廖燦青， 周小輝， 陳中平， 謝智文，徐 杰， 戴晉軍， 王家鄉(xiāng)

（1.長江大學(xué)，湖北荊州 434023；2.宜昌安琪生物農(nóng)業(yè)科技有限公司，湖北宜昌 443200；3.安琪酵母股份有限公司，湖北宜昌 443000）

酵母細(xì)胞壁（YCW）主要成分為甘露聚糖、葡聚糖、蛋白質(zhì)以及少量的幾丁質(zhì)和脂類等（朱延軍等，2009）。 研究發(fā)現(xiàn)，酵母細(xì)胞壁能夠吸附腸道病原菌、促進(jìn)腸道有益菌群、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫、特異性吸附霉菌毒素等。酵母細(xì)胞壁是具有抗生素兼益生素雙重作用的免疫促進(jìn)劑，因其具有天然高效、無殘留、無耐藥性等優(yōu)點(diǎn)而得到廣大養(yǎng)殖戶的關(guān)注和認(rèn)可，已經(jīng)成為當(dāng)今研究熱點(diǎn)之一（趙曉靜等，2012）。目前研究所用的酵母細(xì)胞壁產(chǎn)品大都是采用普通酶解酵母細(xì)胞壁技術(shù)，通過抽提的方法直接離心干燥制成的（劉亞娜等，2019）。 本試驗(yàn)所使用的酵母細(xì)胞壁產(chǎn)品是通過酶解破壁后進(jìn)一步加復(fù)合酶處理，再離心干燥而制成的含有特定分子片段葡聚糖的酵母細(xì)胞壁（徐智鵬等，2015）。 由于深度定向酶解處理，酵母細(xì)胞壁外層甘露聚糖酶解成甘露寡糖更易溶于水，內(nèi)層葡聚糖分子質(zhì)量為9~20 Da，使其表面功能性位點(diǎn)暴露更充分，更易發(fā)揮其生物學(xué)功能（吳宇梁等，2021）。因此，本研究旨在評估日糧中添加深度酵母細(xì)胞壁對白羽肉雞生長性能、免疫功能和腸道微生物的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 酵母細(xì)胞壁樣品由安琪酵母股份有限公司提供， 粗蛋白質(zhì)21% ～23%，β-葡聚糖25% ～27%，甘露聚糖26% ～28%，溶解率45% ~50%， 可溶部分中分子質(zhì)量為14 萬~19 萬Da 的約占38.03%，9 萬~14 Da 的約占61.53%。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及日糧 試驗(yàn)動(dòng)物選用科寶白羽肉雞，基礎(chǔ)日糧配方參考NY/T 33-2004，使用商品飼料，購自宜昌昌偉農(nóng)牧，基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 商品飼料指標(biāo)（風(fēng)干基礎(chǔ)）%

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理 選擇1 日齡白羽肉雞200 羽，隨機(jī)分為4 個(gè)處理組，每個(gè)處理組5 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10 只，各組間試驗(yàn)雞的平均體重差異不顯著（P＞0.05）。 對照組A 飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組B、C、D 分別在基礎(chǔ)日糧中添加250、500、1000 g/t 的酵母細(xì)胞壁多糖，試驗(yàn)期42 d。 試驗(yàn)肉雞自由采食、 飲水， 采用保溫?zé)羧∨{(diào)控圈內(nèi)溫度， 雞舍進(jìn)行稀戊二醛溶液消毒， 肉雞的飼養(yǎng)管理、舍內(nèi)環(huán)境控制依照肉雞飼養(yǎng)管理標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。免疫程序：在7 d 新支二聯(lián)疫苗免疫，14 d 進(jìn)行法氏囊疫苗免疫，21 d 進(jìn)行新城疫二免。

1.4 考察指標(biāo)及測定方法

1.4.1 生長性能試驗(yàn) 分別于每個(gè)試驗(yàn)階段（21、42 d）結(jié)束前，禁食（自由飲水）12 h 后稱重，記錄出欄重（BW），計(jì)算1~21、22~42 d 期間的平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）和料肉比（F/G）。

