陸奉科，韋海春

柳州市婦幼保健院(廣西科技大學(xué)附屬婦產(chǎn)醫(yī)院、兒童醫(yī)院)輸血科，廣西 柳州 545001

血型系統(tǒng)由人類遺傳因素決定[1]，截止到2021 年2 月，國際輸血協(xié)會(ISBT)已經(jīng)確認(rèn)了43 個紅細(xì)胞血型系統(tǒng)。而臨床工作中，ABO血型系統(tǒng)和Rh(D)血型系統(tǒng)最為重要，與輸血診療工作密切相關(guān)，所以研究ABO 和Rh(D)血型具有極其重要的臨床意義。現(xiàn)有的研究表明，ABO血型和Rh(D)血型分布可受種族和地域分布差異的影響[2-3]，因此，有必要對不同區(qū)域的血型分布規(guī)律特征進(jìn)行調(diào)查研究，以便更好地開展備血工作。然而，目前尚未有針對柳州地區(qū)的ABO 及Rh(D)血型分布規(guī)律的相關(guān)報道。本研究回顧分析在本院2019—2021 年就診的64 323 例患者的臨床資料及其ABO及Rh(D)血型結(jié)果，旨在初步調(diào)查和掌握本地區(qū)不同民族人群ABO血型的分布規(guī)律。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2019年7月1日至2021年7月1日在柳州市婦幼保健院就診且符合以下納入和排除標(biāo)準(zhǔn)的64 323例具有ABO血型信息的患者，收集其ABO血型定型結(jié)果及臨床資料。其中，侗族1 607 例，苗族1 824例，瑤族1 422例，壯族23 123例，漢族36 347例。納入標(biāo)準(zhǔn)：具有ABO 及Rh (D)血型信息者；年齡不限。排除標(biāo)準(zhǔn)：①血型結(jié)果正反不符的患者；②只有ABO 血型結(jié)果而沒有Rh(D)結(jié)果的體檢患者。本研究經(jīng)柳州市婦幼保健院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 試劑與儀器 微柱凝膠檢測卡(長春博德血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)；抗D 血型定型試劑、ABO反定型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞(上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)；KA-2200 免疫血液學(xué)專用離心機(jī)(日本久保田)；長春博研TD-3A離心機(jī)；貝索醫(yī)用離心機(jī)；瑞士Hamilton Bonaduz AG全自動血型儀(瑞士曼哈頓)，所有試劑均在有效期內(nèi)使用。

1.3 檢測方法與質(zhì)量控制 所有患者分別抽取2 mL靜脈血并用EDTA-K2抗凝。血型檢測均采用瑞士Hamilton Bonaduz AG全自動血型儀進(jìn)行ABO血型正反型鑒定和Rh(D)血型鑒定。質(zhì)控品與受血者標(biāo)本同時檢測，質(zhì)控品檢測結(jié)果在控后方可發(fā)出受血者檢測報告。D 抗原陰性者采用上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司的Rh(D)(IgM)血型定型試劑(單克隆抗體)試劑進(jìn)行復(fù)查確認(rèn)[4]。所有操作均嚴(yán)格參照相關(guān)SOP進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 ABO、Rh(D)血型基因頻率及Hardy-Weinberg 吻合度檢驗均采用直接計算法，表型分布的預(yù)期值與觀察值以及Hardy-Weinberg 吻合度檢測均參照文獻(xiàn)[5-7]的計算方法進(jìn)行。所得資料按Bernstein 校正公式計算基因頻率，設(shè) A、B、O 基因頻率分別為 p、q、r，A、B、O為表現(xiàn)型頻率，即：

O、A、B、AB血型的期望值頻率分別依照O=r2、A=p2+2pr、B=q2+2qr、AB=2pq公式求得。Hardy-Weinberg吻合度測驗：χ2=Σ(期望值－觀察值)2/期望值，得到的χ2值查找相對應(yīng)P值。Rh(D)(陰性)抗原基因頻率分布情況用直接計算法；Rh 血型D 基因頻率：。各民族間ABO 血型分布差異比較使用SPSS25.0 軟件進(jìn)行行×列表資料的χ2檢驗，以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同民族人群中ABO 血型的分布及基因頻率比較 經(jīng)Hardy-Weinberg 吻合度檢驗結(jié)果顯示，5 個民族的ABO 血型分布規(guī)律為O>B>A>AB，基因頻率r>q>p，其中r的基因頻率較高；對5個民族的ABO 血型觀察值和期望值經(jīng)吻合度檢驗，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，符合Hardy-Weinberg 平衡定律，見表1。

