魯連海 張苗苗 汪香君

（河南省南陽(yáng)南石醫(yī)院兒科，河南 南陽(yáng) 473000）

哮喘是常見(jiàn)的呼吸系統(tǒng)疾病，臨床上表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作的咳嗽、胸悶、喘息等癥狀。大多數(shù)研究認(rèn)為氣道慢性炎癥反應(yīng)、氣道高反應(yīng)等與哮喘的發(fā)病機(jī)制相關(guān)[1]。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，肺炎支原體是呼吸道感染重要的病原體，由其引起的肺炎支原體肺炎患兒呼吸道損傷機(jī)制與哮喘的發(fā)病、氣道炎癥反應(yīng)存在內(nèi)在聯(lián)系[2]。肺炎支原體肺炎合并哮喘起病急，發(fā)展快，可引發(fā)多器官衰竭。因此臨床上需要能準(zhǔn)確反映氣道炎癥變化的指標(biāo)指導(dǎo)肺炎支原體肺炎合并哮喘患兒臨床治療，評(píng)估預(yù)后。CD5 抗原樣蛋白（CD5 molecule-like，CD5L）屬于富含半胱氨酸的清道夫受體超家族，CD5L 是輔助性T 細(xì)胞17（T helper cell 17，Th17）細(xì)胞功能調(diào)節(jié)因子，而Th17 在維持組織免疫功能穩(wěn)定性發(fā)揮作用，戰(zhàn)海濤等[2]研究發(fā)現(xiàn)血清CD5L 水平在重癥哮喘通氣死亡患者中顯著高于存活患者。補(bǔ)體C3（Complement component 3，C3）是人體內(nèi)大分子物質(zhì)，可以通過(guò)不同途徑被激活，能直接參與體液免疫應(yīng)答。

本研究探討CD5L、補(bǔ)體C3 對(duì)肺炎支原體肺炎合并哮喘患兒不良預(yù)后的關(guān)系，旨在為及早篩查肺炎支原體肺炎合并哮喘不良預(yù)后患者并給予相應(yīng)預(yù)防性治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。選取2018 年3 月至2020 年1 月在本院兒科確診的86例肺炎支原體肺炎患兒作為研究對(duì)象，按照是否合并哮喘將所有患兒分為肺炎合并哮喘組（n=40）和單純肺炎支原體肺炎組（n=46）。

納入標(biāo)準(zhǔn)：符合諸福棠《實(shí)用兒科學(xué)》第7 版中關(guān)于肺炎支原體肺炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；符合《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南(2016 年版)》中對(duì)支氣管哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；患兒及家長(zhǎng)能配合完成此次實(shí)驗(yàn)；患兒及家長(zhǎng)均同意本研究實(shí)驗(yàn)，并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重肝、腎功能障礙者；近3m 內(nèi)服用糖皮質(zhì)激素、抗過(guò)敏藥物者；先天性心臟病或腫瘤者；合并有自身免疫性疾病者。

單純肺炎支原體肺炎組男27 例，女19 例；年齡8 個(gè)月~12 歲，平均年齡6.26±2.91 歲。肺炎合并哮喘組男24 例，女16 例；年齡8 個(gè)月~12歲，平均年齡6.15±3.02 歲。另選擇同期來(lái)本院體檢的50 例健康兒童作為對(duì)照組；其中男26 例，女24 例；年齡8 個(gè)月~12 歲，平均年齡6.53±2.83歲。三組患兒一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

所有患兒入院時(shí)清晨空腹時(shí)采取靜脈血3~5 mL，對(duì)照組在體檢當(dāng)天采取靜脈血3~5 mL，所有血液樣本在4℃條件下4000 rpm 離心10 min，分離上清，凍存于-80℃冰箱中，待測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 CD5L、補(bǔ)體C3、IL-17、IL-10 水平檢測(cè)

采用酶聯(lián)免疫吸附（ Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）法檢測(cè)血清中CD5L、補(bǔ)體C3、人白介素-17（Interleukin-17，IL-17）、人白介素-10（Interleukin-10，IL-10）水平，操作步驟嚴(yán)格依據(jù)CD5L ELISA 試劑盒（貨號(hào)：xy-A12224，上海信裕生物科技有限公司）、補(bǔ)體C3 ELISA 試劑盒（貨號(hào)：JK-(a)-5207，上海晶抗生物工程有限公司）、IL-17 ELISA 試劑盒（貨號(hào)：JK-(a)-4957，上海晶抗生物工程有限公司）、IL-10 ELISA 試劑盒（貨號(hào)：XF16183Q，上海信帆生物科技有限公司）進(jìn)行。

