趙雁萍，王海珍，張妍，崔小珍，鄭明學(xué)

（1.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，山西 太原 030000；2.內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)畜產(chǎn)品質(zhì)量安全中心，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010000）

雞球蟲(chóng)病是一種球蟲(chóng)卵囊寄生在雞腸道上皮細(xì)胞且危害養(yǎng)雞業(yè)的疾病，雛雞感染后會(huì)引起生長(zhǎng)發(fā)育受阻、免疫力降低，并誘導(dǎo)發(fā)生其它疾病，其中雞柔嫩艾美耳球蟲(chóng)（E.tenella）危害最大，嚴(yán)重感染可引起昏迷，甚至死亡?，F(xiàn)階段，抗球蟲(chóng)藥物是雞球蟲(chóng)病的主要防治途徑，但使用單一抗球蟲(chóng)藥易產(chǎn)生耐藥性且感染球蟲(chóng)3 d后治療效果不佳。

鈣離子拮抗劑硝苯地平可在柔嫩艾美耳球蟲(chóng)病發(fā)生早期阻斷球蟲(chóng)的侵入，使鈣離子內(nèi)流減少，減輕宿主細(xì)胞損傷，從而保護(hù)雞體；抗氧化劑維生素E、硒具有抗氧化功能，對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞有保護(hù)作用，尤其是將其聯(lián)合使用可增強(qiáng)雞體的免疫機(jī)能，提高抗應(yīng)激的耐受力，從而減輕球蟲(chóng)對(duì)雞體的侵害；鋅可提高雞體的營(yíng)養(yǎng)代謝，促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育，維持雞體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)；止血敏則可增加血小板數(shù)量，縮短凝血時(shí)間，對(duì)雞球蟲(chóng)病引起的血便有良好的治療效果。尹云厚等研究發(fā)現(xiàn)，利用藥物間協(xié)同增效作用，通過(guò)聯(lián)合給藥的方式，可提高療效、擴(kuò)大抗球蟲(chóng)譜，同時(shí)保持對(duì)抗球蟲(chóng)藥的敏感性。但是聯(lián)合使用抗球蟲(chóng)藥和抗損傷藥對(duì)雞球蟲(chóng)病的療效如何尚未見(jiàn)報(bào)道，本研究通過(guò)在前期對(duì)常用抗球蟲(chóng)藥物的敏感性試驗(yàn)篩選出對(duì)雞E.tenella山西分離株最為敏感的妥曲珠利和磺胺氯吡嗪鈉的基礎(chǔ)上，配伍了鈣離子拮抗劑硝苯地平、抗氧化劑硒、鋅和維生素E以及止血敏，旨在為探討聯(lián)合使用抗球蟲(chóng)藥和抗損傷藥物對(duì)雞感染柔嫩艾美耳球蟲(chóng)的治療效果，為今后研制高效抗雞球蟲(chóng)藥物提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

妥曲珠利，購(gòu)自山東鵬露生物科技有限公司；磺胺氯吡嗪鈉，購(gòu)自江蘇天和制藥有限公司；維生素E，購(gòu)自巴斯夫維生素有限公司；亞硒酸鈉（Se），購(gòu)自天津市大茂化學(xué)儀器供應(yīng)站；硝苯地平，購(gòu)自萬(wàn)壽制藥有限責(zé)任公司；硫酸鋅（Zn），購(gòu)自天津市化學(xué)試劑三廠；酚磺乙胺（止血敏），購(gòu)自武漢鼎信通藥業(yè)有限公司。

柔嫩艾美耳球蟲(chóng)（E.tenella）由山西農(nóng)業(yè)大學(xué)病理實(shí)驗(yàn)室提供。

SPF雛雞，由購(gòu)自北京梅里亞維通實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司的SPF種蛋孵化獲得，嚴(yán)格飼養(yǎng)于SPF隔離器中。

