趙 瑩，黃曉巍，唐秋竹，邱智東，李軍鴿*

（長春中醫(yī)藥大學·吉林長春·130117）

黃連解毒湯出自于晉代葛洪的《肘后備急方》，后在唐代王燾的《外臺秘要》卷一《崔氏方》中開始冠以黃連解毒湯之名，是清熱解毒的典型藥方，治療實熱火毒及三焦熱盛之證。黃連解毒湯由黃連、黃芩、黃柏、梔子組成，原文“黃連三兩，黃芩，黃柏各二兩，梔子十四杖擘，以水六升，煮取二升”，黃連為君藥，清心火，肺中焦肺胃之火，黃芩為臣藥，清上焦肺火，黃柏清下焦之火，梔子清三焦之火，導熱下行，合為佐使。黃連解毒湯主要功效是清熱解毒，主要用于治療三焦實熱火毒之證，臨床表現(xiàn)主要為口干舌燥，濕熱黃疸，大熱煩躁，舌紅苔黃，熱病吐血，濕熱下痢，癰瘍疔毒，脈數(shù)有力，還可以用于治療動脈粥樣硬化[1]、阿爾茲海默癥[2]、幽門桿菌感染性胃潰瘍[3]、膿毒癥[4]、急性感染性心內(nèi)膜炎[5]及皮膚病[6]等。黃連解毒湯臨床效果好，應(yīng)用廣泛，還可與其他藥物聯(lián)用增強藥效。有關(guān)黃連解毒湯的化學成分研究主要是活性成分含量測定和水煎自沉淀物的研究，查閱文獻可知，水煎自沉淀形成的原因是煎煮過程中酸堿性藥材配伍產(chǎn)生新的化合物。對于黃連解毒湯藥理作用的研究主要集中在抗炎方面，并且已經(jīng)初步闡明了其作用機制和相關(guān)有效成分。故就組方來源，化學成分，藥理作用以及臨床應(yīng)用等方面進行綜述，為黃連解毒湯的進一步研究和應(yīng)用提供理論參考，為中藥方劑配伍提供依據(jù)。

1 化學成分

1.1 復方化學成分

目前對于黃連解毒湯單味藥化學成分研究較多，對于復方成分研究較少，現(xiàn)已知黃連解毒湯主要化學成分為生物堿類、有機酸類、黃酮類、環(huán)烯醚萜類等[7-9]。其中包括生物堿類化合物5個，有機酸類化合物4個，黃酮類化合物4個，環(huán)烯醚萜類化合物2個。黃連

表1 黃連解毒湯主要化學成分

類別 化合物 分子式 結(jié)構(gòu)式 參考文獻木蘭花堿 C20H24NO4+ [7,8]巴馬汀 C21H22NO4+ [7,8]黃芩素 C15H10O5 [7,8]漢黃芩素 C16H12O5 [7-9]黃酮類黃芩苷 C21H18O11 [7-9]漢黃芩苷 C22H20O11 [7,8]

1.2 配伍前后化學成分

黃連解毒湯主要藥效物質(zhì)有黃芩苷、漢黃芩苷、小檗堿、黃芩素、漢黃芩素等。由于有效成分主要是酸堿化合物，配伍時容易發(fā)生反應(yīng)，使藥材的化學成分及其含量發(fā)生變化[10]，從而影響藥理效應(yīng)。黃連解毒湯中上述藥效物質(zhì)在配伍過程中，生成不溶性沉淀。經(jīng)查閱文獻可知,以小檗堿為代表的總生物堿與黃芩苷，漢黃芩苷配伍時發(fā)生反應(yīng)，生成不溶性復合物[10]，從而解釋了配伍中各成分含量變化。

李桐等[11]通過拆方的方法，全面分析了水煎自沉淀的來源，從熱力學角度分析了自沉淀形成機制。通過拆方可知自沉淀現(xiàn)象明顯的是黃芩-黃連，黃芩-黃柏，其中沉淀現(xiàn)象最明顯的是黃芩-黃連，而其他拆方中并未發(fā)現(xiàn)明顯自沉淀現(xiàn)象。黃連解毒湯自沉淀形成不是簡單的物理凝聚沉淀而是焓驅(qū)動的非共價鍵的化學反應(yīng)。這些實驗證實了對黃連解毒湯自沉淀進一步研究的必要性。

2 藥理作用

黃連解毒湯是治療實熱火毒之證的經(jīng)典藥方，具有清熱瀉火解毒的功效?，F(xiàn)代藥理學研究發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯具有抗炎、抗血栓、抗腫瘤、抗氧化、降血脂、降血糖、肝臟保護作用、保護腦神經(jīng)作用、調(diào)節(jié)免疫、調(diào)節(jié)腸道菌群等藥理作用。

