謝 璽，王慶志

(遼寧省海洋水產(chǎn)科學研究院，大連市海產(chǎn)貝類種質資源創(chuàng)新利用重點實驗室，遼寧 大連 116023)

對蝦養(yǎng)殖是水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的重要組成部分，中國已成為對蝦出口大國。近30年來，隨著養(yǎng)殖業(yè)規(guī)模的不斷擴大，生態(tài)環(huán)境不斷惡化，對蝦的集約化養(yǎng)殖和管理不善導致了一些病毒性疾病普遍流行，主要病原包括：黃頭桿狀病毒(YHV)、桃拉綜合征病毒(TSV)、傳染性皮下及造血組織壞死病毒(IHHNV)、白斑綜合征病毒(WSSV)等，其中由白斑綜合征病毒引起的白斑綜合征對對蝦養(yǎng)殖業(yè)的危害最為嚴重[1-2]。

對蝦白斑綜合征是由白斑綜合征病毒引起的暴發(fā)性流行病，白斑綜合征病毒可通過水平和垂直傳播感染中國明對蝦(Fenneropenaeuschinensis)、日本囊對蝦(Marsupenaeusjaponicus)、凡納濱對蝦(Litopenaeusvannamei)等幾乎所有對蝦類甲殼動物，對蝦生命周期各階段全部易感，發(fā)病病程短，致死率極高[3]。感染白斑綜合征病毒后，對蝦甲殼內表面初現(xiàn)點狀白斑，繼而逐漸擴大至頭胸部和全身，最后甲殼呈白色；發(fā)病前期蝦須、尾扇發(fā)紅，身體消瘦，漫游于水面，發(fā)病后期病蝦殘胃或空胃，甲殼易脫離真皮，游動緩慢無力，致死率高達100%[4]。

自20世紀90年代初，白斑綜合征病毒在中國臺北首次發(fā)現(xiàn)以來，先后在亞洲、北美洲、歐洲等國家和地區(qū)暴發(fā)，引起全球性對蝦流行病，造成養(yǎng)殖對蝦大規(guī)模死亡和巨大經(jīng)濟損失，成為全球對蝦養(yǎng)殖業(yè)危害最大的一種病毒[5-7]。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)、聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織(FAO)以及亞太水產(chǎn)養(yǎng)殖網(wǎng)絡中心(NACA)將白斑綜合征列為需要上報的嚴重水生動物病毒性疫病，我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部也于2009年將其列入《一、二、三類動物疫病病種名錄》中水生生物一類動物疫病。多年來，為了預防和控制該病害流行暴發(fā)，各國學者對白斑綜合征的病原學與流行病學、免疫與致病機理、生態(tài)防控與抗病育種等技術進行了廣泛而深入的研究與應用，取得了顯著成效，其中“中國明對蝦‘黃海1號’新品種及其健康養(yǎng)殖技術”與“對蝦白斑癥病毒單克隆抗體庫的構建及應用”兩項成果分別榮獲2007年度和2010年度國家技術發(fā)明獎二等獎，為我國對蝦養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)健康發(fā)展提供了技術支撐。目前，在對蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)上多采用培育抗病力強的蝦種和切斷白斑綜合征病毒傳播途徑綜合防控白斑綜合征發(fā)生[8]。筆者以白斑綜合征防控技術的發(fā)展現(xiàn)狀作為典型案例分析，展望相關技術的應用前景，為有效防控對蝦白斑綜合征及其他病害提供參考。

1 白斑綜合征防控技術水平分析

白斑綜合征病毒是具有雙層囊膜的環(huán)狀雙鏈DNA病毒，基因組大小約為300 kb，不形成包涵體，病毒粒子形態(tài)為卵圓形或橢球形至短桿狀，呈規(guī)則對稱，長度為250～380 nm，直徑為80～130 nm，囊膜厚為6～7 nm，一端具有鞭毛狀的延伸結構(圖1[9])。病原體功能基因的研究已成為疫苗研制的一個方向。目前GenBank公布了白斑綜合征病毒中國株WSSV-CN、泰國株WSSV-TH、韓國株WSSV-KR、澳大利亞株WSSV-AU等10株的基因組序列[10-14]，各基因組序列間的差異主要表現(xiàn)在大序列缺失、單核苷酸突變、重復序列變化等方面。國際病毒學分類委員會(ICTV)將中國株系白斑綜合征病毒(Whitespotsyndromevirus)WSSV-CN列為線頭病毒科白斑病毒屬(Whispovirus)的代表種[15-16]。

