彭思博 高春山 李玲雪 杜曉燕 鄭偉 柳鵬

(吉林省水產科學研究院，吉林長春 130000)

細鱗鮭(Brachymystaxlenok)隸屬于鮭形目、鮭科、細鱗鮭屬,是名貴的陸封型冷水魚類，國家二級保護水生野生動物，其營養(yǎng)價值高，含脂率低，養(yǎng)殖效益好[1]。美洲紅點鮭(Salvelinusfontinalis)是鮭科、紅點鮭屬魚類，俗稱七彩鮭，為廣鹽性淡水三文魚，其體色鮮艷，肉質堅實，味道鮮美，生長速度快，經濟價值高，市場潛力極大，是紅點鮭屬魚類中養(yǎng)殖最為廣泛的品種[2-4]。這兩種魚均有著較強的應激反應，當研究人員在進行繁殖授精、標志放流、生物學研究等操作時，試驗魚會產生分泌黏液、跳躍掙扎等應激反應，影響相關操作的實施，同時魚體也會受到一定的傷害[5-6]。魚類麻醉劑能有效降低人為操作帶來的魚類應激，減少操作后研究對象的死亡率，從而被廣泛應用于科研試驗和漁業(yè)生產中[7-8]。MS-222是國內外廣泛應用于水產動物的安全可靠的麻醉藥物之一，被美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準為漁用安全麻醉劑，具有使用安全、操作便捷，麻醉和復蘇快等優(yōu)點[9-10]。目前，MS-222對細鱗鮭和美洲紅點鮭的麻醉效果尚未見研究報道。本研究通過測定不同質量濃度MS-222對細鱗鮭和美洲紅點鮭的麻醉效果，檢測麻醉時魚的呼吸頻率以及空氣暴露時長對魚體復蘇的影響，探究兩種魚類的最適麻醉劑濃度，以期為今后在細鱗鮭和美洲紅點鮭人工繁殖中規(guī)范使用麻醉劑提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料

試驗用細鱗鮭和美洲紅點鮭于2021年11月購自吉林省臨江市金鯊冷水魚養(yǎng)殖農民專業(yè)合作社。細鱗鮭全長(35.53±2.20)cm，體長(31.06±2.00)cm，體質量(448.71±92.38)g。美洲紅點鮭全長(34.67±2.60)cm，體長(31.92±2.30)cm，體質量(542.24±109.20)g。

間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽(MS-222)由上海易恩化學技術有限公司生產，為白色粉末，易溶于水。

1.2 麻醉試驗

經預試驗，確定麻醉劑濃度梯度。在水溫(8.5±0.7)℃條件下，MS-222麻醉劑質量濃度梯度設置為20、40、60、80、100、120、140、160 mg/L，并設對照組。每個濃度梯度設3個平行試驗組，每組試驗魚5尾。

試驗在100 L的塑料水箱中進行，試驗用水為山泉水。試驗前細鱗鮭和美洲紅點鮭停食24 h，試驗期間不投飼，不充氧，仔細觀察試驗魚的活動狀態(tài)，記錄其達到麻醉5期(深度麻醉)所需的時間。將麻醉后的試驗魚撈出放在清水中使之蘇醒，記錄其復蘇至正常游動所需的時間及復蘇率。

1.3 呼吸頻率影響試驗

呼吸頻率：將鰓蓋一張一合作為1次呼吸，統(tǒng)計連續(xù)10 s的呼吸次數，換算成1 min的呼吸次數，即為呼吸頻率。

統(tǒng)計試驗魚在正常情況下和在各麻醉劑濃度梯度下1、2、3、4、5 min時的呼吸頻率。每組3尾試驗魚，取各組呼吸頻率的平均值作為各濃度組的呼吸頻率。

1.4 空氣暴露復蘇試驗

將試驗魚放入質量濃度為160 mg/L的MS-222溶液中進行深度麻醉(達到麻醉5期)，麻醉相同時長后將魚從麻醉液中取出，用濕毛巾包裹深度麻醉的試驗魚，使其暴露在空氣中2、3、4、5 min后分別放入清水中，記錄復蘇所需的時間。試驗重復3次，每組試驗魚5尾。

