曹圓圓 魏秀雲(yún)

尿沉渣是尿有形成分經(jīng)離心沉淀。在顯微鏡下見(jiàn)到的尿有形成分，包括尿紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型、結(jié)晶、上皮細(xì)胞等。多以尿干化學(xué)法進(jìn)行檢驗(yàn)，結(jié)果尚可，但誤差較大，容易出現(xiàn)誤診、錯(cuò)診問(wèn)題[1]。尿沉渣檢查可以彌補(bǔ)尿理化檢查不足造成的漏診，對(duì)輔助泌尿系統(tǒng)疾病的診斷，尤其對(duì)腎臟疾病診斷與鑒別起著重要作用，是腎臟疾病實(shí)驗(yàn)診斷的最常用手段[2]。目前，尿液有形成分分析方法主要有光學(xué)顯微鏡人工鏡檢以及各種自動(dòng)化分析儀。而尿液中紅細(xì)胞的檢驗(yàn)，有助于了解泌尿系統(tǒng)各部位的病理變化，對(duì)泌尿系統(tǒng)疾病的診斷、鑒別診斷和預(yù)后判斷等有重要意義。實(shí)驗(yàn)室對(duì)尿紅細(xì)胞的檢查常聯(lián)合尿干化學(xué)和沉渣進(jìn)行分析，二者之間相輔相成、互相印證[3]。但由于現(xiàn)有的常規(guī)檢查方法均存在一定的局限性，因此，我們對(duì)UF-5000 和UC-3500 檢測(cè)尿紅細(xì)胞和白細(xì)胞的結(jié)果與顯微鏡的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較，并對(duì)二者聯(lián)合應(yīng)用的價(jià)值進(jìn)行探討，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 用一次性潔凈塑料杯采集杭州市腫瘤醫(yī)院2021 年1 月至2021 年9 月門(mén)診、住院患者隨機(jī)新鮮中段尿液樣本共2870 份，男1321 例，女1549 例，年齡2～80 歲。樣本采集后立即送檢，于2 h 內(nèi)完成檢測(cè)。

1.2 儀器與試劑 SYSME 公司UF-5000 全自動(dòng)尿有形成分分析儀、UC-3500 尿干化學(xué)分析儀及配套試劑、質(zhì)控品及試紙條。OLYMPUS CX21 光學(xué)顯微鏡、離心機(jī)、尿液刻度離心管。

1.3 檢測(cè)方法 檢測(cè)前對(duì)UF-5000 和UC-3500 進(jìn)行質(zhì)控測(cè)試，確保質(zhì)控通過(guò)后再進(jìn)行標(biāo)本檢測(cè)。所有送檢標(biāo)本均使用一次性清潔尿杯收集晨尿20 mL，分成兩組，每份10 mL 尿液標(biāo)本：一組立即以UC-3500干化學(xué)和UF-5000 尿有形成分檢測(cè)，儀器檢測(cè)嚴(yán)格按照儀器SOP 進(jìn)行操作。另一組將尿液進(jìn)行均勻混合，以轉(zhuǎn)速1500 r/min，離心5 min，將清液去除后留取0.2 mL 尿沉渣進(jìn)行混勻，取20 μL 滴入載玻片內(nèi)。由2 名有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)人員用OLYMPUS CX21 光學(xué)顯微鏡進(jìn)行鏡檢，兩次結(jié)果取平均值為最終結(jié)果。檢測(cè)完畢后，將檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行詳細(xì)記錄。儀器和顯微鏡檢查操作人員均為固定的檢驗(yàn)人員。