1.3.2 復(fù)發(fā)情況

對(duì)肺炎支原體肺炎合并哮喘患兒隨訪半年，觀察患兒病情復(fù)發(fā)情況。復(fù)發(fā)指隨訪期間發(fā)生反復(fù)肺炎支原體呼吸道感染；哮喘再次發(fā)作；或二者都有發(fā)作。并根據(jù)復(fù)發(fā)情況將患兒分為未復(fù)發(fā)組（29 例）和復(fù)發(fā)組（11 例）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS 25.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)。計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±SD）表示，兩組間采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩比較采用SNK-q 檢驗(yàn)。采用Pearson 法分析血清CD5L、補(bǔ)體C3 與IL-17、IL-10 相關(guān)性。受試者工作特征曲線（ Receiver operating characteristic curve，ROC）法分析CD5L、補(bǔ)體C3水平及二者聯(lián)合對(duì)肺炎支原體肺炎合并哮喘患兒不良預(yù)后的診斷價(jià)值。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組的血清CD5L、補(bǔ)體C3 水平比較

與對(duì)照組相比，單純肺炎支原體肺炎組、肺炎合并哮喘組患兒血清補(bǔ)體C3 水平較高，血清CD5L 水平較低（P＜0.05）；與單純肺炎支原體肺炎組相比，肺炎合并哮喘組患兒血清補(bǔ)體C3 水平較高，血清CD5L 水平較低（P＜0.05）見(jiàn)表1。

表1 三組血清CD5L、補(bǔ)體C3 水平比較（±SD）

表1 三組血清CD5L、補(bǔ)體C3 水平比較（±SD）

注：與對(duì)照組相比，*P＜0.05；與單純肺炎支原體肺炎組相比，＃P＜0.05。

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2.2 未復(fù)發(fā)組和復(fù)發(fā)組血清CD5L、補(bǔ)體C3、IL-17、IL-10 水平及其相關(guān)性分析

復(fù)發(fā)組患兒血清補(bǔ)體C3水平為3.61±0.68 g?L-1，未復(fù)發(fā)組為2.98±0.52 g?L-1，復(fù)發(fā)組明顯高于未復(fù)發(fā)組（P＜0.05）；復(fù)發(fā)組患兒血清CD5L 水平 為 161.56±20.37 pg?mL-1，未 復(fù) 發(fā) 組 為182.67±22.69 pg?mL-1，復(fù)發(fā)組明顯低于未復(fù)發(fā)組（P＜0.05）；復(fù)發(fā)組患兒血清IL-17 水平為218.67±31.58 pg?mL-1，未復(fù)發(fā)組為155.62±19.34 pg?mL-1，復(fù)發(fā)組明顯高于未復(fù)發(fā)組（P＜0.05）；復(fù)發(fā)組患兒血清IL-10 水平為207.39±25.74 pg?mL-1，未復(fù)發(fā)組為237.58±33.26 pg?mL-1，復(fù)發(fā)組明顯低于未復(fù)發(fā)組（P＜0.05）；復(fù)發(fā)組患兒血清IL-17/IL-10 比值為 1.35±0.57，未復(fù)發(fā)組為0.96±0.35，復(fù)發(fā)組明顯高于未復(fù)發(fā)組（P＜0.05）。

Pearson 法分析顯示CD5L 與IL-10 呈正相關(guān)性（r=0.684，P＜0.001），與IL-17、IL-17/IL-10 呈負(fù)相關(guān)（r=-0.735，r=-0.726，P＜0.001）；補(bǔ)體C3與IL-17、IL-17/IL-10 呈正相關(guān)性（r=0.692，r=0.714，P＜0.001），與IL-10 呈負(fù)相關(guān)性（r=-0.728，P＜0.001）。

2.3 CD5L、補(bǔ)體C3 水平及二者聯(lián)合對(duì)不良預(yù)后的診斷價(jià)值分析

ROC 結(jié)果顯示，CD5L、補(bǔ)體C3 水平診斷肺炎支原體肺炎合并哮喘患兒不良預(yù)后的曲線下面積（Area under curve，AUC）分別為0.796、0.824，靈敏度分別為75.90%、90.90%，特異度分別為72.70%、65.60%。截?cái)嘀?68.81 pg?mL-1、0.99 g?L-1，二者聯(lián)合對(duì)肺炎支原體肺炎合并哮喘患兒不良預(yù)后曲線下面積AUC 為0.893，靈敏度為100.00%，特異度為72.70%。

