薛高旭， 曹 玲， 孫 晶， 馮有龍，李佳晨， 柳雨影， 姜 瑋

(1.南京中醫(yī)藥大學藥學院，江蘇南京 210023；2.江蘇省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院，江蘇南京 210019；3.泰州市藥品檢驗院，江蘇泰州 225300)

高血壓已成為我國目前最常見的心血管疾病之一[1]。由于擔心長期服用降壓類化學藥不良反應(yīng)較多，很多高血壓患者服用降壓類中成藥及保健食品。而一些商家為了追求商業(yè)利益，向這些降壓類中成藥及保健食品中非法添加化學藥，如果患者在不知情的情況下長期服用，或與其它降壓藥同服,可能造成血壓驟然下降，并發(fā)嚴重的不良反應(yīng)，甚至危及生命[2]。因此，有必要對降壓類中成藥及保健食品中非法添加的化學藥進行監(jiān)測。

降壓類中成藥及保健食品中非法添加化學藥的檢測方法主要有高效液相色譜法[3]、薄層色譜-顯微拉曼光譜聯(lián)用技術(shù)[4]、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)[5]等。離子遷移譜(IMS)具有操作簡便、分析時間短、靈敏度高等優(yōu)點。目前，電噴霧-離子遷移譜(ESI-IMS)技術(shù)已應(yīng)用于抗風濕[6]、改善睡眠[7]、減肥[8]、降糖[9]、止咳平喘[10]等各類中成藥和保健食品中非法添加化學藥的檢測。本文利用ESI-IMS技術(shù)，建立了降壓類中成藥及保健食品中29種化學藥的快速篩查方法。該方法簡便、快速、靈敏度高，為行政監(jiān)管提供了可靠的技術(shù)支撐。

1 實驗部分

1.1 儀器及試劑

GA2100型高效離子遷移譜儀(美國，Excellims公司)；AG -1620型空氣發(fā)生器(北京科普生分析科技有限公司)；XP6型電子天平(瑞士，Mettler Toledo公司)；UA22MFD超聲清洗儀(德國，Wiggens公司)。

20批降壓類中成藥及保健食品均為市售。

1.2 實驗方法

1.2.1 對照品溶液的配制稱取各對照品5.0 mg，分別置于25 mL容量瓶中，用80%甲醇溶解并定容，配制成各含200 μg·mL-1的對照品儲備液。分別精密吸取0.1、0.5、1 mL對照品儲備液于10 mL容量瓶中，用含0.5%乙酸(V/V)的80%甲醇稀釋至刻度，作為正離子對照品溶液；用含0.5%氨水(V/V)的80%甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為負離子對照品溶液。

1.2.2 校正溶液的配制稱取色氨酸和檸檬酸各5.0 mg，分別置于25 mL容量瓶中，用80%甲醇溶解并稀釋至刻度，配制成各含200 μg·mL-1的校正溶液。

1.2.3 樣品前處理稱取樣品(茶劑、片劑、顆粒劑研磨混勻后取其粉末，膠囊取內(nèi)容物)約0.25 g，分別置于25 mL容量瓶中，加80%甲醇約20 mL，超聲提取10 min，冷后稀釋至刻度，用0.45 μm微孔濾膜濾過，續(xù)濾液作為供試品儲備溶液。用含0.5%乙酸的80%甲醇以1∶10、1∶25、1∶50的比例進行稀釋，所得的溶液作為正離子供試品溶液；用含0.5%氨水的80%甲醇以1∶10、1∶25、1∶50的比例進行稀釋，所得的溶液作為負離子供試品溶液。

1.3 離子遷移譜工作條件

電噴霧離子源：正離子模式(ESI+)源電壓為2.2 kV，負離子模式(ESI-)源電壓為1.8 kV；遷移管電壓為8 kV，進氣口溫度為180 ℃，遷移管溫度為180 ℃；離子柵門電壓為50 V，門電壓脈沖寬度為85 μs。遷移氣流速為1.2 L·min-1，排出氣流速為0.8 L·min-1，進樣速度為1.2 μL·min-1。

2 結(jié)果與討論

2.1 實驗條件的優(yōu)化

2.1.1 提取溶劑的選擇實驗比較了各目標物在不同比例甲醇溶液(60%、70%、80%、90%)中的響應(yīng)情況。結(jié)果顯示，80%甲醇溶液中各目標物質(zhì)的響應(yīng)較好，基線較平整，因此選擇80%甲醇溶液作為提取溶劑；同時pH亦會影響目標化合物的響應(yīng)，最終優(yōu)化時向正離子和負離子樣品溶液中分別加入了0.5%乙酸和0.5%氨水。

