農(nóng)　敏　譚婷心

潔凈室VHP傳遞窗性能測試技術(shù)的應(yīng)用

農(nóng)敏譚婷心

（廣西梧州制藥（集團）股份有限公司，廣西 梧州 543000）

在無菌藥品的生產(chǎn)過程中，VHP（氣化過氧化氫）傳遞窗可用于由低級別向高級別潔凈區(qū)傳遞物料，并對窗體及所要傳遞的物料進行表面滅菌。為了考察VHP傳遞窗的性能是否能達到GMP的要求，文章采用不同的技術(shù)手段對VHP傳遞窗性能進行測試，可以證明該VHP傳遞窗能達到使用要求，把物料對潔凈室的污染降低到最低程度，減少因物料污染給藥品帶來污染的風(fēng)險。

VHP傳遞窗；性能測試技術(shù)；潔凈區(qū)

引言

新版GMP顯著提高了無菌藥品生產(chǎn)質(zhì)量的相關(guān)法規(guī)要求，與歐盟GMP接軌，提出了A、B、C、D分級以及更為嚴(yán)格的環(huán)境懸浮粒子和微生物方面的控制要求。新版GMP無菌附錄1第四十五條要求，必要時，可采用熏蒸的方法降低潔凈區(qū)內(nèi)衛(wèi)生死角的微生物污染，應(yīng)當(dāng)驗證熏蒸的殘留水平。針對這種情況，VHP傳遞窗則提供了可以驗證的滅菌技術(shù)。

在藥品生產(chǎn)過程中，必須保證向無菌區(qū)域傳遞物料的安全，向關(guān)鍵生產(chǎn)區(qū)域傳遞的物料、器具等，均需要經(jīng)過滅菌方式方可傳入高級別潔凈區(qū)，而對于不能承受高溫滅菌的物品，則可以選用VHP滅菌傳遞窗。

本次研究的研究對象是凈化型VHP傳遞窗，其采用VHP熏蒸的方式，對窗體及所需要傳遞的物料進行表面滅菌，滅菌效果徹底，能殺死絕大多數(shù)病原菌及病毒，滅菌后無殘留，所耗費的時間也相對較短。對VHP傳遞窗的性能進行測試，考察其滅菌過程參數(shù)符合情況、過濾器完整性、腔體自凈效果、腔體潔凈度、VHP氣體濃度和分布以及VHP滅菌效果，證明此測試方法的有效性，減少由于VHP傳遞窗滅菌不完全等因素導(dǎo)致污染的情況發(fā)生，保證藥品生產(chǎn)的質(zhì)量。

1　VHP傳遞窗構(gòu)造

VHP傳遞窗為具備各種功能控制組件的獨立制動的系統(tǒng)，其各個部件如下。

（1）傳遞窗腔體：腔體材料為304不銹鋼板，VHP往高效過濾器進入通往腔體內(nèi)，配備有回風(fēng)口用于循環(huán)排風(fēng)，傳遞窗的前后配制有玻璃視鏡，可用于觀察墻內(nèi)滅菌過程。

（2）進風(fēng)系統(tǒng)和排風(fēng)系統(tǒng)：該系統(tǒng)主要由進風(fēng)風(fēng)機和排風(fēng)風(fēng)機組成，分別位于VHP傳遞窗的進口和出口處，風(fēng)機的葉輪和電機部分完全隔離，高濃度的VHP不能腐蝕風(fēng)機的任何元器件。

（3）VHP蒸汽發(fā)生系統(tǒng)：主要由儲液罐、蠕動泵、蒸發(fā)室和預(yù)熱器四個部分組成，此系統(tǒng)能夠在高溫的狀態(tài)下，短時間內(nèi)產(chǎn)生大量的過氧化氫氣體，用于腔體內(nèi)的滅菌。

（4）控制系統(tǒng)：控制系統(tǒng)由PLC進行控制，其依照控制界面?zhèn)鲗?dǎo)的指令，可以處理所有與傳遞窗操作相關(guān)的操作，可以通過手動或者自動控制該滅菌過程，對系統(tǒng)進行相應(yīng)的管理和監(jiān)控，并且可以進行系統(tǒng)安全和數(shù)據(jù)方面的提取，系統(tǒng)還可以對用戶登錄/登出系統(tǒng)的時間、參數(shù)設(shè)置和修改和操作人員簽名進行控制。

