郭前爽, 卓富彥, 朱景全, 陳慶華, 朱 鳳, 黃德超, 杜永均,*

(1. 浙江大學(xué)農(nóng)藥與環(huán)境毒理研究所, 杭州 310058; 2. 全國(guó)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心, 北京 100125;3. 四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所, 農(nóng)業(yè)部西南作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 成都 610066;4. 江蘇省植物保護(hù)植物檢疫站, 南京 210036; 5. 廣東省農(nóng)業(yè)有害生物預(yù)警防控中心, 廣州 510500)

大螟Sesamiainferens(鱗翅目: 夜蛾科)幼蟲(chóng)是多食性害蟲(chóng)，寄主范圍廣，包括水稻、玉米、甘蔗、高粱、谷子、麥類、茭白、油菜、向日葵等農(nóng)作物，以及其他禾本科和莎草科的雜草(金翠霞和吳亞, 1986)。大螟主要分布于我國(guó)34°N以南以及日本、韓國(guó)等地區(qū)(顧海南, 1985; 徐麗娜等, 2011)。近幾年大螟在廣東、浙江、江蘇、四川等地發(fā)生危害程度上升較快，有些地區(qū)因?yàn)榉揽囟鳦hilosuppressalis而過(guò)度施用化學(xué)農(nóng)藥，導(dǎo)致大螟甚至比二化螟的發(fā)生還要嚴(yán)重，抗藥性顯著增強(qiáng)，難防治(黃誠(chéng)華等, 2005)，如浙江溫嶺縣的大螟田間種群對(duì)稻豐散已經(jīng)產(chǎn)生了一定的抗藥性，局部地區(qū)大螟對(duì)多殺菌素敏感性明顯下降(趙鈞等, 2016)。大螟是非遷飛性害蟲(chóng)，因此，可以通過(guò)性信息素群集誘殺有效地控制越冬代或利用交配干擾技術(shù)減低基數(shù)(杜永均等, 2013)；另一方面，則是可利用性誘監(jiān)測(cè)確定下一代的發(fā)育進(jìn)程，特別是下一代卵期和卵孵化盛期，從而可以準(zhǔn)確計(jì)算施藥或人工釋放寄生蜂的時(shí)間范圍。

鱗翅目昆蟲(chóng)的雌蛾在羽化后、性成熟時(shí)以一定的晝夜節(jié)律產(chǎn)生求偶行為，典型的表現(xiàn)為翅振、產(chǎn)卵器伸展等，性腺中合成的性信息素會(huì)釋放至體外，并借助于氣流擴(kuò)散，引誘同種異性，從而完成交配。因此，求偶行為在昆蟲(chóng)繁殖中起關(guān)鍵作用。大螟羽化后當(dāng)天就可以求偶、交配，而且交配的比例很高(Nagayamaetal., 2004)。大螟性信息素的主要成分為順11-十六碳烯乙酸酯(Z11-16∶Ac)和順11-十六碳烯醇(Z11-16∶OH)(Nesbittetal., 1976; Zhuetal., 1987; Nagayamaetal., 2006)。因此，對(duì)于這樣沒(méi)有遷飛習(xí)性的、本地蟲(chóng)源的害蟲(chóng)，利用性信息素群集誘殺或交配干擾是非常理想的。昆蟲(chóng)雌成蟲(chóng)的性信息素生物合成、釋放，以及雄成蟲(chóng)的嗅覺(jué)反應(yīng)、求偶和交配行為天生具有晝夜節(jié)律(Groot, 2014; Levi-Zada and Byers, 2021)，對(duì)其機(jī)理的理解與性信息素的應(yīng)用策略密切相關(guān)。水稻中除了大螟還有二化螟，甚至少數(shù)地區(qū)可能還有三化螟和臺(tái)灣稻螟的危害，因此，對(duì)于作物生境中多靶標(biāo)害蟲(chóng)，采用群集誘殺技術(shù)比較難操作，采用誘捕器的成本比較高，人工操作勞動(dòng)力成本更高，而理想的方法是采用交配干擾技術(shù)。因?yàn)樗狙砻绫容^細(xì)嫩，水稻中無(wú)法采用類似果園中的聚乙烯管或其他釋放器，因此，我們開(kāi)發(fā)了采用超劑量自動(dòng)噴施信息素的方法實(shí)現(xiàn)交配干擾。昆蟲(chóng)的求偶和交配行為都有晝夜節(jié)律，在白天和夜晚的許多時(shí)間昆蟲(chóng)并沒(méi)有求偶和交配行為，如聚乙烯(PE)塑料管一類、具基質(zhì)的性信息素釋放器24 h都在釋放，因此，大部分時(shí)間內(nèi)釋放的性信息素化合物是浪費(fèi)的。對(duì)于交配和求偶行為的晝夜節(jié)律的深入理解，有助于設(shè)計(jì)交配干擾技術(shù)及其田間應(yīng)用方法，同時(shí)，也有助于分析誘蛾量與環(huán)境因子的關(guān)系，從而提高性誘測(cè)報(bào)的精準(zhǔn)性。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx(chóng)