平均日增重（ADG）：以重復(fù)為單位，飼養(yǎng)試驗(yàn)開始前和結(jié)束后分別稱重，稱重前禁食12 h，計(jì)算每個(gè)重復(fù)每只雞的平均日增重。 平均日采食量（ADFI）：試驗(yàn)開始后，記錄每天的投料量和每天的剩料量，死亡雞只，計(jì)算每個(gè)重復(fù)每只雞的平均日采食量。 料肉比（F/G）：由每個(gè)重復(fù)的總耗料量和總增重計(jì)算得出每個(gè)重復(fù)的平均料重比。

1.4.2 免疫器官指標(biāo) 分別在21 d 和42 d 屠宰前絕食12 h，僅供飲水。 以重復(fù)為單位稱取各組雞的體重， 選取3 只與平均體重接近的試雞用于屠宰試驗(yàn)。取樣按照家禽屠宰測定標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，分離胸腺、脾臟、法氏囊后稱重，計(jì)算胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)。

器官指數(shù)/（g/kg）=免疫器官鮮重（g）/活體重（kg）。

1.4.3 血清新城疫抗體指標(biāo) 42 d， 每個(gè)處理每個(gè)重復(fù)3 只雞進(jìn)行采血。 采血使用無添加抗凝劑采血管，采血后將采集的血液4000 r/min 離心10 min 分離出血清，用于檢測新城疫抗體滴度，新城疫抗體指標(biāo)采用新城疫診斷技術(shù)血凝（HA）和血凝抑制試驗(yàn)（HI）（GB/T18936—2003）測定。

1.4.4 腸道菌群 42 d， 屠宰過程中在潔凈條件下采集回腸和盲腸中食糜樣品用于測定腸道微生物菌群（常規(guī)平板培養(yǎng)法）。

1.4.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 進(jìn)行預(yù)處理，以“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)軟件中one-way ANOVA 進(jìn)行單因素方差分析， 差異顯著性用Duncan’s 多重比較法，以P< 0.05 作為差異顯著性的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

2.1 酵母細(xì)胞壁對白羽肉雞生長性能的影響肉雞生長性能數(shù)據(jù)如表3 所示， 平均出欄重結(jié)果（BW）顯示C 組＞B 組＞D 組＞A 組，飼糧添加500 g/t YCW 可顯著提高肉雞出欄重， 較對照組（A組）提高13.6%；平均日采食量（ADFI）和平均日增重（ADG）各組之間差異不顯著（P> 0.05）；1 ~42 d 整體分析料肉比（F/G）結(jié)果顯示C 組＜B 組＜D 組＜A 組，與對照組相比，試驗(yàn)組料肉比分別降低0.17、0.20、0.15。

表3 酵母細(xì)胞壁對肉雞生長性能的影響

2.2 酵母細(xì)胞壁對白羽肉雞免疫性能的影響21 d 和42 d 肉雞免疫器官指數(shù)結(jié)果如表4 所示，與對照組相比， 添加YCW 可提高肉雞胸腺和法氏囊指數(shù)，21 d 胸腺指數(shù)、 脾臟指數(shù)和法氏囊指與對照組相比無顯著差異（P> 0.05），但是42 d結(jié)果顯示添加1000 g/t 的YCW 可顯著提高肉雞胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)（P< 0.05），其余組間無顯著差異（P> 0.05）。

42 d 肉雞血清新城疫抗體水平結(jié)果如表5所示，飼糧添加1000 g/t YCW 能顯著提高血清新城疫抗體水平（P< 0.05），較對照組提高31.10%，其余各組血清新城疫抗體滴度水平差異不顯著（P> 0.05）。

表5 酵母細(xì)胞壁對42 d 肉雞血清新城疫抗體水平的影響log2

2.3 酵母細(xì)胞壁對白羽肉雞腸道菌群的影響回腸和盲腸內(nèi)容物中大腸桿菌和沙門氏菌數(shù)量結(jié)果如表6 所示， 添加酵母細(xì)胞壁可降低回腸盲腸大腸桿菌和沙門氏菌數(shù)量， 與對照組相比， 添加500 g/t YCW 對肉雞盲腸大腸桿菌抑制效果無顯著差異（P> 0.05），但是能顯著降低回腸大腸桿菌數(shù)和沙門氏菌數(shù)（P< 0.05），同時(shí)能顯著降低盲腸沙門氏菌數(shù)（P< 0.05）。