2.1 抗炎

通過查閱文獻可知，目前對于炎癥通路研究主要集中在核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB）信號轉(zhuǎn)導途徑；Janus激酶（JAK）/信號轉(zhuǎn)導及轉(zhuǎn)錄激活因子（STAT）通路；絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路上[11]。經(jīng)研究表明黃連解毒湯是通過調(diào)控多通路從而發(fā)揮抗炎作用。董穎[12]研究發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯抗炎作用主要是通過調(diào)節(jié)Toll樣受體4(TLR4)信號通路，白細胞介素-17(IL-17)信號通路和腫瘤壞死因子（TNF）信號通路等從而使血清中炎癥因子水平降低，實現(xiàn)抗炎作用。余蘭彬等[13]基于抗炎角度研究了黃連解毒湯對動脈粥樣硬化大鼠的作用機制，發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯使AS大鼠的VCAM-1，MCP-1表達明顯降低，說明黃連解毒湯可以抑制AS大鼠的炎癥反應(yīng)，干預形成AS斑塊。李弼仁等基于[14]網(wǎng)絡(luò)藥理學研究黃連解毒湯對于巨噬細胞的調(diào)控機制，實驗結(jié)果表明黃連解毒湯可能調(diào)控巨噬細胞極化從而發(fā)揮抗炎作用，機制可能是通過AMPK通路下調(diào)M1型極化因子的表達，上調(diào)M2型極化因子的表達來實現(xiàn)的。

2.2 抗菌

黃連解毒湯對溶血葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、沙門菌，幽門桿菌，銅綠假單胞菌等存在一定的抗抑菌作用。杜巧輝[15]等研究了黃連解毒湯發(fā)揮抑菌作用的成分，發(fā)現(xiàn)了黃連解毒湯總生物堿和黃連解毒湯水提物都具有抑菌活性，并且總生物堿抑菌活性最強，且對革蘭氏陰性菌抑菌作用強于革蘭氏陽性菌。研究發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯中總黃酮和總環(huán)烯醚萜類成分抑菌作用并不明顯，總黃酮的抑菌成分可能與黃芩有關(guān)。生物堿可能是黃連解毒湯抑菌作用的物質(zhì)基礎(chǔ)，藥效成分可能是黃連堿、巴馬汀、小檗堿。車路陽[16]等研究黃連解毒湯聯(lián)合頭孢他啶治療銅綠假單胞菌肺炎小鼠，實驗發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯有抑制銅綠假單胞菌的作用，且與頭孢他啶聯(lián)用效果更好，抑菌其機制是黃連解毒湯破壞了PA生物膜的穩(wěn)定性，從而達到抗菌效果。

2.3 降血脂

黃連解毒湯可以降低熱毒所致動脈粥樣硬化兔子的血脂，從而改善兔動脈粥樣硬化[17]。金瑾[18]預測黃連解毒湯抗高血脂作用的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯通過調(diào)控PPARγ、LDLR和LXRα的基因轉(zhuǎn)錄水平從而實現(xiàn)抗高血脂作用，黃連解毒湯促進PPARγ、LDLR和LXRα基因轉(zhuǎn)錄的激動劑以及調(diào)節(jié)血脂的有效化學成分存在于黃芩梔子的共煎劑中,或為共煎劑吸收入血的代謝產(chǎn)物。并且經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn)對LXRβ的激動作用最強的是黃芩苷，黃連解毒湯復方成分對于抗高血脂具有協(xié)同作用。王瑞國[19]對黃連解毒湯對高血脂引發(fā)主動脈病變預防作用進行研究，發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯具有調(diào)節(jié)血脂的作用，可以對高血脂引發(fā)的血管內(nèi)皮病變起到預防作用，從而減輕主動脈病變幾率，對動脈粥樣硬化起到預防作用。

郝少[20]等研究黃連解毒湯對高脂血癥大鼠代謝的影響，實驗將150只SD大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后隨機分組，20只為正常對照組，其余130只大鼠均連續(xù)喂養(yǎng)15天高脂飼料，建立高脂血癥模型，然后隨機分為辛伐他汀組、黃連解毒湯低、中、高劑量組、模型組、每組16只大鼠，然后按劑量連續(xù)給藥8周后，取大鼠尾部靜脈血，進行血脂檢測，抗氧化檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn)與模型組和辛伐他汀陽性陽性對照組相比，黃連解毒湯組大鼠血清總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、甘油三酯(TAG)含量明顯降低，谷胱甘肽過氧化物(GSHPx)、超氧化物歧化酶(SOD)含量明顯升高，而丙二醛(MDA)含量明顯降低。說明黃連解毒湯能夠使高脂血癥大鼠血脂降低，提高機體抗脂質(zhì)過氧化，調(diào)節(jié)血脂代謝，提高機體抗氧化能力。

