付銀娜 孫春霞 閆伍玲 劉偉 李瑞琴

（1. 河南中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院病理科，河南 鄭州 450000；2. 河南中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，河南 鄭州 450000；3. 河南中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥科學(xué)院，河南 鄭州 450000）

隨著經(jīng)濟(jì)水平提高及生活方式改變，近年來臨床腫瘤發(fā)病率隨之提高，大多數(shù)腫瘤早期無明顯臨床特征，就診時(shí)已處于中晚期，導(dǎo)致無法進(jìn)行手術(shù)治療，需進(jìn)行長時(shí)間放化療，對患者身心健康造成嚴(yán)重影響，因此，臨床應(yīng)盡早對患者腫瘤性質(zhì)進(jìn)行定性診斷，以制定相應(yīng)治療方案，改善預(yù)后[1]。

超聲、磁共振、CT 等影像學(xué)方法目前已廣泛應(yīng)用于腫瘤相關(guān)檢查中，雖操作簡便且無創(chuàng)傷性，但均存在一定漏診、誤診現(xiàn)象?；顧z穿刺等病理診斷為診斷腫瘤的“金標(biāo)準(zhǔn)”，可有效觀察腫瘤分期、分型等，但病理診斷均具有一定創(chuàng)傷性，致使患者產(chǎn)生抵觸情緒，對檢查依從性造成影響。免疫組化目前已逐漸應(yīng)用于腫瘤檢查中，可通過化學(xué)反應(yīng)對腫瘤組織內(nèi)抗原進(jìn)行定性分析，從而進(jìn)行診斷[4]。病理特殊染色可以有效顯示腫瘤組織的分化程度等信息，為臨床早期的診斷提供有效依據(jù)[5]。

目前臨床對于二者聯(lián)合診斷腫瘤相關(guān)研究較少，本研究選取86 例我院腫瘤患者，旨在探討病理特殊染色法、病理免疫組化在腫瘤診斷中的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取86 例我院2019 年8 月至2021 年8 月就診的腫瘤患者，其中男52 例，女34 例，年齡46~73 歲，平均年齡58.73±3.26 歲；體質(zhì)量指數(shù)20.4~26.8 kg?m-2，平均體質(zhì)量指數(shù)23.72±1.05 kg?m-2；本研究經(jīng)我院倫理委員會審核批準(zhǔn)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：均可接受手術(shù)穿刺活檢；病理組織均保存完好；知情本研究并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并精神疾病依從性較差；合并慢性、急性感染疾??；合并造血系統(tǒng)疾??；合并腎、肝功能異常；合并自身免疫系統(tǒng)疾病。

1.2 方法

所有患者入院后均進(jìn)行手術(shù)穿刺檢查，在超聲下根據(jù)腫瘤位置、類型行針對性穿刺，對比病灶組織與標(biāo)準(zhǔn)組織，進(jìn)一步行病理特殊染色法、病理免疫組化檢查。

病理組織修剪為1 cm×2 cm×0.2 cm，浸泡于甲醛溶液中2 h，浸泡完畢后采用透明液處理1 h后進(jìn)行脫水。蠟液中浸泡1 h 后切片處理，厚度為2 μm。

1.2.1 病理特殊染色

采用二甲苯脫蠟處理后，行Mallory 磷鎢酸蘇木素染色，所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒、儀器相關(guān)說明進(jìn)行。

1.2.2 病理免疫組化

脫蠟處理后，采用高壓抗原法進(jìn)行修復(fù)，于壓力鍋中加入配置好的檸檬酸抗原修復(fù)液，加熱至沸騰狀，將切片固定于耐高溫架上，放置于沸騰修復(fù)液中，扣緊壓力閥，待沸騰2 min 后，室溫冷卻，采用PBS 溶液沖洗兩次，每次3min，沖洗完成后加入Glypican-3 抗體，置于室溫下孵育60 min，采用PBS 溶液沖洗3 次，每次4 min，去除PBS 液滴后加1 滴MaxVisionTM 試劑，常溫孵育15 min 后，采用PBS 溶液沖洗3 次，每次3 min，去除PBS 液滴后加1 滴DAB 顯色液，觀察后水洗，水沖返藍(lán)，酒精透明處理，樹膠封固。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 病理特殊染色

根據(jù)觀察陽性細(xì)胞數(shù)目與染色體強(qiáng)度乘積進(jìn)行計(jì)分診斷。0 分：陽性細(xì)胞數(shù)目＜1%，無染色體強(qiáng)度；1 分：陽性細(xì)胞數(shù)目＜10%，具有弱染色體強(qiáng)度；2 分：陽性細(xì)胞數(shù)目為10%~35%，具有中染色體強(qiáng)度；3 分：陽性細(xì)胞數(shù)目為35%~65%，具有強(qiáng)染色體強(qiáng)度；4 分：陽性細(xì)胞數(shù)目為65%以上。經(jīng)陽性細(xì)胞數(shù)目與染色體強(qiáng)度分?jǐn)?shù)乘積進(jìn)行診斷，0 分為陰性；1~4 分為1+；6~8 分為2+；9~12 分為3+。