表6 酵母細(xì)胞壁對42 d 肉雞腸道菌群的影響

3 討論

3.1 酵母細(xì)胞壁多糖對肉雞生長性能的影響本研究的結(jié)果表明， 酵母細(xì)胞壁多糖的添加有助于提高肉雞出欄的平均體重，同時(shí)，酵母細(xì)胞壁多糖提高了肉雞的日增重，降低了料肉比，這與其他很多關(guān)于酵母細(xì)胞壁多糖在肉雞試驗(yàn)研究上的結(jié)果一致。賀淼等（2015）報(bào)道，酵母細(xì)胞壁多糖處理組與對照組相比生產(chǎn)性能差異不顯著（P> 0.05），但是酵母細(xì)胞壁多糖的添加有助于促進(jìn)肉雞全期的采食，改善肉雞全期的平均體重。廖冰麟（2009）報(bào)道， 在全價(jià)日糧中添加酵母細(xì)胞壁多糖可提高AA 肉雞生長全程的體增重， 其中0.3%酵母細(xì)胞壁多糖處理組能顯著提高22 ～42 d 的平均日增重（P< 0.05）。 龔發(fā)源等（2018）報(bào)道，在基礎(chǔ)日糧中添加酵母細(xì)胞壁多糖，42 d 肉雞的出欄體重極顯著高于其他處理組（P＜0.01）。黃鑫等（2015）報(bào)道，酵母細(xì)胞壁組肉雞42 d 出欄體重顯著高于空白對照組。 夏超篤（2016）報(bào)道，與對照組相比，飼料中添加0.1%的酵母細(xì)胞壁可以顯著提高1 ~21 d 黃羽肉雞平均日采食量 （P< 0.05）， 添加0.05%酵母細(xì)胞壁可顯著提高1 ～21 d 黃羽肉雞料重比（P< 0.05），而添加酵母細(xì)胞壁對1 ～21 d黃羽肉雞的平均日增重?zé)o顯著影響（P> 0.05）。在22 ～42 d，與對照組相比，添加酵母細(xì)胞壁對平均日采食量和耗料增重比無顯著性影響 （P<0.05）。 因此，酵母細(xì)胞壁對肉雞日平均采食量影響不明顯，但是可以提高出欄體重，降低料肉比，提高養(yǎng)殖效益。

3.2 酵母細(xì)胞壁多糖對白羽肉雞免疫功能的影響 本研究的結(jié)果表明， 與對照組相比， 添加YCW 組肉雞胸腺、 脾臟和法氏囊指數(shù)都有提升，21 d 胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)和法氏囊指與對照組相比無顯著差異（P> 0.05），但是42 d 結(jié)果顯示添加1000 g/t 的YCW 能顯著提高肉雞胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)（P< 0.05），其余組間無顯著差異（P>0.05）。 酵母細(xì)胞壁是被公認(rèn)的一種天然、高效免疫增強(qiáng)劑。酵母細(xì)胞壁的β-葡聚糖能夠與免疫細(xì)胞表面的受體（dectin-1、CR3）結(jié)合，使免疫信號(hào)傳導(dǎo)途徑被激活， 促使免疫細(xì)胞釋放下游信號(hào)分子， 誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性和非特異性免疫應(yīng)答反應(yīng)；刺激細(xì)胞毒性T 細(xì)胞、B 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞（NK） 的增殖分化（Cross 和Jennings，2001）。 李萍萍等（2011）報(bào)道，酵母細(xì)胞壁多糖能提高種雞新城疫和流感的抗體水平。 黃婧溪等（2018）報(bào)道，飼糧中添加酵母細(xì)胞壁多糖可以顯著地提高21 d 肉雞脾臟指數(shù)，胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)也有不同程度的提高。李靜（2017）報(bào)道，添加500 g/t 酵母細(xì)胞壁多糖試驗(yàn)組肉雞的胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)均略高于正負(fù)對照組（P> 0.05）。廖冰麟（2009）報(bào)道，添加0.1%酵母細(xì)胞壁多糖對肉雞5~21 d 的法氏囊、脾臟和胸腺發(fā)育未造成影響，而5~42 d 的法氏囊、胸腺重量及其相對重量有提高的趨勢，但是當(dāng)酵母細(xì)胞壁多糖的添加量達(dá)到0.3%時(shí)，肉雞5 ～21 d 的脾臟重量和5 ～42 d 的法氏囊重量和胸腺重量顯著提高（P< 0.05）。

