劉愛朋張樹旺王世信王培珍閆國(guó)強(qiáng)

（滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，河北 滄州061000）

我國(guó)藥材種類繁多，品種混亂現(xiàn)象嚴(yán)重，尤其對(duì)于細(xì)小果實(shí)種子類，其細(xì)微特征肉眼不易識(shí)別，顯微鑒別和理化鑒別較繁瑣［1］，故找到一種快速實(shí)用的鑒別手段顯得十分迫切。微性狀鑒別法采用體視顯微鏡，可清楚地觀察到藥材表面、斷面等細(xì)微特征［2-4］，具有簡(jiǎn)單、快速、直觀、廉價(jià)等特點(diǎn)［5-7］。本實(shí)驗(yàn)鑒別紫蘇子、補(bǔ)骨脂、韭菜子、車前子、青葙子、菟絲子、天仙子、南鶴虱、小茴香、酸棗仁這10 種常見細(xì)小果實(shí)種子類藥材的微性狀，并比較正品與偽品的不同點(diǎn)，以期創(chuàng)建適用于基層的藥材快速鑒別方法。

1 材料

1.1 儀器 Olympus-SZX7 型體視顯微鏡（日本奧林巴斯公司）；Oplenic-X64 拍照軟件；Adobe Photoshop 圖像處理軟件。

1.2 藥材 10 種細(xì)小果實(shí)種子類藥材于2021 年4月收集于河北安國(guó)、安徽亳州藥材市場(chǎng)，經(jīng)河北省滄州中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院中藥藥學(xué)部閆國(guó)強(qiáng)主任鑒定，具體信息見表1。

表1 樣品信息Tab.1 Information of samples

2 方法

2.1 制備裝片 將藥材表面清理干凈，放在載玻片上。

2.2 拍攝照片 取干燥潔凈的藥材，在體視顯微鏡下觀察其表面微性狀特征，并采用Adobe Photoshop 軟件將不同景深圖片進(jìn)行合成，拍到完整立體的藥材圖。

2.3 圖像處理 采用Adobe Photoshop 軟件對(duì)圖片進(jìn)行調(diào)節(jié)亮度、飽和度、清晰度、對(duì)比度、去污點(diǎn)等處理。

2.4 微性狀鑒別 根據(jù)觀察拍攝到的藥材微性狀特征，總結(jié)正品、偽品之間的區(qū)別點(diǎn)。

3 結(jié)果

3.1 紫蘇子及其偽品鑒別 紫蘇子呈卵球形或類球形，直徑1.5 mm；表面灰棕色，有微隆起的網(wǎng)紋，網(wǎng)紋暗紫色，網(wǎng)脊較細(xì)，網(wǎng)眼較小，見圖1a。白蘇子呈類卵球形，直徑2.6 mm；表面灰白色，有明顯隆起的網(wǎng)紋，網(wǎng)紋類白色，網(wǎng)脊較寬且凸起明顯，網(wǎng)眼較大，見圖1b。白花菜子近扁球形，直徑1.7 mm；黑褐色；表面由疣狀小突起連成同心環(huán)紋數(shù)條，外緣突起明顯類似齒狀，爪開張，近似彼此連生，見圖1c。三者微性狀特征見表2。

圖1 紫蘇子及其偽品微性狀特征圖Fig.1 Microscopic characteristic images of P.frutescens and its adulterants

表2 紫蘇子及其偽品微性狀特征Tab.2 Microscopic characteristics of P.frutescens and its adulterants

3.2 補(bǔ)骨脂及其偽品鑒別 補(bǔ)骨脂呈腎形，略扁，長(zhǎng)4 mm，寬3 mm；表面黑色，有細(xì)微網(wǎng)狀皺紋和棕黃色腺點(diǎn)；頂端圓鈍，有一小突起，凹側(cè)有果梗痕，見圖2a。曼陀羅子略呈三角狀腎形，扁平，長(zhǎng)3.5 mm，寬2.5 mm；表面黑色，凹凸不平，具細(xì)密的點(diǎn)狀小凹坑，背側(cè)呈弓形隆起，腹側(cè)的下方具一楔形種臍，中間為一裂口狀種孔，見圖2b。毛曼陀羅子呈元寶狀腎形，扁平，長(zhǎng)4 mm，寬3 mm；表面黃棕色，凹凸不平；邊緣有一條明顯的波紋狀契合溝，近溝處點(diǎn)狀凹坑明顯；凹側(cè)具白色種臍，見圖2c。