2.4 降血壓

高血壓是臨床常見病癥，臨床表現(xiàn)為動脈壓升高、心悸、頭暈、惡心頭痛、全身乏力等，還會影響其他器官功能嚴重可導致心力衰竭，還有其他并發(fā)癥等。黃連解毒湯具有降血壓的藥理作用，馬曉聰[21]等人研究黃連解毒湯對自發(fā)性高血壓大鼠主動脈組織miR-133a/Caveolin-1/eNOS通路關(guān)鍵因子表達影響，將SHR大鼠隨機分為黃連解毒湯高中低劑量組、模型組、卡托普利組，每組各10只，將10只WKY大鼠作為正常組，按照規(guī)定藥物劑量給予大鼠灌胃給藥，連續(xù)給藥6周后，對各組大鼠進行血清NO、ET-1及主動脈e NOS活性檢測，主動脈組織mi R133a、Caveolin-1、e NOS m R NA表達檢測，主動脈組織中Caveolin-1、e NOS、p-e NOS蛋白表達檢測。結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯可以提高SHR主動脈mi R-133a、e NOS m RNA表達水平和主動脈e NOS、p-e NOS蛋白的表達水平，同時能降低Caveolin-1 m RNA及蛋白表達水平。從而推測黃連解毒湯能夠保護血管內(nèi)皮，發(fā)揮降血壓的作用。

2.5 抗腫瘤

黃連解毒湯具有抗腫瘤的藥理作用，現(xiàn)代研究表明抗腫瘤主要活性物質(zhì)是黃芩素，小檗堿等，并發(fā)現(xiàn)其體內(nèi)抗腫瘤效果良好，對于惡性腫瘤具有良好的抑制作用。余友華[22]等人研究黃連解毒湯體內(nèi)外抗腫瘤作用，實驗采用小鼠前胃癌MFC等移植性腫瘤模型和小鼠肉瘤S180模型作為體內(nèi)模型，并測定小鼠免疫器官指數(shù)，采用人肝癌SMMC-7721、小鼠S180、人胃癌SGC-7901小鼠MFC瘤株作為體外模型，采用MTT方法測定體外抑制腫瘤作用，實驗結(jié)果表明黃連解毒湯在體內(nèi)有抗腫瘤的作用，在體外也有抑制腫瘤的作用。楊潔[23]等發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯可以促進大鼠膠質(zhì)瘤C6細胞的凋亡，抑制C6細胞的遷移、侵襲和增殖。其機制機制可能與促進Caspase-3和BAX表達有關(guān)以及抑制C6細胞BCL-2表達有關(guān)。

原料經(jīng)機械球磨（時間為0.5h，球料比為3∶1，轉(zhuǎn)速為180 r/min）后在最優(yōu)條件（反應(yīng)溫度為80℃、反應(yīng)時間為60min、溶液鉬濃度為223.20g/L、氨鉬比為 0.906 即原料 （g）∶水 （mL）∶氨水 （mL）為 1.00∶2.10∶0.40、攪拌速度為 100r/min）下制取七鉬酸銨，取其母液進行鉬綜合回收試驗。在溫度為50℃、攪拌速度為100r/min的條件下，改變終點pH值，考察其對鉬綜合回收率的影響，結(jié)果如圖12所示，并考察其對產(chǎn)物物相的影響。

2.6 抗氧化

黃連解毒湯具有抗氧化作用，能降低MDT的含量，提高紅細胞SOD活性，提高細胞抗自由基氧化活性，保護神經(jīng)細胞，減緩細胞凋亡進程[24]。王宏浩[25]等發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯中抗氧化作用的主要生物活性物質(zhì)是多羥基黃酮類，抑制乙酰膽堿酯酶活性主要成分是生物堿。

2.7 保護腦神經(jīng)

根據(jù)相關(guān)文獻得知黃連解毒湯具有一定抗急性腦缺血缺氧的作用，可以提高小鼠抗缺氧能力，改善多發(fā)腦梗大鼠能量代謝障礙，從而達到保護腦神經(jīng)目的，黃連解毒湯中小檗堿具有抗缺氧作用，可以增加常壓密閉缺氧小鼠的存活時間，黃芩提取物可以減少在缺氧狀態(tài)下腦線粒體能量消耗，保護線粒體內(nèi)膜，此外小檗堿還具有抗腦缺血的作用，對腦缺血組織具有一定的保護作用，其機制可能與抗氧自由基有關(guān)[26,27]。

