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        抗核抗體滴度及p53抗體對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值

        2022-08-02 01:19:52陳世豪林耀威湯翠霞
        海南醫(yī)學(xué) 2022年14期
        關(guān)鍵詞:肝癌血清檢測(cè)

        陳世豪,林耀威,湯翠霞

        江門(mén)市新會(huì)區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東 江門(mén) 529100

        原發(fā)性肝癌(primary hepatic carcinoma,PHC)是臨床上常見(jiàn)的一類惡性腫瘤,其發(fā)病機(jī)制目前尚未明確[1-2],早期診斷對(duì)于PHC 的臨床治療及預(yù)后具有重要意義。然而,單一的影像學(xué)手段和血清學(xué)指標(biāo)在早期診斷PHC上的價(jià)值有限,目前對(duì)于多采用聯(lián)合診斷的方式進(jìn)行早期診斷[3]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),在慢性肝病向肝癌發(fā)展的過(guò)程中通常伴隨著兩類自身抗體的產(chǎn)生,一類是抗細(xì)胞核和(或)細(xì)胞漿成分的自身抗體[4],另一類是腫瘤相關(guān)抗原(tumor-associated antigen,TAA)的抗體。檢測(cè)原發(fā)性肝癌患者血清中的腫瘤自身抗體能夠?yàn)楦伟┑脑缙谠\斷和預(yù)后評(píng)估提供可靠信息[5]。本研究采集PHC、自身免疫性肝炎(AIH)患者和健康志愿者的血液樣本,檢測(cè)其抗核抗體(ANA)、腫瘤抑癌基因p53 抗體等指標(biāo),以探討上述指標(biāo)在診斷PHC上的臨床價(jià)值,現(xiàn)報(bào)道如下:

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選擇2020 年2 月至2021 年6 月江門(mén)市新會(huì)區(qū)人民醫(yī)院收治的50 例PHC 患者作為PHC 組,選擇同期50 例自身免疫性肝炎(AIH)患者作為AIH 組。納入標(biāo)準(zhǔn):①所有患者均經(jīng)病理學(xué)明確診斷,PHC 組患者符合《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2011年版)》[6]的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn),AIH組患者符合《自身免疫性肝炎診斷和治療共識(shí)(2015)》[7]中的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn);②能積極配合完成相關(guān)檢查,檢查結(jié)果資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn):①既往有放、化療治療史者;②合并嚴(yán)重意識(shí)障礙、精神疾病者;③合并嚴(yán)重糖尿病、甲亢、心腦血管疾病者。PHC組中男性34例,女性16例;年齡33~76 歲,平均(57.29±6.47)歲;單發(fā) 32 例,雙發(fā) 18 例;腫瘤最大直徑<5 cm 34 例,腫瘤直徑≥5 cm 16 例;臨床分期:Ⅰ期 9 例,Ⅱ期 17 例,Ⅲ期 14 例,Ⅳ期 10 例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移33 例,無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移17 例。AIH 組中男性 37 例,女性 13 例;年齡 31~78 歲,平均(58.11±6.53)歲。另選擇同期50例健康體檢者作為對(duì)照組,其中男性 36 例,女性 14 例;年齡 29~76 歲,平均(57.46±6.78)歲。三組受檢者的性別和年齡比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn),所有受檢者均知情并簽署知情同意書(shū)。

        1.2 檢測(cè)方法 三者受檢者均采集5 mL血液樣本(手術(shù)患者于術(shù)前1周采集,非手術(shù)患者和體檢者于入院后1周內(nèi)采集),以3 000 r/min的速度離心10 min,取上清液保存至-80℃的環(huán)境中待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA)檢測(cè)血清樣本中的p53 抗體和ANA抗體表達(dá),采用免疫印跡法檢測(cè)ANA核型,試劑盒購(gòu)自德國(guó)羅氏公司。所有指標(biāo)測(cè)定均采用羅氏Cobas e602 全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進(jìn)行,試劑盒分別為人p53 抗體ELISA Kit(貨號(hào):CSB-E13816h)和人抗核抗體(ANA) ELISA Kit (貨號(hào):CSB-E09075h),所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒上說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

        1.3 觀察指標(biāo) (1)比較三組受檢者的ANA、p53抗體表達(dá)情況。(2)比較PHC組和AIH組患者的ANA核型。(3)分析血清ANA、p53 抗體與PHC 診斷的關(guān)系。(4)比較血清ANA、p53抗體及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)PHC的診斷效能。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料符合正態(tài)分布,以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,兩組間比較采用t檢驗(yàn),多組間比較采用單因素方差分析;計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn);采用二元Logistic回歸分析法分析各指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果與PHC診斷的相關(guān)性;采用多因素Logistic 回歸模型,擬合多個(gè)變量形成新的聯(lián)合預(yù)測(cè)因子,繪制各單一指標(biāo)和聯(lián)合預(yù)測(cè)因子的受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve,ROC),比較聯(lián)合預(yù)測(cè)因子與各單一指標(biāo)的ROC 曲線面積(AUC)、敏感度、特異度和準(zhǔn)確度。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 三組受檢者的ANA、p53 抗體表達(dá)水平比較 PHC組患者的ANA陽(yáng)性率、p53抗體水平明顯高于AIH組,PHC組、AIH組患者的ANA陽(yáng)性率、p53 抗體水平明顯高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。

        2.2 PHC組和AIH組患者的ANA核型比較 PHC組患者的中斑點(diǎn)型、核仁型、著絲點(diǎn)型和胞漿型的比例明顯高于AIH組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表2。

        表2 PHC組和AIH組患者的ANA核型比較[例(%)]