2　VHP傳遞窗構(gòu)造及滅菌過程概述

VHP傳遞窗整個滅菌過程包括六個階段。

（1）腔體自凈：此狀態(tài)時，無菌空氣由低噪聲離心風(fēng)機壓入，再經(jīng)過高效過濾器均壓以后，通過排風(fēng)管對腔體進行自靜；

（2）腔體干燥：此狀態(tài)時，腔體內(nèi)部進行預(yù)熱干燥，當(dāng)干燥時間達到設(shè)定值后，進入下一階段；

（3）滅菌提升：待預(yù)熱器、蒸發(fā)室達到預(yù)設(shè)溫度至滅菌溫度后，開始腔體滅菌；

（4）滅菌維持：當(dāng)腔體內(nèi)過氧化氫氣體濃度上升至設(shè)定值時，開始滅菌計時，使腔體內(nèi)的過氧化氫氣體濃度和相對濕度保持穩(wěn)定狀態(tài)，達到設(shè)定的滅菌溫度后，進入下一階段；

（5）腔體置換：待傳遞窗腔體內(nèi)殘余過氧化氫濃度≤1 ppm時，通風(fēng)階段結(jié)束；

（6）結(jié)束運行。

3 性能測試部分

3.1 材料與試劑

PAO氣溶膠、VHP蒸汽化學(xué)試紙條、食品級35%過氧化氫溶液、嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌片、TSB培養(yǎng)基、試管。

3.2 儀器與設(shè)備

生化培養(yǎng)箱、ATI-2H光度計、TDA-6C氣溶膠發(fā)生器、MET ONE 3445懸浮粒子計數(shù)器（采樣量100 L）。

3.3 測試方法

3.3.1 高效過濾器完整性測試

對高效過濾器進行完整性測試，可考察其過濾器是否存在泄漏，確保腔體內(nèi)的自凈效果達到要求。

（1）測試步驟：①在高效過濾器的上游發(fā)氣溶膠作為塵源，待氣溶膠在腔體內(nèi)混合均勻后，把該濃度設(shè)定為100%基準(zhǔn)值；②在上游的氣溶膠濃度達到20 ug/L～80 ug/L的時候，手持采樣頭在高效過濾器下方進行掃描，檢測時采樣頭距離高效過濾器2 cm～3 cm，掃描速度在3 cm/s～5 cm/s；③檢測氣溶膠的濃度，此時光度計上顯示的濃度和上游的濃度比值，為泄漏率。

（2）判定標(biāo)準(zhǔn)。過濾器和框架泄露限度應(yīng)≤0.01%。

（3）試驗結(jié)果。高效過濾器完整性測試的光度計掃描結(jié)果顯示，透過率均小于0.1%，結(jié)果符合要求，說明該VHP傳遞窗高效過濾器完整無泄漏，可提供潔凈氣流。

3.3.2 VHP系統(tǒng)自凈時間測試

通過在VHP傳遞柜內(nèi)部制造一定濃度粒子下的污染環(huán)境，然后進行粒子采樣，計算粒子到達相應(yīng)級別靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)的時間，該時間即為自凈時間。通過考察自凈時間是否能達到標(biāo)準(zhǔn)要求，可證明該系統(tǒng)的送風(fēng)系統(tǒng)所送出的潔凈氣流能夠及時把污染氣體清除，達到自凈的效果。

（1）測試步驟：①在VHP傳遞窗內(nèi)放置粒子計數(shù)器，利用氣溶膠發(fā)生器持續(xù)發(fā)煙至粒子超出B級潔凈區(qū)潔凈級別（0.5 μm粒子）100倍（即352000粒/ m3以上）以上后停止發(fā)煙；②打開懸浮粒子計數(shù)器連續(xù)采樣，設(shè)置每一分鐘記錄一次粒子數(shù)據(jù)，直至達到潔凈室B級級別的靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)要求；③統(tǒng)計粒子達到B級級別的自凈時間，測試共進行三次。

（2）判定標(biāo)準(zhǔn)。經(jīng)過自凈后，VHP傳遞窗內(nèi)空氣潔凈度應(yīng)能達到B級潔凈室靜態(tài)標(biāo)準(zhǔn)要求（B級區(qū)：≥0.5 μm粒子不得過3520粒/ m3），且自凈時間T≤15 min。

