袁圓玥，岑劍偉，李來好，楊賢慶，黃 卉，魏 涯，郝淑賢，趙永強，王悅齊，林 織

1. 上海海洋大學(xué)，上海 201306

2. 中國水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所/農(nóng)業(yè)農(nóng)村部水產(chǎn)品加工重點實驗室，廣東 廣州 510300

3. 大連工業(yè)大學(xué)/海洋食品精深加工關(guān)鍵技術(shù)省部共建協(xié)同創(chuàng)新中心，遼寧 大連 116034

4. 廣東順欣海洋漁業(yè)集團有限公司，廣東 陽江 529800

羅非魚 (Oreochromis niloticus) 富含優(yōu)質(zhì)蛋白和不飽和脂肪酸，肉鮮刺少，價格低廉，深受廣大消費者喜愛。2021年中國漁業(yè)統(tǒng)計年鑒數(shù)據(jù)顯示，2020年羅非魚養(yǎng)殖產(chǎn)量達到165.54 萬噸，是我國主要淡水養(yǎng)殖水產(chǎn)品之一[1]。魚類極易受不良環(huán)境因素影響而產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，羅非魚體側(cè)高，背鰭發(fā)達，當(dāng)受到外界刺激時，鰭棘會豎起以防御，具有一定的攻擊性，易對操作者和魚體造成傷害，不利于羅非魚的流通、運輸操作。為了減緩活魚運輸、包裝、檢查采樣、轉(zhuǎn)移搬運等流通環(huán)節(jié)引起的應(yīng)激反應(yīng)，減少魚體損傷，提高操作便捷性及成活率，通常采用麻醉技術(shù)抑制其神經(jīng)系統(tǒng)并減弱對環(huán)境變化的敏感性，降低魚的活動能力，使其新陳代謝處于低水平，減少應(yīng)激反應(yīng)帶來的負面影響。在眾多麻醉劑中，間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽 (MS-222)、丁香酚和二氧化碳 (CO2) 常用于水產(chǎn)品領(lǐng)域，但藥用麻醉處理劑會在魚體內(nèi)富集，多國明確規(guī)定了MS-222、丁香酚等化學(xué)麻醉劑在魚體內(nèi)的最大殘留量和休藥期，合規(guī)方可銷售和食用[2]。早在1943年，已有學(xué)者提出將CO2作為麻醉劑[3]。丁亞濤[4]研究發(fā)現(xiàn)，CO2可以降低鳊魚(Parabramis pekinensis)在運輸時的生理生化反應(yīng)，延長保活時間。Oliveira等[5]研究表明，CO2可減輕細鱗鯧 (Piaractus mesopotamicus)的生理應(yīng)激。CO2麻醉處理具有成本低、體內(nèi)無殘留、無藥物消退期等優(yōu)點，且在通風(fēng)條件下對于操作人員和環(huán)境均無傷害，是一種安全、理想的藥用麻醉劑替代品。本文主要探索了CO2麻醉羅非魚的裝備及技術(shù)條件，研究CO2對羅非魚的麻醉效果，及其對羅非魚的血清生化、呼吸代謝、氧化應(yīng)激、肌肉質(zhì)構(gòu)特性等指標(biāo)的影響，為CO2麻醉在魚類長途運輸操作和抗應(yīng)激中的研究及應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

羅非魚購于廣州大江苑農(nóng)貿(mào)市場，體質(zhì)量為(700±100) g，停食暫養(yǎng)于 50 L 水箱中 24 h，暫養(yǎng)期間保持水體清潔及氧氣泵正常工作，保證供氧充足。

糖原、乳酸、丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、總抗氧化能力測試盒均購自南京建成生物工程有限公司，魚皮質(zhì)醇ELISA試劑盒購自江蘇酶免實業(yè)有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

SF203000A冷水機 (蘇州肯道節(jié)能設(shè)備公司)、溫度傳感器 (上海DFRobot公司)、pH電極傳感器(上海 DFRobot公司)、Multi3630 IDS 便攜式多參數(shù)水質(zhì)分析儀 (德國WTW公司)、Synergy全功能酶標(biāo)儀 (美國 BioTek 公司)；CT3 質(zhì)構(gòu)儀 (美國Brookfield公司)、BS-800M全自動生化分析儀 (深圳邁瑞生物醫(yī)療公司)；麻醉裝置由麻醉桶、微孔曝氣管、耐壓導(dǎo)氣管、二氧化碳減壓閥、液化二氧化碳鋼瓶組成 (圖1)。復(fù)蘇裝置由復(fù)蘇池、氣泵、氣石等器件組成。