1.4 結(jié)果判斷 UC-3500 干化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果以±、＋、＋＋、＋＋＋為陽(yáng)性。UF-5000 以紅細(xì)胞>32.6 個(gè)/μL 為陽(yáng)性，白細(xì)胞>33.8 個(gè)/μL 為陽(yáng)性。顯微鏡鏡檢紅細(xì)胞>3 個(gè)/HP 為陽(yáng)性；白細(xì)胞＞5 個(gè)/HP 為陽(yáng)性。聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性界定標(biāo)準(zhǔn)：UF-5000 或UC-3500 任一檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，組間差異采用配對(duì)χ2檢驗(yàn)。使用受試者工作特征（ROC）曲線分析UF-5000、UC-3500 的診斷價(jià)值。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 UF-5000 與顯微鏡檢測(cè)尿紅細(xì)胞結(jié)果比較2870 份尿液標(biāo)本中，UF-5000 與顯微鏡檢測(cè)尿液紅細(xì)胞結(jié)果比較，假陽(yáng)性率4.56%，假陰性率32.46%。UF-5000 檢測(cè)尿液紅細(xì)胞陽(yáng)性數(shù)517 例（18.01%），陰性2353 例（81.99%）；顯微鏡檢測(cè)尿液紅細(xì)胞陽(yáng)613 例（21.36%），陰性2257 例（78.64%）。UF-5000方法和顯微鏡檢測(cè)診斷結(jié)果一致性為89.48%（Kappa=0.668，P <0.001）；UF -5000 診斷陽(yáng)性率為18.01%，明顯低于顯微鏡檢測(cè)診斷（21.36%），且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。UF-5000 方法的敏感度67.53%，特異度95.43%。ROC 曲線下面積為0.815，95%CI：0.792～0.838，P<0.001。見(jiàn)表1、圖1。

2.2 UC-3500 尿干化學(xué)分析儀與顯微鏡檢測(cè)尿紅細(xì)胞結(jié)果比較 2870 份尿液標(biāo)本中，UC-3500 與顯微鏡檢測(cè)尿液紅細(xì)胞結(jié)果比較假陽(yáng)性率17.46%，假陰性率9.62%。UC-3500 干化學(xué)分析紅細(xì)胞陽(yáng)性948例（33.03%），陰性1922 例（66.97%），顯微鏡檢測(cè)尿液紅細(xì)胞陽(yáng)675 例（21.36%），陰性2195 例（78.64%）。UC-3500 方法和顯微鏡檢測(cè)診斷結(jié)果一致性為84.21%（Kappa=0.608，P<0.001）；UC-3500 診斷陽(yáng)性率33.03%，明顯高于顯微鏡檢測(cè)診斷（21.36%），且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。敏感度為90.37%，特異度為82.54%，ROC 曲線下面積為0.865，95%CI：0.865～0.893，P<0.001。見(jiàn)表1、圖1。

2.3 UF-5000 和UC-3500 聯(lián)合檢測(cè)與顯微鏡檢測(cè)尿液紅細(xì)胞結(jié)果比較 聯(lián)合檢測(cè)紅細(xì)胞陽(yáng)性數(shù)1033例（35.99%），陰性數(shù)1837 例（64.01%），與顯微鏡檢測(cè)結(jié)果比較，假陽(yáng)性率19.81%，假陰性率4.4%（與單獨(dú)UF-5000 比較，P<0.001），聯(lián)合法和顯微鏡檢測(cè)診斷結(jié)果一致性為85.37%（Kappa=0.607，P<0.001）；聯(lián)合診斷陽(yáng)性率35.99%，明顯高于顯微鏡檢測(cè)診斷（21.36%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。敏感度95.59%，特異度80.19%，ROC 曲線下面積0.879，95%CI：0.865～0.893，P<0.001。見(jiàn)表1、圖1。

表1 UF-5000 自動(dòng)化尿沉渣分析儀與顯微鏡檢測(cè)尿液紅細(xì)胞結(jié)果[例（%）]

圖1 UF-5000、UC-3500 分析儀單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)尿紅細(xì)胞的ROC 曲線

2.4 UF-5000 與顯微鏡檢測(cè)尿白細(xì)胞結(jié)果比較UF-5000 與顯微鏡檢測(cè)結(jié)果比較，假陽(yáng)性率3.74%，假陰性率11.91%。UF-5000 檢測(cè)尿液白細(xì)胞陽(yáng)性610 例（21.25%），陰性2260 例（78.75%）；顯微鏡檢測(cè)尿液白細(xì)胞陽(yáng)性620 例（21.60%），陰性2250 例（78.40%）。UF-5000 方法和顯微鏡檢測(cè)診斷結(jié)果一致性為94.84%（Kappa=0.836，P<0.001）；UF-5000 診斷陽(yáng)性率21.25%，與顯微鏡檢測(cè)診斷（21.60%）比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.085）。敏感度88.09%，特異 度96.26%。ROC 曲線下面積為0.922，95%CI：0.906～0.938，P<0.001。見(jiàn)表2、圖2。