于2021年4月從寧波市東吳鎮(zhèn)水稻田割取稻樁，帶回實(shí)驗(yàn)室后，放置到養(yǎng)蟲(chóng)籠中，室溫下飼養(yǎng)，待其羽化后，當(dāng)日雌雄分開(kāi)放置在直徑28 cm、高32 cm的折疊養(yǎng)蟲(chóng)籠中，并喂食10%葡萄糖水。

1.2 大螟交配行為觀察

將當(dāng)晚新羽化的大螟按雌雄1∶1的數(shù)量配對(duì)，放置在500 mL的塑料杯中，用紅光燈每隔20 min觀察1次，并記錄雌雄蛾交尾開(kāi)始時(shí)間，結(jié)束時(shí)間，共觀察到20對(duì)交配。

產(chǎn)卵器伸展行為觀察：將18頭未交配的雌蛾單獨(dú)放置在500 mL容積的廣口塑料瓶中，每隔20 min觀察一次，記錄開(kāi)始時(shí)間及結(jié)束時(shí)間，觀察時(shí)采用紅光照明。

1.3 性信息素的提取、鑒定及其合成和釋放晝夜節(jié)律的測(cè)定

每隔2 h提取單頭、未交配雌性大螟的性信息素，采用溶劑浸提和固相微萃取(solid phase microextration, SPME) 2種方法。溶劑浸提法：輕輕擠壓雌蛾腹部，使性腺暴露出來(lái)，用清洗烘干的眼科剪剪下，用濾紙吸去水分后，放置在玻璃色譜瓶中，加入50 μL色譜級(jí)正己烷，浸提1 h后，將正己烷吸出，采用微氮?dú)饬鳚饪s提取液備用。SPME法：性信息素釋放的晝夜節(jié)律使用2日齡、未交配的雌蛾。SPME法參照文獻(xiàn)(Hughes and Cardé, 2020)，采用SPME直接吸附性信息素腺體外表的分泌物。SPME吸附纖維為(polydimethylsiloxane/divinyl benzene, PDMS/DVB; 膜厚=100 μm; Supelco Inc., Bellefonte, PA)。每個(gè)時(shí)段，測(cè)試、提取6個(gè)雌蛾的性信息素。

氣質(zhì)聯(lián)用儀采用安捷倫6890GC-5975MS并配有DB-FastFAME毛細(xì)管柱(60 m×0.25 mm×0.25 μm)。程序升溫: 60℃停留1 min，然后每分鐘升溫10℃至180℃，之后每分鐘升溫3℃ 至210℃，再每分鐘升溫10℃ 至250℃維持10 min。離子源溫度為230℃，能壓70 eV載氣為氦氣。 稱取Z11-16∶Ac，用正己烷稀釋成50, 100, 200, 500和1 000 ng/μL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)樣1 μL測(cè)定不同濃度的對(duì)應(yīng)峰面積。制做性信息素化合物的劑量和峰面積曲線得到相應(yīng)的函數(shù)，由此計(jì)算單個(gè)性信息素化合物的滴度。