圖1 二氧化碳麻醉裝置示意圖Fig. 1 Schematic of CO2 anesthesia device

1.3 實驗方法

1.3.1 實驗步驟

微孔曝氣管呈螺旋狀均勻鋪設(shè)于直徑為38 cm、高度54 cm的麻醉桶底部，以氣壓0.4 Mpa向其中持續(xù)充入CO2，CO2經(jīng)耐壓導(dǎo)氣管到微孔曝氣管進入水體，得到pH為4.7～5.0、溶解氧未檢出的CO2飽和溶液，并以0.1 Mpa氣流持續(xù)通入CO2以維持飽和狀態(tài)，獲得麻醉液。將羅非魚轉(zhuǎn)移至麻醉液中進行麻醉實驗，觀察不同水溫對魚體的麻醉效果差異。麻醉完畢后，迅速將羅非魚轉(zhuǎn)移至復(fù)蘇池進行復(fù)蘇，復(fù)蘇池溶解氧質(zhì)量濃度為 8.30～9.30 mg·L?1，水溫為20～25 ℃，并持續(xù)打氧，評價復(fù)蘇效果。抽取不同階段的樣品，檢測麻醉-復(fù)蘇羅非魚的血清生化指標(biāo)、代謝產(chǎn)物指標(biāo)、氧化應(yīng)激指標(biāo)、肌肉質(zhì)構(gòu)特性指標(biāo)。

1.3.2 不同水溫對 CO2麻醉羅非魚效果的影響

參照羅晶晶等[6]和高仁法等[7]的方法并稍作修改，本試驗將麻醉程度分為4個階段 (A1—A4)，復(fù)蘇程度分為4個階段 (R1—R4)。用抄網(wǎng)將停食暫養(yǎng)的魚轉(zhuǎn)移到麻醉液中浸泡，當(dāng)魚出現(xiàn)中度麻醉(A3 期) 至深度麻醉 (A4 期) 反應(yīng)現(xiàn)象，表明羅非魚進入麻醉狀態(tài)。麻醉時間從魚體被放入CO2麻醉液開始計時至從麻醉液中撈出結(jié)束，復(fù)蘇時間為麻醉的羅非魚放入清水開始到R4期 (表1)。

表1 羅非魚在不同麻醉階段和復(fù)蘇階段的行為特征Table 1 Behavioral characteristics of tilapia at different anesthesia and resuscitation stages

準(zhǔn)備5個水箱，在魚、水質(zhì)量比為1∶2的條件下，使用循環(huán)水冷機調(diào)整水溫梯度為5、10、15、20、25 ℃，制備好麻醉液。隨機選取羅非魚進行麻醉實驗，每個溫度5 尾，平行5次，記錄麻醉時間，麻醉完畢后將羅非魚打撈至復(fù)蘇池中進行復(fù)蘇實驗，記錄復(fù)蘇時間和復(fù)蘇率，并記錄24和48 h的成活率。

1.3.3 實驗取樣

以暫養(yǎng)狀態(tài)下的羅非魚為對照組，以15 ℃麻醉的羅非魚為麻醉組，以15 ℃麻醉并復(fù)蘇的羅非魚為復(fù)蘇組，以15 ℃麻醉后復(fù)蘇存活24 h的羅非魚為復(fù)蘇24 h組，對比4組羅非魚生理指標(biāo)的變化。

對照組、麻醉組、復(fù)蘇組、復(fù)蘇24 h組中各取3尾魚，置于冰盤上，斷尾取血，全血不加抗凝劑，常溫靜置待血液凝固后4 ℃冷藏過夜，當(dāng)血清自然析出，以 4 ℃、3 000 r·min?1離心 10 min，取上層血清，保存?zhèn)溆谩２裳笱杆偃「闻K和魚背部肌肉，用生理鹽水充分漂洗吸干水分后保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.4 生理生化指標(biāo)的測定

血清生化指標(biāo)的測定：谷草轉(zhuǎn)氨酶 (AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶 (ALT)、堿性磷酸酶 (ALP)、血糖 (Glu)使用血液生化自動分析儀，皮質(zhì)醇 (COR) 含量使用南京建成生物工程有限公司的皮質(zhì)醇ELISA試劑盒，對血清樣品進行測定。