2.5 UC-3500 與顯微鏡檢測(cè)尿白細(xì)胞結(jié)果比較UC-3500 白細(xì)胞陽(yáng)性523 例（18.22%），陰性2347 例（81.78%），與顯微鏡檢測(cè)結(jié)果比較，假陽(yáng)性率2.51%，假陰性率21.82%。UC-3500 方法和顯微鏡檢測(cè)診斷結(jié)果一致性為93.48%（Kappa=0.793，P<0.001）；UF-3500 診斷陽(yáng)性率18.22%，低于顯微鏡檢測(cè)診斷（20.77%），且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。敏感度78.18%，特異度97.47%。ROC 曲線下面積為0.878，95%CI：0.858～0.899，P<0.001。見(jiàn)表2、圖2。

2.6 UF-5000 和UC-3500 聯(lián)合檢測(cè)與顯微鏡檢測(cè)尿液白細(xì)胞結(jié)果比較 UF-5000 聯(lián)合UC-3500 檢測(cè)白細(xì)胞陽(yáng)性699 例（24.36%），陰性2171 例（75.64%）；與顯微鏡檢測(cè)結(jié)果比較，假陽(yáng)性率為7.34%，假陰性率10.74%（與單獨(dú)UC-3500 比較，P<0.001），聯(lián)合法和顯微鏡檢測(cè)診斷結(jié)果一致性為92.99%（Kappa=0.770，P<0.001）；聯(lián)合診斷陽(yáng)性率24.36%，高于顯微鏡檢測(cè)診斷（22.51%），且差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001）。敏感度89.26%，特異度92.66%。ROC 曲線下面積0.910，95%CI：0.894～0.925，P<0.001。見(jiàn)表2、圖2。

圖2 UF-5000、UC-3500 分析儀單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)尿白細(xì)胞的ROC 曲線

表2 UF-5000 自動(dòng)化尿沉渣分析儀與顯微鏡檢測(cè)尿液白細(xì)胞結(jié)果[例（%）]

3 討論

尿常規(guī)檢查是一項(xiàng)用來(lái)進(jìn)行多種疾病初步檢查的常見(jiàn)檢查方法，傳統(tǒng)的檢驗(yàn)方式是顯微鏡檢測(cè)法。聯(lián)檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，臨床上出現(xiàn)了多種檢驗(yàn)儀器和檢驗(yàn)試劑盒，并被廣泛地應(yīng)用于尿常規(guī)檢查[4]。

在尿液分析中，尿液有形成分是重要的檢測(cè)內(nèi)容，采用自動(dòng)化分析儀能有效提高工作效率，減輕工作強(qiáng)度。UF-5000 尿液有形成分分析儀采用熒光染色流式細(xì)胞術(shù)，針對(duì)有核和無(wú)核成分分別染色，提高了檢測(cè)正確性。鏡下血尿是一系列泌尿系病理變化的初始信號(hào)，無(wú)癥狀血尿的檢測(cè)對(duì)疾病的早期診斷十分重要[5]。UF-5000 具有以下幾點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：標(biāo)本不需要離心、操作簡(jiǎn)單快速，同時(shí)樣本重復(fù)性好，在臨床上應(yīng)用廣泛。盡管尿有形成分檢測(cè)最有效的方法就是顯微鏡檢測(cè)法，其缺點(diǎn)是操作復(fù)雜，無(wú)法滿足臨床大量樣本的需求。但對(duì)于自動(dòng)尿液分析儀的基本性能需要采用人工顯微鏡檢對(duì)其進(jìn)行評(píng)估，以使自動(dòng)尿液分析儀發(fā)揮最大的功效，在提高工作效率基礎(chǔ)上確保結(jié)果的正確可靠。干化學(xué)分析儀UC-3500 采用傳統(tǒng)的尿液干化學(xué)分析技術(shù)和原理，其優(yōu)點(diǎn)是不僅能檢測(cè)完整的紅細(xì)胞，還能檢測(cè)被破壞的紅細(xì)胞（隱血試驗(yàn)），同時(shí)還可以通過(guò)白細(xì)胞酯酶間接檢測(cè)白細(xì)胞量[6-7]。然而，臨床實(shí)踐證實(shí)，干化學(xué)分析存在較高的假陽(yáng)性和假陰性，其原因可能與尿液中存在不穩(wěn)定過(guò)氧化物酶、尿液被氧化劑污染、尿路感染時(shí)某些細(xì)菌產(chǎn)生過(guò)氧化物酶或尿液中存在游離的血紅蛋白或肌紅蛋白等有關(guān)[8-9]；此外，當(dāng)尿中有肌紅蛋白、氧化劑、易熱性觸酶或大量細(xì)菌時(shí)，可使干化學(xué)出現(xiàn)紅細(xì)胞假陽(yáng)性；而當(dāng)尿中白細(xì)胞為非中性粒細(xì)胞時(shí)可能出現(xiàn)白細(xì)胞假陰性。

