張浩然，葉安琪，張躍偉，成樂琴

吉林化工學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院，吉林 吉林 132022

人參皂苷衍生化及生物活性研究進(jìn)展

張浩然，葉安琪，張躍偉，成樂琴*

吉林化工學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院，吉林 吉林 132022

人參皂苷是人參Panax ginseng的主要生物活性成分，特別是其降解產(chǎn)物次級稀有人參皂苷具有廣泛的抗癌、改善記憶、提高免疫力、神經(jīng)保護(hù)等作用，但由于水溶性低，生物利用度小，應(yīng)用受到一定的限制。通過對人參皂苷分子的結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，可以有效提高人參皂苷的水溶性、靶向性，從而提高生物利用率，顯著提高人參皂苷的藥物活性和減少毒副作用。對人參皂苷結(jié)構(gòu)修飾策略及活性研究進(jìn)行了綜述，為人參皂苷及其衍生物在食品、藥品等領(lǐng)域的深層次應(yīng)用研究提供理論依據(jù)。

人參皂苷；次級人參皂苷；化學(xué)修飾；衍生化；生物活性

人參又稱亞洲人參或高麗參，是傘形目五加科人參屬植物人參Panax ginsengC. A. Mey的根，作為一種名貴中草藥在東亞國家有數(shù)千年使用歷史，被用作滋補(bǔ)藥品或用于抗炎[1]、護(hù)肝[2]、神經(jīng)保護(hù)[3]、美白[4]、抗腫瘤[5]等。人參皂苷是人參的重要活性成分，屬于三萜類糖苷化合物，可分為原人參二醇組皂苷（PPD型皂苷）、原人參三醇組皂苷（PPT型皂苷）和齊墩果烷型，文獻(xiàn)研究表明，已從人參根中分離出40多種人參皂苷[6]。

人參皂苷具有抗氧化、抗炎、血管舒張、抗過敏、抗糖尿病等多種治療作用[7]。一些人參皂苷通過減少DNA損傷、減少宿主對突變的易感性、增加免疫監(jiān)測和細(xì)胞凋亡等顯示其抗癌特性[8]。此外，人參皂苷還能有效改善傳統(tǒng)化療藥物的療效，防止對正常組織的損傷[9-10]。

人參皂苷水溶性較差[11]、血藥濃度低、口服吸收慢、生物利用度低[12]，在一定程度上限制了人參皂苷的臨床應(yīng)用。研究表明，通過對人參皂苷的分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，可以大幅度提高其水溶性[13]、穩(wěn)定性[14]、靶向性[15-16]，從而有效提高其藥理活性[17]。近年來，對人參皂苷（特別是次級人參皂苷）的物理和化學(xué)修飾研究取得了一定進(jìn)展，本文對人參皂苷的結(jié)構(gòu)修飾方法及其藥理活性進(jìn)行綜述。

1 人參皂苷的?；揎?/h2>

人參皂苷藥動(dòng)學(xué)研究表明，90%的口服人參皂苷經(jīng)過體內(nèi)腸道中結(jié)腸菌逐步裂解末端糖，得到20-O-β-D-吡喃葡萄糖基-達(dá)瑪-24-烯-3β,12β,20S-三醇（M1）、20-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖基達(dá)瑪-24-烯-3β,12β,20S-三醇（Mc）、20-O-β-D-吡喃葡萄糖基達(dá)瑪-24-烯-3β,6α,12β,20S-四醇（F1）、3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20-O-β-D-吡喃葡萄糖基達(dá)瑪-24-烯-3β,12β,20S-三醇（F2）、達(dá)瑪-24-烯-3β,12β,20S-三醇（PPD）、達(dá)瑪-24-烯-3β,6α,12β,20S-四醇（PPT）等稀有人參皂苷[18]。這些代謝產(chǎn)物經(jīng)消化道吸收，通過血液循環(huán)進(jìn)入肝臟，進(jìn)一步酯化為人參皂苷脂肪酸酯，可在體內(nèi)維持更長時(shí)間。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，人參皂苷脂肪酸酯在體內(nèi)不良反應(yīng)小、藥物活性高，可能是體內(nèi)真正的抗腫瘤活性物質(zhì)，因此，脂肪酸酯化人參皂苷是一種極具潛力的候選藥物。