3 討論

圖1 血清CD5L、補(bǔ)體C3 水平及二者聯(lián)合對(duì)不良預(yù)后診斷的ROC 曲線

哮喘是由于T 淋巴細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞等參與的慢性氣道炎癥，哮喘病情的發(fā)展與Th17/Treg 細(xì)胞平衡密切相關(guān)[1,2,5]。賴(lài)其廷等研究發(fā)現(xiàn)重度哮喘患者血清IL-17 水平明顯高于中度哮喘患者，血清IL-10 水平明顯低于中度哮喘患者[5]。本研究發(fā)現(xiàn)肺炎支原體肺炎合并哮喘患兒復(fù)發(fā)組血清IL-17 水平顯著高于未復(fù)發(fā)組，血清IL-10 水平顯著低于未復(fù)發(fā)組，提示肺炎支原體肺炎合并哮喘不良預(yù)后患兒可能存在免疫紊亂。

CD5L 是一種控制炎癥反應(yīng)的調(diào)控蛋白，可參與感染、動(dòng)脈粥樣硬化和癌癥等過(guò)程。各種小鼠疾病模型支持CD5L 通過(guò)阻止巨噬細(xì)胞和其他細(xì)胞類(lèi)型的凋亡參與炎癥過(guò)程[2,5]。高偉霞等報(bào)告哮喘患兒血清CD5L 水平明顯低于正常健康兒童[6]。本研究結(jié)果推測(cè)CD5L 可能參與肺炎支原體肺炎合并哮喘的發(fā)生，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)CD5L 與IL-10 呈正相關(guān)性，與IL-17、IL-17/IL-10 呈負(fù)相關(guān)性，提示CD5L 可能通過(guò)調(diào)控Th17/Treg 細(xì)胞穩(wěn)態(tài)平衡，調(diào)控肺炎支原體肺炎合并哮喘患兒的預(yù)后。

補(bǔ)體是一類(lèi)經(jīng)活化后具有生物活性，可介導(dǎo)炎癥的蛋白質(zhì)。研究顯示補(bǔ)體C3 是連接機(jī)體炎癥和免疫反應(yīng)的重要樞紐，高水平補(bǔ)體C3 可介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，從而引起氣道組織損傷和氣道上皮重塑[5-7]，韓晨鵬等報(bào)告肺炎支原體感染患兒血清補(bǔ)體C3 水平明顯高于健康兒童，且重癥肺炎支原體感染患兒血清補(bǔ)體C3 水平明顯高于輕癥肺炎支原體感染患兒[7]。本研究結(jié)果提示補(bǔ)體C3 可能參與肺炎支原體肺炎合并哮喘的發(fā)生及預(yù)后。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)補(bǔ)體C3 與IL-17、IL-17/IL-10 呈正相關(guān)性，與IL-10 呈負(fù)相關(guān)性，提示補(bǔ)體C3 參與肺炎支原體肺炎合并哮喘預(yù)后可能與通過(guò)Th17/Treg 細(xì)胞穩(wěn)態(tài)平衡途徑。CD5L 與補(bǔ)體C3二者聯(lián)合對(duì)肺炎支原體肺炎合并哮喘患兒不良預(yù)后曲線下面積AUC 為0.893，靈敏度為100.00%，特異度為72.70%，二者聯(lián)合靈敏度皆高于二者單獨(dú)診斷時(shí)，提示CD5L 與補(bǔ)體C3 肺炎支原體肺炎合并哮喘患兒不良預(yù)后具有一定的臨床價(jià)值。

綜上所述，CD5L 在肺炎支原體肺炎合并哮喘不良預(yù)后患兒中下調(diào)，補(bǔ)體C3 在肺炎支原體肺炎合并哮喘不良預(yù)后患兒中上調(diào)，可能是評(píng)估肺炎支原體肺炎合并哮喘預(yù)后的生物指標(biāo)。但本研究也有不足之處，本研究尚未深入探討CD5L、補(bǔ)體C3 與肺炎支原體肺炎合并哮喘不良預(yù)后發(fā)生的機(jī)制。