朱琳琳，杜 泓

(沈陽航空航天大學(xué) 自動化學(xué)院，沈陽 110136)

宮頸癌屬于宮頸惡性腫瘤，在女性惡性腫瘤發(fā)病率中居第二位。宮頸細胞學(xué)篩查的普遍應(yīng)用，可以使宮頸癌和癌前病變得以早期發(fā)現(xiàn)和治療，使得宮頸癌的發(fā)病率和死亡率大幅度下降。人工閱片環(huán)節(jié)中醫(yī)護人員需要在數(shù)以萬計的細胞中找到各種異常細胞，這是一項高強度的工作。利用宮頸細胞分割技術(shù)對宮頸細胞圖像進行輔助判斷分析[1-2]，可以減少醫(yī)護人員的工作量，使判斷分析的效率和準(zhǔn)確率顯著提升。

由于細胞圖像的復(fù)雜多樣性，細胞分割成為醫(yī)學(xué)圖像的經(jīng)典難題，國內(nèi)外許多專家學(xué)者都進行了研究。用于細胞分割的經(jīng)典分割方法有閾值分割[3]、邊緣檢測[4]、分水嶺算法[5]及主動輪廓算法[6]等。目前，隨著深度學(xué)習(xí)方法的廣泛應(yīng)用，也有越來越多的研究者采用這種方法進行細胞分割?；谏疃葘W(xué)習(xí)的細胞分割方法一般采用卷積神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)[7-8]和U-net神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)[9]等，如李雪玉[10]提出了一種具有融合標(biāo)記功能的卷積神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)，實現(xiàn)了宮頸脫落細胞的深度分割。這種方法雖然解決了復(fù)雜背景下的圖像分割問題，但受像素點分類機制的制約，很難準(zhǔn)確分割重疊細胞。貝琛圓等[11]使用U-net網(wǎng)絡(luò)模型對腺體細胞進行分割，與宮頸細胞相比腺體細胞有一個顯著的特點，即重疊率十分低，幾乎沒有相互重疊的細胞，且腺體細胞圖像背景不復(fù)雜，這使細胞精確分割難度大大降低。對于宮頸細胞圖像分割問題，僅采用傳統(tǒng)的分割方法，或僅采用深度學(xué)習(xí)的分割方法，都很難實現(xiàn)重疊細胞的實例分割。故本文在使用深度學(xué)習(xí)對宮頸細胞圖像進行語義分割的基礎(chǔ)上，采用主動輪廓算法[12]中的Snake模型解決了重疊宮頸細胞的實例分割問題。

本文為了解決重疊細胞的分割問題，采用改進U-net網(wǎng)絡(luò)完成細胞圖像的語義分割，搭建U-net網(wǎng)絡(luò)訓(xùn)練，得到三分類語義分割結(jié)果。在此基礎(chǔ)上提取游離細胞和細胞團塊，依據(jù)細胞團塊的細胞核、細胞形狀等信息得到每個細胞的初始輪廓，將其輸入到Snake模型進行演化，直至逼近細胞真實輪廓。

1 數(shù)據(jù)集處理

宮頸細胞學(xué)篩查方法是通過光學(xué)顯微鏡觀察宮頸細胞涂片，對觀察到的宮頸細胞圖像形態(tài)結(jié)構(gòu)進行分析，最后根據(jù)宮頸細胞學(xué)病理原理進行診斷。本文所研究的數(shù)據(jù)集為某腫瘤醫(yī)院提供的宮頸細胞TCT圖像數(shù)據(jù)集，共240張圖像，每幅圖像像素尺寸均為2048*1536，每張圖像含有十幾個到上百個細胞，如圖1所示。

圖1 宮頸細胞TCT圖像

圖像標(biāo)注是選擇圖像中的對象并按照名稱標(biāo)記它們的過程。為了準(zhǔn)確快速辨別細胞圖像中細胞、細胞核等類別，在病理醫(yī)生的指導(dǎo)下，本文使用Labelme軟件對宮頸細胞數(shù)據(jù)集進行圖像標(biāo)注，標(biāo)簽分為3類，標(biāo)注結(jié)果如圖2所示，其中黑色為背景，灰色為細胞，灰色細胞中間的白色區(qū)域為細胞核。