Wei等[19]將人參皂苷Rh2溶解在氯仿中，緩慢加入辛酰氯和三乙胺，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)15 min合成了12,6′-二辛?；藚⒃碥誖h2即D-Rh2（2），見圖1。體外人肝細(xì)胞QSG7701細(xì)胞MTT實(shí)驗(yàn)表明，D-Rh2對人肝細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用明顯低于人參皂苷Rh2；而對H22肝癌小鼠的體內(nèi)抗腫瘤實(shí)驗(yàn)表明，D-Rh2的抗腫瘤活性與人參皂苷Rh2相當(dāng)。與人參皂苷Rh2相比，D-Rh2在體外能顯著降低對人肝細(xì)胞株QSG-7701的毒性，但不減弱體內(nèi)抗腫瘤活性。D-Rh2對胸腺指數(shù)的增強(qiáng)作用表明，D-Rh2可能通過刺激淋巴細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞毒性作用而間接影響腫瘤的生長。

很多抗癌藥物（如第3代鉑類藥物奧沙利鉑）對癌細(xì)胞有很好的殺傷作用，但同時(shí)殺傷正常細(xì)胞，產(chǎn)生神經(jīng)毒性、血液和胃腸道毒性、惡心和嘔吐等不良反應(yīng)[20]。人參皂苷Rh2經(jīng)過羥基選擇性酯化，在不降低抗癌活性條件下，可以顯著降低QSG-7701細(xì)胞的毒性，減少對正常細(xì)胞的損傷，說明酯化可能是減少藥物不良反應(yīng)的一種良好的方法。

Zhang等[21]以人參二醇為原料，選擇乙酸酐、棕櫚酰氯和硬脂酰氯為主要試劑，合成了3種脂肪酸酯衍生物3β-乙酰氧基人參二醇（4）、3β-棕櫚酸乙酰氧基人參二醇（5）和3β-硬脂酸乙酰氧基人參二醇（6）（圖2）。

圖1 人參皂苷Rh2的12,6′-二辛酰基脂肪酸酯衍生化Fig. 1 Derivatization of ginsenoside Rh2 with 12,6′-dioctanoyl fatty acid ester

圖2 人參二醇的脂肪酸酯衍生化Fig. 2 Derivatization of ginsengdiol with fatty acid ester

Zhang課題組[21]以5-氟尿嘧啶（5-FU）為陽性對照，用Vero細(xì)胞系檢測了人參二醇脂肪酸酯的抗腫瘤增殖活性。MTT法檢測結(jié)果顯示，人參二醇的衍生物4具有較強(qiáng)的抗腫瘤作用，效果高于陽性對照5-FU，而化合物5和6的抑瘤作用均低于陽性對照組。這說明脂肪酸酯中脂肪鏈的長短對抗腫瘤效果影響顯著，脂肪鏈短，抗腫瘤效果好，脂肪鏈長，抗腫瘤效果下降。

乙酰水楊酸是世界上最常用的藥物之一。近年來有研究表明，乙酰水楊酸以及水楊酸均具有抗腫瘤活性[22-23]。Xu等[24]為提高人參皂苷和乙酰水楊酸的抗腫瘤活性，以三七皂苷的酸水解產(chǎn)物為原料，用水楊酸合成了人參皂苷水楊酸衍生物，在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步與乙酸酐進(jìn)行反應(yīng)合成了人參皂苷乙酰水楊酸衍生物（圖3）。

