燕文敬，龔美亮，陳 瑞，焦 嬌，李玉茹，王 坤

解放軍總醫(yī)院第二醫(yī)學(xué)中心 檢驗(yàn)科，國(guó)家老年疾病臨床研究中心，北京 100853

N-乙酰-β-氨基葡萄糖酶(N-acetyl- β- glucosaminase，NAG)是細(xì)胞溶酶體內(nèi)的一種酸性水解酶，在腎單位近曲小管上皮細(xì)胞內(nèi)含量豐富，正常情況下尿液中NAG含量較低，腎小管受損時(shí)，會(huì)導(dǎo)致大量NAG釋放入尿液，引起尿液中NAG升高。研究已證實(shí)尿NAG升高是腎早期損傷的敏感指標(biāo)[1-3]。因尿液稀釋和濃縮的影響，隨機(jī)尿中成分濃度或活性檢測(cè)結(jié)果重復(fù)性較差，尿肌酐(creatinine，Crea)每日排除量較為穩(wěn)定，隨機(jī)尿液中肌酐的濃度可以反映尿液的濃縮程度，臨床上常用尿肌酐作為其他排泄物的校正因子，計(jì)算隨機(jī)尿液中NAG/Crea的比值，即可及時(shí)反映腎小管受損情況，也能減少因隨機(jī)尿液濃縮程度差異帶來(lái)的影響，臨床上得到廣泛應(yīng)用[4-5]。目前并沒(méi)有已達(dá)成共識(shí)的老年人群尿液NAG/Crea參考范圍，為了給臨床診療提供更加完善的輔診依據(jù)，本研究旨在探討老年群體尿液NAG、NAG/Crea的參考范圍。

資料與方法

1 資料 選擇解放軍總醫(yī)院第二醫(yī)學(xué)中心2021年4 - 7月健康查體人員體檢資料。排除標(biāo)準(zhǔn)：臨床診斷為糖尿病、高血壓、腎功能異常、腫瘤或其他惡性疾病。

2 NAG和尿肌酐檢測(cè) 采用西門子全自動(dòng)生化分析儀Dimension EXL(德國(guó)，西門子醫(yī)療器械公司)，NAG檢測(cè)試劑盒(京械注準(zhǔn)20152400968)及相應(yīng)校準(zhǔn)品、質(zhì)控品(北京九強(qiáng)生物技術(shù)股份有限公司)；尿肌酐檢測(cè)試劑為西門子廠家原裝試劑。

3 分組和分析指標(biāo) 世界衛(wèi)生組織將≥60歲人群定義為老年群體[6]。本組依此將實(shí)驗(yàn)對(duì)象分為青壯年組(＜60歲)和老年組(≥60歲)，比較兩組人員尿液標(biāo)本NAG、NAG/Crea差異性。NAG/Crea=尿NAG活性/尿肌酐濃度。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理使用SPSS19.0軟件完成。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以±s表示，非正態(tài)分布的計(jì)量數(shù)據(jù)以Md(IQR)表示。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)(百分比)表示，組間差異比較采用χ2檢驗(yàn)。尿液NAG、NAG/Crea參考范圍制定為2.5 ～ 97.5分位數(shù)(P2.5～P97.5)；確定參考范圍制定是否需要區(qū)分性別和年齡采用Z檢驗(yàn)，若Z＞Z*則需要分組建立各自的參考范圍[7]。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 兩組尿液NAG/Crea等指標(biāo)年齡比較 共納入915例體檢者，年齡分布在21 ～ 98歲，男性525例(57.4%)，女性390例(42.6%)。青壯年組419例，老年組496例。受限于單中心樣本來(lái)源的局限性，兩組性別組成差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=163，P＜0.001)，但本實(shí)驗(yàn)納入對(duì)象標(biāo)準(zhǔn)和數(shù)量完全符合《WS/T 402-2012 臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制定》文件要求。尿NAG參考范圍的制定不需考慮年齡因素(Z＜Z*)，尿NAG/Crea參考范圍的制定需要區(qū)分年齡差異(Z＞Z*)。由表1知，兩年齡段數(shù)據(jù)Z檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量Z明顯小于臨界Z*(即無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異)，符合相應(yīng)的定義/要求。兩年齡段數(shù)據(jù)Z檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量Z已大于臨界Z*(即有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異)，佐證了相應(yīng)的定義/要求。