圖2 細胞標(biāo)注圖像

2 方法

本文提出的分割方法分為2個步驟，分別為基于U-net網(wǎng)絡(luò)的圖像語義分割和基于主動輪廓的實例分割。首先，使用改進U-net網(wǎng)絡(luò)完成圖像的語義分割，即把像素分為細胞核、細胞質(zhì)和背景3類，為后續(xù)細胞的初始輪廓獲取提供必要條件；接著，分離圖像中游離細胞與細胞團塊，在此基礎(chǔ)上，為了準(zhǔn)確分割細胞團塊中的重疊細胞，通過分析細胞核和細胞質(zhì)邊界的關(guān)系，為每個細胞初始化一個輪廓，利用Snake模型演化輪廓曲線完成重疊細胞圖像的實例分割。具體分割過程如圖3所示，總體分割流程如圖4所示。

圖3 分割過程

圖4 分割流程

2.1 基于改進U-net網(wǎng)絡(luò)的語義分割

本文最終實現(xiàn)宮頸細胞的實例分割，而實例分割是在語義分割的基礎(chǔ)上進行的，不但要進行像素級別的分類，還需在具體的類別基礎(chǔ)上區(qū)分不同的實例。圖像語義分割是指將圖像每個像素都劃分出對應(yīng)的類別，實現(xiàn)像素級別的分類，本文采用改進的U-net網(wǎng)絡(luò)對細胞圖像進行語義分割。

自從2015年U-net網(wǎng)絡(luò)發(fā)表于MICCAI上[9]，U-net網(wǎng)絡(luò)及其擴展模型[11]廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)圖像分割，是比較早的語義分割算法。最初應(yīng)用于細胞壁分割，之后在細胞分割等領(lǐng)域都有顯著貢獻。

U-net網(wǎng)絡(luò)是一個由收縮路徑(左側(cè))和擴張路徑(右側(cè))構(gòu)成的U型結(jié)構(gòu)網(wǎng)絡(luò)。收縮路徑遵循卷積網(wǎng)絡(luò)的典型結(jié)構(gòu)，包括重復(fù)2個的卷積以及一個最大池化操作。其中每個卷積之后跟隨一個Relu非線性變換，重復(fù)4次完成下采樣過程。擴張路徑則執(zhí)行相反的操作，經(jīng)反卷積與壓縮路徑特征圖拼接進行傳遞。

在原始的U-net網(wǎng)絡(luò)中，發(fā)現(xiàn)會存在特征圖丟失的現(xiàn)象，而卷積層具有在噪聲背景中提取圖像感興趣區(qū)域特征的作用。因此，適當(dāng)增加卷積層可以獲取更多的圖像特征信息，使得語義分割結(jié)果更好。本文對U-net網(wǎng)絡(luò)進行改進，將收縮路徑和擴展路徑加深一層。如圖5所示，增加了Block1和Block11，左側(cè)Block1至Block6為收縮路徑，右側(cè)Block7至Block11為擴展路徑，使得整個網(wǎng)絡(luò)經(jīng)過5次下采樣和5次上采樣。經(jīng)驗證，改進后的U-net網(wǎng)絡(luò)與原始網(wǎng)絡(luò)相比，提高了宮頸細胞分割的準(zhǔn)確度，使語義分割效果更佳。圖3b為獲得的圖像語義分割結(jié)果。

圖5 改進U-net網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)圖

2.2 基于Snake模型實例分割

本節(jié)在細胞語義分割結(jié)果的基礎(chǔ)上，對細胞形狀信息進行分析，對于游離細胞直接提取其輪廓，對于細胞團塊，則需對其中每個細胞的輪廓進行提取。而主動輪廓方法使用曲線表示目標(biāo)輪廓[6,13]，并可以有效結(jié)合圖像先驗知識[14-15]實現(xiàn)圖像有效分割，非常適合進行單個細胞輪廓提取。本文使用由Kass提出的Snake主動輪廓模型進行細胞輪廓的實例分割。

具體分割過程由3個步驟組成,分別是細胞核的提取、細胞區(qū)域的分類、重疊細胞的輪廓提取。詳細介紹如下：

(1)細胞核提取

上一節(jié)中，經(jīng)過改進U-net網(wǎng)絡(luò)獲得細胞圖像語義分割結(jié)果，如圖3b所示。從結(jié)果圖中提取細胞核即偏白色區(qū)域，對圖3c的細胞核進行標(biāo)號，計算連通分量，生成標(biāo)記矩陣，該矩陣用不同的整數(shù)來標(biāo)記細胞核圖像中的細胞核。

(2)細胞區(qū)域分類

與細胞核相同，在語義分割的結(jié)果上提取細胞區(qū)域如圖3d所示。假設(shè)每個細胞核對應(yīng)一個細胞，通過判斷各連通域中細胞核個數(shù)是否為1，將細胞區(qū)域分為2類，游離細胞區(qū)域和細胞團塊區(qū)域。