圖2 補(bǔ)骨脂及其偽品的微性狀特征圖Fig.2 Microscopic characteristic images of P.corylifolia and its adulterants

3.3 韭菜子及其偽品鑒別 韭菜子呈半圓形，略扁，長(zhǎng)3.5 mm，寬2.5 mm；表面黑色，一面突起，有細(xì)密的網(wǎng)狀皺紋，另一面平或微凹，皺紋不明顯，見圖3a～3b。蔥子呈類三角形，略扁，長(zhǎng)3 mm，寬2 mm；表面黑色，一面平凹，另一面隆起，隆起面有1～2 條突起的棱線；表面密被點(diǎn)狀小突起紋理，見圖3c～3d。兩者微性狀特征見表3。

表3 韭菜子及其偽品微性狀特征Tab.3 Microscopic characteristics of A.tuberosum and its adulterants

圖3 韭菜子及其偽品微性狀特征圖Fig.3 Microscopic characteristic images of A.tuberosum and its adulterants

3.4 車前子及其偽品鑒別 車前子呈不規(guī)則長(zhǎng)圓形、橢圓形或三角狀長(zhǎng)圓形；表面黃棕色至黑褐色，有細(xì)密皺紋，一面有灰白色凹點(diǎn)狀種臍，見圖4a～4b。荊芥子為小堅(jiān)果，三棱形，表面棕褐色，有縱棱線。一端較尖，有白色的果柄痕，見圖4c。兩者微性狀特征見表4。

圖4 車前子及其偽品微性狀特征圖Fig.4 Microscopic characteristic images of P.asiatica and its adulterants

3.5 青葙子及其偽品鑒別 青葙子呈扁圓形，少數(shù)腎形，中間微隆起且較邊緣稍厚；表面亮黑色，有光澤，側(cè)邊緣中央微凹處有一突起的種臍，見圖5a。雞冠花子呈三角狀扁圓形，背面弓狀隆起，并常有凹陷而略作多面形；表面亮黑色，有光澤，側(cè)邊微凹處有一柄狀凸起并偏向一側(cè)的種臍，見圖5b。

圖5 青葙子及其偽品微性狀特征圖Fig.5 Microscopic characteristic images of C.argentea and its adulterants

3.6 菟絲子及其偽品鑒別 菟絲子呈類球形；表面灰棕色至棕褐色，粗糙，布滿白色小顆粒，一端有淡黃色圓點(diǎn)；中央有微凹的線形種臍，見圖6a。千穗谷呈扁圓形，較飽滿，中間鼓出；表面淡黃綠色；近邊緣處有一圈環(huán)帶，見圖6b。加熱至種皮破裂，菟絲子可見淡黃色螺旋狀胚，形如吐絲，見圖6c。千穗谷胚黃白色呈半圓形，見圖6d。兩者微性狀特征見表5。

表5 菟絲子及其偽品微性狀特征Tab.5 Microscopic characteristics of C.australis and its adulterants

圖6 菟絲子及其偽品微性狀特征圖Fig.6 Microscopic characteristic images of C.australis and its adulterants

3.7 天仙子及其偽品鑒別 天仙子呈扁腎形或扁卵形；表面棕黃色，有隆起的細(xì)密的蜂窩狀網(wǎng)紋；種臍微突，見圖7a。南天仙子呈扁平心臟形，稍有棱角；表面紅棕色，有粘液化表皮毛，遇水發(fā)粘、豎起；種臍微凹，見圖7b。

圖7 天仙子及其偽品微性狀特征圖Fig.7 Microscopic characteristic images of H.niger and its adulterants

3.8 南鶴虱及其偽品鑒別 南鶴虱為雙懸果，多分裂，分果呈半橢圓形；表面棕黃色，頂端有花柱殘基；背面隆起，具4 條窄翅狀次棱，翅上密生一列黃白色鉤刺，次棱間的凹下處有不明顯的主棱，其上散生短柔毛，接合面平坦，有3 條脈紋，上具柔毛，見圖8a。華南鶴虱背面隆起，密生長(zhǎng)短不一、排列不齊的鉤刺，形如刺猬；接合面凹陷成槽狀，中間有一條脈紋，見圖8b。

