李沛檑,劉垠澤,劉 霜,吳恒梅
(佳木斯大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院,黑龍江 佳木斯 154007)
薰衣草(Lavandula angustifoliaMill.)為唇形科薰衣草屬植物[1],多年生草本或半灌木天然香料[2],原產(chǎn)于歐洲南部地中海海岸及阿爾卑斯山南麓國(guó)家或地區(qū),現(xiàn)主要產(chǎn)于法國(guó)、英國(guó)、中國(guó)等地,其葉形花色美麗優(yōu)雅,常青綠且?guī)в歇?dú)特芳香氣味,多為紫色、藍(lán)色、粉紅色等。通過(guò)大量種植薰衣草,可以營(yíng)造身心愉悅的空間,因此薰衣草在園林綠化方面有很大開(kāi)發(fā)潛力[3]。
萬(wàn)壽菊(Tagetes erectaL.)為菊科萬(wàn)壽菊屬,一年生雙子葉草本植物,原產(chǎn)于墨西哥,在中國(guó)各地區(qū)均有分布,大部分生長(zhǎng)于路邊野地,隨處可見(jiàn),花較大,花期較長(zhǎng),在布景點(diǎn)綴時(shí)常用中、矮品種,而植株較高的品種常常被用作背景材料,具有一定的觀賞價(jià)值[4]。波斯菊(Cosmos bipinnatusL.)為菊科秋英屬,一年生或多年生草本植物[5],在園林、公園和布置景觀時(shí)常被采用。近年來(lái),隨著人們對(duì)環(huán)境美化的要求不斷提高,園林景觀的設(shè)計(jì)已經(jīng)日趨重要,因此研究不同花卉之間的混播很有必要。以薰衣草、萬(wàn)壽菊和波斯菊三種具有觀賞價(jià)值的植物為試驗(yàn)材料,比較不同濃度薰衣草浸提液對(duì)萬(wàn)壽菊、波斯菊種子的生長(zhǎng)指標(biāo)及生理指標(biāo)影響,以期找出不同濃度的薰衣草浸提液對(duì)萬(wàn)壽菊和波斯菊各項(xiàng)指標(biāo)影響的變化規(guī)律[6-8],旨在為種植花卉混播植物選擇提供參考依據(jù)。
薰衣草新鮮枝條由佳木斯大學(xué)科學(xué)園提供,波斯菊種子和萬(wàn)壽菊種子均購(gòu)于佳木斯市花鳥(niǎo)魚(yú)市場(chǎng),純度≥95.00%。
1.2.1 浸提液的配置
將新鮮的薰衣草莖葉部分切成約1 cm 小段,放入烘干機(jī),55℃條件下烘干2 h,冷卻至室溫,剪碎并研至粉末。用電子天平稱取薰衣草粉末10 g,按10 g:100 mL 比例向燒杯中加入蒸餾水500 mL(28℃),用保鮮膜封口,靜置24 h 后,用雙層紗布過(guò)濾,再用濾紙進(jìn)一步過(guò)濾至澄清液體。后將配置好的母液按1:10(0.1 g·mL-1)、1:20(0.05 g·mL-1)、1:40(0.025 g·mL-1)、1:80(0.012 5 g·mL-1)的比例用蒸餾水稀釋母液,放入冰箱4℃保存?zhèn)溆茫?]。
1.2.2 種子發(fā)芽試驗(yàn)
挑選種皮大小完整的萬(wàn)壽菊和波斯菊種子,用濃度0.2%的高錳酸鉀溶液消毒,再用蒸餾水洗凈;分別用濃度為0.1 g·mL-1、0.05 g·mL-1、0.025 g·mL-1、0.012 5 g·mL-1的薰衣草浸提液培養(yǎng),以等量的蒸餾水作為對(duì)照(CK)。
本試驗(yàn)采用水培法對(duì)種子進(jìn)行培養(yǎng),取直徑為9 cm 的培養(yǎng)皿,底部放置兩層濾紙,每個(gè)培養(yǎng)皿均勻擺放100 粒種子,加入1~2 mL 不同濃度的浸提液至濾紙完全濕潤(rùn)且沒(méi)有多余流動(dòng)液體在培養(yǎng)皿內(nèi),上面蓋兩層紗布,將紗布浸濕,蓋上蓋子,每處理3次重復(fù)。放在25℃室溫下培養(yǎng),定期補(bǔ)液,以保持種子萌發(fā)必需的水分。
發(fā)芽期間每24 h 統(tǒng)計(jì)一次,第3 d 測(cè)發(fā)芽勢(shì);第7 d 統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率。計(jì)算公式如下[10]:發(fā)芽率=(7 d 發(fā)芽種子數(shù)/供試種子數(shù))×100%;發(fā)芽勢(shì)=(3 d 正常發(fā)芽的種子數(shù)/供試種子總數(shù))×100%;第10 d 每個(gè)皿隨機(jī)取10 株用游標(biāo)卡尺測(cè)量根長(zhǎng)、芽長(zhǎng);用電導(dǎo)率儀測(cè)定溶液的相對(duì)電導(dǎo)率;用硫代巴比妥酸顯色法測(cè)定種子MDA含量[11]。
采用Excel 2010 錄入和整理數(shù)據(jù)并繪圖,采用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)軟件的Duncan 測(cè)驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,數(shù)值以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