1.5 數據處理

試驗所得數據使用EXCEL和SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析，數據以“平均值±標準差”表示，設P<0.05為統(tǒng)計學檢驗的顯著性水平。

2 結果

2.1 麻醉、復蘇的分期及行為特征

根據細鱗鮭和美洲紅點鮭在麻醉試驗中的實際行為表現，可將兩種魚的麻醉程度分為6期，復蘇過程分為4期。各分期及相應的行為特征見表1～表4。

表1 細鱗鮭麻醉分期及行為特征

表2 美洲紅點鮭麻醉分期及行為特征

表3 細鱗鮭復蘇分期及行為特征

表4 美洲紅點鮭復蘇分期及行為特征

2.2 不同濃度MS-222的麻醉效果

當水溫為(8.5±0.7)℃時，在不同質量濃度的麻醉劑作用下，細鱗鮭和美洲紅點鮭麻醉及復蘇過程中各階段所需的時間見表5～表6。當MS-222的質量濃度為20 mg/L時，細鱗鮭和美洲紅點鮭均只進入輕度麻醉或鎮(zhèn)靜狀態(tài)；當MS-222質量濃度為80、100 mg/L時，細鱗鮭進入深度麻醉所需的時間顯著少于40 mg/L和60 mg/L濃度組，并顯著多于120、140和160 mg/L濃度組(P<0.05)；當MS-222的質量濃度為100 mg/L時，其復蘇所需的時間顯著少于其余試驗組(P<0.05)。

表5 不同濃度MS-222對細鱗鮭的麻醉效果

表6 不同濃度MS-222對美洲紅點鮭的麻醉效果

當MS-222質量濃度為80 mg/L時，美洲紅點鮭麻醉所需的時間顯著少于40、60 mg/L濃度組，而顯著多于100、120、140和160 mg/L濃度組(P<0.05)；當MS-222的質量濃度為100 mg/L時，美洲紅點鮭復蘇所需的時間顯著多于40、60和80 mg/L濃度組，且顯著少于120、140和160 mg/L濃度組(P<0.05)。對比兩種魚的麻醉效果，美洲紅點鮭較細鱗鮭對MS-222更為敏感。

2.3 不同濃度MS-222對試驗魚呼吸頻率的影響

在低濃度(質量濃度20、40 mg/L)麻醉劑中，細鱗鮭和美洲紅點鮭的呼吸頻率均表現為先略微上升，隨后下降并趨于穩(wěn)定；在MS-222質量濃度為90～120 mg/L時，2種試驗魚的呼吸頻率均表現為隨麻醉時間的延長而下降的趨勢；在MS-222質量濃度為140～160 mg/L時，2種試驗魚的呼吸頻率均迅速下降為0?？傮w而言，在MS-222的麻醉試驗中，試驗魚的呼吸頻率均隨著麻醉時間的延長而呈下降趨勢(見圖1～圖2)。

圖1 不同質量濃度MS-222對細鱗鮭呼吸頻率的影響

圖2 不同質量濃度MS-222對美洲紅點鮭呼吸頻率的影響

2.4 空氣暴露時長對復蘇的影響

由表7～表8可知，當細鱗鮭深度麻醉后，空氣暴露時長在1～2 min時，復蘇所需的時長隨暴露時長的增加而減少，且當暴露時長為2 min時細鱗魚復蘇所需的時間最少(P<0.05)。當暴露時長為3～5 min時，復蘇所需時間隨暴露時長的增加而增加；美洲紅點鮭深度麻醉后，在1～5 min內，復蘇所需時間隨暴露時長的增加而減少，且當暴露時長為5 min時，美洲紅點鮭復蘇所需的時間最少(P<0.05)。

