張祎 王舟 楊斌

慢性乙型肝炎(CHB)是臨床常見(jiàn)的一種內(nèi)科疾病，CHB患者常見(jiàn)肝損傷，并伴隨膽汁和膽汁酸分泌減少，從而對(duì)患者腸道微生物代謝產(chǎn)生影響[1-3]。研究發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞介素-17(IL-17)家族細(xì)胞因子也參與了CHB患者的肝細(xì)胞炎癥及纖維化進(jìn)程，但有關(guān)IL-17家族細(xì)胞因子中部分細(xì)胞因子的作用機(jī)制尚不明確[4，5]，IL-17家族細(xì)胞因子與腸道菌群關(guān)系報(bào)道較少，本研究旨在對(duì)此進(jìn)行分析，結(jié)果報(bào)告如下。

資料與方法

一、一般資料

納入2018年1月至2020年1月泰州市人民醫(yī)院CHB患者74例，設(shè)為觀察組，男39例，女35例；年齡(45.8±12.4)歲；體質(zhì)指數(shù)(BMI)(22.74±3.25)kg/m2；同期80名體檢健康者為對(duì)照組，男43名，女37名；年齡(46.1±12.1)歲；BMI (22.89±3.17)kg/m2。兩組一般資料比較均P>0.05。本研究經(jīng)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

二、納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①觀察組符合相關(guān)診斷依據(jù)[6]；②血清HBsAg陽(yáng)性半年以上；③均知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①近1周內(nèi)發(fā)生消化道出血，糞便潛血呈陽(yáng)性；②近1個(gè)月內(nèi)使用過(guò)干擾素、抗病毒、抗生素等藥物；③合并嚴(yán)重心腦血管疾病。

三、方法

依據(jù)細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒(購(gòu)自賽默飛世爾科技有限公司)提取糞便中細(xì)菌的DNA。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)糞便中腸桿菌科、糞腸球菌等9種腸道菌群含量。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)血清IL-17家族細(xì)胞因子(IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E、IL-17F)水平。分析IL-17與腸道菌群的關(guān)系。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié) 果

一、兩組患者的腸道菌群含量比較

兩組患者的乳桿菌屬、瘤胃球菌屬、白假絲酵母含量無(wú)明顯差異(P>0.05)；與對(duì)照組相比，觀察組腸桿菌科、糞腸球菌、梭菌屬、擬桿菌屬、普雷沃菌屬、雙歧桿菌屬含量較高(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組患者的腸道菌群含量比較(lg拷貝/g，±s)

二、兩組IL-17家族細(xì)胞因子水平比較

與對(duì)照組相比，觀察組IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E、IL-17F水平較高(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 兩組IL-17家族細(xì)胞因子水平比較(pg/mL，±s)

三、IL-17家族細(xì)胞因子與CHB腸道菌群的相關(guān)性分析

IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E、IL-17F與腸桿菌科、糞腸球菌、梭菌屬、擬桿菌屬、普雷沃菌屬、雙歧桿菌屬均呈正相關(guān)，與乳桿菌屬、瘤胃球菌屬、白假絲菌屬無(wú)明顯相關(guān)性。見(jiàn)表3。

表3 IL-17家族細(xì)胞因子與CHB腸道菌群的相關(guān)性分析

討 論

本研究顯示，與對(duì)照組相比，觀察組腸桿菌科、糞腸球菌等含量較高，提示CHB患者存在腸道菌群失調(diào)情況。CHB患者易出現(xiàn)肝硬化，肝功能損傷可影響患者清除體內(nèi)毒素的能力，此外，患者膽汁和膽汁酸分泌減少對(duì)腸道菌群代謝有一定影響，引起菌群紊亂[7]。本研究中，觀察組擬桿菌屬含量最高，與相關(guān)研究結(jié)果一致。鄭婷婷等[8]研究CHB及其他人群的腸道菌群變化和差異，發(fā)現(xiàn)在CHB、肝硬化、肝衰竭3組患者中，共檢出100余種菌屬，其中擬桿菌屬在各樣本中豐度最高，與本研究結(jié)果互為印證。

本研究顯示，與對(duì)照組相比，觀察組IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E、IL-17F水平較高，提示IL-17A～E參與了CHB患者的發(fā)病過(guò)程。IL-17是一種早期促炎因子，具有激活T細(xì)胞的作用，可上調(diào)多種促炎因子的表達(dá)，不僅能夠介導(dǎo)炎性細(xì)胞的局部浸潤(rùn)，而且可在中性粒細(xì)胞的增殖和趨化過(guò)程中發(fā)揮作用，增加組織細(xì)胞的通透性，逐漸導(dǎo)致肝組織損傷[9]。研究顯示，隨著CHB患者炎癥程度的加重，外周血IL-17水平隨之升高，且肝功能水平越差，IL-17水平越高[10]。趙霞等[11]通過(guò)研究CHB患者外周血IL-17在CHB病情進(jìn)展中的機(jī)制和作用，發(fā)現(xiàn)與正常健康人相比，乙肝肝硬化患者血清IL-17水平，輔助性T細(xì)胞-17(Th-17)細(xì)胞數(shù)增高，可能是因?yàn)镠BV在肝細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制促進(jìn)了IL-17陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)上升。

本研究顯示，IL-17家族細(xì)胞因子與腸桿菌科、糞腸球菌、梭菌屬、擬桿菌屬、普雷沃菌屬、雙歧桿菌呈正相關(guān)?？赡苁荂HB患者體內(nèi)菌群迅速繁殖，導(dǎo)致大量多形核白細(xì)胞趨化因子產(chǎn)生，肝臟炎癥反應(yīng)加重，使得白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)等細(xì)胞因子大量釋放，Th-17被激活，分泌并活化IL-17家族細(xì)胞因子，導(dǎo)致腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-6(IL-6)等促炎因子水平上升，加重了肝臟的炎癥反應(yīng)。

綜上，IL-17家族細(xì)胞因子與腸桿菌科、糞腸球菌、梭菌屬、擬桿菌屬、普雷沃菌屬、雙歧桿菌呈正相關(guān)。