王 旭，萬曉莉*，楊海明，單昊書，肖宇航，劉文峰，劉文沛

（1.揚州大學動物科學與技術學院，江蘇揚州 225009 ；2.鎮(zhèn)江市動物疫病預防控制中心，江蘇鎮(zhèn)江 212000）

隨著畜禽養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展，蛋白質(zhì)飼料原料短缺問題日益突出，畜禽規(guī)模養(yǎng)殖污染導致環(huán)保壓力增大，制約著我國飼料工業(yè)和畜禽養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展，低蛋白質(zhì)精準營養(yǎng)研究將成為畜禽養(yǎng)殖業(yè)未來發(fā)展的趨勢。大量研究表明，適當降低飼糧中粗蛋白質(zhì)水平，并補充結晶氨基酸，對蛋雞生產(chǎn)性能沒有不良影響。高溫也是影響蛋白質(zhì)利用效率的重要因素。在高溫環(huán)境中，飼喂高蛋白質(zhì)飼糧會因熱量增加而加速體內(nèi)熱量的產(chǎn)生。適當降低飼糧粗蛋白質(zhì)水平，并添加人工合成氨基酸可以緩解家禽高溫應激帶來的負面影響。青蒿是一種菊科蒿屬草本植物，在我國傳統(tǒng)中醫(yī)學中被廣泛應用。青蒿中含有結構類型多樣的化學成分，主要有倍半萜、二萜和黃酮等，具有抑菌殺蟲、解熱抗炎等藥理活性。Payam 等研究發(fā)現(xiàn)，在蛋雞飼糧中添加75 g/kg 青蒿可提高蛋雞飼料轉化率和部分蛋品質(zhì)指標，對血清抗氧化指標也有積極影響。參考前人研究成果，本研究在蛋雞低蛋白質(zhì)飼糧中添加0.5%的青蒿粉進行試驗，旨在研究在低蛋白質(zhì)飼糧中添加青蒿粉對夏季蛋雞生產(chǎn)性能及生理性能的影響，為青蒿粉的應用及改善高溫應激等相關研究提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗設計及日糧 試驗在鎮(zhèn)江句容浩源生態(tài)生物農(nóng)業(yè)科技公司進行。選用576 只52 周齡的健康海蘭褐產(chǎn)蛋雞，采用單因素完全隨機設計，將試驗蛋雞隨機分為4 個組（常溫對照組、高溫對照組、高溫低蛋白組和高溫低蛋白青蒿組），每組8 個重復，每個重復18 只雞。試驗預試期10 d，正試期42 d。常溫對照組白天平均溫度為（26.2±1.4）℃，3 個高溫組白天平均溫度為（31.2±2.0）℃。常溫對照組和高溫對照組飼喂基礎飼糧（粗蛋白質(zhì)15.85%），高溫試驗組分別飼喂低蛋白飼糧（粗蛋白質(zhì)13.85%）和添加0.5%青蒿粉的低蛋白質(zhì)飼糧，試驗基礎飼糧參照NRC（1994）蛋雞的營養(yǎng)需要配制。試驗所用青蒿粉產(chǎn)于河南南陽，所用青蒿粉均取青蒿干燥的地上部分去除老莖后經(jīng)烘干、粉碎制成?；A飼糧和低蛋白飼糧組成及營養(yǎng)成分見表1。

表1 基礎飼糧和低蛋白質(zhì)飼糧組成及營養(yǎng)成分（風干基礎）

1.2 飼養(yǎng)管理 試驗蛋雞分上、中、下3 層階梯籠養(yǎng)，每籠3 只，常溫對照組置于濕簾通風處，高溫組置于雞舍陽面過道處。于試驗期內(nèi)，每日07:30 至19:30 每隔1 h 記錄試驗組溫度，并計算平均值；嚴格按照海蘭褐蛋雞飼養(yǎng)管理手冊進行規(guī)范飼養(yǎng)。

1.3 測定指標與方法

1.3.1 生產(chǎn)性能 試驗期間，每天17:00 定時采集雞蛋，以每個重復為單位統(tǒng)計產(chǎn)蛋數(shù)、總蛋重、死淘數(shù)及采食量；以組為單位統(tǒng)計平均蛋重、產(chǎn)蛋率、平均日產(chǎn)蛋量、合格蛋率、存活率、平均日采食量及料蛋比。