圖8 南鶴虱及其偽品微性狀特征圖Fig.8 Microscopic characteristic images of D.carota and its adulterants

3.9 小茴香及其偽品鑒別 小茴香為雙懸果，圓柱形，有的稍彎曲，黃綠色，兩端略尖；頂端殘留黃棕色的花柱基；基部時(shí)有細(xì)小的果柄；果實(shí)易分離，分果呈長(zhǎng)橢圓形，背面有縱棱5條，合生腹面平坦，較寬，見圖9a。孜然為雙懸果，圓柱形，較縱直而不彎曲，黃綠色，疏被絨毛；頂端殘留柱基；基部有細(xì)果柄，雙懸果不易分離；背面有3 條較明顯的棱，相鄰兩棱間有較小的棱；腹面中央有一明顯的色較淺的縱棱，見圖9b。蒔蘿子雙懸果常裂為分果，呈扁平橢圓形，棕褐色；背面扁壓，有3 條微突起的棱助，兩側(cè)肋線則擴(kuò)展成翅狀，邊緣灰白色，見圖9c。3.10 酸棗仁及其偽品鑒別 酸棗仁呈扁橢圓形，長(zhǎng)5～9 mm，寬5～7 mm，厚約3 mm；表面紫紅色，平滑有光澤，有的兩面均呈圓隆狀突起，有的一面較平坦，中間有一條隆起的縱淺紋，另一面稍突起，一端凹陷，可見線形種臍；另端有細(xì)小突起的合點(diǎn)，見圖10a。理?xiàng)椚瘦^扁；表面黃棕色，有淡黃棕色斑點(diǎn)狀花紋，見圖10b。兵豆常水煮后曬干；表面顏色由黃綠色變?yōu)樽霞t色時(shí)，摻偽到酸棗仁中；呈扁圓形，較酸棗仁略小，中間向邊緣漸??；表面皺縮，見圖10c。

圖9 小茴香及其偽品微性狀特征圖Fig.9 Microscopic characteristic images of F.vulgare and its adulterants

圖10 酸棗仁及其偽品微性狀特征圖Fig.10 Microscopic characteristic images of Ziziphus jujuba var. spinosa and its adulterants

4 討論

體視顯微鏡可以放大藥材的性狀特征，幫助基層快速準(zhǔn)確地對(duì)中藥材做出真?zhèn)舞b別［8］。

紫蘇子、菟絲子、車前子、韭菜子等細(xì)小果實(shí)種子類中藥，由于體積小，傳統(tǒng)性狀特征不易肉眼觀察，導(dǎo)致這類藥材摻偽嚴(yán)重［9-13］，很多文獻(xiàn)中雖也有相關(guān)報(bào)道，但大多數(shù)只是以文字形式進(jìn)行描述，不夠直觀具體，而本研究以文字描述加以高清放大的微性狀立體圖片，提供鑒別參考。

顯微鑒定、理化鑒定和分子鑒定等現(xiàn)代鑒定方法的儀器設(shè)備昂貴，操作復(fù)雜，檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，難以適用于基層中藥鑒定工作［14］。普通光學(xué)顯微鏡主要用于顯微鑒別，需要對(duì)藥材進(jìn)行組織解剖，顯微切片等專業(yè)性強(qiáng)且復(fù)雜的操作。微距照相雖然也可以獲得細(xì)小藥材的高清照片，但在拍攝時(shí)往往只能聚焦于某個(gè)點(diǎn)上，而中藥材表面凹凸不平，導(dǎo)致不在同一個(gè)景深的地方有些模糊，而體式顯微鏡采用3D 景深合成技術(shù)，可以全方位更清晰更立體地拍攝藥材，能夠保證每一個(gè)平面都是清楚的，這些優(yōu)勢(shì)是微距相機(jī)所不具備的。且該方法操作簡(jiǎn)單，速度快速、價(jià)格優(yōu)廉，它完全可以成為一種適用基層且行之有效的中藥快速檢驗(yàn)方法［15-18］。