對三七皂苷酸水解產(chǎn)物的水楊酸衍生化及乙酰水楊酸衍生化產(chǎn)物的細(xì)胞毒性測試以及衍生物對人類結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞、胃癌bgc-823細(xì)胞、宮頸癌HeLa細(xì)胞、人類乳腺癌MCF-7細(xì)胞、人類肺癌A549細(xì)胞和2個(gè)普通癌癥細(xì)胞系的抗癌活性評價(jià)結(jié)果表明，所有化合物均顯示低毒性或無毒性（IC50＞100μmol/L），進(jìn)一步說明羥基的酯化是減少藥物不良反應(yīng)的良好途徑。另外，人參皂苷乙酰水楊酸衍生物的抗癌活性明顯強(qiáng)于人參皂苷水楊酸衍生物，其中，當(dāng)化合物3中R2為X2，R3為H時(shí)對MCF-7細(xì)胞的抑制活性最強(qiáng)，IC50＝（2.56±0.09）μmol/L，同樣說明了乙酰化可以有效提高藥物抗腫瘤活性。

圖3 三七皂苷酸水解產(chǎn)物的水楊酸衍生化及乙酰水楊酸衍生化Fig. 3 Derivatization of the product of notoginsenoside by acid hydrolysis with salicylic acid and acetylsalicylic acid

人參皂苷的酰基化研究表明，羥基經(jīng)?；梢燥@著降低毒性，而且對不同?；a(chǎn)物的抗癌活性研究表明，人參皂苷乙?；苌镆约叭藚⒃碥找阴Ｋ畻钏嵫苌锏目拱┗钚悦黠@比其他?；a(chǎn)品好，而?；奶兼溤龃髸r(shí)，抗癌活性明顯降低。

2 人參皂苷的硫酸化修飾

人參皂苷Rh2是一種原人參二醇型甾體皂苷，C-3位連有1個(gè)吡喃型葡萄糖，C-12和C-20位連有與仲碳和叔碳相連的羥基。Fu等[25]采用常見的氯磺酸-吡啶法對20(S)-人參皂苷Rh2的吡喃型葡萄糖的6位羥基和C-12位羥基進(jìn)行了選擇性硫酸化反應(yīng)，再通過堿中和得到了2種新型硫酸化衍生1a和1b（圖4）。1a和1b對LPS誘導(dǎo)小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞的抗炎作用結(jié)果顯示，經(jīng)過硫酸化處理后的1a和1b水溶性大幅度增強(qiáng)，而且以劑量相關(guān)方式顯著抑制炎癥細(xì)胞因子和介質(zhì)，上調(diào)抗炎細(xì)胞因子，顯示出比人參皂苷Rh2更強(qiáng)的抗炎作用。

圖4 20(S)-人參皂苷Rh2的硫酸化Fig. 4 Sulfation of 20(S)-ginsenoside Rh2

人參皂苷的硫酸化研究表明，將人參皂苷轉(zhuǎn)變成硫酸氫酯，再將其轉(zhuǎn)變成鹽是提高其水溶性的良好的方法，水溶性的提高不僅提高了生物利用度，而且還增強(qiáng)了人參皂苷的抗炎活性。

隨著新世紀(jì)各大高校校區(qū)建設(shè)熱潮的掀起，國內(nèi)各高校普遍具備校區(qū)集中、設(shè)備先進(jìn)、場所多樣、服務(wù)功能齊全的方形活動(dòng)教室、圓形討論室、生活中心、體育館、多功能廳等，在這些便利條件的助推下，提高了學(xué)生之間的交往主動(dòng)意愿，為實(shí)施朋輩導(dǎo)師制計(jì)劃提供了充分的硬件保障。

3 人參皂苷的PEG修飾

人參皂苷通常在胃腸道內(nèi)被水解酶降解[26-27]后吸收，因此其本身的口服生物利用率較低。隨著對人參皂苷藥動(dòng)學(xué)的深入研究，人參皂苷的靶向給藥制劑成為了研究熱點(diǎn)。聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）是一種水溶性、非離子型、無毒的高分子材料，廣泛應(yīng)用于高分子藥物的載體領(lǐng)域[28]。通過PEG對藥物進(jìn)行表面改性，可以提高藥物的水溶性，保護(hù)藥物不被蛋白水解，延長藥物在血液中的循環(huán)時(shí)間，降低藥物的毒性[29]，同時(shí)PEG改性藥物因存在酸敏感基團(tuán)酯基，在腫瘤組織（通常顯示弱pH環(huán)境）中可以發(fā)生酯降解釋放出藥物，從而提高藥物的靶向性[30]。