1.3.2 蛋品質(zhì) 正試期第42 天從每重復中抽取6 枚雞蛋，測定蛋殼厚度、蛋殼強度、蛋形指數(shù)、蛋白高度、哈氏單位、蛋黃比例、蛋黃顏色。參考Mehmet 等的方法測定蛋殼強度、蛋殼厚度及蛋形指數(shù)指標。采用多功能蛋品測定儀（EM T-5200，Robotmation，日本）測定蛋白高度、哈夫單位和蛋黃顏色，用雞蛋分離器將蛋黃與蛋清分離，采用電子天平稱重，計算蛋黃比例。

1.3.3 蛋雞血清生化指標和抗氧化指標 正試期第42 天，從各重復中選取1 只蛋雞，使其空腹12 h，翅下靜脈抽血10 mL，室溫靜置1 h 后，4 000 r/min 離心10 min；分離血清，置于-20℃冰箱保存。參考張李榮的方法測定總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、總蛋白、白蛋白、球蛋白（球蛋白=總蛋白–白蛋白）、葡萄糖、谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶。測定血清抗氧化指標（丙二醛、總超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷胱甘肽S 轉移酶、總抗氧化能力）。血清抗氧化測定均按試劑盒（南京建成生物工程研究所）說明書操作。

1.4 統(tǒng)計分析 采用Excel 2019 進行數(shù)據(jù)整理，用 SPSS 21.0 進行ANOVA 單因素檢驗，并用Duncan's 法進行均值多重比較，數(shù)據(jù)結果表示為平均值±標準差。

2 結果

2.1 低蛋白日糧及青蒿粉對夏季蛋雞生產(chǎn)性能的影響 由表2 可知，高溫低蛋白組和高溫低蛋白青蒿組蛋雞平均日采食量、平均蛋重、料蛋比、合格蛋率和母禽存活率與常溫對照組和高溫對照組均無顯著差異；高溫對照組蛋雞產(chǎn)蛋率較常溫對照組低12.37%（<0.05）；高溫低蛋白組與高溫低蛋白青蒿組蛋雞產(chǎn)蛋率高于高溫對照組（>0.05）。

表2 低蛋白日糧及青蒿粉對夏季蛋雞生產(chǎn)性能的影響

2.2 低蛋白日糧及青蒿粉對夏季蛋雞蛋品質(zhì)的影響 由表3 可知，高溫低蛋白青蒿組蛋黃顏色常溫高于對照組和高溫對照組（<0.05），高溫低蛋白組蛋黃顏色高于常溫和高溫對照組（>0.05）；高溫低蛋白組和高溫低蛋白青蒿組雞蛋蛋殼厚度、蛋殼強度、蛋形指數(shù)及哈氏單位、蛋白高度、蛋黃比例無顯著差異。

表3 低蛋白日糧及青蒿粉對夏季蛋雞蛋品質(zhì)的影響

2.3 低蛋白日糧及青蒿粉對夏季蛋雞血清生化指標的影響 由表4 可知，高溫低蛋白青蒿組蛋雞血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、總蛋白、白蛋白、球蛋白和葡萄糖含量以及谷丙轉氨酶活性與常溫對照組和高溫對照組均無顯著差異；高溫低蛋白組谷草轉氨酶活性高于高溫低蛋白青蒿組（<0.05），高溫低蛋白組谷草轉氨酶活性高于常溫對照組和高溫對照組（>0.05）。

表4 低蛋白日糧及青蒿粉對夏季蛋雞血清生化指標的影響

2.4 低蛋白日糧及青蒿粉對夏季蛋雞血清抗氧化指標的影響 由表5 可知，高溫低蛋白組和高溫低蛋白青蒿組蛋雞血清過氧化氫酶活性和總抗氧化能力與常溫對照組和高溫對照組均無顯著差異；高溫低蛋白組蛋雞血清總超氧化物歧化酶低于常溫對照組酶活（<0.05），且血清中丙二醛含量高于常溫對照組（<0.05）。高溫低蛋白組蛋雞血清谷胱甘肽S 轉移酶含量低于高溫對照組（<0.05）；高溫低蛋白青蒿組與常溫對照組之間血清抗氧化指標差異不顯著。高溫低蛋白青蒿組蛋雞血清谷胱甘肽S 轉移酶活性低于高溫對照組（<0.05）；高溫低蛋白青蒿組血清丙二醛含量低于高溫低蛋白組（<0.05）。