2.1.1 薰衣草浸提液對(duì)萬(wàn)壽菊和波斯菊發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)的影響
由表1 可知,在0~0.1 g·mL-1薰衣草浸提液處理范圍內(nèi),隨浸提液濃度的升高,萬(wàn)壽菊和波斯菊的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)均呈下降趨勢(shì)。在0.012 5~0.05 g·mL-1時(shí),萬(wàn)壽菊和波斯菊的發(fā)芽率均與CK相比差異不顯著(P>0.05),但在0.1 g·mL-1時(shí)萬(wàn)壽菊和波斯菊的發(fā)芽率與CK 相比差異顯著(P<0.05),分別比CK降低了25%、19.33%,抑制程度最大。在0.012 5~0.1 g·mL-1時(shí),萬(wàn)壽菊的發(fā)芽勢(shì)均與CK 相比差異顯著(P<0.05),其中在0.1 g·mL-1時(shí),萬(wàn)壽菊的發(fā)芽勢(shì)比CK 降低了18.75%,影響最大。波斯菊的發(fā)芽勢(shì)在0.012 5~0.025 g·mL-1時(shí)與CK 差異不顯著(P>0.05),而在0.05~0.1 g·mL-1時(shí),波斯菊的發(fā)芽勢(shì)與CK 相比差異顯著(P<0.05),且在0.1 g·mL-1時(shí),波斯菊的發(fā)芽勢(shì)與CK 相比降低了58.66%,抑制程度顯著。這表明高濃度的薰衣草浸提液嚴(yán)重影響了萬(wàn)壽菊和波斯菊種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)。
表1 不同濃度浸提液對(duì)萬(wàn)壽菊和波斯菊種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)的影響Tab.1 Effects of different concentrations of thyme extract on germination rate and germination potential of seeds of T. erecta and C. bipinnatus
2.1.2 薰衣草浸提液對(duì)萬(wàn)壽菊和波斯菊種子生長(zhǎng)指標(biāo)的影響
表2結(jié)果表明,隨薰衣草浸提液濃度的升高,兩種幼苗的根長(zhǎng)和芽長(zhǎng)先增加后減少。在0.012 5~0.025 g·mL-1浸提液處理范圍內(nèi),萬(wàn)壽菊的根長(zhǎng)、芽長(zhǎng)與CK 相比差異不顯著(P>0.05),根長(zhǎng)分別比CK增長(zhǎng)了0.53 cm、0.48 cm,芽長(zhǎng)分別比CK 增加了1.55 cm、1.02 cm;在0.05~0.1 g·mL-1處理范圍內(nèi),萬(wàn)壽菊的根長(zhǎng)和芽長(zhǎng)與CK 相比差異顯著(P<0.05)且均小于CK。在0~0.1 g·mL-1處理范圍內(nèi),波斯菊的根長(zhǎng)在0.012 5 g·mL-1時(shí)與CK 相比差異顯著(P<0.05)且差異最大,說(shuō)明0.012 5 g·mL-1的濃度更適合其生長(zhǎng)。在0.012 5~0.025 g·mL-1處理的波斯菊芽長(zhǎng)與CK 相比分別增長(zhǎng)了1.31 cm、0.49 cm,且與CK相比差異顯著(P<0.05),當(dāng)薰衣草浸提液濃度達(dá)到0.1 g·mL-1時(shí),芽長(zhǎng)與CK 相比差異顯著(P<0.05),比CK 減少了0.93 cm。這表明,薰衣草浸提液對(duì)兩種幼苗的根長(zhǎng)、芽長(zhǎng)影響為低濃度促進(jìn)高濃度抑制。
表2 不同濃度浸提液對(duì)萬(wàn)壽菊和波斯菊根長(zhǎng)和芽長(zhǎng)的影響Tab.2 Effects of different concentration of thyme extract on root length and bud length of T. erecta and C. bipinnatus seeds
2.2.1 薰衣草浸提液對(duì)萬(wàn)壽菊和波斯菊種子萌發(fā)電導(dǎo)率的影響
如圖1 所示,在0.012 5~0.1 g·mL-1薰衣草浸提液處理范圍內(nèi),兩種種子隨浸提液濃度的增大,電導(dǎo)率逐漸升高,說(shuō)明薰衣草浸提液破壞了兩種種子的細(xì)胞膜且濃度越大破壞力越強(qiáng)。在0.012 5~0.1 g·mL-1處理范圍內(nèi),萬(wàn)壽菊的相對(duì)電導(dǎo)率均與CK 相比差異顯著(P<0.05);隨浸提液濃度的升高,波斯菊電導(dǎo)率除在0.012 5 g·mL-1外均與CK 相比差異顯著(P<0.05)。當(dāng)薰衣草浸提液濃度達(dá)到0.1 g·mL-1時(shí),兩種種子的電導(dǎo)率值達(dá)到最大值,分別比CK 增加了21.92%、17.95%。表明過(guò)高濃度的浸提液會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)膜滲透性增加,細(xì)胞內(nèi)的電解質(zhì)大量外滲。