Mathiyalagan等[31]為了提高CK（9）的溶解度，通過酯鍵在人參皂苷表面進(jìn)行了PEG修飾（圖5）。采用MTT法分析，用HT-29細(xì)胞檢查了PEG-CK（10）和PEG的體外細(xì)胞毒性，發(fā)現(xiàn)與游離CK相比PEG-CK毒性較低，表明了親水性聚合物的生物相容性。在弱酸性條件下（病理生理?xiàng)l件pH 5.0～6.5），PEG-CK偶聯(lián)物釋放CK的量大于正常條件（生理?xiàng)l件pH 7.4），這種非常高的藥物溶解度、pH選擇性、以及PEG-CK偶聯(lián)物在病理生理位點(diǎn)的增強(qiáng)積累，可能會(huì)提高藥物的整體療效。

劉梅等[32]首先用PEG2000與丁二酸酐在吡啶存在下70 ℃反應(yīng)24 h合成了單甲氧基聚乙二醇2000-琥珀酸單酯（mPEG2000-A），再利用人參皂苷Rg1（11）糖苷鍵上的羥基與單酯的酯交換反應(yīng)合成了PEG-Rg1（圖6）。通過人參皂苷Rg1和PEG-Rg1（12）在大鼠離體胃中的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rg1經(jīng)過PEG修飾后可以改善游離狀態(tài)時(shí)在胃中容易分解的問題，穩(wěn)定性大幅度提高。

與此同時(shí)，劉梅等[33]隨機(jī)取2組SD小鼠，分別尾靜脈注射人參皂苷Rg1和PEG-Rg1。通過2組小鼠在不同時(shí)間點(diǎn)各臟器及血漿中的藥物分布，計(jì)算人參皂苷Rg1和PEG-Rg1的靶向系數(shù)。結(jié)果表明，PEG-Rg1對腎、肝、肺、心、脾、肝都有靶向選擇性，肝、腎、肺組織的靶向系數(shù)分別為9.21、26.31、3.31，而未修飾人參皂苷Rg1只有肝的靶向系數(shù)大于1。由此可見，PEG-Rg1對各臟器的靶向選擇性明顯加強(qiáng)，其中腎組織的靶向選擇性最高。

圖5 人參皂苷CK的PEG衍生化Fig. 5 Derivatization of ginsenoside CK with PEG

圖6 人參皂苷Rg1的PEG衍生化Fig. 6 Derivatization of ginsenoside Rg1 with PEG

趙海軍等[34]以對硝基苯氧酰化PEG為框架，利用硝基苯氧基易于離去的特性，在無水條件下將抗腫瘤特效藥依托泊苷（vp16）結(jié)構(gòu)中的酚羥基、人參皂苷Rh2（G-Rh2）糖結(jié)構(gòu)片段上的6-OH以及PEG鏈兩端的羥基共價(jià)連接，形成如圖7所示的“疏水-親水-疏水”的兩親性共聚物G-Rh2-PEG-vp16（13）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，化合物13體內(nèi)外穩(wěn)定性較好，且在pH 6.5的腫瘤組織環(huán)境下仍能釋放足量的藥物。化合物13共聚物采用中西藥物結(jié)合，能夠達(dá)到協(xié)同抗腫瘤的作用，是一種很有前景的新型抗腫瘤藥物。

PEG結(jié)構(gòu)中有重復(fù)的-OCH2CH2-結(jié)構(gòu)單元，據(jù)報(bào)道[35]，在-OCH2CH2-結(jié)構(gòu)單元中的氧原子通過吸電子誘導(dǎo)效應(yīng)使其周圍具有較高的電子云密度，從而加強(qiáng)與水分子的氫鍵能力，提高水溶性。人參皂苷通過酯基連接PEG，借助PEG的強(qiáng)親水性可有效提高水中溶解度和生物利用度，同時(shí)人參皂苷經(jīng)PEG修飾后毒性減弱，穩(wěn)定性增大，靶向性提高，特別是在腫瘤組織適宜存在的微酸性環(huán)境中容易分解釋放藥物，是癌癥靶向治療的良好途徑。

