楊 齡 房 昉 尹源源 解利瓊

（1 云南中醫(yī)藥大學(xué)，云南 昆明 650500；2 云南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，云南 昆明 650021；3 昆明醫(yī)科大學(xué)，云南 昆明 650500）

代謝綜合征（metabolic syndrome，MS）是指人體的蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物等物質(zhì)發(fā)生代謝紊亂的病理狀態(tài)，是一組復(fù)雜的代謝紊亂癥候群，是糖尿病、心腦血管疾病的危險(xiǎn)因素[1]。無糖尿病的MS患者發(fā)生T2DM的風(fēng)險(xiǎn)是正常人群的5倍。隨著國(guó)民生活水平的提高，MS患病率逐年上升。一項(xiàng)針對(duì)上海青浦區(qū)的調(diào)查顯示35歲以上成人MS患病率為32.40%[2]。如何預(yù)防MS的發(fā)生，減少心腦血管發(fā)病率，降低社會(huì)醫(yī)療成本就成了醫(yī)學(xué)探討的重點(diǎn)內(nèi)容之一。目前對(duì)MS的預(yù)防主要從飲食、生活習(xí)慣上入手，從飲食上說作為生活必需品的水，是家家戶戶每日都要接觸的必需品，如果可以從水入手，選擇可以起到預(yù)防MS的水，那必將成為預(yù)防MS的一大突破。目前市面上水的品種多種多樣，本研究選擇自來水、純凈水，天然高堿性水3種水作對(duì)比，觀察對(duì)比飲用3種不同水質(zhì)3個(gè)月后大鼠臟器、血糖、血脂等變化情況，期望能夠提供飲用不同的水對(duì)機(jī)體MS影響的客觀實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為人們選擇健康飲水提供參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

天然高堿性水：某品牌天然高堿性礦泉水，由云南某礦泉水有限公司出品，pH值為9.3，生產(chǎn)日期2020年1月20日，550 mL塑料瓶裝。本研究已獲得我院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)，云南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理編號(hào)：R-06202069。

純凈水：由某飲料(中國(guó))有限公司出品，pH值為6.5，生產(chǎn)日期2020年1月10日，555 mL塑料瓶裝。

生化檢測(cè)：試劑盒：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、血糖、尿酸、肌酐、尿素、三酰甘油、膽固醇、高密度脂蛋白（HLD）、低密度脂蛋白（LDL）試劑盒由雷杜/長(zhǎng)春匯力提供。全自動(dòng)生化分析儀生產(chǎn)廠家為：深圳雷杜生命科技生產(chǎn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

1月齡清潔級(jí)SD大鼠30只[由昆明醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：CXK（滇）K2015-0002]，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為3組，天然高堿性礦泉水組10只，純凈水組10只，自來水組10只，雌雄各半。各組在給予高脂飼料（由江蘇南通特洛菲飼料科技有限公司提供）的同時(shí)給予不同的水喂養(yǎng)，天然高堿性礦泉水組給予pH 9.3堿性水喂養(yǎng)，純凈水組給予pH 6.5純凈水喂養(yǎng)、自來水組給予自來水喂養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)連續(xù)3個(gè)月，實(shí)驗(yàn)期間不限制進(jìn)食及飲水。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

實(shí)驗(yàn)期間觀察動(dòng)物的一般情況。實(shí)驗(yàn)第90天禁食12 h，稱重，在麻醉狀態(tài)下從心臟取血測(cè)定大鼠肝功能、腎功能、血脂、血糖、血尿酸指標(biāo)，具體指標(biāo)包括：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、血糖、尿酸、肌酐、尿素、三酰甘油、膽固醇、HDL、LDL。

大鼠處死后肝臟固定、包埋、切片、梯度脫蠟、染色、脫水、透明、封片，行HE染色，光鏡下觀察各組大鼠肝臟的形態(tài)改變。著重觀察各組大鼠肝臟脂肪變性的情況。脂肪肝分度（F0～F4）依據(jù)肝細(xì)胞脂肪變性占據(jù)所獲取肝組織標(biāo)本量的范圍，F(xiàn)0：＜5%；F1：5%～30%；F2：31%～50%；F3：31%～50%；F4：＞75%[3]。F0計(jì)0分，F(xiàn)1計(jì)1分，F(xiàn)2計(jì)2分，F(xiàn)3計(jì)3分，F(xiàn)4計(jì)4分。脂肪肝分度的分值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，計(jì)量資料（血生化檢測(cè)結(jié)果）以（）表示，組間計(jì)量資料比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；等級(jí)資料（病理切片打分）兩組間比較使用秩和檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理學(xué)觀察