圖1 不同濃度浸提液對(duì)萬(wàn)壽菊和波斯菊電導(dǎo)率的影響Fig.1 Effects of different concentrations of extracts on the conductivity of T. erecta and C. bipinnatus
2.2.2 薰衣草浸提液對(duì)萬(wàn)壽菊和波斯菊MDA 含量的影響
由表3可知,隨薰衣草浸提液濃度的升高,兩種種子內(nèi)的MDA含量逐漸增加。在0.012 5~0.1 g·mL-1處理范圍內(nèi),萬(wàn)壽菊的MDA 含量與CK 相比差異顯著(P<0.05),但0.012 5 g·mL-1與0.025 g·mL-1處理組組間差異不顯著(P>0.05)。在0.012 5~0.1 g·mL-1處理范圍內(nèi),波斯菊的MDA 含量與CK 相比差異顯著(P<0.05),分別比CK 增加了0.72 g·μmol-1、1.12 g·μmol-1、1.58 g·μmol-1、3.69 g·μmol-1。這表明,低濃度的浸提液對(duì)兩種種子細(xì)胞膜的損傷程度較小,高濃度的浸提液對(duì)兩種種子細(xì)胞膜的損傷程度較大,且波斯菊的受損傷程度均大于萬(wàn)壽菊。
表3 不同濃度浸提液對(duì)萬(wàn)壽菊和波斯菊MDA含量的影響Tab.3 Effects of different concentrations of extracts on MDA content of T. erecta and C. bipinnatus
種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)是判斷種子發(fā)芽能力的重要指標(biāo),在一定程度上反映了種子出苗快慢以及出苗齊度,可以直觀的反映出種子活力強(qiáng)弱,其指標(biāo)越高,說(shuō)明種子在該條件下越適合生長(zhǎng)。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)隨著薰衣草浸提液濃度的升高,兩種種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)均逐漸降低。但低濃度薰衣草浸提液處理的兩種種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)與CK 相比差別較小,高濃度的薰衣草浸提液與CK 相比發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)差異較大。這表明,高濃度的薰衣草浸提液對(duì)兩種種子的萌發(fā)具有抑制作用,而低濃度的浸提液對(duì)其無(wú)顯著影響。這與徐芬芬[12]等的研究結(jié)果相似。
幼苗根長(zhǎng)、芽長(zhǎng)可作為重要指標(biāo)來(lái)反映植株的生長(zhǎng)狀況。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),隨著薰衣草浸提液濃度的升高兩種植物幼苗的根長(zhǎng)和芽長(zhǎng)呈先增加后減少的趨勢(shì),其中在薰衣草浸提液濃度為0.012 5~0.025 g·mL-1時(shí),促進(jìn)兩種種子生長(zhǎng),可以進(jìn)行混播;但在浸提液濃度為0.1 g·mL-1時(shí),對(duì)兩種種子的生長(zhǎng)起到明顯抑制作用。這與Siyar等[13]、朱吉鳳等[14]的研究結(jié)果相似。
電導(dǎo)率是衡量植物細(xì)胞質(zhì)膜滲透性的重要指標(biāo)之一。MDA 含量的增加是植物細(xì)胞損傷的直接原因,其含量可以反映植物遭受傷害的程度以及植物的抗逆性,含量越高說(shuō)明植物受到的損害越嚴(yán)重。本試驗(yàn)通過(guò)測(cè)定兩種種子的生理指標(biāo)顯示:高濃度浸提液增加了兩種種子電導(dǎo)率和MDA含量,導(dǎo)致兩種種子膜透性加大,電解質(zhì)外流,嚴(yán)重影響兩種種子生長(zhǎng)。這與馬銀山等[15]、梁瀟等[16]、楊棟林等[17]的實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似。
高濃度的薰衣草浸提液對(duì)兩種植物的生長(zhǎng)指標(biāo)和生理指標(biāo)均有嚴(yán)重影響,萬(wàn)壽菊和波斯菊更適合在較低濃度的薰衣草浸提液培養(yǎng)下進(jìn)行混播生長(zhǎng),不僅豐富了植物造景的層次與色彩,也體現(xiàn)了高品質(zhì)的城市綠化水平。本試驗(yàn)僅是薰衣草浸提液小范圍內(nèi)的質(zhì)量濃度對(duì)萬(wàn)壽菊和波斯菊影響的初步研究,以后還需設(shè)置更細(xì)、更廣的質(zhì)量濃度范圍并結(jié)合大田試驗(yàn)深入研究。