圖7 人參皂苷Rh2的G-Rh2-PEG-vp16衍生化Fig. 7 Derivatization of ginsenoside Rh2 with G-Rh2-PEG-vp16

4 人參皂苷的氨基酸化修飾

氨基酸是指分子中同時(shí)擁有氨基和羧基官能團(tuán)的化合物，氨基酸的羧基可與人參皂苷中的羥基以酯基形式結(jié)合。劉繼華[36]以人參皂苷Rg3、人參皂苷Rh2、原人參二醇為原料，分別與叔丁氧羰基（Boc）或乙?；Ｗo(hù)的多種氨基酸進(jìn)行反應(yīng)，首次合成了原人參二醇型皂苷的氨基酸衍生物（圖8）。研究表明，氨基酸分子的結(jié)構(gòu)越大，與皂苷反應(yīng)越困難；氨基酸化可以發(fā)生在1個(gè)羥基上生成單酯，也可以同時(shí)發(fā)生在多個(gè)羥基上生成多酯；與乙?；Ｗo(hù)相比，Boc保護(hù)的氨基酸反應(yīng)后的產(chǎn)物相對少，后期分離純化更簡單。另外發(fā)現(xiàn)，氨基酸更容易與葡萄糖側(cè)鏈的羥基發(fā)生反應(yīng)，而且最容易發(fā)生反應(yīng)的部位是Glc-6′位羥基。對氨基酸衍生物油水分配系數(shù)的測定表明，人參皂苷經(jīng)氨基酸衍生化后水溶性明顯提高，且蛋白結(jié)合率測定表明，衍生物抗癌活性作用可能提高。

25-OH-PPD是從人參果實(shí)中分離得到的一種有前途的抗腫瘤天然化合物。在研究中發(fā)現(xiàn)25-OH-PPD在體內(nèi)可以抑制胃癌細(xì)胞生長，引起細(xì)胞周期阻滯，誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡，但沒有明顯的宿主毒性，因此25-OH-PPD有望成為治療癌癥的理想藥物[38]。為提高25-OH-PPD的抗腫瘤活性，Wang等[37]在25-OH-PPD的C-3和C-12處引入了可增加極性的氨基和可增加親脂性的受Boc保護(hù)的氨基（圖9），并研究了對MCF-7細(xì)胞、A549細(xì)胞和3種人類結(jié)直腸癌細(xì)胞增殖的抑制作用。在合成的20種25-OH-PPD的氨基酸化衍生物中，去保護(hù)氨基酸衍生物表現(xiàn)出更高的對癌細(xì)胞的毒性活性，此外衍生化所使用氨基酸側(cè)鏈的類型及其生物活性之間顯示出很強(qiáng)的相關(guān)性。

5 人參皂苷的氧化修飾

圖8 20S-Rg3、20S-Rh2、20S-PPD的氨基酸衍生化Fig. 8 Derivatization of 20S-Rg3, 20S-Rh2, 20S-PPD with amino acid

圖9 25-OH-PPD的氨基酸衍生化Fig. 9 Derivatization of 25-OH-PPD with amino acid

圖10 20(S)-Rg3、20(S)-Rh2、20(S)-PPD的過氧酸氧化Fig. 10 Peroxyacid oxidation of 20(S)-Rg3, 20(S)-Rh2, 20(S)-PPD

