莫秋怡，施文婷，徐東婷，嚴(yán)玉晶，崔婷，孫冬梅，梁志毅（廣東一方制藥有限公司，廣東省中藥配方顆粒企業(yè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 佛山 528244）

麥門冬湯屬國(guó)家中醫(yī)藥管理局2018年4月13日發(fā)布的《古代經(jīng)典名方目錄（第一批）》，始載于漢代“醫(yī)圣”張仲景所著《金匱要略·卷上·肺痿肺癰咳嗽上氣病脈證治第七》[1]。該方由麥冬、半夏、人參、甘草、粳米、大棗組成，具有滋養(yǎng)肺胃、降逆下氣的功效，原治虛熱肺痿，后世亦用于肺陰不足或胃陰不足證[2]?，F(xiàn)代藥理臨床應(yīng)用研究表明，麥門冬湯具有治療慢性萎縮性胃炎、抗呼吸道炎癥及鎮(zhèn)咳、干預(yù)肺纖維化、抗腫瘤及免疫增強(qiáng)等作用，臨床多用于治療慢性胃炎、硅沉著病、肺纖維化、肺癌、多病因咳嗽等[3]。

目前，關(guān)于麥門冬湯的研究多集中在藥理作用、臨床應(yīng)用等方面[3-7]，尚未見麥門冬湯相關(guān)制劑研究的報(bào)道，面對(duì)古今制劑方式的更迭以及現(xiàn)代市場(chǎng)應(yīng)用的需求，對(duì)麥門冬湯顆粒的成型工藝進(jìn)行研究具有重要意義。中藥制粒技術(shù)主要有濕法制粒、干法制粒、流化噴霧制粒等，濕法制粒歷史悠久，至今仍被廣泛應(yīng)用；干法制粒則是近年才出現(xiàn)的新型制粒技術(shù)，相比于濕法制粒節(jié)省了軟材，簡(jiǎn)化了干燥過程，具有效率高、制粒過程不受熱、成品不易吸潮、質(zhì)量穩(wěn)定，顆粒崩解性與溶出性好、含藥量高等特點(diǎn)[8-9]，特別適合以中藥浸膏粉直接制粒。麥門冬湯處方中麥冬和大棗含有大量糖苷類物質(zhì)，在制粒過程中易黏機(jī)，顆粒一次成型率較低，且易產(chǎn)生花顆粒，造成資源浪費(fèi)。輔料是影響顆粒劑質(zhì)量的重要因素，輔料的種類選擇及配比直接影響顆粒劑的成型難易、溶出速度等。因此，本研究先通過單因素試驗(yàn)對(duì)輔料種類及配比進(jìn)行篩選，再通過Box-Behnken 試驗(yàn)對(duì)麥門冬湯顆粒的干法制粒工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，根據(jù)熵權(quán)法確定各指標(biāo)權(quán)重，并進(jìn)行綜合評(píng)分，優(yōu)選出干法制粒的最佳工藝參數(shù)，為麥門冬湯顆粒的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)提供數(shù)據(jù)支持。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

LGS20 型干法制粒機(jī)（南京迦南科技有限公司），TDL-4000C 低速壹式大容量離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠），ME204E 型萬分之一天平（瑞士METTLER TOLEDO 公司），DHG-9146A 型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏試驗(yàn)設(shè)備有限公司），CS-2A+型脆碎度測(cè)定儀（天津市精拓儀器有限公司），JJ200B 型電子天平（常熟市雙杰測(cè)試儀器廠），CR 不銹鋼標(biāo)準(zhǔn)篩（上海宜昌儀器紗篩廠）。

1.2 試藥

麥芽糊精（批號(hào)：2019110751，吉林中糧生化能源銷售有限公司），糊精（批號(hào)：190114C，曲阜市天利藥用輔料有限公司），乳糖（批號(hào)：20200112，珠海安寶健藥業(yè)有限公司），可溶性淀粉（批號(hào)：210108，安徽山河藥用輔料股份有限公司），麥門冬湯浸膏粉（廣東一方制藥有限公司制備，純浸膏粉每克相當(dāng)于生藥1.92 ～2.08 g）。