1.4 田間誘蛾晝夜節(jié)律記錄方法

采用寧波紐康生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的新型害蟲(chóng)自動(dòng)監(jiān)測(cè)工具“賽撲星”昆蟲(chóng)性誘電子智能測(cè)報(bào)系統(tǒng)(SPT-F-02)監(jiān)測(cè)每日、每小時(shí)田間誘蛾動(dòng)態(tài)。該系統(tǒng)利用性誘的專一性，結(jié)合電子通訊技術(shù)，田間實(shí)時(shí)自動(dòng)、準(zhǔn)確計(jì)數(shù)，無(wú)線傳輸至云端數(shù)據(jù)庫(kù)。性誘智能測(cè)報(bào)系統(tǒng)每隔1 h發(fā)送1次數(shù)據(jù)。賽撲星性誘智能測(cè)報(bào)系統(tǒng)同時(shí)記錄了當(dāng)日每小時(shí)誘捕器周圍的溫度和濕度。監(jiān)測(cè)系統(tǒng)設(shè)置于四川省綿陽(yáng)市三臺(tái)縣(31.38°N, 104.91°E)、四川省瀘州市敘永縣(28.20°N, 105.47°E)、廣東省惠州市博羅縣(23.22°N, 114.04°E)、浙江省諸暨市(29.83°N, 120.39°E)、浙江省長(zhǎng)興縣(31.00°N, 120.01°E)、浙江省吳興區(qū)(30.67°N, 120.03°E)和江蘇省姜堰區(qū)(32.53°N, 120.22°E) 7個(gè)縣的水稻種植區(qū)。

1.5 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)所得數(shù)據(jù)結(jié)果采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行分析。多組比較采用 單因素方差分析(one-way ANOVA)法，顯著性分析采用LSD法，兩組平均數(shù)間顯著性差異比較采用Student 氏t檢驗(yàn)法。利用Pearson相關(guān)系數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析，相關(guān)性分析的顯著性用雙尾t檢驗(yàn)分析?；貧w分析采用線性回歸法。顯著性分析時(shí)P>0.05 表示差異不顯著，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 大螟性信息素合成和釋放的晝夜節(jié)律

經(jīng)計(jì)算得到Z11-16∶AC的含量(C)與峰面積(A)的標(biāo)準(zhǔn)曲線C=1×10-6A,R2=0.997。大螟性信息素的生物合成和釋放有一定的時(shí)間差異，采用溶劑浸提的方法提取單個(gè)大螟雌蛾的性信息素時(shí)(圖1: A)，始于暗期前1 h就可檢測(cè)到性信息素化合物，然后在暗期開(kāi)始后4 h性信息素含量逐漸增加，至暗期8 h，達(dá)到一個(gè)高峰，Z11-16∶Ac滴度達(dá)到平均單雌60.5±25.6 ng，Z11-16∶OH滴度為12.4±1.9 ng。之后性信息素化合物的含量略降低，但在光期后1 h，又可以檢測(cè)到性信息素化合物的一個(gè)高峰，光期5 h還可以被顯著檢測(cè)到，Z11-16∶Ac滴度還達(dá)到平均單雌96.9±20.9 ng，Z11-16∶OH滴度為26.7±6.6 ng(圖2: A)。整個(gè)暗期Z11-16∶Ac和Z11-16∶OH的比例平均為2.8±1.9，而光期Z11-16∶Ac和Z11-16∶OH的比例平均為2.5±0.9，統(tǒng)計(jì)上沒(méi)有顯著差異(P=0.770)。

同時(shí)，SPME吸附大螟分泌至腺體外的性信息素化合物(圖1: B)，分析結(jié)果顯示，在暗期之前未能檢測(cè)到性信息素化合物，到了暗期后的6 h才檢測(cè)到性信息素化合物，然后，逐漸增加，到暗期后10 h達(dá)到最高峰，Z11-16∶Ac平均單雌含量30.4±9.5 ng，Z11-16∶OH則為3.2±1.0 ng。但光期后1 h，依然保持較高的量，Z11-16∶Ac平均單雌含量為28.9±10.9 ng，Z11-16∶OH的則為4.5±1.4 ng。Z11-16∶Ac/Z11-16∶OH比例顯著降低(P<0.05)。光期后3-5 h也能檢測(cè)到，但非常微量(圖2: B)。整個(gè)暗期Z11-16∶Ac和Z11-16∶OH的比例平均為8.5±1.2，而光期Z11-16∶Ac和Z11-16∶OH的比例平均為5.7±0.6，統(tǒng)計(jì)上差異顯著(P=0.02)，同時(shí)也遠(yuǎn)高于浸提法中的比例(圖2)。顯然浸提代表的是腺體中的總性信息素化合物含量，體外吸附表示的是已經(jīng)分泌出腺體外的量，不僅兩者在量和時(shí)間上有差異，而且Z11-16∶Ac和Z11-16∶OH的比例差異也很大。