代謝產(chǎn)物指標(biāo)的測定：糖原 (GLY)、乳酸 (LD)含量的測定使用南京建成生物工程有限公司的糖原測定試劑盒和乳酸試劑盒，對肌肉和肝臟樣品進行測定。

氧化應(yīng)激指標(biāo)的測定：丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶 (GSHPx)、總抗氧化能力 (T-AOC) 使用南京建成生物工程有限公司的測定試劑盒，對肝臟樣品進行測定。

肌肉質(zhì)構(gòu)特性指標(biāo)測定：將魚背部肌肉修整為 8 cm×3 cm×1 cm 的魚片，使用 Brookfield LFRA-100型質(zhì)構(gòu)儀及P/44平底圓柱形探頭測定硬度、膠著性、咀嚼性、彈性，在質(zhì)地多面剖析 (TPA) 模式下循環(huán)壓縮 2 次，測試速度為 1 mm·s?1，觸發(fā)點負載為5.0 g，下壓距離5 mm。每組取魚片6 片，每片取8 點進行測試。

1.4 數(shù)據(jù)分析

實驗數(shù)據(jù)利用 Microsoft Excel 2010 和 JMP Pro14軟件進行統(tǒng)計分析，均值比較采用獨立樣本t檢驗，單因素方差分析采用LSD法，數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(±SE)”表示，差異顯著的標(biāo)準(zhǔn)為P＜0.05。使用Origin 2021軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同水溫對 CO2 麻醉羅非魚效果的影響

不同水溫條件下CO2對羅非魚的麻醉效果見表2。在15 ℃下CO2飽和溶液中，羅非魚的麻醉時間約為 101 s，5 、10 、20 ℃ 需約 150 s才能進入麻醉狀態(tài)，25 ℃則需約326 s。不同麻醉溫度條件處理后，羅非魚均可100%復(fù)蘇成活，羅非魚在15 ℃下CO2飽和溶液處理組的復(fù)蘇時間約為134 s，其他處理組羅非魚的復(fù)蘇時間介于251～396 s。CO2作為麻醉劑對羅非魚無致死作用，5組溫度條件麻醉的羅非魚48 h仍可存活。有研究認為，理想的麻醉效果應(yīng)是麻醉和恢復(fù)均較為迅速[8]。本實驗選擇15 ℃作為最佳麻醉處理溫度，在15 ℃水溫條件下CO2飽和溶液中相比其他處理組的麻醉用時和復(fù)蘇用時均最短。本實驗采用的曝氣材料為納米微孔管，通氣時微孔曝氣管均勻擴張，以0.4 Mpa向其中持續(xù)充氣，麻醉液pH值接近5，溶解氧濃度為 0 mg·L?1，表明麻醉液達到飽和狀態(tài)，CO2在水中呈現(xiàn)煙霧飄散狀態(tài)，與水的接觸面增大，上浮速度慢，CO2溶解效果均勻，提高了CO2的利用率。

表2 不同溫度下二氧化碳麻醉羅非魚的效果Table 2 CO2 anesthesia effect on tilapia at different temperatures

2.2 CO2 麻醉對羅非魚血清生化指標(biāo)的影響

當(dāng)魚類遭受環(huán)境因子的脅迫時，下丘腦-垂體-腎上腺軸 (HPA軸) 興奮性提高，腎上腺分泌壓力激素[9-10]。在眾多壓力激素中，皮質(zhì)醇與脅迫因子的關(guān)系最為密切。多項研究表明，皮質(zhì)醇是應(yīng)激反應(yīng)的靈敏指標(biāo)。齊紅莉等[11]對美洲鰣 (Alosa sapi-dissima) 施加脅迫后發(fā)現(xiàn)，其皮質(zhì)醇含量迅速增加了約48 倍。由圖2可知，經(jīng)飽和CO2脅迫后的羅非魚皮質(zhì)醇質(zhì)量濃度為 (89.97±3.78) ng·mL?1，與對照組相比顯著升高，復(fù)蘇組和復(fù)蘇24 h組與對照組無顯著性差異，但較麻醉組羅非魚的皮質(zhì)醇顯著降低。CO2環(huán)境脅迫激活了羅非魚HPA軸，促使皮質(zhì)醇大量分泌，從而應(yīng)對壓力，羅非魚皮質(zhì)醇在脅迫解除后恢復(fù)到對照組水平。HPA軸是神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的重要部分，具有一套負反饋機制，大量的皮質(zhì)醇又可以通過負反饋調(diào)節(jié)，抑制HPA軸繼續(xù)產(chǎn)生壓力激素[12]。麻醉組血糖濃度為 (9.92±0.05) mmol·L?1，顯著高于其余實驗組，出現(xiàn)典型的應(yīng)激性高血糖癥，高血糖可以給魚體提供足夠的能量以抵抗低氧環(huán)境。范興[13]研究了CO2麻醉對羅非魚和卵形鯧鲹 (Trachinotus ovatus)離水保活的影響，結(jié)果表明，麻醉組樣本血清皮質(zhì)醇、血糖高于非麻醉組。血糖呈先升后降趨勢與皮質(zhì)醇一致， 皮質(zhì)醇屬于一種糖皮質(zhì)激素，可以增加肝糖原的合成，抑制組織對葡萄糖的利用，從而導(dǎo)致血糖上升[14]。