表7 不同空氣暴露時長對細鱗鮭復蘇的影響

表8 不同空氣暴露時長對美洲紅點鮭復蘇的影響

3 討論

3.1 最適麻醉劑濃度

試驗結果表明，MS-222對細鱗鮭和美洲紅點鮭都具有較好的麻醉效果。一般來說，能讓魚在3 min內麻醉、5 min內復蘇的可視為理想的麻醉劑[11]。本研究中，當MS-222質量濃度為80～100 mg/L時，細鱗鮭能夠在3 min內進入深度麻醉狀態(tài)，并且能在5 min內100%復蘇；當MS-222質量濃度為80 mg/L時，美洲紅點鮭能夠在3 min內進入深度麻醉狀態(tài)，并且能在5 min內100%復蘇。這與黃顙魚[8]、鱖魚[5]、秦嶺細鱗鮭[12]、長薄鰍[13]等成魚的最適麻醉劑濃度不同。麻醉劑的麻醉效果與魚類的自身因素以及外部環(huán)境密切相關，根據魚的種類、生長階段以及水體環(huán)境的不同而發(fā)生相應的改變[7]。當水溫在10.5 ℃時，秦嶺細鱗鮭的最適MS-222麻醉劑質量濃度為50 mg/L，與本研究中細鱗鮭的最適麻醉濃度相比較低[12]。陳細華等[14]研究發(fā)現，同一種魚，規(guī)格越小，對MS-222的反應也越敏感。在相同的麻醉濃度下，魚的規(guī)格越大，進入深度麻醉狀態(tài)所需的時間越長。本試驗中細鱗鮭的規(guī)格為(448.71±92.38)g，較秦嶺細鱗鮭[12][(160±52)g]大，可能是其最適麻醉濃度更高的原因。在溫度和水源相同的情況下，MS-222對細鱗鮭和美洲紅點鮭的麻醉效果相似，但不完全相同，這可能與魚類品種不同有關。

3.2 MS-222對魚呼吸頻率的影響

呼吸頻率是衡量魚體麻醉程度的重要指標。魚的呼吸頻率與麻醉程度、水體環(huán)境以及魚的種類密切相關[7]。在MS-222對大鱗鲃[7]和吉富羅非魚[15]的麻醉研究中，魚的呼吸頻率在整個麻醉期間總體呈下降趨勢。但另有報道表明，赤眼鱒[16]等魚類在麻醉狀態(tài)較淺時，其呼吸頻率呈上升趨勢，而在深度麻醉時，其呼吸頻率下降。本研究中，細鱗鮭和美洲紅點鮭的呼吸頻率在淺麻醉狀態(tài)初期上升，隨后下降，而在深麻醉狀態(tài)下則快速下降，具有獨特性。

3.3 空氣暴露時長對魚體復蘇的影響

本研究顯示，進入深度麻醉的細鱗鮭，經空氣暴露1～2 min，其復蘇所需的時間隨暴露時長的增加而減少。暴露時長在3～5 min時，復蘇所需的時間隨暴露時長的增加而增加，這與布氏鯛[17]、長鰭吻魚句[18]的研究結果類似。美洲紅點鮭進入深度麻醉后，經空氣暴露1～5 min，其復蘇所需的時間隨暴露時長的增加而減少。復蘇所需時間隨暴露時長增加而減少的原因，可能是當試驗魚暴露在空氣中，其體內不再繼續(xù)富集麻醉劑，且其神經系統(tǒng)中的麻醉劑隨著血液循環(huán)向身體其他部位擴散，經皮膚排出，由此形成神經系統(tǒng)-肌肉-外部濕潤環(huán)境之間的麻醉劑排出通道，降低了神經系統(tǒng)的麻醉程度，魚體呼吸部分恢復，因而在暴露前期，復蘇所需的時間逐漸減少。復蘇所需的時間隨暴露時長的增加而增加的原因，可能是當試驗魚的麻醉程度降低后，由于其耗氧量增加、暴露時間過長而導致窒息或者昏迷，因而在暴露后期，復蘇所需的時間逐漸增加。本研究中，兩種試驗魚進入深度麻醉后，隨著空氣暴露時長的增加，復蘇所需的時間增減趨勢不同，可能是兩種魚對MS-222麻醉劑的敏感度不同所致。

4 結論

本研究結果表明，MS-222對細鱗鮭和美洲紅點鮭均有良好的麻醉效果，具有入麻快、復蘇快、安全邊界寬等特點，是一種較為理想的水產用麻醉劑。建議在漁業(yè)生產和科研實驗中對美洲紅點鮭和細鱗鮭使用質量濃度為80 mg/L的MS-222。