1.2 試驗(yàn)方法

11日齡SPF雛雞90只，隨機(jī)分為6組（15只/組），每組3個(gè)重復(fù)。C0組（不感染不給藥），T0組（感染不給藥），T1組聯(lián)合用藥(妥曲珠利50 mg/kg+磺胺氯吡嗪鈉300 mg/kg+硝苯地平240.6 mg/kg+VE 152.17 mg/kg+Se 2.588 mg/kg +Zn 70.71 mg/kg+止血敏176.8 mg飼料)，T2組(妥曲珠利50 mg/kg飼料)，T3組(磺胺氯吡嗪鈉300 mg/kg飼料)，T4組(妥曲珠利50 mg/kg飼料+磺胺氯吡嗪鈉300 mg /kg飼料）。T0～T4組在分組后次日人工感染E.tenella孢子化卵囊5.0×10個(gè)/只雞，感染后72 h，向T1～T4組飼喂拌有各組藥物的飼料。

試驗(yàn)期間，觀察記錄雞的采食量變化、精神狀況、糞便性狀和死亡數(shù)目，并計(jì)算日采食量，收集第5~7天的糞便，并用麥克馬斯特法計(jì)數(shù)，計(jì)算OPG；第6天起每天記錄血便記分，第8天對(duì)全部雞只稱重后剖檢，記錄盲腸病變記分，計(jì)算相對(duì)增重率、平均血便率、成活率、OPG、病變值和抗球蟲(chóng)指數(shù)（ACI）。

1.3 判定標(biāo)準(zhǔn)

抗球蟲(chóng)效果：當(dāng)ACI＜120，為無(wú)效；當(dāng)ACI＝120～160時(shí)，為中效；當(dāng)ACI＝160～180時(shí)，為良好；當(dāng)ACI＞180時(shí)，為高效。

1.4 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)結(jié)果采用SPSS17.0軟件對(duì)各試驗(yàn)組的OPG和病變值進(jìn)行差異顯著性分析，P＜0.01為差異極顯著，P＜0.05差異顯著，并用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 各試驗(yàn)組雞臨床癥狀

接種球蟲(chóng)卵囊72 h，T0組雞精神狀況未見(jiàn)異常，但陸續(xù)出現(xiàn)輕微下痢，隨后，T2、T3組糞便略稀，T1、T4組未見(jiàn)明顯異常，各組采食量均未見(jiàn)異常；96 h，T0組雞出現(xiàn)精神沉郁，采食量下降，開(kāi)始有血便，T2、T3、T4組出現(xiàn)拉稀，而T1組未見(jiàn)異常；120 h開(kāi)始至試驗(yàn)結(jié)束，T0組出現(xiàn)嚴(yán)重精神萎靡，采食量顯著下降，腹瀉并出現(xiàn)大量血便，T1組精神無(wú)明顯異常，僅2只出現(xiàn)輕微血便，T2、T3組精神狀態(tài)欠佳，采食量下降，其中T2組血便較嚴(yán)重。試驗(yàn)期間各組日采食量情況見(jiàn)表1。

表1 各組日采食量情況 單位：g

2.2 聯(lián)合用藥對(duì)感染E.tenella雞只的相對(duì)增重率的影響

感染加藥組的相對(duì)增重率均高于T0組，其中T1組雞相對(duì)增重率最高，其次是T4、T3、T2組，見(jiàn)表2。

2.3 聯(lián)合用藥對(duì)感染E.tenella雞只的平均血便率的影響

各感染加藥組的平均血便率均低于T0組，其中T1組雞平均血便率最低，見(jiàn)表2。

2.4 聯(lián)合用藥對(duì)感染E.tenella雞只的抗球蟲(chóng)效果影響

T1、T3、T4組成活率為100%；感染加藥組OPG均極顯著（P＜0.01）低于T0組；感染加藥組的病變值均低于T0組，且T1組極顯著（P＜0.01）低于T0組；感染加藥組的ACI均高于T0組，其中T1組雞ACI值最高，為181.04，達(dá)高效，見(jiàn)表2。