圖2 二氧化碳麻醉對血清皮質(zhì)醇和血糖濃度的影響Fig. 2 CO2 anesthesia effect on concentration of serum cortisol and blood glucose

對照組、麻醉組、復(fù)蘇組、復(fù)蘇24 h組羅非魚血清AST、ALT、ALP活性均呈現(xiàn)先上升后降低的趨勢，變化顯著 (圖3)。AST和ALT是魚體新陳代謝過程中必不可少的“催化劑”。AST主要存在于心肌組織，其次是肝組織，ALT主要存在于肝臟組織細胞中。魚體健康的狀態(tài)下，AST和ALT在血清中的含量很低，當(dāng)這兩種酶活性變化時，表示肝臟組織和心肌組織受損。與其余實驗組相比，麻醉組羅非魚兩種酶活性顯著升高，可能是由于飽和CO2水體對羅非魚造成的脅迫致使魚體肝臟組織和心肌組織損傷嚴(yán)重，細胞壞死或細胞膜通透性增加，導(dǎo)致AST和ALT被大量釋放入血，引起血清中酶活性顯著升高[15]。復(fù)蘇組羅非魚兩種酶活性較麻醉組均顯著降低，但較對照組均顯著升高，這可能是因為復(fù)蘇組水中氧氣充足，環(huán)境脅迫得到緩解，但肝功能和心肌功能未完全恢復(fù)。復(fù)蘇24 h組AST、ALT活性低于麻醉組，但顯著高于對照，說明魚體自然恢復(fù)24 h后，肝功能和心肌功能有一定程度緩解。

圖3 二氧化碳麻醉對血清谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶和堿性磷酸酶活性的影響Fig. 3 CO2 anesthesia effect on activities of serum aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase and alkaline phosphatase

ALP廣泛存在于各組織器官中，主要由肝臟合成分泌，也可以指示肝損傷。ALP是一種在堿性環(huán)境下能夠去磷酸化的水解酶，參與機體生理代謝，加速物質(zhì)的攝取和轉(zhuǎn)運，參與調(diào)節(jié)機體磷代謝，為ADP磷酸化為ATP提供更多的無機磷，也是非特異性免疫系統(tǒng)重要的水解酶[16]。麻醉組羅非魚ALP活性顯著高于對照組、復(fù)蘇組和復(fù)蘇24 h組，提示麻醉處理對羅非魚造成肝損傷，也間接反映魚體免疫系統(tǒng)增強。但復(fù)蘇組、復(fù)蘇24 h組ALP較對照組顯著降低，有可能是ALP通過保持低活性來降低機體組織細胞的生理活動。

2.3 CO2 麻醉對羅非魚代謝物質(zhì)含量的影響

實驗組羅非魚糖原含量較對照組顯著下降(圖4)。糖原主要存在于肝臟和骨骼肌中，是魚體儲備的重要能源物質(zhì)，抵抗脅迫時加速分解為機體供能。麻醉組、復(fù)蘇組肝糖原顯著低于初始狀態(tài)，說明在無氧或低氧條件下，魚體需要大量能量以抵抗脅迫因子對自身的傷害，此時將加速糖原的分解代謝[17]。麻醉組、復(fù)蘇組肌糖原含量較對照組顯著下降，說明肌肉的無氧酵解過程被啟動以提供能量，并伴隨乳酸和ATP生成[18]。復(fù)蘇24 h組肌糖原較麻醉組、復(fù)蘇組顯著增加，而復(fù)蘇24 h組肝糖原較麻醉組、復(fù)蘇組顯著降低，說明復(fù)蘇24 h羅非魚主要是通過肝糖原的降解為機體供能。有研究表明，饑餓脅迫狀態(tài)下魚優(yōu)先動用肝臟內(nèi)的儲能物質(zhì)作為能源，通過肝糖原分解和糖異生作用維持血糖平衡[19]。