2 兩組尿液NAG/Crea等指標(biāo)性別比較 尿NAG、NAG/Crea參考范圍的制定均不需考慮性別因素(Z＜Z*)。見(jiàn)表2。

3 NAG和NAG/Crea參考范圍分析 尿液NAG參考范圍為3.53 ～ 24.48 U/L。尿液NAG/Crea參考范圍：＜60歲為4.24 ～ 21.93 U/g·Cr，≥60老年人群為4.61 ～ 27.83 U/g·Cr。見(jiàn)表3。

表 1 不同年齡分組參考范圍Z檢驗(yàn)Tab. 1 Reference interval Z-test grouped by age

表 2 不同性別分組參考范圍Z檢驗(yàn)Tab. 2 Reference interval Z-test grouped by sex

討 論

2019年末，我國(guó)60歲及以上人口約有2.54億，占總?cè)丝诘?8.4%[8]。老年人群因身體功能的逐漸下降，激素水平、代謝能力等方面都異于年輕群體，所以在檢驗(yàn)工作中，制定老年人群檢測(cè)項(xiàng)目的參考范圍尤為必要，當(dāng)前已有不少研究用于制定老年人檢測(cè)項(xiàng)目的參考范圍，如紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血漿D二聚體水平等[9-10]。目前還沒(méi)有老年群體尿液NAG/Crea的參考范圍。

尿NAG作為腎損傷的一個(gè)敏感度較高的指標(biāo)，其升高要早于尿素氮、內(nèi)生肌酐清除率、腎小球?yàn)V過(guò)率等[11-12]。研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)基礎(chǔ)疾病并發(fā)癥涉及腎時(shí)，尿NAG可以作為一種腎標(biāo)志物用來(lái)衡量患者的病情[13-16]。最新證據(jù)表明尿NAG不僅可以反映腎小管的受損程度，還與動(dòng)脈粥樣硬化有較強(qiáng)的相關(guān)性。Kim等[17]在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，尿NAG與頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度高度相關(guān)，推測(cè)可能是腎小管受損后發(fā)生氧化應(yīng)激反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生相應(yīng)的物質(zhì)，進(jìn)一步引發(fā)斑塊的聚集。

表 3 NAG和NAG/Crea參考范圍Tab. 3 NAG and NAG/Crea reference ranges

本研究結(jié)果顯示，隨機(jī)尿NAG活性水平?jīng)]有表現(xiàn)出年齡、性別上的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。分析其原因， NAG活性受限于隨機(jī)尿液的濃縮情況而產(chǎn)生較大的隨機(jī)誤差，而尿肌酐每日排除總量較為穩(wěn)定，引入尿肌酐作為修正因子，采用NAG/Crea作為評(píng)估指標(biāo)可以減少因隨機(jī)尿液濃縮程度不同產(chǎn)生的隨機(jī)誤差，提高臨床診斷的準(zhǔn)確性。Liu等[18]實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示尿NAG活性隨著年齡的增長(zhǎng)而升高，且男性的活性要高于女性。我們認(rèn)為，隨機(jī)尿本身NAG活性檢測(cè)結(jié)果并不穩(wěn)定，另外單中心數(shù)據(jù)來(lái)源也會(huì)造成偏差，且我們的實(shí)驗(yàn)主要針對(duì)老年人群，從樣本年齡架構(gòu)上，兩個(gè)實(shí)驗(yàn)存在不同，采用不同的試劑也可能產(chǎn)生偏差。Liu等的實(shí)驗(yàn)并沒(méi)有引入尿肌酐這個(gè)校正因子做進(jìn)一步比對(duì)。我們通過(guò)尿Crea比對(duì)后得出結(jié)論，尿NAG/Crea值隨著年齡的增長(zhǎng)而升高，但不同性別的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

本實(shí)驗(yàn)存在的局限：1)受限于單中心樣本來(lái)源的局限性，性別比例差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，有待多中心、跨區(qū)域、大樣本量數(shù)據(jù)的支持完善；2)是雖然提出了參考范圍，但缺少對(duì)早期腎損傷患者的驗(yàn)證，下一步將進(jìn)行臨床驗(yàn)證。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)初步建立了老年人群尿NAG、NAG/Crea的參考范圍，其中尿NAG參考范圍為3.53 ～ 24.48 U/L；尿NAG/Crea參考范圍為＜60歲人群4.24 ～ 21.93 U/g·Cr，≥60歲老年人群4.61 ～ 27.83 U/g·Cr。