（3）測試結(jié)果。自凈時間測試結(jié)果如表1所示。

表1 自凈時間檢測結(jié)果

通過三次測試數(shù)據(jù)表明，三次自凈時間分別為9 min、10 min和10 min，測試結(jié)果均符合要求，說明該VHP傳遞窗自凈效果良好，可快速凈化由粒子帶來的污染，也符合相應(yīng)潔凈區(qū)域潔凈度要求，該測試方法有效。

3.3.3 滅菌過程參數(shù)符合情況測試

通過考察滅菌過程各相關(guān)運行參數(shù)是否符合要求，來確保此過程是符合既定的規(guī)程來進行滅菌的，從而證明滅菌過程無任何偏差，減少物料污染的風(fēng)險。

（1）測試步驟。進行VHP滅菌程序，觀察并記錄滅菌過程中相關(guān)參數(shù)。

（2）判定標(biāo)準(zhǔn)。滅菌過程參數(shù)應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)要求。

（3）測試結(jié)果。滅菌過程參數(shù)測試結(jié)果如表2所示。

通過三次滅菌參數(shù)測試數(shù)據(jù)表明，各滅菌步驟測試結(jié)果均符合要求，說明該VHP傳遞窗滅菌過程是完全符合既定設(shè)定程序要求的，該滅菌過程有效。

表2 滅菌過程參數(shù)檢測結(jié)果

3.3.4 VHP氣體分布測試

VHP氣體分布測試，是為了確認(rèn)待滅菌物品以最大裝載量，并按照與生產(chǎn)操作相同條件下放置的情況下，VHP氣體仍然能夠均勻分布于傳遞窗內(nèi)各個測試點。

（1）檢測方法：①于VHP傳遞窗內(nèi)放置與生產(chǎn)操作相同最大裝載量物品；②分別將VHP蒸汽化學(xué)試紙條均勻分布于傳遞窗內(nèi)15個測試點（共分三層分布，每層分布5個測試點，分布如圖1所示）；③啟動VHP傳遞窗自動滅菌運行程序，記錄滅菌時VHP濃度值，滅菌結(jié)束后，觀察化學(xué)試紙條變色情況，測試共進行三次。

（2）判定標(biāo)準(zhǔn)。滅菌時過氧化氫濃度峰值應(yīng)＞300 ppm，化學(xué)試紙條均能顯著變色，各指示條變色后顏色基本一致，無顯著性差異。

（3）試驗結(jié)果。VHP氣體分布測試結(jié)果如表3所示。

通過三次測試數(shù)據(jù)表明，滅菌時傳遞窗內(nèi)VHP濃度均能超過300 ppm，經(jīng)過滅菌后，化學(xué)試劑條的顏色均能顯著變色，且無顯著差異，說明在該滿載情況下，VHP氣體均能均勻分布于腔體內(nèi)，并能達到要求的濃度，測試符合要求，該測試方法有效。

表3 VHP氣體分布測試結(jié)果

3.3.5 VHP滅菌效果測試

通過檢測滅菌過程VHP的滅菌效力進行確認(rèn)，確保其通過VHP滅菌后，能夠殺死腔體內(nèi)中所有微生物，達到預(yù)期的滅菌效果。

（1）檢測方法：①VHP傳遞窗滿載情況下，按VHP氣體分布測試點布置嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌片（孢子量106）；②運行VHP傳遞窗自動滅菌程序，并記錄運行參數(shù)；③待滅菌程序完成并通風(fēng)結(jié)束后，迅速將嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌片取下，并在無菌條件下接種至TSB培養(yǎng)基中；④在無菌條件下，將一片未經(jīng)過接觸VHP的嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌片接種至TSB培養(yǎng)基中，作為陽性對照管，另一支只含TSB培養(yǎng)基的試管作為陰性對照管；⑤將所有試驗培養(yǎng)基試管至于生化培養(yǎng)箱中（55℃～60℃）培養(yǎng)7天，觀察培養(yǎng)基是否渾濁，測試共進行三次。

（2）判定標(biāo)準(zhǔn)：①試驗結(jié)束后，觀察接種有試驗樣品菌片的TSB培養(yǎng)基，應(yīng)不渾濁，陽性對照應(yīng)有菌生長（渾濁），陰性對照應(yīng)無菌生長，則此次滅菌效果判定合格；②若有試驗樣品菌片的TSB培養(yǎng)基有菌生長，陽性對照有菌生長，陰性對照無菌生長，則判定此次滅菌效果不合格；③若陽性對照無菌生長或陰性對照有菌生長，則試驗樣品結(jié)果無論如何，均判定此次試驗無效。