1.3.2 病理免疫組化

經(jīng)免疫組化特殊染色后采用GLypican-3 判定結(jié)果，染色后顯示為棕黃色即診斷為陽性。

1.4 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)病理特殊染色、免疫組化單獨(dú)、聯(lián)合診斷結(jié)果、病理診斷結(jié)果一致性，聯(lián)合診斷結(jié)果采用并聯(lián)原則。比較病理特殊染色、免疫組化單獨(dú)、聯(lián)合診斷效能。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用例或率（n（%））表示，兩組間比較行χ2檢驗(yàn)，采用Kappa 值檢驗(yàn)特殊染色、免疫組化診斷結(jié)果與病理診斷結(jié)果一致性，其中Kappa 值＜0.4為差，0.4～0.75 為較好，＞0.75 為好。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理特殊染色法、免疫組化單獨(dú)、聯(lián)合診斷結(jié)果

經(jīng)術(shù)后病理診斷結(jié)果顯示，86 例腫瘤患者中，惡性62 例，良性24 例；經(jīng)病理免疫組化診斷結(jié)果顯示，86 例腫瘤患者中，惡性48 例，良性38例；經(jīng)病理特殊染色法、免疫組化聯(lián)合診斷結(jié)果顯示，86 例腫瘤患者中，惡性61 例，良性25 例；經(jīng)一致性分析結(jié)果顯示，病理特殊染色法、免疫組化聯(lián)合診斷與術(shù)后病理診斷結(jié)果Kappa 指數(shù)值為0.743，見表1。

表1 病理特殊染色法、免疫組化聯(lián)合診斷結(jié)果

2.2 單獨(dú)、聯(lián)合診斷準(zhǔn)確率比較

病理特殊染色、免疫組化單獨(dú)診斷靈敏度、準(zhǔn)確率、漏診率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。與病理特殊染色單獨(dú)診斷比較，病理特殊染色、免疫組化聯(lián)合診斷靈敏度、準(zhǔn)確率較高，漏診率較低（P＜0.05）；與病理免疫組化單獨(dú)診斷比較，病理特殊染色、免疫組化聯(lián)合診斷靈敏度、準(zhǔn)確率較高，漏診率較低（P＜0.05），見表2。

表2 單獨(dú)、聯(lián)合診斷效能比較（n（%））

3 討論

腫瘤是目前臨床多發(fā)疾病，大多數(shù)腫瘤發(fā)病初期無典型特征，易被患者忽視，且常出現(xiàn)漏診、誤診現(xiàn)象，當(dāng)出現(xiàn)腫瘤特征時(shí)已進(jìn)入中晚期，導(dǎo)致無法進(jìn)行手術(shù)治療，對預(yù)后恢復(fù)造成嚴(yán)重影響。因此，早發(fā)現(xiàn)、早治療為腫瘤治療的關(guān)鍵所在，從而改善患者生存質(zhì)量。

近年來病理特殊染色、免疫組化已逐漸應(yīng)用于腫瘤病理診斷中，其中免疫組化可通過觀察患者腫瘤切片結(jié)合臨床表現(xiàn)，了解腫瘤具體形態(tài)及在機(jī)體內(nèi)轉(zhuǎn)化途徑，從而根據(jù)腫瘤特征制定治療方案[8]。本研究結(jié)果顯示，病理免疫組化診斷準(zhǔn)確率為74.42%，與術(shù)后病理診斷結(jié)果Kappa 指數(shù)值為0.461，說明病理免疫組化診斷對于腫瘤檢查具有一定價(jià)值，與術(shù)后病理診斷結(jié)果一致性良好，可用于臨床初步診斷。病理特殊染色為腫瘤檢查時(shí)常用的輔助診斷措施，可有效觀察腫瘤病變組織網(wǎng)狀纖維數(shù)量、密集程度、粗細(xì)等情況，從而彌補(bǔ)病理診斷的不足[12]。本研究結(jié)果顯示，病理特殊染色、免疫組化聯(lián)合診斷準(zhǔn)確率顯著高于單獨(dú)診斷，與術(shù)后病理診斷結(jié)果Kappa 指數(shù)值為0.743，提示臨床可通過聯(lián)合應(yīng)用病理特殊染色、免疫組化進(jìn)行早期診斷，以制定相應(yīng)治療方案。

綜上所述，病理特殊染色聯(lián)合病理免疫組化可有效提高腫瘤診斷準(zhǔn)確率，為臨床早期診斷及制定相應(yīng)治療方案提供可靠依據(jù)。