圖1 大螟雌蛾性信息素化合物的氣質(zhì)聯(lián)用離子流圖Fig. 1 Ion chromatogram of sex pheromone compoundsof female moths of Sesamia inferens by GC-MSA: 溶劑浸提Solvent extract; B: SPME吸附SPME adsorption.

2.2 大螟產(chǎn)卵器伸展行為的晝夜節(jié)律

雌蛾在進(jìn)入求偶發(fā)情期后靜止不動(dòng)，尾部略微抬起，將產(chǎn)卵器伸出體外，性腺外翻，性腺外翻的時(shí)間發(fā)生在暗期后的6-8 h (圖3)。這個(gè)時(shí)間段與性信息素釋放至腺體體表外的時(shí)間一致(圖2: B)。

圖2 大螟雌蛾性信息素合成和釋放的晝夜節(jié)律Fig. 2 Circadian rhythm of the synthesis and release ofsex pheromone of female moths of Sesamia inferensA: 溶劑浸提Solvent extract; B: SPME吸附SPME adsorption. L: 光照期Photophase; D: 暗期Scotophase.下同The same below. 圖中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤；柱上不同小寫(xiě)和大寫(xiě)字母分別表示Z11-16∶Ac和Z11-16∶OH滴度差異顯著(P<0.05, LSD法)。Data in the figure are mean±SE. Different lowercase and capital letters above bars indicate significant difference (P<0.05) in the Z11-16∶Ac and Z11-16∶OH titers, respectively, by LSD method.

圖3 大螟雌蛾產(chǎn)卵器外翻伸展行為的晝夜節(jié)律Fig. 3 Circadian rhythm of the extrusion behavior ofthe ovipositor of female moths of Sesamia inferens

2.3 大螟交配的晝夜節(jié)律

大螟雌雄蛾在光期未發(fā)現(xiàn)有交配現(xiàn)象，交配時(shí)間主要集中在暗期后的4-8 h內(nèi)，但暗期后的8-10 h時(shí)間段只有不足5%(圖4: A)。大螟雌蛾的交配平均持續(xù)時(shí)間為83.4±5.0 min(圖4: B)。

未交配過(guò)的雌蛾產(chǎn)卵器伸出的平均持續(xù)時(shí)間為80.8±4.4 min(圖4: B)。從中可以發(fā)現(xiàn)，大螟交配的起始時(shí)間早于性信息素釋放至腺體體表外的時(shí)間1～2 h，但與性信息素在腺體內(nèi)的快速合成時(shí)間(溶劑浸提的性信息素滴度變化)相吻合(圖2: A, B)。

圖4 大螟交配行為的晝夜節(jié)律以及交配率(A)和產(chǎn)卵器伸展行為的持續(xù)時(shí)間(B)Fig. 4 Circadian rhythm of mating behavior and the mating rate (A) and the durationof ovipositor extrusion behaviors (B) of Sesamia inferens

