董國(guó)興，陽(yáng)愛(ài)國(guó)，陳 烺，郝力力，袁東波*

（1.四川省南充市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 南充 637000；2.四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 成都 610041；3.西南民族大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，四川 成都 610041）

棘球蚴病俗稱包蟲(chóng)病，由棘球絳蟲(chóng)幼蟲(chóng)所引起的一類(lèi)人畜共患寄生蟲(chóng)病，屬于我國(guó)二類(lèi)動(dòng)物疫病。本病主要以犬、狐及狼為傳染源和終末宿主，人、牛羊等家畜以及鼠等嚙齒類(lèi)動(dòng)物為中間宿主［1］。包蟲(chóng)病對(duì)我國(guó)畜牧業(yè)造成重大經(jīng)濟(jì)損失，并嚴(yán)重危害人的健康，是我國(guó)西部牧區(qū)因病返貧的主要因素之一［2］。本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)犬糞樣品進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)川西地區(qū)阿壩州、甘孜州、涼山州以及雅安市部分包蟲(chóng)病流行地區(qū)的感染情況進(jìn)行分析，給四川省包蟲(chóng)病防控提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 樣本采集和處理 共采集犬糞樣本3 200份。采集地點(diǎn)包括阿壩藏族羌族自治州的馬爾康市、阿壩縣、松潘縣、壤塘縣、理縣、九寨溝縣，甘孜藏族自治州的石渠縣、雅江縣、鄉(xiāng)城縣、德格縣、理塘縣、甘孜縣，涼山彝族自治州的木里縣、越西縣，雅安市的寶興縣和天全縣。每個(gè)市（縣）各200份。

取犬糞樣1 g，放入盛有1 mL 樣品稀釋液（試劑盒）的1.5 mL離心管中，充分振蕩混勻糞樣，在3 000 r∕min條件下離心10 min，取上清液備用。

1.2 儀器設(shè)備和試劑

1.2.1 儀器設(shè)備 離心機(jī)；最終測(cè)定儀器為萊恩德LD-96A酶標(biāo)儀。

1.2.2 試劑 棘球絳蟲(chóng)糞抗原夾心ELISA 檢測(cè)試劑盒。

1.3 檢測(cè)方法和結(jié)果判定

1.3.1 檢測(cè)方法（1）按照棘球絳蟲(chóng)糞抗原夾心ELISA 檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行樣本處理，記錄樣本順序，取出包被板。

（2）按順序加入已處理樣品100 μL。陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照各1孔，臨界對(duì)照3孔。于37 ℃放置60 min。

（3）洗板機(jī)洗板6次，洗板結(jié)束將微孔板倒置在吸水紙上拍干。

（4）每孔加酶標(biāo)記物50 μL，于37 ℃放置30 min。洗板。

（5）每孔加顯色液A、B 各50 μL，振蕩混勻，置37 ℃避光30 min。

（6）每孔加入終止液50 μL，混勻后用酶標(biāo)儀讀數(shù)，450 nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值。

1.3.2 結(jié)果判定 根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)判定結(jié)果，陽(yáng)性：樣品OD 值比臨界對(duì)照OD 值平均值≥1.0；陰性：樣品OD 值比臨界對(duì)照OD 值平均值＜1.0。

2 結(jié)果與分析

2.1 各縣陽(yáng)性率情況 阿壩州阿壩縣陽(yáng)性率為1.0%；甘孜州德格縣陽(yáng)性率為5.5%，鄉(xiāng)城縣陽(yáng)性率為4.5%；涼山州木里縣陽(yáng)性率為5.0%；雅安市天全縣陽(yáng)性率為0.5%，其余市（縣）均未檢測(cè)出陽(yáng)性樣本。具體結(jié)果如表1所示。

表1 各縣陽(yáng)性率情況

2.2 分析 本次檢測(cè)阿壩州涉及1個(gè)市、5個(gè)縣，共采集犬糞樣品1 200份，總陽(yáng)性率為0.2%；甘孜州涉及6 個(gè)縣，共采集犬糞樣品1 200 份，總陽(yáng)性率為1.7%；涼山州涉及2 個(gè)縣，共采集犬糞樣品400 份，總陽(yáng)性率為2.5%；雅安市涉及2 個(gè)縣，共采集犬糞樣品400份，總陽(yáng)性率為0.3%。2021年四川省包蟲(chóng)病部分流行地區(qū)的總陽(yáng)性率為1.0%，如表2所示。