對于游離細胞分割，本文提取游離細胞區(qū)域的邊緣并對其進行可視化，如圖3f所示。對于細胞團塊中重疊細胞的分割，下一小節(jié)將進行說明。

(3)重疊細胞輪廓提取

Snake主動輪廓模型基本思想為以一條具有彈性的初始輪廓線為模板，通過模板自身的彈性形變，與圖像感興趣區(qū)域特征相匹配并調(diào)和，實現(xiàn)某種能量函數(shù)最小化，完成對圖像的分割。

本文以細胞核質(zhì)心為圓心，細胞核質(zhì)心到團塊邊緣的相應(yīng)距離d為半徑，形成一個圓形初始輪廓，如圖6b所示，距離d定義為

(1)

能量函數(shù)Esnake定義為[12]

(2)

其中

(3)

Eext(v(s))=-[?Gσ(x,y)*H(x,y)]2

(4)

其中：v(s)為圖6b中圓形初始輪廓線；s為曲線參數(shù)；α和β分別為描述輪廓的連續(xù)參數(shù)和平滑參數(shù)；Eint控制輪廓的連續(xù)性及平滑性；Gσ(x,y)為方差σ的二維高斯函數(shù)；?為梯度算子；H(x,y)為宮頸細胞團塊灰度圖像。

通過對式(2)的迭代計算，使其達到最小，進行細胞輪廓的演化，圖像的梯度越大能量函數(shù)越小，使其不斷向局部梯度最大的區(qū)域移動，直至收斂到邊緣。經(jīng)過實驗驗證，本文迭代500次時分割結(jié)果達到最好。迭代過程如圖6c所示，迭代最終結(jié)果如圖6d所示。

圖6 細胞團塊分割過程

對細胞團塊中每一個重疊細胞進行上述操作，提取出每一個細胞輪廓，整個細胞團塊分割結(jié)果如圖3i所示。

3 實驗結(jié)果分析

實驗采用的計算機硬件配置為Intel Core(TM)i7-8750H與NVDIA GeForce GTX 1060，使用軟件Pycharm 2019.2 x64，以Pytorch為框架訓(xùn)練和測試U-net網(wǎng)絡(luò)模型。

3.1 模型訓(xùn)練

在上述實驗環(huán)境中，搭建U-net網(wǎng)絡(luò)，對采集到的宮頸細胞樣本進行訓(xùn)練和測試。宮頸細胞圖像數(shù)據(jù)集共240張，其中訓(xùn)練集為標(biāo)注圖像與原圖各200張，測試集為未經(jīng)過處理圖像原圖40張。訓(xùn)練時，設(shè)置U-net網(wǎng)絡(luò)的學(xué)習(xí)率為0.001，Batchsize為3，初始Epoch為200，Iteration為67，將原圖與經(jīng)過標(biāo)注處理的圖像一起送入網(wǎng)絡(luò)進行訓(xùn)練。其中每10個Epoch保存一次網(wǎng)絡(luò)模型，選擇最佳結(jié)果的網(wǎng)絡(luò)模型進行最終的40張圖片測試，輸出宮頸細胞語義分割結(jié)果，其中最佳網(wǎng)絡(luò)模型Epoch為120。

3.2 質(zhì)量評估

為評估最終宮頸細胞分割效果，從主觀和客觀2方面對實驗結(jié)果進行評估。主觀評估主要是從視覺上觀察整體實驗分割效果，客觀評估是對實驗分割結(jié)果與標(biāo)注結(jié)果進行比較，從計算數(shù)據(jù)指標(biāo)上評估分割效果，評估指標(biāo)為準(zhǔn)確性(Precision)、靈敏度(Recall)、相似度(Dice)和交并比(Intersection Over Union，IOU)，計算公式分別為

(5)

(6)

(7)

(8)

式中，B、R分別表示實驗分割結(jié)果和人工標(biāo)注結(jié)果；Precision為正確預(yù)測部分占預(yù)測部分的比例；Recall為正確預(yù)測部分占真實部分比例；Dice為醫(yī)學(xué)圖像分割的重要度量，表示真實部分與預(yù)測部分的重疊度；IOU為真實部分與預(yù)測部分的交并比，以上各評估指數(shù)，其值越接近1分割效果越好。

本文研究具有重疊細胞的宮頸細胞圖像的細胞實例分割問題，因此進行分割指數(shù)評估時，需要對宮頸細胞圖像中的每一個細胞進行評估。在醫(yī)生指導(dǎo)下，對測試集細胞圖像做單個細胞標(biāo)注，圖像的部分標(biāo)注結(jié)果如圖7所示。圖7a為細胞原圖，圖7b～7f為部分游離細胞的標(biāo)注結(jié)果，圖7a中部分細胞團塊標(biāo)注結(jié)果如圖7h～7l所示，該部分細胞團塊原圖如圖7g所示。