人參皂苷不僅可以在支鏈發(fā)生氧化，在環(huán)上也可以發(fā)生氧化。有報(bào)道顯示，PD環(huán)上的氧化產(chǎn)物和A環(huán)的開環(huán)產(chǎn)物對人類免疫缺陷病毒HIV和丙型肝炎病毒HCV蛋白酶有抑制作用[38]。受此啟發(fā)，Zhang等[39]對PD進(jìn)行了一系列有益的氧化合成反應(yīng)（圖11），以提高其抗腫瘤活性，并采用MTT法檢測人參皂苷氧化產(chǎn)物對A549細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、人腦膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、人卵巢癌8901細(xì)胞和正常人卵巢細(xì)胞株IOSE144的增殖抑制作用。對U87細(xì)胞的細(xì)胞毒性篩選結(jié)果表明，化合物1a、3和3d比陽性對照有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性作用，其中化合物3的IC50值為（19.51±1.00）μmol/L，顯示較強(qiáng)的抗腫瘤細(xì)胞增殖活性。對MCF-7細(xì)胞株的研究結(jié)果顯示，1a和2的IC50值為17.73～23.58 μmol/L，其抗腫瘤活性優(yōu)于IC50值為（29.4±0.7）μmol/L的5-氟尿嘧啶和IC50值為（52.62±2.39）μmol/L母體化合物PD。此外，3b對HeLa細(xì)胞的IC50值為11.65～19.60 μmol/L，表現(xiàn)出較好的抗增殖活性。

PD及其衍生化產(chǎn)品經(jīng)PCC、O2、H2O2進(jìn)行3個(gè)不同階段氧化得到的產(chǎn)物的抗癌活性研究對比可知，第2階段用O2氧化得到的產(chǎn)品24、27和30的抗癌活性分別比與之對應(yīng)的第3階段PCC氧化產(chǎn)物26和29以及第3階段H2O2氧化產(chǎn)物25、28和31更高，說明A環(huán)的3-位羰基的α-位引入烯醇結(jié)構(gòu)的活性優(yōu)于其他氧化產(chǎn)物。

6 人參皂苷的氮雜化修飾

在天然產(chǎn)物中，主要分布于海蠕蟲體內(nèi)的氮雜環(huán)化合物具有明顯的細(xì)胞毒性[40]。在齊墩果酸的結(jié)構(gòu)修飾過程中，嘧啶類化合物對乳腺癌細(xì)胞具有普遍的抑制活性，其活性優(yōu)于陽性藥物依托泊苷[41]。

Zhang等[39]設(shè)計(jì)合成了環(huán)A稠合氮雜環(huán)衍生物，并對其抗腫瘤活性進(jìn)行了評價(jià)。首先用氯鉻酸吡啶（PCC）氧化PD，再用鄰苯二胺、乙二胺、硫、嗎啉、鹽酸聯(lián)氨等試劑進(jìn)行反應(yīng)得到氮雜環(huán)衍生物（圖12、13）。在所合成的人參二醇氮雜環(huán)衍生物中，20(R)-20,25-環(huán)氧-[5,4-b]-吡唑-12β-達(dá)瑪烷（41）與陽性對照5-Fu和母體化合物PD相比，顯示出優(yōu)越的抗腫瘤活性及抗增殖活性，而且活性明顯高于其他衍生物。根據(jù)SAR分析，對于A549細(xì)胞和8901細(xì)胞而言，20(R)-[2,3-b]-吡嗪-達(dá)瑪烷-12β,20,25-三醇（44）具有良好的抗癌細(xì)胞增殖活性，是陽性對照5-Fu的2.6倍。另外，細(xì)胞毒性研究結(jié)果表明，所有衍生物對正常細(xì)胞表現(xiàn)出較低的細(xì)胞毒活性。

圖11 人參二醇的氧化路線圖Fig. 11 Oxidation route map of ginsengdiol

在所合成的化合物中，吡唑啉化合物41的活性比其他衍生物高得多，推測這與其特殊的A環(huán)稠合吡唑啉結(jié)構(gòu)有關(guān)；C-17連有鏈狀結(jié)構(gòu)片段的吡嗪化合物44比C-17連有環(huán)狀結(jié)構(gòu)片段的吡嗪化合物21d具有更出色的抗癌增殖活性；化合物44與43相比，除了HeLa細(xì)胞以外，對其它癌細(xì)胞的抗癌效果顯著提高，這可能是由于其C-12位所連基團(tuán)是羥基而非羰基有關(guān)[39]。

圖12 人參二醇氮雜環(huán)衍生化路線1Fig. 12 Route 1: Derivatization of ginsengdiol saponins via nitrogen heterocycle

圖13 人參二醇氮雜環(huán)衍生化路線2Fig. 13 Route 2: Derivatization of ginsengdiol saponins via nitrogen heterocycle