圖4 二氧化碳麻醉對代謝物質(zhì)含量的影響Fig. 4 CO2 anesthesia effect on content of metabolites

羅非魚乳酸含量先上升后下降 (圖4)。乳酸是葡萄糖發(fā)生無氧酵解的產(chǎn)物，當(dāng)組織處于應(yīng)激反應(yīng)或無氧環(huán)境時，線粒體三羧酸循環(huán)中的丙酮酸不能有氧氧化而還原為乳酸。在麻醉過程中，羅非魚在缺氧狀態(tài)的麻醉液中反應(yīng)激烈，糖酵解產(chǎn)生的乳酸是無氧呼吸的最終產(chǎn)物，因此，麻醉狀態(tài)的羅非魚乳酸含量顯著高于初始水平。本實驗觀察到，復(fù)蘇組羅非魚在復(fù)蘇過程中會出現(xiàn)快速游動甚至撞壁的現(xiàn)象，可能是魚體感受到環(huán)境從無氧到有氧的快速變化，肌肉運動增強，產(chǎn)生乳酸，結(jié)果顯示復(fù)蘇組乳酸含量顯著高于復(fù)蘇24 h組。復(fù)蘇24 h期間，氧氣充足，魚體恢復(fù)正常，運動較少，乳酸參與細胞和生物體的各項生命活動，含量降低。復(fù)蘇組羅非魚肝乳酸含量較麻醉組顯著上升，而復(fù)蘇組羅非魚肌乳酸含量較麻醉組顯著下降，可能是由于復(fù)蘇需要大量能量，肝臟通過血液攝取肌肉中的乳酸，在乳酸脫氫酶的作用下進一步分解為H2O和CO2，為魚體提供能量[20]。金一春等[21]在研究CO2麻醉對白斑狗魚 (Esox lucius) 的影響中發(fā)現(xiàn)，相較麻醉前，復(fù)蘇后白斑狗魚肝糖原顯著降低，肝乳酸顯著升高，與本實驗結(jié)果一致。

2.4 CO2 麻醉對羅非魚氧化應(yīng)激指標(biāo)的影響

4組羅非魚肝臟中MDA水平呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢 (圖5)。正常生理條件下，由抗氧化酶系統(tǒng)和抗氧化物質(zhì)組成的抗氧化體系具有一定的修復(fù)能力，不斷消除自由基，使自由基的產(chǎn)生及消除處于動態(tài)平衡，而低氧脅迫會使機體發(fā)生氧化應(yīng)激，產(chǎn)生過量自由基[22-23]。MDA是過量的自由基與生物膜上的不飽和脂肪酸發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物[24]。麻醉組、復(fù)蘇組MDA含量均顯著高于對照組，表明麻醉過程極度缺氧使羅非魚產(chǎn)生了大量氧自由基，且復(fù)蘇組羅非魚體內(nèi)仍有大量氧自由基。而復(fù)蘇24 h組MDA含量較復(fù)蘇組、麻醉組顯著下降，說明復(fù)蘇24 h過程中魚體的脂質(zhì)過氧化程度得到一定緩解。為了抵抗自由基傷害，機體需合成各類抗氧化酶和抗氧化物質(zhì)以減輕魚體的氧化損傷，稱之為氧化應(yīng)激，這是機體自我保護的一種機制[25]。

圖5 二氧化碳麻醉對肝臟丙二醛、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶、總抗氧化能力的影響Fig. 5 CO2 anesthesia effect on levels of MDA, SOD,GSH-Px and T-AOC in liver

4組羅非魚肝臟中SOD、GSH-Px、T-AOC均呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢 (圖5)。SOD和GSHPx等抗氧化酶是生物體抗氧化的第一道防線，SOD可以有效清除氧自由基，同時產(chǎn)生過氧化氫，GSH-Px可以分解氫過氧化物，也可以分解MDA[26]。麻醉組羅非魚SOD、GSH-Px活性較對照組顯著下降，可能是由于魚體不適應(yīng)環(huán)境從有氧到無氧的快速變化，抗氧化酶的活性下降，整體代謝水平低，另外，魚體通過消耗自身SOD、GSHPx以抵抗氧化應(yīng)激。將羅非魚重新放入高溶氧量的復(fù)蘇環(huán)境中，魚體抗氧化酶作用被激活，復(fù)蘇組、復(fù)蘇24 h組SOD活性較麻醉組顯著上升。復(fù)蘇組、復(fù)蘇24 h組GSH-Px活性較麻醉組也顯著上升，可能是由于SOD不足以完全清除過量的自由基，需要大量GSH-Px的協(xié)同作用。