2.1.1 組織切片觀察 與純凈水組、自來水組相比，天然高堿性水組肝索、肝竇結(jié)構(gòu)清楚，肝臟未見明顯脂肪變性，或僅部分肝細(xì)胞內(nèi)見脂滴空泡，肝脂肪變性程度輕（圖1、圖2）。而純凈水組肝索、肝竇結(jié)構(gòu)紊亂，肝細(xì)胞內(nèi)含有巨大脂滴空泡，肝脂肪變性明顯，多呈中、重度脂肪變性（圖3）；自來水組肝索、肝竇結(jié)構(gòu)尚清楚，部分肝細(xì)胞內(nèi)見脂滴空泡，脂滴體積一般較小，個(gè)別脂滴體積較大。肝脂肪變性程度較輕（圖4）。

2.1.2 組織切片打分 天然高堿性水組脂肪肝分度多為F0～F1；純凈水組脂肪肝分度多為F2～F3；自來水組，脂肪肝分度多為F1～F2。肝脂肪分度的結(jié)果進(jìn)行等級(jí)資料秩和檢驗(yàn)，通過對(duì)各組大鼠肝臟的脂肪變性情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。結(jié)果顯示，天然堿性水組與純凈水組秩均值差異明顯，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.035）；自來水組和純凈水組相比，秩均值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.044）；天然堿性水組與自來水組相比，秩均值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P=0.768。見表1。

表1 肝組織切片打分的比較（n）

2.2 血生化結(jié)果

2.2.1 天然高堿性水組與純凈水組相比 結(jié)果顯示，與純凈水組相比，天然高堿性水組血糖、ALT、LDL明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與純凈水相比，天然高堿性水組膽固醇下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 天然高堿性水組與純凈水組血生化指標(biāo)比較

2.2.2 天然高堿性水組與自來水組相比 結(jié)果顯示，與自來水組相比，天然高堿性水組血糖、尿酸明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與自來水組相比，天然高堿性水組ALT、肌酐、尿素、TG、TC、LDL有所下降，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表3。

表3 天然高堿性水組與自來水組血生化指標(biāo)比較

3 討論

在MS里比較常見的臨床表現(xiàn)有：脂代謝異常、血糖升高、尿酸升高，而脂代謝異常早期常常表現(xiàn)為肝臟的脂肪變。通過本實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在大鼠給予高脂飼料的同時(shí)，給予天然高堿性水干預(yù)能明顯減輕大鼠肝脂肪變性，大鼠血糖升高情況也較純凈水組及自來水組低，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明天然高堿性水對(duì)大鼠脂肪肝有一定預(yù)防作用，并在某種程度上能預(yù)防大鼠血糖升高。在張照英和舒為群[4]實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)期飲用純凈水可引起大鼠血鎂降低，可能導(dǎo)致脂質(zhì)代謝障礙，血脂增高。黃海雄等[5]實(shí)驗(yàn)提示天然礦泉水有利于肝功能恢復(fù)，可預(yù)防脂肪肝。在汪澍等[6]的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)2型糖尿病大鼠飲用鍶礦泉水可降低TC和TG，且聯(lián)合格列美脲治療者效果更佳，可能對(duì)延緩2型糖尿病的進(jìn)程及預(yù)防脂肪肝的形成有一定作用。還有研究表明，堿性水能夠抑制高血脂的形成和血脂的氧化，從而降低血脂，還有利于心、腦血管疾病的防治[7]。王豫廉[8]的試驗(yàn)結(jié)果顯示，飲用堿性水能使原發(fā)性高血壓患者、糖尿病患者及血糖偏高者、高脂血癥血壓、血糖、三酯甘油和總膽固醇顯著降低。其次，與自來水組相比，天然高堿水組尿酸升高也不明顯，但于莎莉等[9]研究表明pH值為（9.3±0.6）的堿性飲用水能有效預(yù)防小鼠高尿酸血癥及其引起的急性腎臟組織損傷。與本研究結(jié)果不相符。原因可能與高堿性礦泉水中含有多種微量元素，如偏硅酸、鈉、鉀、鈣、鍶、鎂、硒、鍺、溴等相關(guān)。有文獻(xiàn)顯示[10-12]，飲水中低鎂可影響血脂代謝，純凈水由于不含有鎂等微量元素，飲用純凈水可不同程度影響大鼠脂代謝關(guān)鍵酶活性及載脂蛋白含量，長(zhǎng)期飲用可能對(duì)脂蛋白代謝有負(fù)面影響；通過飲水途徑補(bǔ)充鎂可影響載脂蛋白的含量，從而調(diào)節(jié)血脂異常，起到保護(hù)作用。通過以上資料初步考慮礦泉水中的多種有益的微量元素影響了脂質(zhì)代謝，抑制了大鼠肝臟脂肪病變，控制了血糖上升。

本次實(shí)驗(yàn)為MS患者中患有脂肪肝及有糖尿病危險(xiǎn)因素人群提供了一定的科學(xué)健康飲水參考，關(guān)于天然高堿性水對(duì)大鼠肝臟脂肪變及血糖抑制的具體機(jī)制還需要進(jìn)一步證實(shí)。另外，天然高堿性水對(duì)大鼠其他代謝綜合征的臨床影響還有待于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)觀察。