圖1 白斑綜合征病毒病毒粒子的形態(tài)學Fig.1 Morphology of the WSSV virion

對白斑綜合征病毒的蛋白質鑒定有助于認知白斑綜合征病毒的裝配形式和入侵機理，為開發(fā)白斑綜合征病毒的快速診斷技術和疫苗提供理論依據(jù)。白斑綜合征病毒基因組中編碼的蛋白包括能組裝成病毒粒子的結構蛋白和參與病毒復制及相關的調控蛋白。其中結構蛋白可維持病毒基本構象、保護病毒核酸，在病毒識別、吸附和侵入細胞過程中起重要作用[17]，主要為核衣殼蛋白(如VP15)、囊膜蛋白(如VP19與VP28)[18]和被膜蛋白(如VP26)(圖2[19])。

圖2 膜蛋白復合物和核衣殼的三維模型Fig.2 3D models of the membrane protein complex and the nucleocapsid

1.1 檢測與診斷技術

對蝦養(yǎng)殖實踐表明，任何病害一旦暴發(fā)就很難控制，易造成對蝦嚴重減產(chǎn)或絕產(chǎn)。在白斑綜合征病毒感染早期，快捷準確的病毒診斷技術是生產(chǎn)上實現(xiàn)病毒預警與防控、減少經(jīng)濟損失的重要前提。目前，世界動物衛(wèi)生組織(https:∥www.oie.int/index.php?id=2439&L=0&htmfile=chapitre_wsd.htm#chapitre_wsd.biblio-48)推薦的白斑綜合征病毒標準檢測方法主要包括宏觀病理學檢測法、顯微病理學檢測法[20-21]、抗體抗原檢測法[22-23]、分子生物學檢測法[24]等，一些方法的適用性和定向性診斷評級見表1。

表1 養(yǎng)殖對蝦不同階段定向監(jiān)測和診斷白斑綜合征病毒感染的方法評級

1.1.1 目視檢測法

目視檢測法主要依據(jù)宏觀病理學原理于養(yǎng)殖現(xiàn)場直接觀察判斷。一旦發(fā)現(xiàn)對蝦食量下降，靜臥水底，出現(xiàn)離群獨游、緩游、側游或游到水面附近等不正常的游泳行為，且甲殼上嵌有明顯的白色斑點，頭胸甲出現(xiàn)易剝離等癥狀[3,25]，建議及時采取應急措施，控制病情蔓延。需要注意的是，出現(xiàn)白斑并非感染白斑綜合征病毒的可靠診斷標志，也難以全面掌握白斑綜合征病毒的感染率，需結合組織病理學等方法獲得準確病情。

1.1.2 顯微病理學檢測法

顯微病理學診斷法是通過光學或電子顯微鏡觀察患病對蝦的組織學變化，包括細胞核肥大、染色質邊緣化等。黃倢等[26]首創(chuàng)了一種適用于現(xiàn)場快速檢測白斑綜合征病毒的簡便方法，即新鮮病變組織(如鰓上皮或表皮上皮組織)的T-E染色法，全程用時僅需10 min，通常在400～1000倍光學顯微鏡下可以看到細胞核肥大和核內嗜酸性或空泡樣包涵體，不過該方法檢測到的病毒不能直接用于斷定對蝦發(fā)病。電子顯微技術可以直接觀察到白斑綜合征病毒粒子的形態(tài)和大小，是公認最為直觀的檢測病毒性病原方法，但是操作復雜、樣品處理時間長，試驗條件比較嚴格[27-28]。

1.1.3 免疫學檢測方法

針對病毒或重組病毒結構蛋白的多克隆和單克隆抗體已被用于各種免疫分析，包括免疫印跡分析[29]、酶聯(lián)免疫吸附法、液相芯片技術[30]等。其中酶聯(lián)免疫吸附法是根據(jù)免疫測定原理發(fā)展的一種固相免疫酶技術，包括單克隆抗體酶聯(lián)免疫吸附法[31]、間接酶聯(lián)免疫吸附法[32]、雙抗夾心直接或間接酶聯(lián)免疫吸附法[33]等，典型應用代表是以膠體金免疫層析法為基礎建立的快速檢測試紙條，適用于對蝦養(yǎng)殖現(xiàn)場[34]。需要注意的是，白斑綜合征病毒的主要靶組織是外胚層和中胚層的胚胎起源，特別是角質層上皮和皮下結締組織，但是不同組織對白斑綜合征病毒的免疫應答有明顯差異，建議應用該類方法時選擇蝦體相同部位檢測[35]。相較前述兩種方法，基于抗原抗體的方法更為快速方便，因此推薦該類方法用于確診急性白斑綜合征病毒感染。