表1 不同民族人群中ABO血型的分布及基因頻率

2.2 各民族ABO 血型分布頻率比較 對5 個民族ABO血型分布頻率之間行χ2檢驗兩兩比較，結(jié)果顯示，漢族與其他4 個民族分別比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；而其他民族間兩兩比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2 漢族與其他4個民族ABO血型分布頻率間比較(例)

2.3 5 個民族Rh (D)陰性抗原基因頻率分布比較 侗族Rh (D)陰性抗原基因頻率為0.06%，D 基因頻率為0.024 9；漢族Rh (D)陰性抗原基因頻率為0.22%，D基因頻率為0.046 9；苗族Rh(D)陰性抗原基因頻率為0.49%，D基因頻率為0.070 2；瑤族Rh(D)陰性抗原基因頻率為0.14%，D基因頻率為0.037 5；壯族Rh (D)陰性抗原基因頻率為0.16%，D 基因頻率為0.040 4，見表3。

表3 Rh血型在不同民族中的分布及基因頻率

3 討論

據(jù)研究表明，我國的ABO血型分布可以粗略劃分為南北兩大類，分別以B基因頻率較高和O 基因頻率較高為特征[8]。本次調(diào)查結(jié)果顯示柳州地區(qū)人群侗、漢、苗、瑤、壯族ABO 血型基因頻率特征為O>B>A>AB，基因頻率r>q>p，且r 均大于0.6，符合南方人群有較高的O基因頻率的特點[5]。而柳州地區(qū)少數(shù)民族的ABO 血型基因頻率分布特點也與國內(nèi)其他學(xué)者對這些少數(shù)民族的研究結(jié)果相一致[3，9]。比如，侗族的血型基因分布頻率與鐘江[10]對貴州省侗族的調(diào)查研究結(jié)果相符；苗族的血型基因分布頻率與姚玉仙等[11]對貴州省苗族的研究結(jié)果相一致；壯族的血型基因分布頻率也與莫秋紅等[12]針對廣西南寧地區(qū)壯族的研究結(jié)果相符。而在不同民族間ABO血型的分布頻率中，漢族與侗、苗瑤、壯族比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，與黎海瀾等[3]的研究結(jié)果相一致。而侗族與苗族、瑤族、壯族差異無統(tǒng)計學(xué)意義；而苗族與瑤族、壯族差異無統(tǒng)計學(xué)意義；而瑤族與壯族差異也無統(tǒng)計學(xué)意義，顯示出了漢族的血型分布與少數(shù)民族分布有可能存在一定差異。綜上所述，研究結(jié)果初步顯示了柳州地區(qū)ABO血型基因頻率的分布規(guī)律。

而針對Rh(D)血型，現(xiàn)有的研究表明，白人的Rh(D)陰性率約占15%，黑人Rh(D)陰性率為4%，蒙古人種中 Rh(D)陰性率不到 1%[5，13]。而漢族 Rh 陰性約占0.2%~0.5%，南方少數(shù)民族的Rh陰性占的比例更低[5]。本研究結(jié)果顯示，Rh (D)陰性的表現(xiàn)頻率均小于0.5%，與我國其他地區(qū)學(xué)者針對少數(shù)民族Rh(D)陰性的研究結(jié)果相符。

本研究結(jié)果僅針對此次納入的研究對象，未來有待多中心擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步深入研究及驗證。盡管如此，本研究結(jié)果還是初步顯示了本地區(qū)ABO 及Rh(D)血型的分布規(guī)律，O基因頻率較高而A基因頻率較低；漢族與少數(shù)民族之間ABO血型分布可能存在一定差異；本地區(qū)少數(shù)民族的Rh(D)陰性頻率較低，符合南方地區(qū)少數(shù)民族血型分布特征。研究結(jié)果可以給本地區(qū)群體遺傳學(xué)的大數(shù)據(jù)提供較有意義的信息，也為本地區(qū)血液中心和醫(yī)療機(jī)構(gòu)合理的采供血和儲血備血工作提供一定參考依據(jù)。