2.4 田間大螟雄蛾被性信息素誘捕的晝夜節(jié)律

由于各地作物布局的差異，大螟又是多食性的，因此，監(jiān)測(cè)系統(tǒng)誘捕到的雄蛾的動(dòng)態(tài)在不同地點(diǎn)之間有較大的差異。四川省三臺(tái)縣測(cè)報(bào)點(diǎn)的大螟誘蛾量在3月下旬開(kāi)始至6月上旬的越冬代較高，有明顯的誘蛾高峰期，但之后到9月中旬之前，雖有一定誘蛾量，但沒(méi)有明顯的世代峰期(圖5: A)；越冬代誘蛾呈現(xiàn)明顯的晝夜節(jié)律，從暗期2 h開(kāi)始，至光期1 h， 高峰在暗期7 h(圖6: A)。6月至9月誘蛾發(fā)生在黑暗后的2-10 h內(nèi)，但誘蛾峰形不明顯。 四川敘永縣則有2個(gè)大螟的誘蛾高峰，越冬代的誘蛾晝夜節(jié)律與三臺(tái)接近，但8月份誘蛾晝夜節(jié)律時(shí)間更分散(圖6: C)。江蘇省泰州市姜堰的2個(gè)測(cè)報(bào)點(diǎn)(圖5: B)，雖然日誘蛾高峰期不一樣，但誘蛾的晝夜節(jié)律基本一致，都在暗期的6-10 h之間(圖6: E, F, G, H)。越冬代蛾量不大，但第1代和2代誘蛾量較大。浙江省湖州長(zhǎng)興縣的誘蛾高峰就在越冬代，之后誘蛾量很低(圖5: C)。誘蛾的晝夜節(jié)律在暗期的6-10 h之間(圖6: I, J)。6月中下旬的第一代則比較分散，從暗期1 h開(kāi)始，至光期1 h，高峰在暗期9 h。浙江省紹興市諸暨測(cè)報(bào)點(diǎn)(圖5: C)，3個(gè)世代比較清晰，越冬代的誘蛾晝夜節(jié)律在黑暗后的1 h開(kāi)始，至光期1 h，高峰在暗期7 h(圖6: K)。第1代的誘蛾晝夜節(jié)律在黑暗后的7 h開(kāi)始，至光期1 h，高峰在暗期9 h。第2代的誘蛾晝夜節(jié)律也始于黑暗后的7 h，高峰在暗期的10 h和光期的1 h。廣東省惠州市博羅縣5月份的第1代大螟則比較分散(圖5: D)，從暗期1 h開(kāi)始，至光期1 h。但6月中下旬的一代晝夜節(jié)律的時(shí)間比較集中，始于黑暗后的1 h，高峰在暗期的6 h，光期的1 h結(jié)束(圖6: N, O)。

圖5 大螟性誘監(jiān)測(cè)點(diǎn)的日誘捕蛾量動(dòng)態(tài)變化Fig. 5 Daily number of moths caught per trap in the field at the pheromone monitoring sites

圖6 大螟性誘監(jiān)測(cè)點(diǎn)誘捕蛾量的晝夜節(jié)律Fig. 6 Circadian rhythms of hourly moth catches per trap in the field at the pheromone monitoring sitesA, B: 四川三臺(tái)Santai, Sichuan; C, D: 四川敘永Xuyong, Sichuan; E, F: 江蘇姜堰1 Jiangyan 1, Jiangsu; G, H: 江蘇姜堰2 Jiangyan 2, Jiangsu; I, J: 浙江長(zhǎng)興Changxing, Zhejiang; K, L, M: 浙江諸暨Zhuji, Zhejiang; N, O: 廣東博羅Boluo, Guangdong.

這些不同地點(diǎn)和世代的大螟誘蛾結(jié)果顯示，其晝夜節(jié)律受地理位置、世代和環(huán)境因子的影響顯著。從這些點(diǎn)的數(shù)據(jù)可以看出雄蛾在暗期的活動(dòng)時(shí)間范圍遠(yuǎn)長(zhǎng)于雌蛾在暗期釋放性信息素的時(shí)間，在光期沒(méi)有誘捕到雄蛾。

3 討論

雖然環(huán)境中的溫度、濕度也可以作為環(huán)境鐘，但這些因子容易受到各種植物背景、氣候等環(huán)境因子的影響，因此，溫濕度并不像白天黑夜的光強(qiáng)度有穩(wěn)定的節(jié)律變化。日出性和夜出性昆蟲(chóng)行為都具有天生的晝夜節(jié)律(Groot, 2014)，甚至貯糧害蟲(chóng)也是如此(Závodskáetal., 2012)。通常我們的認(rèn)識(shí)是昆蟲(chóng)在性成熟時(shí)先釋放性信息素到自然環(huán)境之中，同種異性成蟲(chóng)的嗅覺(jué)系統(tǒng)捕獲氣味分子，產(chǎn)生神經(jīng)信號(hào)及其腦部中樞神經(jīng)系統(tǒng)的加工處理，對(duì)氣味源作出定向飛行行為。因此，不僅雌成蟲(chóng)釋放信息素有晝夜節(jié)律，相對(duì)應(yīng)的同種異性個(gè)體的嗅覺(jué)行為反應(yīng)、求偶和交配行為也具有晝夜節(jié)律。求偶行為的時(shí)間差，即晝夜節(jié)律差異，也可成為同生境昆蟲(chóng)性信息素近緣種的生殖隔離策略之一(Mazor and Dunkelblum, 2005)。