同時(shí)， 本研究表明飼糧添加1000 g/t 酵母細(xì)胞壁可顯著提高血清新城疫抗體水平， 較對照組提高31.10%。 李春松等（2012）報(bào)道，日糧中添加酵母細(xì)胞壁能提高肉雞血清球蛋白及新城疫抗體水，效果優(yōu)于黃芪多糖。 黃鑫（2015）報(bào)道，與對照組相比，添加1 kg/t 酵母細(xì)胞壁提高了抗體水平。管秀界（2020）報(bào)道，飼料中添加1 kg/t 酵母細(xì)胞壁組21 d 肉雞血清新城疫抗體水平最高，但沒有達(dá)到顯著差異（P> 0.05）。表明添加1 kg/t 酵母細(xì)胞壁可適當(dāng)提高肉雞接種新城疫疫苗后的抗體生成。劉星（2015）研究表明，飼糧添加酵母細(xì)胞壁多糖后NDV 抗體效價(jià)有升高的趨勢，尤其1000 g/t啤酒酵母細(xì)胞壁多糖組最高。 由此可見， 酵母細(xì)胞壁可以適當(dāng)促進(jìn)免疫器官發(fā)育和免疫抗體分泌，提高肉雞免疫功能。

3.3 酵母細(xì)胞壁多糖對白羽肉雞腸道菌群的影響 各試驗(yàn)組腸道內(nèi)容物大腸桿菌和沙門氏菌數(shù)量均低于對照組， 添加500 g/t YCW 對肉雞盲腸大腸桿菌數(shù)量無顯著影響（P> 0.05），但是能顯著降低回腸大腸桿菌數(shù)和沙門氏菌數(shù)（P< 0.05），同時(shí)能顯著降低盲腸沙門氏菌數(shù)（P< 0.05）。 Spring（2000）報(bào)道，酵母細(xì)胞壁中的甘露寡糖結(jié)構(gòu)與病原菌在腸壁上的結(jié)合受體結(jié)構(gòu)相似， 因此可以競爭性地與病原菌結(jié)合， 阻礙病原菌在腸壁上的黏附，且甘露寡糖不能被病原菌和腸道消化酶降解，緊密結(jié)合的“病原菌-甘露寡糖復(fù)合體”可以通過腸道排除體外。Froebel（2020）報(bào)道，益生元寡糖可抑制病原菌對雞上皮細(xì)胞的黏附。 Kiros（2019）報(bào)道， 在肉雞日糧中使用YCW 作為益生元可以通過減少盲腸負(fù)荷降低病原菌的感染率。 賀淼（2015）報(bào)道，日糧中添加酵母細(xì)胞壁多糖降低了肉雞盲腸內(nèi)容物中的大腸菌落總數(shù)。綜上所述，飼料中添加酵母細(xì)胞壁可以降低腸道中大腸桿菌和沙門氏菌數(shù)量，減少致病菌對腸道的危害，維護(hù)腸道健康。

4 結(jié)論

飼糧添加酵母細(xì)胞壁能提高肉雞出欄重，降低料肉比， 提高免疫器官指數(shù)和血清特異性抗體水平； 飼糧中添加酵母細(xì)胞壁類產(chǎn)品還可抑制病原微生物（大腸桿菌、沙門氏菌）增殖，對腸道微生物有一定的調(diào)控作用。