表3 UF-5000、UC-3500 分析儀檢測(cè)檢測(cè)白細(xì)胞、紅細(xì)胞的敏感度和特異度

由于尿液檢測(cè)干擾因素很多，部分臨床醫(yī)生對(duì)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)缺乏分析能力，不清楚檢測(cè)數(shù)據(jù)假陽(yáng)性、假陰性問(wèn)題，單純依賴檢驗(yàn)數(shù)據(jù)可能會(huì)由于一個(gè)錯(cuò)誤的數(shù)據(jù)而引起誤診[10-11]。假陽(yáng)性率和假陰性率是評(píng)估檢驗(yàn)方法或檢驗(yàn)系統(tǒng)的主要指標(biāo)，分別代表誤診率和漏診率，尤其是假陰性率（漏診率）最為重要。根據(jù)ISO15189 評(píng)審要求，尿液分析假陰性率應(yīng)低于5%。本研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)UF-5000 和UC-3500 單獨(dú)檢測(cè)應(yīng)用時(shí)，與顯微鏡手工鏡檢法相比較，均具有較高的敏感性和檢出率，但同時(shí)均具有較高的假陰性率，總體上均高于規(guī)定的要求，但兩者假陰性率差異較大。UF-5000 檢測(cè)RBC 的假陰性率較高，達(dá)到32.5%，而UC-3500 檢測(cè)WBC 的假陰性率較高，達(dá)到21.8%；表明二者單獨(dú)檢測(cè)的漏診率均較高，一定程度不符合臨床診療的要求。當(dāng)兩者聯(lián)合檢測(cè)應(yīng)用時(shí)，紅細(xì)胞和白細(xì)胞檢測(cè)的假陰性均顯著降低，紅細(xì)胞為6.65%，白細(xì)胞為11.46%；表明聯(lián)合應(yīng)用UF-5000 和UC-3500 檢測(cè)可顯著降低漏診率。檢測(cè)符合率是評(píng)估檢測(cè)系統(tǒng)或方法整體一致性的基本指標(biāo)，整合了陽(yáng)性和陰性一致性。在本研究中，UF-5000 和UC-3500 聯(lián)合檢測(cè)比單獨(dú)檢測(cè)的整體符合率略有降低，可能是聯(lián)合檢測(cè)敏感性或特異性增高而特異性或敏感性降低不一致所致，但兩者結(jié)果基本相當(dāng)，吻合率較高，提示檢測(cè)系統(tǒng)的組合模式并不明顯影響結(jié)果的正確度，表明其總體檢測(cè)效率接近。

由于假陰性率（漏診率）是臨床和實(shí)驗(yàn)室重點(diǎn)關(guān)注的指標(biāo)，UF-5000 和UC-3500 聯(lián)合應(yīng)用不僅可顯著降低漏診率，還提高了尿液檢測(cè)的敏感性，更適用于尿液檢驗(yàn)常規(guī)篩查工作，可大大地減少手工鏡檢法給檢驗(yàn)工作人員帶來(lái)的工作量。盡管UF-5000 和UC-3500 聯(lián)合檢測(cè)仍不能完全達(dá)到臨床實(shí)驗(yàn)室的性能要求，但在日常的工作中，我們可結(jié)合實(shí)際情況，基于聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果制定合適的顯微鏡復(fù)檢規(guī)則，針對(duì)可疑結(jié)果使用顯微鏡對(duì)樣本進(jìn)行復(fù)檢，既可以最大程度提高工作效率，更能有效降低漏診、誤診，為臨床提供更加準(zhǔn)確的診斷依據(jù)。通過(guò)檢測(cè)結(jié)果可制定合理的臨床治療方案，對(duì)預(yù)后評(píng)估具有重要參考價(jià)值，可為臨床用藥提供有效支持[12]。