侯 靚，陳子?xùn)|，劉照清，劉一平

（湖南省農(nóng)藥檢定所，湖南 長沙 410005）

吡蟲啉，英文通用名：imidacloprid，化學(xué)名稱：1-（6-氯吡啶-3-吡啶基甲基）-N-硝基亞咪唑烷-2-基胺，其結(jié)構(gòu)式見圖1。吡蟲啉是煙堿類超高效殺蟲劑，具有廣譜、高效、低毒、低殘留、不易產(chǎn)生抗性，對人畜安全等特點(diǎn)，主要用于防治刺吸式口器害蟲[1-3]，能夠有效防治菠菜蚜蟲。

圖1 吡蟲啉化學(xué)結(jié)構(gòu)式

有很多關(guān)于吡蟲啉殘留在蔬菜、水果和其他作物[4-5]中的報(bào)道，吡蟲啉的檢測基本采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行，研究成本較高。本文采用固相萃取的前處理方法，結(jié)合HPLC-DAD 快速檢測吡蟲啉在菠菜中的殘留量，研究了吡蟲啉在菠菜中的消解情況，評價(jià)了10%吡蟲啉可濕性粉劑在菠菜上的安全使用及殘留情況。

1 材料與方法

1.1 儀器設(shè)備與實(shí)驗(yàn)試劑

1.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑

二氯甲烷、乙腈等，AR/GR，美國TEDIA 公司；吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)品，純度為99%，Dr.Ehrenstorfer GmbH；10%吡蟲啉可濕性粉劑，WP，本實(shí)驗(yàn)室研制；無水硫酸鈉、氯化鈉，AR，上海國藥集團(tuán)。

1.1.2 儀器設(shè)備

電子天平，AB204-E，瑞士梅特勒公司；高速冷凍離心機(jī)，H2050R-1，長沙湘儀有限公司；液相色譜儀，Agilent 1260 HPLC-DAD，美國安捷倫公司；高速組織分散器，IKAT-25，德國IKA 公司。

1.2 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)

按農(nóng)藥殘留試驗(yàn)準(zhǔn)則要求，2018 年和2019 年在天津市、長沙市和廈門市開展10%吡蟲啉WP 在菠菜上的殘留試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)田設(shè)置有15 m2的處理小區(qū)，每個(gè)處理含有3 個(gè)重復(fù)，處理小區(qū)間有保護(hù)隔離帶，并設(shè)有空白對照小區(qū)。降解動態(tài)試驗(yàn)噴施67.5 g ai/ha 的藥劑在長至一半大小時(shí)的菠菜上，并在施藥后按照2 h、1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d 時(shí)間采集7 次菠菜樣品；最終殘留試驗(yàn)則設(shè)計(jì)為空白對照、45 g ai/ha 濃度藥液施藥2 次和3 次以及67.5 g ai/ha 濃度藥液施藥2 次和3 次5 個(gè)處理。在最后一次用藥結(jié)束后間隔3、5、7 d 采集12 顆以上的菠菜樣品，處理后保存于-20 ℃冰箱中待測。

1.3 分析方法

1.3.1 樣品前處理

樣品前處理流程見圖2。

圖2 樣品前處理流程圖

1.3.2 液相色譜條件

儀器型號：Agilent 1260 HPLC-DAD；色譜柱：C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，10 μm）；檢測器：DAD；柱溫：40 ℃；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣體積：20 μL；吸收波長：270 nm。

梯度洗脫條件如表1：

表1 梯度洗脫條件

1.3.3 添加回收試驗(yàn)

在菠菜空白樣品中分別添加0.02 mg/kg、0.2 mg/kg和1.0 mg/kg 的吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個(gè)濃度重復(fù)添加5 個(gè)樣品，并設(shè)置空白對照。按1.3.1 和1.3.2 處理并檢測吡蟲啉，計(jì)算其添加回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2 結(jié)果與分析

2.1 添加回收率和精密度

吡蟲啉的回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果顯示，當(dāng)添加水平為0.02 mg/kg～1.0 mg/kg 時(shí)，吡蟲啉在菠菜中回收率為97.5%～109.5%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差1.7%～5.0%，符合農(nóng)藥殘留分析的要求，具體數(shù)據(jù)見表2。在上述色譜條件下吡蟲啉的LOD 為0.02 mg/kg，LOQ 為0.2×10-9g，保留時(shí)間8.77 min 左右。

表2 菠菜中吡蟲啉的回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=5）

2.2 消解動態(tài)試驗(yàn)結(jié)果

菠菜噴灑10%吡蟲啉可濕性粉劑后，菠菜中吡蟲啉殘留量均隨時(shí)間減少，消解規(guī)律滿足一級動力學(xué)方程。吡蟲啉在菠菜中的半衰期為2.1 d。

2.3 最終殘留試驗(yàn)結(jié)果

按照1.2 田間試驗(yàn)設(shè)計(jì)最終殘留試驗(yàn)采用10%吡蟲啉WP 在蚜蟲初發(fā)期對菠菜進(jìn)行噴霧，用藥濃度分別為45 g ai/ha 和67.5 g ai/ha，兌水噴霧2 次～3 次，施藥每次間隔7 d，檢測結(jié)果顯示，3 d 收獲時(shí)殘留量（露地）范圍在0.12 mg/kg～1.23 mg/kg 間，殘留量（大棚）范圍在0.36 mg/kg～2.35 mg/kg；5 d 收獲時(shí)殘留量（露地）范圍在＜0.02 mg/kg～0.82 mg/kg 間，殘留量（大棚）范圍在0.12 mg/kg～1.33mg/kg；7 d 收獲時(shí)殘留量（露地）范圍在＜0.02 mg/kg～0.49 mg/kg 間，殘留量（大棚）范圍在0.18 mg/kg～0.95 mg/kg。

3 結(jié)論

按照農(nóng)藥殘留量分析與檢測的技術(shù)要求，本文建立了一種運(yùn)用HPLC-DAD 快速檢測菠菜中吡蟲啉殘留量的方法并探究了吡蟲啉在菠菜中的消解規(guī)律。消解動態(tài)結(jié)果顯示，吡蟲啉在菠菜中的降解半衰期為2.1 d，屬于易降解農(nóng)藥[6]。收獲期菠菜中吡蟲啉的殘留量均低于我國殘留限量值（MRL）5 mg/kg。因此，采用10%吡蟲啉可濕性粉劑，防治菠菜蚜蟲，最高施藥制劑用量450 g/hm2（有效成分45 g ai/ha），每季最多施藥2 次，安全采收間隔期7 d。