T-AOC是一個體系內(nèi)的各種抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的總體水平。對照組、麻醉組、復(fù)蘇組T-AOC的變化趨勢與SOD、GSH-Px的變化趨勢基本一致。麻醉組T-AOC較對照組顯著降低，這可能是因為CO2麻醉羅非魚時，魚體積累了許多自由基，機體不足以抵抗自由基。復(fù)蘇組、復(fù)蘇24 h組T-AOC與對照組無顯著性差異，進一步說明復(fù)蘇組羅非魚抗氧化體系被激活。復(fù)蘇24 h后，魚體總抗氧化能力回升至對照組水平，由CO2麻醉對羅非魚引起的氧化損傷可在24 h自然復(fù)蘇后得到恢復(fù)。

2.5 CO2麻醉對羅非魚肌肉質(zhì)構(gòu)特性指標(biāo)的影響

對照組、麻醉組、復(fù)蘇組、復(fù)蘇24 h組羅非魚背部肌肉的硬度呈先上升后下降的趨勢，彈性無顯著性差異 (圖6)。麻醉組羅非魚片的硬度顯著高于其余實驗組 (P＜0.05)。重度低氧脅迫時，蛋白質(zhì)分子內(nèi)或分子間發(fā)生交聯(lián)作用，蛋白分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性提高，肌原纖維蛋白的降解被抑制，影響魚肉嫩度[27]。且麻醉實驗過程中肌肉收縮加劇，糖原和ATP大量消耗，乳酸積累，線粒體活動增強，使得硬度顯著上升[28]。膠著性、咀嚼性與硬度相關(guān)，變化趨勢基本一致。王彥波等[29]的研究表明，氮氣致死顯著增加了鯽 (Carassius auratus) 的硬度、膠著性、咀嚼性，對彈性無顯著影響。

圖6 二氧化碳麻醉對質(zhì)構(gòu)指標(biāo)的影響Fig. 6 CO2 anesthesia effect on texture index

3 結(jié)論

本研究發(fā)現(xiàn)，羅非魚在15 ℃ CO2飽和水溶液中約2 min入麻，復(fù)蘇用時約為3 min。在CO2麻醉過程中，羅非魚嚴(yán)重缺氧，誘發(fā)機體產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，對機體造成嚴(yán)重的肝臟組織損傷和心肌組織損傷，消耗大量能量物質(zhì)。本文通過對血清生化指標(biāo)、代謝物質(zhì)含量指標(biāo)、抗氧化指標(biāo)、魚肉質(zhì)構(gòu)特性指標(biāo)進行評價，得出CO2麻醉對羅非魚的生理生化及魚肉品質(zhì)的影響。麻醉復(fù)蘇24 h后，魚體生理生化指標(biāo)基本恢復(fù)至對照組水平，說明飽和CO2麻醉對羅非魚造成的損傷是可逆的。因此，CO2可應(yīng)用于快速麻醉羅非魚。目前產(chǎn)業(yè)上的應(yīng)用主要采用曝氣石將CO2導(dǎo)入水體得到CO2溶液，該方法操作簡便、成本低，但產(chǎn)生的氣體顆粒較大，不利于魚體吸收，且CO2用量大[30-32]。本研究利用微孔曝氣管使水體通入CO2時形成納米級氣泡，增大氣體與水溶液的接觸面積，加快CO2飽和溶液的制備，且細微的氣泡顆粒更容易被魚體吸收，節(jié)約CO2用量，減少CO2排放量，更加節(jié)能環(huán)保，且縮短了麻醉羅非魚的時間。微孔曝氣管的成本相對較高，供氣需配備CO2氣瓶，占用空間較大，麻醉裝置尚需改進。本研究結(jié)果可為羅非魚的運輸前準(zhǔn)備提供技術(shù)參考，但羅非魚的CO2麻醉-復(fù)蘇調(diào)控機制與CO2在魚體內(nèi)的代謝途徑有待進一步研究。