定西地區(qū)女性高危型HPV 感染率與國內(nèi)多省市地區(qū)感染率相似，感染模式以單一感染為主，感染型別以HPV16 型最為常見，其次為HPV58 和HPV52 型。不同年齡段高危型HPV 感染率存在顯著差異，60～69 歲感染率最高，可能與定西部分地區(qū)經(jīng)濟(jì)生活條件較為落后，衛(wèi)生條件差，個人疾病預(yù)防觀念薄弱，延誤了宮頸病變早期篩查時間有關(guān)。由此可見，及早接種HPV 九價疫苗科能有效降低該地區(qū)女性高危型HPV感染率，而HPV九價疫苗的適宜接種年齡段為16～26歲，所以，應(yīng)加強(qiáng)對定西地區(qū)年輕女性的健康教育，定期進(jìn)行HPV篩查。