性信息素的生物合成位置發(fā)生在性信息素腺體中，合成產(chǎn)物釋放進(jìn)入細(xì)胞膜或表皮層(Foster and Anderson, 2019; Levi-Zada and Byers, 2021)。在煙芽夜蛾Chlorideavirescens中，醛是由類似的醇通過(guò)細(xì)胞膜或腺體角質(zhì)層中的氧化酶產(chǎn)生的，醛和醇兩種類型的化合物在腺體的不同部位產(chǎn)生、儲(chǔ)存：細(xì)胞中的醇和角質(zhì)層中的醛，表面和外角質(zhì)層含有大量醛和少量醇，內(nèi)部則是醇含量較高 (Foster and Anderson, 2019)。大螟的主成分是Z11-16∶Ac和Z11-16∶OH(圖1)，以及微量的順11-十六碳烯醛(Z11-16∶Ald)。本文為了區(qū)分性信息素分泌和釋放前、后的差異，采用溶劑浸提法和SPME吸附法，前者代表的是總的性信息素滴度，而后者則是分泌出腺體外、表皮上的性信息素量。 性信息素腺體中先合成Z11-16∶OH，之后才通過(guò)乙?；铣蒢11-16∶Ac，而通過(guò)氧化酶則合成Z11-16∶Ald。合成性信息素化合物的各種合成酶的基因表達(dá)水平具有晝夜節(jié)律的變化，如黃地老虎Agrotissegetum(Závodskáetal., 2009)、甜菜夜蛾Spodopteraexigua(Chengetal., 2010)和二化螟(Guoetal., 2020)中，因此，性信息素化合物滴度的晝夜節(jié)律是一個(gè)普遍的現(xiàn)象(Blochetal., 2013; Liuetal., 2013)。從我們的結(jié)果來(lái)看，大螟性信息素的生物合成時(shí)間較早，合成量快速啟動(dòng)的時(shí)間與交配的時(shí)間接近，即暗期4 h。然而，性信息素分泌和釋放的時(shí)間則顯著晚于雌雄配對(duì)交配的時(shí)間，大致有2 h的時(shí)間差。不僅如此，分泌出體外的Z11-16∶Ac和Z11-16∶OH的比例在暗期和光期有顯著差異，這種配比差異可能影響對(duì)雄蛾的引誘作用。在我們的試驗(yàn)中，在室內(nèi)配對(duì)大螟交配時(shí)間比性信息素釋放至體外的時(shí)間要早，這可能是因?yàn)槿斯づ鋵?duì)，不需要像在田間，需要通過(guò)性信息素的擴(kuò)散引誘異性個(gè)體來(lái)求偶。但從數(shù)據(jù)分析，交配和性信息素釋放的晝夜節(jié)律似乎表面上看兩者是獨(dú)立的。大螟產(chǎn)卵器伸出的時(shí)間在暗期6-8 h，持續(xù)時(shí)間可達(dá)1個(gè)多小時(shí)。由此推斷，性信息素合成后分泌至細(xì)胞膜或表皮是主動(dòng)的釋放，但從表皮進(jìn)入體外空氣中則是被動(dòng)的、自然揮發(fā)，因此，大螟產(chǎn)卵器伸出的一部分原因可能是為了更快、更大量地釋放性信息素，由此提高了性信息素的擴(kuò)散范圍，增大了吸引雄蛾的機(jī)會(huì)。