圖7 實例分割標(biāo)注

3.3 結(jié)果分析

本文在U-net網(wǎng)絡(luò)語義分割的基礎(chǔ)上，提取游離細胞與細胞團塊，并使用Snake模型演化初始輪廓對細胞團塊圖像進行分割，測試集宮頸細胞圖像的分割結(jié)果如圖8所示。

圖8 宮頸細胞圖像分割結(jié)果

3.3.1 語義分割結(jié)果分析

針對宮頸細胞語義分割的算法較多，如Otsu算法、CV模型算法等，本文使用Otsu算法[16]、CV模型算法[17]、原始U-net網(wǎng)絡(luò)[9]以及改進的U-net網(wǎng)絡(luò)分別做分割指數(shù)評估，對比結(jié)果如圖9所示，測試集上實驗數(shù)據(jù)如表1所示。

表1 語義分割比較結(jié)果表

可以看到，Otsu算法并不能完整地找到細胞區(qū)域，細胞和背景信息相差不多的區(qū)域尤為明顯；CV模型算法相較于Otsu算法可以將大部分細胞區(qū)域找到，但準(zhǔn)確率不高，存在噪聲，邊緣處分割也較為粗糙；原始U-net網(wǎng)絡(luò)分割結(jié)果是前3種方法中準(zhǔn)確率最高的，但可以看到部分細胞沒有被找到，例如在圖9e中，方框內(nèi)的細胞有缺失，而本文算法可以找到大部分細胞，如圖9f所示。本文算法相較于其他3種算法，可以得到干凈完整的宮頸細胞區(qū)域，和原始U-net網(wǎng)絡(luò)相比，在保證Precision持平的情況下，Recall、Dice及IOU都有顯著提升。總體來看，本文算法的細胞語義分割準(zhǔn)確率高，效果更好。

圖9 4種細胞語義分割算法對比圖

3.3.2 實例分割結(jié)果分析

對于實例分割部分，根據(jù)圖7所示標(biāo)注結(jié)果，針對圖像中游離細胞、細胞團塊中的重疊細胞分別進行分割指數(shù)評估(其中包括311個細胞實例)，結(jié)果如表2所示。從表中可以看出游離細胞的分割精度達到96.65%，受到分割精度及標(biāo)注精度的影響，重疊細胞的分割精度略低于游離細胞，但是也達到了82.53%，細胞實例分割的整體精度接近90%。

表2 游離、團塊細胞的實例分割指數(shù)評估表

從主觀評估上，游離細胞可達到精準(zhǔn)分割，重疊細胞也可找到其對應(yīng)的邊緣完成分割，其中細胞團塊含有2個重疊細胞的區(qū)域分割結(jié)果,如圖10所示；含有3個重疊細胞的區(qū)域分割結(jié)果，如圖11所示；含有4個重疊細胞的區(qū)域分割結(jié)果，如圖12所示。

圖10 2個重疊細胞區(qū)域分割

圖11 3個重疊細胞區(qū)域分割

圖12 4個重疊細胞區(qū)域分割

從客觀評估上，由表2數(shù)據(jù)可知，游離細胞算法分割準(zhǔn)確率十分高，但存在細胞團塊亮度不均勻情況，邊緣模糊導(dǎo)致Snake模型曲線在演化的過程中有些許偏差，使得其分割準(zhǔn)確率沒有游離細胞高，但是從整體效果上看，本文算法實現(xiàn)了宮頸細胞圖像的實例準(zhǔn)確分割。

4 結(jié)論

本文研究在語義分割的基礎(chǔ)上使用主動輪廓Snake模型完成了重疊宮頸細胞圖像分割，首先利用Pytorch深度學(xué)習(xí)框架構(gòu)建并訓(xùn)練U-net網(wǎng)絡(luò)，得到具有細胞、細胞核及背景三分類的語義分割圖像，再依據(jù)細胞核與細胞形狀信息為每個細胞初始化輪廓，然后使用Snake模型對初始輪廓演化，使其逼近真實輪廓。實驗結(jié)果表明，本文宮頸細胞圖像語義分割的準(zhǔn)確率為91%，實例分割的準(zhǔn)確率90%，實現(xiàn)了精確的語義分割和準(zhǔn)確的實例分割。但存在由于細胞內(nèi)部亮度不均勻?qū)е路指铄e誤的情況，將在下一步研究中考慮如何提高語義分割結(jié)果的準(zhǔn)確度，引入更多的先驗知識以提高輪廓提取的準(zhǔn)確性。