表2 各地陽(yáng)性率情況

本次調(diào)查結(jié)果與2012年及2018年四川省犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)的平均陽(yáng)性率相比（圖1）［3］，其感染率大幅度降低，如阿壩州的馬爾康市、甘孜州的石渠縣、涼山州的越西縣以及雅安市的天全縣均未檢測(cè)出陽(yáng)性樣本。

圖1 四川省近年犬細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染情況對(duì)比

3 討論

本次共檢測(cè)犬糞樣本共3 200 份，陽(yáng)性率約為1.0%。與四川省2012年及2018年流調(diào)的平均陽(yáng)性率32.3%、8.1%相比，2021 年陽(yáng)性率明顯降低。其中，阿壩州的馬爾康市、松潘縣、壤塘縣、理縣、九寨溝縣，甘孜州的石渠縣、雅江縣、理塘縣、甘孜縣，涼山州的越西縣以及雅安市的寶興縣感染率大幅度降低。分析原因如下：（1）各地建立了相應(yīng)的犬只管理系統(tǒng)，對(duì)各家各戶的犬進(jìn)行登記，且大力提倡家犬拴養(yǎng)；（2）限制了牧區(qū)居民養(yǎng)殖犬的數(shù)量，及時(shí)對(duì)流浪犬撲殺；（3）本著“犬犬投藥，月月驅(qū)蟲(chóng)”的防控原則，定期用吡喹酮對(duì)家犬進(jìn)行藥物驅(qū)蟲(chóng)；（4）對(duì)羊群進(jìn)行免疫接種，機(jī)體具有了一定的保護(hù)力［4］。（5）集中屠宰牛羊，及時(shí)對(duì)動(dòng)物臟器進(jìn)行無(wú)害化處理，很大程度上避免了犬誤食患病動(dòng)物臟器，從而降低感染本病的風(fēng)險(xiǎn)。作為包蟲(chóng)病重度流行的甘孜州石渠縣，在本次調(diào)查中未檢測(cè)出陽(yáng)性樣本，但是涼山州木里縣作為包蟲(chóng)病輕度流行區(qū)域，本次檢測(cè)陽(yáng)性率為5.0%，提示當(dāng)?shù)貞?yīng)引起重視。

此外，在包蟲(chóng)病防控工作中依舊存在幾點(diǎn)問(wèn)題：（1）驅(qū)蟲(chóng)工作存在不足。使用藥物吡喹酮對(duì)家犬進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)時(shí)，由于藥物適口性差，增加了藥物驅(qū)蟲(chóng)的難度，犬在不食或攝入藥量不足情況下都會(huì)直接影響驅(qū)蟲(chóng)效果。經(jīng)藥物驅(qū)蟲(chóng)后，由于當(dāng)?shù)啬撩窬幼》稚?，糞便無(wú)法做到集中定點(diǎn)無(wú)害化處理，糞便中的蟲(chóng)卵仍存在感染隱患。（2）屠宰工作存在不足。部分地區(qū)無(wú)法做到集中屠宰，存在牧民自行屠宰的現(xiàn)象，屠宰后的動(dòng)物臟器也未能及時(shí)集中銷(xiāo)毀。因此，當(dāng)?shù)卣嚓P(guān)部門(mén)應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)宣傳，讓廣大居民了解包蟲(chóng)病的生活史、傳播途徑等相關(guān)知識(shí)，同時(shí)做好犬的驅(qū)蟲(chóng)工作，避免糞便中的蟲(chóng)卵污染環(huán)境；加強(qiáng)屠宰檢疫工作和培訓(xùn)工作，做到集中屠宰和集中處理動(dòng)物臟器，并對(duì)屠宰場(chǎng)進(jìn)行動(dòng)物疫病防控知識(shí)及技能的培訓(xùn)。

4 結(jié)論

四川省部分包蟲(chóng)病流行地區(qū)的犬不僅存在細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)感染，還存在多房棘球絳蟲(chóng)以及混合感染［5］。然而，本次檢測(cè)所用試劑盒只能檢測(cè)到細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)，無(wú)法檢測(cè)到多房棘球絳蟲(chóng)。因此，后期可采用熒光PCR方法對(duì)犬糞樣本進(jìn)行細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)和多房棘球絳蟲(chóng)檢測(cè)，從而提供更為完整的數(shù)據(jù)參考?！?/p>