表5 低蛋白日糧及青蒿粉對夏季蛋雞血清抗氧化指標的影響

3 討 論

3.1 低蛋白日糧及青蒿粉對夏季蛋雞生產(chǎn)性能的影響 高溫應激是雞在高溫環(huán)境下由于體溫調(diào)節(jié)及生理機能趨于紊亂而發(fā)生的一系列異常反應，并伴隨生產(chǎn)性能下降，甚至出現(xiàn)休克、死亡。高溫應激對蛋雞的產(chǎn)蛋量和飼料轉化效率均有不利影響。本試驗結果表明，高溫應激導致蛋雞產(chǎn)蛋性能降低，高溫試驗組蛋雞產(chǎn)蛋率顯著低于常溫對照組，這是由于在高溫環(huán)境中蛋雞機體代謝熱顯著下降，飲水量上升，采食量低、營養(yǎng)攝入不足影響蛋雞生產(chǎn)性能。

低蛋白飼糧是指根據(jù)現(xiàn)有營養(yǎng)需要標準，飼糧粗蛋白質(zhì)水平降低2～4 個百分點，并按照理想氨基酸模式添加合成氨基酸滿足動物生長和生產(chǎn)的飼糧，而飼糧中能量水平是控制動物采食量的主要因素。本試驗結果顯示，在高溫條件下，飼喂低蛋白飼糧對蛋雞的采食量沒有顯著影響，這是由于高溫對照組、高溫低蛋白組和高溫低蛋白青蒿組所飼喂的飼糧能量水平相近，能夠滿足蛋雞的維持和生產(chǎn)需要，使得各高溫試驗組間蛋雞采食量差異不顯著。在高溫環(huán)境中，降低飼糧中粗蛋白質(zhì)水平，并補充添加人工合成氨基酸，可以緩解高溫對蛋雞生產(chǎn)性能的負面影響。Yang 等研究發(fā)現(xiàn)，32～41 周齡 Fengda-1 產(chǎn)蛋雞飼喂含14.50% 和15.00%粗蛋白質(zhì)飼糧，其產(chǎn)蛋率分別比飼喂含15.50%粗蛋白質(zhì)飼糧的蛋雞高2.36%和2.06%。高溫低蛋白組和高溫低蛋白青蒿組蛋雞產(chǎn)蛋率分別比高溫對照組高4.86%和3.20%。在高溫環(huán)境中，蛋雞的消化機能受到負面影響，從而影響飼糧蛋白質(zhì)的合成與分解，減少了蛋白質(zhì)代謝熱量的產(chǎn)生，緩解部分熱應激，提高了部分蛋雞因熱應激降低的生產(chǎn)性能。

青蒿，亦稱香蒿，菊科，2 年生草本植物，在我國有超過2 000 年的沿用歷史，青蒿具有多種功效。蛋雞的嗅覺靈敏，能夠區(qū)分具有甜、咸、酸和苦味飼糧，飼糧的氣味會影響蛋雞的采食量。本試驗中，高溫低蛋白青蒿組蛋雞采食量較高溫低蛋白組低1.57%，這可能是由于飼糧中青蒿具有苦味，推測有可能降低飼糧的適口性，導致高溫低蛋白青蒿組蛋雞采食量低于高溫低蛋白組蛋雞。此外，由于試驗后期蛋雞采食量下降，導致蛋雞的營養(yǎng)物質(zhì)吸收量的降低，造成試驗后期高溫低蛋白青蒿組蛋雞產(chǎn)蛋率略低于高溫低蛋白組，但產(chǎn)蛋率仍高于高溫對照組。因此，青蒿粉對蛋雞生產(chǎn)性能的影響還需要進一步試驗研究證實。