2.1.2 ESI-IMS檢測模式的選擇考察了29種對照品在正、負離子工作模式下的響應(yīng)信號，發(fā)現(xiàn)氫氯噻嗪等7種化學藥在負離子模式下有較高響應(yīng)，而普萘洛爾等22種化學藥適合在正離子模式下檢測。

2.1.3 ESI-IMS檢測條件的選擇在1.6～2.6 kV范圍內(nèi)，考察源電壓對測定結(jié)果的影響。源電壓的改變通常會影響目標物的響應(yīng)強度，但對遷移時間基本沒有影響。正離子模式下，普萘洛爾等22種化學藥源電壓為2.2 kV 時的響應(yīng)均較好；負離子模式下，氫氯噻嗪等7種化學藥在源電壓為1.8 kV時的響應(yīng)較好。實驗還發(fā)現(xiàn)，遷移管電壓改變時不僅影響目標物遷移時間，同時影響響應(yīng)強度。綜合考慮，選擇遷移管電壓為8.0 kV。

2.1.4 遷移時間與約化遷移率為了消除溫度、氣壓等外界因素的影響，采用遷移時間和約化遷移率K0對各對照品進行定性。

(1)

其中，L為遷移管的長度(cm)；td為遷移時間(s)；U為遷移管電壓(V)；P為氣壓(inHg)；T為遷移管溫度(K)。

在上述條件下，儀器校正后分別取正離子和負離子對照品溶液，注入離子遷移譜儀中進行分析，各物質(zhì)IMS譜圖見圖1。29種目標物的遷移時間為8.3～19.2 ms，K0在0.76～1.58 cm2·V-1·s-1范圍。

圖1 29種對照品溶液的IMS圖譜(A～C:正離子模式;D:負離子模式)Fig.1 IMS spectrograms of 29 standard solutions(A-C:Positive mode;D:Negative mode)

2.2 專屬性考察

溶劑空白測定結(jié)果如圖2所示，在各目標物出峰的位置均無干擾峰出現(xiàn)，表明方法專屬性良好。

圖2 溶劑空白的IMS圖譜(A:正離子模式;B:負離子模式)Fig.2 IMS spectrograms of blank solvent(A:Positive mode;B:Negative mode)

2.3 基質(zhì)效應(yīng)與檢測限考察

2.4 方法重現(xiàn)性的考察

3個月內(nèi)，每個月隨機選取5 d，對各物質(zhì)的對照品溶液進行離子遷移譜分析。結(jié)果表明，29種化學藥在3個月內(nèi)任意5 d的遷移時間的相對標準偏差(RSD)均在0.5%以內(nèi)，重現(xiàn)性良好。

2.5 樣品的測定與譜庫的建立

對市場中抽查的20批降壓類中成藥及保健食品進行ESI-IMS分析，在負離子模式下有2批樣品檢測到非法添加化學藥，其中一批(膠囊2)除了溶劑峰外，在12.384 ms檢測到非法添加化學藥，與氫氯噻嗪遷移時間相比，相對誤差為0.01%；一批(軟膠囊1)除了溶劑峰外，在8.432 ms檢測到非法添加化學藥，與苯磺酸氨氯地平遷移時間相比，相對誤差為0.03%。離子遷移譜圖見圖3。采用實驗室已建立的液-質(zhì)聯(lián)用方法測定上述樣品，測定結(jié)果與ESI-IMS一致。

圖3 膠囊2和軟膠囊1的IMS圖譜(A:膠囊2;B:軟膠囊1)Fig.3 IMS spectrograms of capsule 2 and soft capsule 1(A:capsule 2;B:soft capsule 1)

3 結(jié)論

本文建立了降壓類中成藥及保健食品中29種非法添加化學藥的ESI-IMS檢測方法，該方法簡單快速、靈敏度高，與化學試劑盒快篩結(jié)果相比，測定更具通用性，結(jié)果更具穩(wěn)定性。利用所建立的方法對20批市售樣品進行篩查，其中一批檢出氨氯地平，1批檢出氫氯噻嗪。因此，ESI-IMS可用于現(xiàn)場的快速篩查，可大大降低檢測成本，提高篩查效率，為進一步規(guī)范市場環(huán)境提供技術(shù)保障。