2 方法與結(jié)果

2.1 麥門冬湯顆粒的制備

將麥門冬湯浸膏粉與一定比例的輔料混合均勻，調(diào)節(jié)壓輪壓力、壓輪頻率和送料頻率后，將混勻的物料置于干法制粒機(jī)中壓成片狀物，再破碎成顆粒，整粒即得[10]。

2.2 評(píng)價(jià)指標(biāo)測(cè)定方法

2.2.1 一次成型率[11]將顆粒依次通過一號(hào)篩和五號(hào)篩，稱定能通過一號(hào)篩但不能通過五號(hào)篩的顆粒的質(zhì)量，計(jì)算一次成型率。一次成型率（%）＝通過一號(hào)篩但不通過五號(hào)篩的顆粒質(zhì)量/送料質(zhì)量×100%。

2.2.2 吸濕率[12]參照藥物引濕性試驗(yàn)指導(dǎo)原則（2020年版《中國(guó)藥典》四部通則9103）測(cè)定。

2.2.3 溶化率[13]取顆粒約0.5 g，精密稱定，置20 mL 離心管中，精密加入10 mL 沸水，振蕩攪拌3 min 后，4000 r·min-1離心10 min，棄去上清液，加入適量水將殘?jiān)芙獠⑥D(zhuǎn)移至蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，于105 ℃烘箱內(nèi)干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速稱定質(zhì)量，計(jì)算溶化率。溶化率（%）＝（總顆粒質(zhì)量-殘?jiān)|(zhì)量）/總顆粒質(zhì)量×100%。

2.2.4 脆碎度[10]取適量顆粒依次通過二號(hào)篩和四號(hào)篩，取能通過二號(hào)篩但不能通過四號(hào)篩的顆粒適量，稱定質(zhì)量（m1），置于脆碎度測(cè)定儀中，設(shè)定轉(zhuǎn)速為35 r·min-1，轉(zhuǎn)動(dòng)4 min，取出，過四號(hào)篩，精密稱定未過四號(hào)篩的顆粒質(zhì)量（m2），計(jì)算脆碎度。脆碎度（%）＝（m1-m2）/m1×100%。

2.3 權(quán)重系數(shù)的考察[14]

熵權(quán)法是根據(jù)指標(biāo)的變異程度來確定客觀權(quán)重，若某個(gè)指標(biāo)的信息熵越小，表明該指標(biāo)值變異程度越大，能提供的有效信息就越多，其權(quán)重也就相應(yīng)變大，反之則變小。

① 數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化：針對(duì)定量指標(biāo)數(shù)據(jù)，考慮到數(shù)量級(jí)不同，對(duì)指標(biāo)進(jìn)行無量綱化處理。本研究采用Hassan 法[15]分別對(duì)各指標(biāo)進(jìn)行數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換求“歸一值”，計(jì)算公式如下：

對(duì)于取值越大越好的指標(biāo)：Yij＝（xij-min{xij}）/（max{xij}-min{xij}）對(duì)于取值越小越好的指標(biāo)：Yij＝（max{xij}-xij）/（max{xij}-min{xij}）

② 對(duì)標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化：即計(jì)算第j項(xiàng)指標(biāo)下第i項(xiàng)評(píng)價(jià)項(xiàng)目指標(biāo)值所占的比重（fij）。

③ 計(jì)算各指標(biāo)的信息熵：根據(jù)信息論中信息熵的定義，信息熵Ej公式如下：

當(dāng)fij＝0，考慮到lnfij無意義，因此，對(duì)fij的計(jì)算進(jìn)行修正，將其定義為④ 計(jì)算各指標(biāo)的熵權(quán)系數(shù)：根據(jù)Ej的計(jì)算公式計(jì)算出各個(gè)指標(biāo)的Ej為E1，E2，……，Em。通過Ej計(jì)算各指標(biāo)的權(quán)重。