表2 各組藥效試驗(yàn)結(jié)果

3 討論

目前，雞球蟲(chóng)病的防治主要是通過(guò)在飼料中添加抗球蟲(chóng)藥物，但日趨嚴(yán)重的藥物濫用會(huì)導(dǎo)致耐藥性的產(chǎn)生。研究者們則利用藥物間的相互協(xié)同和彼此互補(bǔ)，通過(guò)采用幾種作用機(jī)制不同的藥物聯(lián)合使用的方式，以期發(fā)揮各自優(yōu)勢(shì)共同產(chǎn)生良好的療效。劉家男等通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合使用穿心蓮與復(fù)方磺胺間甲氧嘧啶對(duì)抗球蟲(chóng)有更好的療效。劉康雅等對(duì)聯(lián)合使用氨丙啉和妥曲珠利的抗球蟲(chóng)效果進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)二者聯(lián)合使用抗球蟲(chóng)效果更佳。

妥曲珠利可通過(guò)降低球蟲(chóng)呼吸鏈酶活性，抑制其在細(xì)胞線粒體內(nèi)的氧化磷酸化作用，進(jìn)而擾亂機(jī)體的正常代謝，最終導(dǎo)致球蟲(chóng)死亡；磺胺氯吡嗪鈉通過(guò)抑制葉酸代謝，阻礙核蛋白的合成，影響球蟲(chóng)的發(fā)育與增值；二者均為廣譜抗球蟲(chóng)藥。試驗(yàn)結(jié)果顯示，聯(lián)合使用這兩種抗球蟲(chóng)藥相較使用單一抗球蟲(chóng)藥，球蟲(chóng)卵囊的產(chǎn)量減少，雞相對(duì)增重率增加，抗球蟲(chóng)效果良好，表明聯(lián)合使用這兩種作用機(jī)制不同的抗球蟲(chóng)藥的抗球蟲(chóng)效果要優(yōu)于使用單一抗球蟲(chóng)藥。

聯(lián)合使用抗球蟲(chóng)藥和抗損傷藥，雞的相對(duì)增重率較聯(lián)合使用兩種抗球蟲(chóng)藥時(shí)更高，表明添加抗損傷藥既可抑制球蟲(chóng)生長(zhǎng)與繁殖，提高抗球蟲(chóng)能力，又可提升雞體的免疫力，促進(jìn)雞體的發(fā)育。對(duì)因感染E.tenella球蟲(chóng)引起的血便，聯(lián)合使用抗球蟲(chóng)藥和抗損傷藥的治療效果最佳；使用磺胺氯吡嗪鈉的效果僅次于聯(lián)合使用兩種抗球蟲(chóng)藥，表明抗損傷藥物對(duì)血便的的治療起了較大作用，它對(duì)提升雞體免疫力和減輕感染癥狀均起到積極作用，尤其是使用止血敏可提高血小板數(shù)量，促使凝血活性物質(zhì)的釋放，與磺胺氯吡嗪鈉共同作用能對(duì)血便起到良好的治療效果。可見(jiàn)，聯(lián)合使用抗球蟲(chóng)藥和抗損傷藥對(duì)感染E.tenella雞的相對(duì)增重率和成活率有明顯作用，抗球蟲(chóng)效果達(dá)高效，同時(shí)又對(duì)盲腸的病變和血便有良好療效，與崔怡等發(fā)現(xiàn)的聯(lián)合使用包膜丁酸鈉與癸氧喹酯對(duì)抗球蟲(chóng)有增效作用的結(jié)論一致。

4 結(jié)論

聯(lián)合應(yīng)用作用機(jī)制及特點(diǎn)不同的抗球蟲(chóng)藥物、鈣離子拮抗劑和抗氧化劑類藥物時(shí), 不但可增加存活率, 降低球蟲(chóng)對(duì)機(jī)體造成的損害，達(dá)到高效抗球蟲(chóng)療效，且優(yōu)于單一或者兩種抗球蟲(chóng)藥聯(lián)合使用，還可以增強(qiáng)對(duì)機(jī)體的抵抗力，從而促進(jìn)機(jī)體的正常生長(zhǎng)發(fā)育。