廖偉祥,林慶裕,申雁鳴,康曉明
(1.廣州市胸科醫(yī)院內(nèi)六科;2.廣州市胸科醫(yī)院病案室;3.廣州市胸科醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東廣州 510030)
結(jié)核性腦膜炎(tuberculous meningitis,TBM)是結(jié)核分枝桿菌導(dǎo)致的腦脊膜非化膿性炎癥疾病[1]。TBM屬于最嚴(yán)重的結(jié)核病,常合并肺結(jié)核的發(fā)生,死亡率及中樞神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥的發(fā)生率高達(dá)50%。早診斷、早治療是降低結(jié)核性腦膜炎致殘率以及病死率的關(guān)鍵[2]?;诖?,本研究探討4種不同檢驗(yàn)技術(shù)對早期診斷TBM的臨床價(jià)值,為盡早診斷TBM提供臨床參考依據(jù),現(xiàn)報(bào)道如下。
1.1 一般資料 選取2021年1月至2022年1月廣州市胸科醫(yī)院收治的152例TBM患者為研究對象進(jìn)行回顧性分析。根據(jù)是否診斷為TBM分為TBM組(79例,診斷為結(jié)核性腦膜炎)和非TBM組(73例,診斷為其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病且未合并活動(dòng)性肺結(jié)核),根據(jù)是否合并合并活動(dòng)性肺結(jié)核(PTB)將TBM組患者分為A組(46例,TBM合并PTB患者)和B組(33例,沒有合并PTB的TBM患者)。TBM組患者中男性52例,女性27例;年齡18~84歲,平均年齡(34.11±3.14)歲。非TBM組患者中男性50例,女性23例;年齡17~80歲,平均年齡(33.23±3.28)歲。A組患者中男性33例,女性13例;年齡18~74歲,平均年齡(34.43±3.59)歲。B組患者中男性19例,女性14例;年齡18~84歲,平均年齡(34.11±3.14)歲。4組患者性別、年齡等一般資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),組間具有可比性。本研究經(jīng)廣州市胸科醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn):①符合2009年于南非開普敦召開的關(guān)于結(jié)核性腦膜炎的經(jīng)驗(yàn)交流國際會(huì)議上TBM的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3];②無其他器質(zhì)性病變。排除標(biāo)準(zhǔn):①臨床資料不完整;②無意配合研究者。
1.2 檢驗(yàn)方法 腦脊液抗酸桿菌培養(yǎng):抽取所有患者腦脊液3 mL為標(biāo)本于無菌離心試管中,以3 000 r/min離心15 min富集,培養(yǎng)管中加入0.8 mL營養(yǎng)添加劑(美國BD公司)與雜菌抑制劑(美國BD公司)混合物;取0.5 mL樣本沉淀接種至MGIT培養(yǎng)管上機(jī)培養(yǎng)。若培養(yǎng)陽性,約15 d報(bào)告陽性結(jié)果,培養(yǎng)42 d后若未報(bào)告陽性則判斷為陰性[4]。腦脊液結(jié)核抗體(CSF ATA):利用斑點(diǎn)免疫膠體金滲濾技術(shù)檢驗(yàn)?zāi)X所有患者脊液中的結(jié)核抗體。試劑盒購自上海奧普生物醫(yī)藥股份有限公司。嚴(yán)格遵循說明書操)作試驗(yàn)以及判讀結(jié)果。腦脊液GeneXpert MTB/RIF(CSF Xpert):抽取所有患者腦脊液3 mL,以3 000 r/min離心15 min后富集,留取1 mL沉淀;加入1 mL樣本處理液混勻15 min,然后將2 mL樣品混合物加入到GeneXpert檢測匣中,按照生產(chǎn)商使用說明,將檢測匣裝載到GeneXpert儀器(Cepheid,型號:GX-XVI R2)中,上機(jī),自動(dòng)判讀結(jié)果[5]。血γ 干擾素釋放試驗(yàn)(IGRAs):使用購自英國Oxford公司的T-SPOT.TB試劑盒完成,嚴(yán)格按照試劑說明書和廣州市胸科醫(yī)院檢驗(yàn)科SOP文件操作。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):陰性對照斑點(diǎn)數(shù)<6時(shí),A或B抗原孔減去陰性對照所得斑點(diǎn)數(shù)≥6判為陽性;陰性對照計(jì)數(shù)≥6時(shí),檢測孔斑點(diǎn)數(shù)≥2倍陰性對照計(jì)數(shù),判定為陽性[6]。