2.4 輔料種類的篩選

本試驗(yàn)將對(duì)麥芽糊精、乳糖、糊精、可溶性淀粉進(jìn)行考察，按浸膏粉和輔料為3∶1、2∶1、1∶1 的配比設(shè)置了12 組試驗(yàn)，固定干法制粒參數(shù)（壓輪壓力12 MPa，送料頻率16 r·min-1，壓輪頻率3 r·min-1），經(jīng)制粒后整粒成型，分別測(cè)定各組試驗(yàn)的一次成型率、吸濕率、溶化率和脆碎度。由熵權(quán)法計(jì)算得到一次成型率、吸濕率、溶化率和脆碎度的權(quán)重分別是0.35、0.24、0.26 和0.15，按綜合評(píng)分＝一次成型率×0.35+吸濕率×0.24+溶化率×0.26+脆碎度×0.15，計(jì)算各組試驗(yàn)的綜合評(píng)分。結(jié)果見表1，由表1可知，當(dāng)浸膏粉和乳糖的配比為1∶1 時(shí)，綜合評(píng)分最高，故確定最優(yōu)輔料及加入比例為浸膏粉∶乳糖＝1∶1。

表1 輔料種類及用量考察結(jié)果Tab 1 Type and dosage of excipient

2.5 Box-Behnken 設(shè)計(jì)-響應(yīng)面法設(shè)計(jì)試驗(yàn)

2.5.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果 本試驗(yàn)選擇影響干法制粒的主要工藝參數(shù)壓輪壓力、送料頻率、壓輪頻率[16]，為影響因素，以一次成型率、吸濕率、溶化率、脆碎度的綜合評(píng)分作為響應(yīng)值進(jìn)行Box-Behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)。由熵權(quán)法計(jì)算得到一次成型率、吸濕率、溶化率和脆碎度的權(quán)重分別是0.38、0.13、0.24 和0.25，按綜合評(píng)分＝一次成型率×0.38+吸濕率×0.13+溶化率×0.24+脆碎度×0.25，計(jì)算各組試驗(yàn)的綜合評(píng)分，試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見表2、3。

表2 Box-Behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)因素水平Tab 2 Factor and level of Box-Behnken test design

表3 Box-Behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Tab 3 Box-Behnken test design and results

2.5.2 模型擬合與方差分析 利用Design Expert 8.0.6 軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行二次多元回歸擬合，得到綜合評(píng)分對(duì)編碼自變量的二次多元回歸方程Y＝0.54+0.09A-0.18B-0.019C-0.096AB-0.12AC+0.046BC-0.17A2+0.1B2-0.028C2，方差分析結(jié)果見表4。

由表4可知，模型P＝0.0061 ＜0.01，表明該方程模型顯著性高，擬合度良好；失擬項(xiàng)P＝0.1343 ＞0.05，表明失擬項(xiàng)不顯著，未知因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果干擾??；決定系數(shù)R2＝0.9108，進(jìn)一步表明模型的擬合度和可信度良好；精密度＝10.153 ＞4，說明此模型的精密度較好，因此可用此模型對(duì)麥門冬湯干法制粒工藝進(jìn)行分析和預(yù)測(cè)。由F值可知，各因素對(duì)綜合評(píng)分影響大小順序?yàn)椋核土项l率＞壓輪壓力＞壓輪頻率，A、B對(duì)綜合評(píng)分影響顯著；交互項(xiàng)中，僅AC交互作用影響顯著；二次項(xiàng)中，僅A2影響顯著；說明各因素與綜合評(píng)分之間并非簡(jiǎn)單的線性關(guān)系。

表4 擬合回歸方程的方差分析結(jié)果Tab 4 Analysis of variance results of the fitted regression equation

2.5.3 響應(yīng)面各因素交互作用分析 通過Design-Expert 8.0.6 軟件處理，得到兩因素間的交互作用響應(yīng)面分析圖，如圖1～3。

圖1響應(yīng)曲面較平滑，說明AB 之間交互作用影響不顯著；當(dāng)送料頻率不變時(shí)，綜合評(píng)分隨壓輪壓力的增大表現(xiàn)為先上升后下降；當(dāng)壓輪壓力不變時(shí)，綜合評(píng)分隨送料頻率的增大表現(xiàn)為先下降后上升。