咪唑具有2個(gè)sp2雜化氮原子的五元芳雜環(huán)化合物，具有獨(dú)特的藥理活性，如抗驚厥、抗菌、抗癌、抗炎、抗腫瘤、抗病毒、抗?jié)?、?zhèn)痛等藥理活性。將咪唑基團(tuán)引入藥物中，還會(huì)引發(fā)一些特殊的生物活性[42]。因此備受研究者關(guān)注。

甾體咪唑類化合物具有很高的醫(yī)用價(jià)值。張嚴(yán)磊[43]將具有達(dá)瑪烷甾體結(jié)構(gòu)的人參二醇、人參三醇與咪唑基團(tuán)連接，設(shè)計(jì)了系列甾體咪唑衍生物。人參二醇未能合成咪唑衍生物，但人參三醇成功合成多個(gè)人參三醇氧化產(chǎn)物的咪唑衍生物及人參三醇氧化產(chǎn)物的咪唑鹽衍生物（圖14）。

圖14 人參三醇酮的咪唑及取代咪唑衍生化Fig. 14 Derivatization of ginsengtriolone via imidazole and substituted imidazole

張嚴(yán)磊[43]首先用瓊斯試劑將人參三醇（45）的C-2位和C-6位的羥基氧化生成人參三醇酮（化合物46），再用溴代試劑對化合物46的C-2位進(jìn)行溴代得化合物47，在甲苯中與咪唑及咪唑衍生物加熱回流，分別得到人參三醇-2-溴-3,6-二酮與咪唑、甲基咪唑和苯并咪唑的反應(yīng)產(chǎn)物48、49和50。最后將生成的化合物48與鹵化芐反應(yīng)合成了人參三醇酮溴代物咪唑鹽51和52；化合物24與氯化芐生成人參三醇酮氯代物咪唑鹽31。對HL60人急性髓系白血病細(xì)胞的抗癌活性研究表明，化合物48、51、52顯示較好的抗癌活性，其中化合物51的活性最強(qiáng)，其效果好于順鉑。

7 其他

人參皂苷的修飾方法還有烷基化、氚化還原等方法。例如姜竹韻[44]分別采用Purdie法、Haworth法、Hakomori法和Cicanu法對人參皂苷Rg2分子中的C-12位羥基進(jìn)行了甲基化結(jié)構(gòu)修飾研究，以改變?nèi)藚⒃碥誖g2的極性，改善其功能。而吳久偉等[45]將原人參二醇溶解在氯仿中，用重鉻酸鉀氧化得到原人參二醇氧化物，再利用新制的硼氚化鈉對原人參二醇進(jìn)行氚化還原，得到 [3,12-3H] 原人參二醇。所得還原產(chǎn)物經(jīng)過分析發(fā)現(xiàn)，其各項(xiàng)指標(biāo)均能滿足藥學(xué)和醫(yī)學(xué)相關(guān)研究要求，有助于提高人參皂苷在癌癥治療和診斷上的應(yīng)用。

8 結(jié)語與展望

人參皂苷是人參的主要生物活性成分，特別是通過人參皂苷的降解得到的次級稀有人參皂苷顯示良好的抗癌[46-47]、改善記憶[48]、神經(jīng)保護(hù)[48]等藥理作用，受到廣泛關(guān)注。同時(shí)，因次級稀有人參皂苷水溶性低、生物利用度小的問題，應(yīng)用受到一定限制，因此化學(xué)方法修飾人參皂苷逐漸成為國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。

通過人參皂苷的?；?、硫酸化法、PEG修飾法、氨基酸法、氧化法、氮雜化法、烷基化法、氚化還原法等對人參皂苷進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，可以有效提高人參皂苷的水溶性、穩(wěn)定性、靶向性、從而提高生物利用率，顯著提高人參皂苷的藥物活性。