2.8 免疫調(diào)節(jié)

黃連解毒湯可以提高荷瘤小鼠T細胞分泌IL-4的能力，從而提高CD+4Th2細胞分泌的能力，還可以促進T淋巴細胞亞群增殖,改變T淋巴細胞亞群比例，從而既發(fā)揮體液免疫的同時增強細胞免疫作用[28]。

2.9 調(diào)節(jié)腸道菌群

何文嬌[29]等人采用16S rDNA技術(shù)研究黃連解毒湯對db/db小鼠腸道菌群作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯可以上調(diào)有益菌群豐度，減少有害致病菌群豐度，調(diào)節(jié)腸道菌群處于平衡狀態(tài)。

3 臨床應(yīng)用

黃連解毒湯治療動脈粥樣硬化、糖尿病、阿爾茲海默癥等有良好的效果，除此之外還可與其他藥物聯(lián)用，臨床應(yīng)用廣泛，治療效果良好。

3.1 2型糖尿病

糖尿病在中醫(yī)學中屬于消渴癥的范疇，體內(nèi)痰濕內(nèi)蘊和郁而化熱，耗氣傷陰。黃連解毒湯在臨床治療糖尿病具有較好的療效，陳英鑾[30]采用黃連解毒湯聯(lián)合西藥治療陰虛熱盛型2型糖尿病，發(fā)現(xiàn)治療組空腹血糖，糖化血紅蛋白均低于對照組，治療效果高于對照組，不良反應(yīng)發(fā)生率低于對照組，說明黃連解毒湯聯(lián)合西藥治療2型糖尿病效果顯著，安全性好。

3.2 動脈粥樣硬化

動脈粥樣硬化是由脂質(zhì)紊亂引起的慢性炎癥疾病，可以引發(fā)一系列心血管疾病，如冠心病，腦梗死等。從中醫(yī)角度來看，動脈粥樣硬化是痰瘀阻滯兼熱毒內(nèi)蘊，痰熱郁結(jié)引起的，因此黃連解毒湯清熱解毒作用為治療提供了中醫(yī)理論指導[31]。劉亞榮[32]等采用黃連解毒湯加減辯證治療方法，研究其對治療頸動脈粥樣硬化的作用，發(fā)現(xiàn)觀察組患者血清hs-CRP、IL-6、TNF-α、TC、TG、HDL-C水平均下降且比對照組低，且觀察組不良反應(yīng)發(fā)生率低，綜上所訴黃連解毒湯具有改善患者血脂代謝，血管內(nèi)皮功能，炎癥反應(yīng)來治療頸動脈粥樣硬化。

3.3 阿爾茲海默癥

阿爾茲海默癥是臨床上常見疾病，多發(fā)于老年人，病因復雜，起病緩慢，多表現(xiàn)為記憶障礙，精神行為障礙等。趙玲[33]等采用黃連解毒湯聯(lián)合匹伐他汀的實驗方法，探究治療效果。實驗發(fā)現(xiàn)實驗組谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶均低于對照組，不良反應(yīng)發(fā)生率也低于對照組，且差異具有統(tǒng)計學意義。說明黃連解毒湯可以增強匹伐他汀治療阿爾茲海默癥的療效，且不良反應(yīng)少，安全性高。

孫莉敏[34]等人預測黃連解毒湯治療阿爾茲海默癥機制，篩選出17個藥效成分，這些成分可能通過抑制Tau蛋白過度磷酸化、Aβ異常聚集和Aβ產(chǎn)生，清除腦內(nèi)Aβ，減弱神經(jīng)細胞凋亡來治療阿爾茲海默癥。

4 小結(jié)

目前對于黃連解毒湯單味藥化學成分研究已經(jīng)有很多報道，但對黃連解毒湯復方化學成分研究較少，如多種化學成分含量分析，方中發(fā)揮藥效作用的活性成分與體內(nèi)代謝過程研究方面不深入，此外發(fā)現(xiàn)煎煮過程中出現(xiàn)自沉淀現(xiàn)象，自沉淀物質(zhì)為鹽酸小檗堿和黃芩苷絡(luò)合而成，部分藥理實驗研究表明自沉淀物質(zhì)有利于提高藥物的生物利用度，但自沉淀體內(nèi)藥效學變化研究報道較少，數(shù)據(jù)不豐富。黃連解毒湯化學成分復雜，臨床應(yīng)用廣泛，但是對于其發(fā)揮藥效的機制尚不明確，還需要廣大學者在黃連解毒湯藥效機制方面進行深入研究。