圖1 壓輪壓力與送料頻率對(duì)綜合評(píng)分的響應(yīng)面及等高線圖Fig 1 Response surface and contour map of rolling pressure and feeding speed to the comprehensive score

圖2的響應(yīng)曲面較陡峭，等高線呈橢圓形，說明AC 之間交互作用影響顯著；當(dāng)壓輪頻率較小時(shí)，綜合評(píng)分隨壓輪壓力的增大而增加；當(dāng)壓輪頻率達(dá)到一定值后，綜合評(píng)分隨壓輪壓力的增加表現(xiàn)為先上升后下降；當(dāng)壓輪壓力較小時(shí)，綜合評(píng)分隨壓輪頻率的增大而增加；當(dāng)壓輪壓力達(dá)到一定值后，綜合評(píng)分隨壓輪頻率的增大而減小。

圖2 壓輪壓力與壓輪頻率對(duì)綜合評(píng)分的響應(yīng)面及等高線圖Fig 2 Response surface and contour map of rolling pressure and rolling speed to the comprehensive score

圖3的響應(yīng)曲面較平緩，說明BC 之間交互作用影響不顯著。當(dāng)壓輪頻率不變時(shí)，綜合評(píng)分隨送料頻率的增大表現(xiàn)為先下降后趨于平緩；當(dāng)送料頻率不變時(shí)，隨壓輪頻率的增大，綜合評(píng)分變化不明顯。

圖3 送料頻率與壓輪頻率對(duì)綜合評(píng)分的響應(yīng)面及等高線圖Fig 3 Response surface and contour map of feeding speed and rolling speed to the comprehensive score

2.6 驗(yàn)證試驗(yàn)

利用Design Expert 8.0.6 軟件，由回歸模型進(jìn)行預(yù)測(cè)分析，綜合評(píng)分最大預(yù)測(cè)值為0.997，最優(yōu)工藝條件為壓輪壓力15.6 MPa，送料頻率20 r·min-1，壓輪頻率3 r·min-1。在此條件下，進(jìn)行3 組驗(yàn)證試驗(yàn)，見表5。3 組驗(yàn)證試驗(yàn)綜合評(píng)分均值為0.916，RSD為1.4%，與預(yù)測(cè)值的偏差為8.1%，說明建立的模型預(yù)測(cè)性良好，優(yōu)化的工藝穩(wěn)定可行。

表5 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果Tab 5 Verification test

3 討論

中藥制劑常用的輔料有麥芽糊精、可溶性淀粉等[17]，本試驗(yàn)通過單因素試驗(yàn)篩選出最佳輔料配比為浸膏粉∶乳糖＝1∶1，乳糖具有良好的流動(dòng)性、溶化性、成型性和較弱的吸濕性，使用乳糖作為輔料可以提高顆粒的成型率、溶出率和降低顆粒的吸濕性，保證臨床療效。

本研究采用Box-Behnken 試驗(yàn)優(yōu)選麥門冬湯顆粒的干法制粒工藝[18-19]，結(jié)果表明，建立的二次多元回歸方程的擬合度和可信度良好，通過回歸方程進(jìn)行預(yù)測(cè)，得到最優(yōu)工藝條件為壓輪壓力15.6 MPa，送料頻率20 r·min-1，壓輪頻率3 r·min-1。同時(shí)，采用熵權(quán)法計(jì)算各指標(biāo)的權(quán)重可以使評(píng)分結(jié)果更科學(xué)、合理、接近實(shí)際情況，避免了主觀因素對(duì)試驗(yàn)結(jié)果造成誤差。

本研究制得的麥門冬湯顆粒外觀性狀均勻，流動(dòng)性、溶化性較好，吸濕性較低，改善了浸膏粉的流動(dòng)性、飛散性、吸濕性以及直接應(yīng)用的局限性，并通過驗(yàn)證試驗(yàn)確定響應(yīng)面法優(yōu)選的干法制粒工藝穩(wěn)定可行，可為麥門冬湯顆粒的工業(yè)化生產(chǎn)提供參考。