人參皂苷的結(jié)構(gòu)修飾中，?；?、硫酸化法、PEG修飾法、氨基酸法均是通過人參皂苷中特定羥基與衍生化試劑通過酯化和酯交換反應(yīng)引入酯基從而改變其物理和生物活性，不同的衍生化試劑根據(jù)其結(jié)構(gòu)的不同有不同的改性效果。人參皂苷通過?；?、硫酸化法、PEG修飾法、氨基酸法引入酯基，可以有效降低人參皂苷對正常細(xì)胞的毒副作用，提高抗癌、抗炎等藥物活性；?；苌镏?，短脂肪鏈?；ㄈ缫阴；┗蛞阴Ｋ畻铛；囊肟梢杂行岣呷藚⒃碥盏目拱┗钚?，長脂肪鏈?；囊虢档涂拱┗钚?；人參皂苷通過PEG修飾、硫酸化和氨基酸修飾均能顯著提高人參皂苷水溶性和生物利用度，其中，PEG法還可以使人參皂苷穩(wěn)定性增大、在癌細(xì)胞適宜生存的微酸環(huán)境中可以有效釋放藥物，從而提高藥物的靶向性，是人參皂苷對癌細(xì)胞靶向治療的一種可行方法。

人參皂苷的氮雜化產(chǎn)品毒性較小，對人參皂苷的氮雜化研究表明，不同雜環(huán)結(jié)構(gòu)的引入可以影響人參皂苷抗癌活性的高低，即有些雜環(huán)的引入使抗癌活性顯著提高，有些雜環(huán)反而降低抗癌活性。另外，雜環(huán)的影響也與人參皂苷本身結(jié)構(gòu)有密切關(guān)系，說明人參皂苷的抗癌活性并不是分子結(jié)構(gòu)中單一結(jié)構(gòu)片段起作用，而是多官能團(tuán)的共同協(xié)同作用。

綜上所述，良好的水溶性及靶向性可以提高藥效，改善藥物在人體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特性。人參皂苷的理化性質(zhì)與其羥基數(shù)量、母核結(jié)構(gòu)、所連基團(tuán)大小和數(shù)量及連接位置等因素有關(guān)。使用化學(xué)方法對人參皂苷分子的結(jié)構(gòu)進(jìn)行修飾，為提高人參皂苷生物利用率提供了重要方向。隨著近年來藥物領(lǐng)域的迅速發(fā)展，新的技術(shù)、新的方法層出不窮，人參皂苷的修飾技術(shù)也將不斷創(chuàng)新，更多的人參皂苷衍生化產(chǎn)品有望應(yīng)用于臨床。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Research progress on ginsenoside derivatization and its biological activities

ZHANG Hao-ran, YE An-qi, ZHANG Yue-wei, CHENG Le-qin
Department of Pharmacy and Applied Chemistry, Jilin Institute of Chemical Technology, Jilin 132022, China

Ginsenosides are the main biologically active components of ginseng, especially the secondary rare ginsenosides which are degradation products, have extensive biological activities. However, due to the characteristics of their structures, the low water solubility and the low bioavailability largely limit their applications. Modification of the molecular structure of ginsenosides by chemical methods can effectively improve the water solubility and targeting properties of ginsenosides, thereby increasing the bioavailability and significantly improving the drug activity of ginsenosides. This article reviews and compares the latest research advances in the modification methods and biological activity research of ginsenosides, which provides references for further studies on the chemical modification and potential utilization value of ginsenosides and their applications in food, medicine and other fields.

ginsenosides; secondary rare ginsenosides; chemical modification; derivatization; biological activity

R284

A

0253-2670(2022)14-4554-14

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.14.033

2021-11-08

吉林省科技廳重點(diǎn)科技研發(fā)項(xiàng)目（20180201073YY）；吉林化工學(xué)院重大研發(fā)項(xiàng)目（吉化院合字[2015]第005號）

張浩然（1998—），女，內(nèi)蒙古通遼人，碩士研究生，主要從事人參皂苷結(jié)構(gòu)修飾研究。E-mail: 1656248294@qq.com

*通信作者：成樂琴（1969—），女（朝鮮族），黑龍江林口人，教授，主要從事天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)修飾及藥物合成。E-mail: chengleqin@126.com

[責(zé)任編輯 王文倩]