（3）試驗結(jié)果。VHP滅菌效果測試結(jié)果如表4所示。

通過三次檢測數(shù)據(jù)表明，經(jīng)過VHP傳遞窗在線滅菌后，各測試點的TSB培養(yǎng)結(jié)果均無菌生長，陽性對照均有菌生長，陰性對照均無菌生長，說明在滿載物料的情況下，經(jīng)過VHP滅菌程序后，均能有效殺滅傳遞窗空間內(nèi)微生物，可使芽孢數(shù)量下降6個對數(shù)單位，滿足了滅菌的要求，減少了因由低級別潔凈區(qū)向高級別潔凈區(qū)傳遞物料而產(chǎn)生的風(fēng)險，且滅菌結(jié)束后VHP的殘留均小于1 ppm，符合殘留量要求。

表4 VHP滅菌測試結(jié)果

4 討論

本文主要闡述了VHP傳遞窗性能測試技術(shù)的應(yīng)用，通過對VHP傳遞窗進行性能測試，其測試結(jié)果完全符合要求，證明了該測試技術(shù)的可靠性和有效性，該傳遞窗能用于藥品無菌制劑生產(chǎn)線上物料的傳遞，能充分說明該性能測試方法是合乎日常生產(chǎn)實際的。

然而，該VHP傳遞窗的性能測試方法往往通常不止上述這幾項測試方法，對滅菌效果有效性影響的因素還有很多，比如傳遞窗的密封性是否會直接影響腔體內(nèi)VHP的濃度，從而對滅菌效果造成影響；系統(tǒng)的蠕動泵充氣速率也有較大影響，充氣速率的快和慢，往往會影響過氧化氫氣體的濃度變化，從而影響滅菌效果，同時還應(yīng)當(dāng)注意檢查蠕動泵系統(tǒng)的完整性，看是否存在泄漏的風(fēng)險；還有就是在充氣和保壓階段，充氣時間的長短，還有過氧化氫的注射流量也對滅菌效果有較大影響，一般延長充氣時間，加大過氧化氫的用量，都會識得滅菌效果更佳；另外裝載模式也會對滅菌效果有較大影響，因為被滅菌的物料表面必須與VHP充分的進行接觸，若裝載量過大，容易存在部分死角而達不到充分的滅菌效果，增加物料傳遞的污染風(fēng)險，所以裝載物應(yīng)留有部分間隙以防滅菌不完整。

5 結(jié)束語

VHP傳遞窗的性能測試技術(shù)還有待于專業(yè)技術(shù)人員更深入的研究與探討，設(shè)計出更多符合測試設(shè)備性能的技術(shù)項目，減少由低風(fēng)險潔凈區(qū)向高風(fēng)險潔凈區(qū)傳遞物料的風(fēng)險，從而更充分保障藥品生產(chǎn)的質(zhì)量控制過程，生產(chǎn)出質(zhì)量合格的產(chǎn)品。

[1] 高楊. 過氧化氫蒸汽滅菌傳遞窗滅菌效果的影響因素[J]. 現(xiàn)代養(yǎng)生，2017(9): 283.

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Application of VHP Transfer Window Performance Test Technology in Clean Room

In the production process of sterile drugs, VHP (vaporized hydrogen peroxide) transfer window can be used to transfer materials from low-level to high-level clean areas, and sterilize the window and the materials to be transferred. In order to investigate whether the performance of VHP transfer window can meet the requirements of GMP, this paper uses different technical means to test the performance of VHP transfer window, which can prove that the VHP transfer window can meet the use requirements, reduce the pollution of materials to the clean room to a minimum, and reduce the risk of drug pollution caused by material pollution.

VHP transfer window; performance testing technology; clean area

TQ46

A

1008-1151(2022)06-0056-04

2022-03-26

農(nóng)敏（1984－），女，廣西橫州人，廣西梧州制藥（集團）股份有限公司工程師，從事藥品設(shè)備、藥品設(shè)備技術(shù)研究工作。

譚婷心（1985－），女，廣西博白人，廣西梧州制藥（集團）股份有限公司工程師，從事藥品技術(shù)、藥物警戒研究工作。