雄蛾對(duì)性信息素的嗅覺(jué)反應(yīng)也表現(xiàn)明顯的晝夜節(jié)律，不僅體現(xiàn)在嗅覺(jué)受體基因(Zhengetal., 2014)和氣味結(jié)合蛋白基因(Konstantopoulouetal., 2006)的表達(dá)水平，在行為上也是一樣(Kawazuetal., 2010)，這種行為差異并不是在周緣神經(jīng)系統(tǒng)水平上控制，而是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Rosénetal., 2003)，章魚(yú)胺可能參與其中的信號(hào)識(shí)別的神經(jīng)通路過(guò)程(Linnetal., 1996; Linnetal., 1992)。從性誘自動(dòng)智能測(cè)報(bào)系統(tǒng)的數(shù)據(jù)可以得到大螟雄蛾誘捕的晝夜節(jié)律(圖6)，相較于雌蛾性信息素的釋放和交配的時(shí)間范圍，顯然雄蛾對(duì)性信息素反應(yīng)的時(shí)間范圍比較寬，可以從最早暗期1 h至光期1 h，高峰期在暗期6-10 h，但同時(shí)表明受世代、氣候和地理位置差異的顯著影響。類似金銀花尺蠖Heterolochajinyinhuaphaga，其求偶和交配晝夜節(jié)律與溫度、相對(duì)濕度和光周期相關(guān)，隨著蛾子日齡的增長(zhǎng)，求偶和交配的平均開(kāi)始時(shí)間提前，25℃是最適合求偶和交配的溫度，而溫度高于或低于25℃，總求偶和總交配的百分比下降，求偶開(kāi)始時(shí)間延遲，交配持續(xù)時(shí)間減少，增加相對(duì)濕度有利于求偶和交配(Xiangetal., 2018)。蟲(chóng)齡也影響昆蟲(chóng)的求偶、交配節(jié)律(Wangetal., 2015)。光周期也是一個(gè)重要的影響因子(Linnetal., 1992, 1996)，延長(zhǎng)的光周期抑制了求偶和交配(Xiangetal., 2018)。寄主的差異不僅影響性信息素的組成差異(Grootetal., 2008)，也影響了雄蛾對(duì)性信息素反應(yīng)的晝夜節(jié)律，玉米型草地貪夜蛾Spodopterafrugiperda的求偶和交配時(shí)間比水稻型的變異大(Sch?fletal., 2009)。田間誘蛾的晝夜節(jié)律是這些因子的綜合體現(xiàn)。

大螟成蟲(chóng)不需要補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)(金翠霞和吳亞, 1986)，羽化后當(dāng)日即可以交配。雖然雌蛾在光期的起始時(shí)間還有少量性信息素的合成和釋放，但雄蛾并沒(méi)有反應(yīng)。相對(duì)于雄蛾對(duì)性信息素的反應(yīng)時(shí)間，大螟雌蛾在暗期釋放性信息素的時(shí)間范圍比較短，而人工合成的性信息素誘芯在田間是24 h釋放，并在田間隨氣流擴(kuò)散，因此，在與自然雌蛾的競(jìng)爭(zhēng)上具有很大的優(yōu)勢(shì)。從本研究數(shù)據(jù)可見(jiàn)，大螟的交配時(shí)間早于性信息素的釋放時(shí)間(圖2-4)，因此，在蟲(chóng)口高密度的環(huán)境下，一些雌雄蛾可能不需要性信息素的幫助就可以實(shí)現(xiàn)其交配。也就是說(shuō)，在蟲(chóng)口密度高的情況下，性信息素群集誘殺的效果可能會(huì)下降。越冬代誘蛾量時(shí)間比較集中，而之后的世代則比較分散，因此，性誘群集誘殺越冬代效果比較理想。在我國(guó)水稻、玉米、高粱或甘蔗種植區(qū)的許多地方有多種害蟲(chóng)同時(shí)發(fā)生，如水稻中的二化螟和大螟，玉米和高粱中大螟和條螟Chilosacchariphagus、亞洲玉米螟Ostriniafurnacalis等，甘蔗中大螟、二點(diǎn)螟Chiloinfuscatellus、條螟等，利用群集誘殺技術(shù)的誘捕器成本比較高，因此，理想的信息素技術(shù)應(yīng)該是交配干擾技術(shù)。理解大螟的晝夜節(jié)律，可以減少合成性信息素化合物釋放的時(shí)間，即設(shè)置起始噴施性信息素化合物的時(shí)間在交配開(kāi)始時(shí)間之前2-3 h，雄蛾誘捕時(shí)間結(jié)束后則可以關(guān)閉釋放性信息素，由此可以節(jié)省性信息素的用量，降低防控成本，提高防治效果。