        2.3 血清ANA、p53抗體與PHC診斷的關(guān)系 經(jīng)Logistic 回歸分析結(jié)果顯示,ANA、p53 抗體均與PHC的診斷密切相關(guān)(P<0.05),見(jiàn)表3。

        表3 血清ANA、p53抗體與PHC診斷關(guān)系的Logistic回歸分析

        2.4 血清ANA、p53抗體及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)PHC的診斷效能比較 ANA、p53 抗體及聯(lián)合檢測(cè)在診斷PHC上的 AUC 分別為 0.730、0.729 和 0.805,聯(lián)合檢測(cè)的敏感度、特異度、準(zhǔn)確度分別為86.00%、92.00%、89.00%,均明顯高于ANA、p53抗體單項(xiàng)檢測(cè),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表4和圖1。

        表4 血清ANA、p53抗體及聯(lián)合檢測(cè)對(duì)PHC的診斷效能比較

        圖1 血清ANA、p53抗體聯(lián)合檢測(cè)在診斷PHC上的ROC曲線

        3 討論

        早期診斷并積極開(kāi)展治療是提高PHC 患者生存率、改善預(yù)后的關(guān)鍵。目前,PHC 的臨床診斷主要依靠影像學(xué)檢查、肝組織活檢、血清學(xué)標(biāo)志物等手段進(jìn)行[8]。然而,多普勒超聲、CT、MRI 等影像學(xué)手段難以發(fā)現(xiàn)諸如小肝癌等體積較小的腫瘤病灶。肝組織活檢結(jié)果準(zhǔn)確可靠,但該檢查屬于有創(chuàng)檢查,取樣受限較多,患者通常不易接受。與上述檢查手段相比,血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)具有無(wú)創(chuàng)、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)勢(shì),另外,血清學(xué)標(biāo)志物在影像學(xué)手段察覺(jué)異常前就已出現(xiàn)異常表達(dá),對(duì)于腫瘤的早期檢測(cè)和預(yù)警具有積極意義[9-10]。

        PHC 發(fā)生時(shí),機(jī)體通常會(huì)產(chǎn)生兩種抗體,抗細(xì)胞核和(或)細(xì)胞漿成分的自身抗體與腫瘤相關(guān)抗原的抗體。ANA 能夠?qū)⒆陨碚婧思?xì)胞的各種成分作為靶抗原的自身抗體,可有效識(shí)別各種細(xì)胞核組織[11]。p53是目前研究較為透徹的抑癌基因之一,其定位于染色體17p13.1,具有監(jiān)視基因組完整性、控制調(diào)節(jié)細(xì)胞分化、凋亡、衰老等多個(gè)細(xì)胞功能[12]。相關(guān)研究表明,ANA、p53 抗體在PHC 患者的血清中存在高表達(dá),且與腫瘤大小、分期、Child-Pugh積分、AFP含量呈正相關(guān)[13]。

        本研究對(duì)PHC 患者、AIH 患者和健康體檢者的ANA陽(yáng)性率、p53 抗體進(jìn)行比較,結(jié)果顯示,PHC患者的ANA 陽(yáng)性率、p53 抗體水平均明顯高于AIH 患者,PHC 患者、AIH 患者的 ANA 陽(yáng)性率、p53 抗體均明顯高于健康體檢者。Logistic 回歸分析結(jié)果顯示,ANA、p53抗體均是影響PHC診斷的獨(dú)立因素。陳子若等[14]的研究結(jié)果表明,PHC 患者的p53 抗體水平、p53陽(yáng)性表達(dá)率和AFP 水平均明顯高于肝臟良性病變者。曹成紅等[15]的研究結(jié)果表明,病毒性肝炎患者的血清AFP、ANA水平明顯高于AIH患者。本研究結(jié)果與上述兩者的研究結(jié)果基本吻合,ANA、p53抗體在鑒別診斷PHC 上具有一定價(jià)值。分析原因,AIH 發(fā)生后,肝細(xì)胞抗原的持續(xù)性作用引起過(guò)度炎癥反應(yīng)和局部肝細(xì)胞壞死,誘發(fā)AFP 促使機(jī)體免疫調(diào)節(jié)功能發(fā)揮作用,增強(qiáng)肝細(xì)胞的自我修復(fù)能力,與此同時(shí),患者通常伴有不同程度的肝功能損傷,引發(fā)自身免疫功能失衡。從AIH發(fā)展到PHC,可進(jìn)一步加重自身免疫功能失衡[16],ANA、p53 抗體等自身抗體水平出現(xiàn)異常升高,而患者的ANA 核型也更多地表現(xiàn)為斑點(diǎn)型、核仁型、著絲點(diǎn)型和胞漿型。

        ROC曲線結(jié)果顯示,ANA、p53抗體在診斷PHC上的AUC分別為0.730、0.729,均>0.6,提示上述指標(biāo)在診斷PHC上具有較好的臨床價(jià)值。上述指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的AUC為0.805,敏感度、特異度和準(zhǔn)確度分別為86.00%、92.00%、89.00%,均明顯高于ANA、p53 抗體單項(xiàng)檢測(cè),說(shuō)明聯(lián)合檢測(cè)能夠顯著提高PHC診斷的準(zhǔn)確率。

        綜上所述,ANA、p53 抗體在診斷PHC 上各具優(yōu)勢(shì),兩者聯(lián)合檢測(cè)能夠有助于進(jìn)一步提升PHC的診斷效能,對(duì)于PHC 患者的早期診斷、個(gè)性化治療策略的制定以及預(yù)后評(píng)估提供重要依據(jù)。

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