3.2 低蛋白日糧及青蒿粉對夏季蛋雞蛋品質(zhì)的影響 飼喂低蛋白飼糧及低蛋白飼糧中添加適量青蒿粉能一定程度上增加蛋黃顏色。Torki 等在高溫條件下，降低52 周齡羅曼蛋雞飼糧蛋白質(zhì)水平能夠顯著提高雞蛋蛋黃顏色。Ji 等將21 周齡海蘭褐殼蛋雞飼糧蛋白質(zhì)水平降低至16%，雞蛋蛋黃顏色增加。本研究結果發(fā)現(xiàn)，高溫低蛋白組雞蛋蛋黃顏色分別比高溫對照組和常溫對照組高13.04%和5.75%。推測可能是因為低蛋白飼糧中玉米含量增加，玉米中含有的葉黃色素含量水平相對較高，可改善蛋黃顏色。高溫低蛋白青蒿組雞蛋蛋黃顏色分別比常溫對照組和高溫對照組高24.39%和16.38%，表明適量添加青蒿粉能夠增加蛋黃顏色，這可能是由于青蒿中含有的色素能有效被腸道吸收，并轉移到蛋黃中，增加蛋黃顏色。

3.3 低蛋白日糧及青蒿粉對夏季蛋雞血清生化指標的影響 血清生化指標可反映機體生理代謝狀態(tài)，其中谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶是組織氧化損傷的有效指標。飼糧中添加酶解青蒿粉可顯著降低蛋雞血清谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活性。本研究發(fā)現(xiàn)，高溫對照組和高溫低蛋白組蛋雞血清谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶活性高于常溫對照組。這是由于在熱應激條件下，細胞膜的通透性升高導致細胞內(nèi)酶釋放入血的速度加快，從而導致血清中谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶活性升高，說明在高溫條件下，飼糧中添加適量青蒿粉能夠緩解熱應激對蛋雞造成的機體損傷，維持內(nèi)分泌系統(tǒng)的穩(wěn)定。

3.4 低蛋白日糧及青蒿粉對夏季蛋雞血清抗氧化指標的影響 夏季高溫造成長期的慢性熱應激會大量消耗機體內(nèi)的抗氧化劑，打破機體氧化與抗氧化之間的平衡，誘發(fā)氧化應激。有研究證明，酶解青蒿對高溫環(huán)境飼養(yǎng)下肉仔雞的生長發(fā)育、神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)、肝功能和抗氧化能力均有一定促進作用。Wan 等研究發(fā)現(xiàn)，在飼糧中添加酶解青蒿能夠改善熱應激狀態(tài)下肉雞胸肌的抗氧化能力，從而提高肉品質(zhì)。本試驗中，高溫對照組、高溫低蛋白組、高溫低蛋白青蒿組蛋雞血清中總超氧化物歧化酶和谷胱甘肽S 轉移酶活性降低?？偝趸锲缁笇C體的氧化與抗氧化平衡起至關重要的作用；谷胱甘肽S 轉移酶是與肝臟解毒相關的酶，當肝細胞受損時，谷胱甘肽S 轉移酶則會較早地釋放到血液中，因此將谷胱甘肽S 轉移酶作為肝臟損傷的敏感指標。在高溫條件下，機體抗氧化酶活性降低，造成其清除自由基的能力下降，最終造成機體的氧化損傷。高溫易引起蛋雞的氧化應激，進而產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化和細胞膜氧化損傷，最終導致蛋雞血清丙二醛含量升高。本試驗中，高溫對照組和高溫低蛋白組血清丙二醛含量高于常溫對照組。Wan 等研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加1 g/kg 酶解青蒿能夠降低肉雞肝臟和血清中丙二醛含量。Payam 等研究發(fā)現(xiàn)，在蛋雞飼糧中添加青蒿粉亦能降低蛋雞血清中丙二醛含量。本試驗中，低蛋白質(zhì)飼糧未能顯著緩解高溫對產(chǎn)蛋后期蛋雞的氧化應激，但高溫低蛋白青蒿組血清中丙二醛含量較對照組顯著降低，證明添加適量青蒿粉可降低蛋雞細胞受損，緩解在夏季高溫下蛋雞產(chǎn)蛋后期所受到的氧化損傷。

4 結 論

本試驗結果表明，高溫條件下飼喂低蛋白飼糧或低蛋白青蒿飼糧均能相對提高蛋雞生產(chǎn)性能；低蛋白質(zhì)飼糧中添加0.5%青蒿粉能夠顯著加深蛋黃顏色，改善蛋品質(zhì)，并顯著降低蛋雞血清丙二醛含量、提高谷胱氨肽S 轉移酶活性。綜上所述，在低蛋白質(zhì)飼糧中添加0.5%青蒿粉能改善蛋品質(zhì)，且能夠有效改善夏季蛋雞的生產(chǎn)性能和抗氧化性能。