1.3 觀察指標(biāo) ①比較4種技術(shù)檢測結(jié)果。以液體培養(yǎng)法為標(biāo)準(zhǔn),收集患者抗結(jié)核治療前的腦脊液,經(jīng) 4%NaOH溶液處理,取 0.1mL接種于酸性羅氏培養(yǎng)基,置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng),腦脊液標(biāo)本按照MGIT生產(chǎn)規(guī)范進(jìn)行培養(yǎng)。②分析4種技術(shù)檢測結(jié)核性腦膜炎的效能。敏感度=真陽性例數(shù)/(真陽性例數(shù)+假陰性例數(shù))×100%;特異度=真陰性例數(shù)/(真陰性例數(shù)+假陽性例數(shù))×100%;陽性預(yù)測值=真陽性例數(shù)/(真陽性例數(shù)+假陽性例數(shù))×100%;陰性預(yù)測值=真陰性例數(shù)/(真陰性例數(shù)+假陰性例數(shù))×100%。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以[例(%)] 表示,多組間比較采用Bonferroniχ2檢驗(yàn)。一致性采用Kappa檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 4種技術(shù)檢測結(jié)果比較 4種不同檢測技術(shù)陽性及陰性情況比較,見表1。
表1 4種技術(shù)檢測結(jié)果比較
2.2 4種技術(shù)檢測結(jié)核性腦膜炎的效能分析 抗酸桿菌培養(yǎng)檢測TBM的敏感度為0.014,特異度為0.100,準(zhǔn)確性為0.525,陽性預(yù)測值為0.100,陰性預(yù)測值為0.052,Kappa值為0.134;CSF ATA檢測TBM的敏感度為0.127,特異度為0.099,準(zhǔn)確度為0.454,陽性預(yù)測值為0.091,陰性預(yù)測值為0.051,Kappa值為0.103;CSF Xpert檢測TBM的敏感度為0.037,特異度為0。100,準(zhǔn)確性為0.653,陽性預(yù)測值為0.100,陰性預(yù)測值為0.059,Kappa值為0.358;IGRAs檢測TBM的敏感度為0.081,特異度為0.095,準(zhǔn)確性為0.485,陽性預(yù)測值為0.094,陰性預(yù)測值為0.082,Kappa值為0.738;IGRAs 聯(lián)合CSF Xpert 檢測TBM的敏感度為0.089,特異度為0.095,準(zhǔn)確性為0.759,陽性預(yù)測值為0.095,陰性預(yù)測值為0.088,Kappa值為0.829。見表2。
表2 4種技術(shù)檢測結(jié)核性腦膜炎的效能分析
TBM是預(yù)后最差的一種結(jié)核病,并且目前臨床上針對該病的早期快速診斷仍存在較大的困難。
Xpert技術(shù)將抗酸桿菌培養(yǎng)至少3周才能完成的檢測時(shí)間縮短為2 h[7],且該技術(shù)操作簡單,整個(gè)實(shí)驗(yàn)手動(dòng)操作時(shí)間不超過5 min,檢測結(jié)果不會(huì)因人而異,整個(gè)檢驗(yàn)過程在密閉的環(huán)境中進(jìn)行,對實(shí)驗(yàn)室人員及環(huán)境具有比較好的保護(hù)[8]。Xpert檢測系統(tǒng)因其具有全封閉、全自動(dòng)化操作、污染可能性小、人為錯(cuò)誤少、結(jié)果精確度高、檢測周期短、敏感度高等優(yōu)勢[9],且可對利福平進(jìn)行耐藥檢測,對結(jié)核病的診斷具有重要意義。但是,該技術(shù)對結(jié)核菌含量較少的腦脊液檢出陽性率較低,另外,如果患者檢測前曾使用過抗癆藥物,也會(huì)影響的其結(jié)果。本研究結(jié)果顯示,血IGRAs的敏感度高于CSF Xpert、CSF抗酸桿菌培養(yǎng)、CSF ATA。但CSF Xpert敏感度高于抗酸桿菌培養(yǎng)、CSF ATA,盡管分子生物學(xué)原則上具有較高的靈敏度,但在本研究中相對于培養(yǎng)和抗酸染色,仍有假陰性存在。
本研究結(jié)果顯示,血IGRAs檢測具有較高的陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測、敏感度及特異度。并且進(jìn)一步比較,即使是沒有合并活動(dòng)性肺結(jié)核的單純性結(jié)核性腦膜炎,其陽性率也高達(dá)0.082,在各種檢測方法中具有較明顯的優(yōu)勢。在患者抵觸有創(chuàng)操作的情況下,簡單無創(chuàng)的血IGRAs檢測則可作為首選的檢測方法。
另外,本研究結(jié)果還顯示,血IGRAs聯(lián)合CSF Xpert檢測可進(jìn)一步提高TBM診斷的敏感度,為早期有效診斷TBM提供重要依據(jù),并且能快速、特異地檢測出腦脊液中結(jié)核分枝桿菌以及患者是否對利福平耐藥。因此,臨床上推薦血IGRAs聯(lián)合CSF Xpert檢測,以提高早期診斷結(jié)核性腦膜炎的準(zhǔn)確性,從而讓患者盡早獲取有效的抗結(jié)核治療方案,從而降低TBM的病死率及致殘率。
在TBM患者中,行ATA、抗酸桿菌培養(yǎng)、Xpert檢查,由于所取標(biāo)本為腦脊液,其檢驗(yàn)結(jié)果與患者肺病是否存在結(jié)核病灶并無關(guān)聯(lián)。而血IGRAs檢測為血清免疫學(xué)檢驗(yàn)手段,其檢驗(yàn)結(jié)果與患者罹患結(jié)核的部位并無關(guān)聯(lián)。本研究的A、B組檢驗(yàn)結(jié)果比較顯示,兩組患者間CSF抗酸桿菌培養(yǎng)、CSF ATA、CSF Xpert及血IGRAs比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
綜上所述,血IGRAs是診斷結(jié)核病的重要依據(jù),血IGRAs聯(lián)合CSF Xpert檢測具有較高敏感度及特異度,并且成本較低,效益相對較高,對TBM的早期診斷具有重要的臨床價(jià)值,值得應(yīng)用。