張譽方，段博芳，關少君，楊建發(fā)，鄒豐才，董國棟，翟國蓮

(1.云南農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院，云南昆明 650201；2.云南省動物疫病預防控制中心，云南昆明 650201；3.臨滄市永德縣畜牧獸醫(yī)局，云南臨滄 677600)

云南地區(qū)以文山馬、烏蒙馬、云南矮馬、大理馬等6種馬為固有品種[1]，2009年云南驢被列為云南省畜禽遺傳資源保護名錄[2]。云南省馬屬動物存欄60萬匹，其中馬存欄23萬匹，騾存欄17萬匹，驢存欄19萬匹，弓形蟲對馬屬動物發(fā)育、繁衍造成危害[3],對云南地區(qū)馬屬動物養(yǎng)殖造成一定的經(jīng)濟損失，并威脅著人類健康。 剛地弓形蟲(Toxoplasmagondii)屬于頂復門原蟲，可感染人類，其終末宿主是貓和貓科動物，主要通過貓的糞便等排泄物進行傳播[4]。人和動物主要通過食入含有弓形蟲包囊的食物或被弓形蟲卵囊污染的水源、食物而感染[5]。感染后可出現(xiàn)流產(chǎn)、死胎等癥狀。由于弓形蟲可穿過血腦屏障進入中樞神經(jīng)系統(tǒng)[6]，癥狀嚴重時常表現(xiàn)出腦積水、腦炎和不同程度的神經(jīng)癥狀[7]。

弓形蟲感染馬屬動物多為隱性感染，許多國家和地區(qū)已有報道[8-11]。國內(nèi)對于弓形蟲病的相關報道多以貓和豬，云南地區(qū)已有豬和鳥類感染弓形蟲病的報道，但以馬屬動物為宿主的弓形蟲病尚無報道。本調(diào)查通過對云南省部分地區(qū)馬屬動物感染弓形蟲進行血清流行病學分析，以期為云南省馬屬動物弓形蟲的防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 樣品的采集 2020年5月～11月，采集血液樣品，經(jīng)分離血清處理后分裝，獲得云南省969份馬屬動物血清樣品，帶回實驗室后置于4℃冰箱保存待檢(表1)。

表1 血清樣品信息表

1.1.2 試劑 弓形蟲抗體酶聯(lián)免疫分析試劑盒(批號m 1203346)，上海酶聯(lián)生物科技有限公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 夾心ELISA檢測抗體及結果判定 按照試劑盒說明書進行操作。試驗有效性：陽性對照孔平均值>1.00，陰性對照平均值<0.20；臨界值=陰性對照孔平均值+0.15；若樣品OD值<臨界值，則判定為陰性；若樣品OD值≥臨界值，則判定為陽性。

1.2.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析 用統(tǒng)計學軟件SPSS20.0進行分析，用χ2檢驗，若P>0.05，則差異不顯著，若P<0.05，則差異顯著，若P<0.01，則差異極顯著。

2 結果

2.1 弓形蟲血清抗體總陽性率

969份樣品中79份血清抗體陽性，總陽性率為8.15% (79/969)。不同地區(qū)和不同種類馬屬動物血清抗體陽性率不同。

2.2 不同地區(qū)和不同種類馬屬動物弓形蟲抗體

保山地區(qū)和德宏地區(qū)陽性率均為10.67% ，紅河地區(qū)弓形蟲抗體陽性率為2.63%，不同地區(qū)馬屬動物血清樣本弓形蟲陽性率差異不顯著(P>0.05)(表2)。騾的血清抗體陽性率為11.72%，驢陽性率為8.92%，馬弓形蟲血清抗體陽性率為3.03%。不同種類的馬屬動物弓形蟲的陽性率差異顯著(P<0.01)(表3)。

表2 不同地區(qū)馬屬動物弓形蟲感染情況

表3 不同種類馬屬動物弓形蟲感染情況

3 討論

云南馬屬動物弓形蟲血清抗體陽性率與新疆和青海地區(qū)相比較高，而低于吉林、遼寧和內(nèi)蒙古地區(qū)。不同地區(qū)間的陽性率不同可能與當?shù)氐牡乩憝h(huán)境、氣候和馬屬動物的養(yǎng)殖方式、種類以及對弓形蟲的檢測方法有關。云南省相較于新疆和青海地區(qū)，差別主要為亞熱帶季風氣候，降水較為豐富，這些因素可能有利于弓形蟲卵囊在環(huán)境中存活。此外，云南省的馬屬動物主要以散養(yǎng)戶為主，多樣的飼養(yǎng)環(huán)境所帶來的風險或許是其感染率較西北地區(qū)更高的原因之一。

試驗結果顯示，8個地區(qū)中，保山和德宏的馬屬動物弓形蟲感染率最高，紅河的馬屬動物弓形蟲感染率最低。其原因可能是因為保山和德宏位于云南省西南部地區(qū)，山地地形較多，降水更為豐富，具有較高的氣溫和濕度，有利于弓形蟲卵囊在環(huán)境中存活；其次，保山和德宏相比紅河海拔更高，高海拔地區(qū)居民以放牧為主，環(huán)境中野生貓科動物相對較多，作為弓形蟲的終末宿主，這也會增大馬屬動物感染弓形蟲的風險。

本研究中不同種類馬屬動物血清樣本弓形蟲陽性率差異極顯著(P<0.01)、騾弓形蟲陽性率顯著高于馬和驢；不同地區(qū)的馬屬動物血清樣本弓形蟲陽性率差異不顯著(P>0.05)，表明品種是影響馬屬動物弓形蟲感染的重要因素?？赡苁遣煌N類的馬屬動物對于弓形蟲的易感性不同。騾的陽性率較高，可能是作為馬和驢的種間雜種，其自身基因上對于弓形蟲的易感性較強；也與騾的養(yǎng)殖方式和重視程度的不同有關。家貓的糞便混在騾的飼料中被其誤食也會增大騾感染弓形蟲病的風險。

此次對云南部分地區(qū)馬屬動物血清通過ELISA方法調(diào)查發(fā)現(xiàn)，弓形蟲病抗體總陽性率為8.15%(79/969)，8個地區(qū)的馬屬動物普遍存在弓形蟲的感染與流行。其中不同種類馬屬動物弓形蟲感染率差異極顯著，騾弓形蟲陽性率明顯高于馬和驢；而各個地區(qū)均存在弓形蟲的感染也說明弓形蟲對生存環(huán)境具有高度可塑性。

弓形蟲作為專性細胞內(nèi)寄生原蟲，其危害嚴重且分布廣泛，目前尚無理想的防治藥物[12]。在養(yǎng)殖業(yè)和旅游業(yè)中，人與馬屬動物的直接接觸會增大弓形蟲的感染風險[13]。因此，不僅要在馬屬動物中加強防控，保障云南地區(qū)馬屬動物養(yǎng)殖業(yè)長期穩(wěn)定發(fā)展，更要在人群中采取有效措施防范弓形蟲病的發(fā)生和流行，從而保障人類健康，有效維護公共衛(wèi)生安全。