1.1.4 分子生物學檢測法

分子生物學檢測法主要包括環(huán)介導等溫擴增技術、隨即擴增多態(tài)性DNA技術、核酸探針技術、聚合酶鏈式反應(PCR)技術等。其中，PCR技術是以對蝦的基因組為模板，根據(jù)預測病毒設計引物，進行體外擴增檢測，靈敏度高、特異性強，廣泛應用于對蝦病毒的檢測、早期診斷、防控與品種選育等，目前國內外均已開發(fā)出白斑綜合征病毒的商品化PCR檢測試劑盒[36-37]。一些研究人員還根據(jù)實際需要對常規(guī)PCR技術進行了改進，使檢測結果更為快速準確[38]，如套式PCR、實時定量PCR、反轉錄PCR、多重引物PCR等[39-41]。核酸探針是被放射性同位素、生物素或熒光染料標記了的能夠被探測到的核酸片段，具有特異性好、敏感性高和快速檢測等特點，白斑綜合征病毒核酸探針試劑盒目前已經(jīng)面世；通過結合原位雜交和組織切片技術，不但可以確定白斑綜合征病毒感染細胞的類型，而且能觀察到組織病理變化，相比染色更具優(yōu)越性，有助于研究發(fā)病機理和流行病學[42]。隨即擴增多態(tài)性DNA技術的擴增產(chǎn)物能夠形成病毒核酸指紋圖譜，在檢測時可以比較不同來源毒株DNA序列的同源性，有助于篩選出與抗病性狀相關的分子遺傳標記[43]。環(huán)介導等溫擴增技術依賴于循環(huán)置換擴增實現(xiàn)對靶序列的放大，在等溫條件下，1 h即可擴增出109拷貝靶序列，可以檢出對蝦發(fā)病早期或隱性感染階段體內攜帶的較低量白斑綜合征病毒，兼具特異、靈敏和現(xiàn)場快速檢測與推廣應用等特點[44-45]。此外，近年來有國內學者基于重組酶聚合酶擴增(RPA)技術初步構建了對蝦白斑綜合征病毒快速檢測方法，在靈敏度(10個病毒粒子以下)和檢測時間(10 min以內)上體現(xiàn)出明顯優(yōu)勢，有望實現(xiàn)實時熒光重組酶聚合酶擴增技術的應用與推廣[46]。

1.2 免疫防控技術

對蝦類水生動物疾病的預防與控制是產(chǎn)業(yè)持續(xù)健康發(fā)展的關鍵和基本保障。對蝦養(yǎng)殖水環(huán)境復雜多變，病原變異頻繁，特別是大面積暴發(fā)的病毒性疾病很難得到有效的控制。免疫防治是對蝦大規(guī)模養(yǎng)殖中病害防控最有潛力的一種手段[18]。Venegas等[47]于2000年首次報道，在自然和試驗白斑綜合征病毒感染中存活下來的日本囊對蝦對隨后的白斑綜合征病毒感染表現(xiàn)出了抗病性。經(jīng)典的免疫學理論認為對蝦類無脊椎動物的先天性免疫缺乏特異性和免疫記憶，盡管潛在的機制仍然未知，越來越多試驗已經(jīng)表明，“接種”的對蝦在白斑綜合征病毒攻擊后有更好的存活率，說明在抵抗病原感染的過程中，對蝦的先天免疫系統(tǒng)同樣具有某種形式的免疫記憶，即所謂的“免疫啟動”或“訓練免疫”[48-49]。這種訓練免疫記憶主要表現(xiàn)為：經(jīng)過病原微生物或疫苗的初次處理，多數(shù)對蝦[凡納濱對蝦、斑節(jié)對蝦(Penaeusmonodon)、日本囊對蝦等]可以對再次感染的同種或異種病原微生物誘發(fā)出更強的免疫防御反應和清除病原的能力[19]。這種免疫反應為通過接種疫苗制定對蝦類無脊椎動物的疾病控制策略提供了理論基礎。目前，核酸疫苗(DNA疫苗和雙鏈RNA疫苗)被認為是有效對抗白斑綜合征病毒的潛在新方法，國內外學者已研制出對蝦抗白斑綜合征病毒的核酸藥物或植物提取物等有效成分，可以誘發(fā)蝦體產(chǎn)生針對白斑綜合征病毒免疫應答的保護效應，提高對蝦成活率，相關產(chǎn)品已獲得國際專利授權[50-51]。

1.2.1 DNA疫苗

DNA疫苗一般由抗原蛋白基因和表達載體質粒構成，通過在宿主體內翻譯、合成、識別過程激活免疫系統(tǒng)，當病毒與宿主細胞表面分子相互作用時引發(fā)免疫應答。研究發(fā)現(xiàn)，向對蝦體內導入利用編碼白斑綜合征病毒結構蛋白VP15、VP28、VP35和VP281的基因構建重組DNA質粒，能明顯提高對蝦的抗病力、存活率及酚氧化酶原和超氧化物歧化酶水平，抵御白斑綜合征病毒的侵害[52-53]。相比于傳統(tǒng)的蛋白質疫苗：DNA疫苗制備簡潔，成本低廉，易于規(guī)?；a(chǎn)；抗原基因在體內可以長期表達；具有弱毒疫苗的免疫原性，能激發(fā)體液免疫和細胞免疫反應，不存在毒力回升等[54]，但存在一定程度的轉基因爭議和風險。

1.2.2 RNA疫苗

RNA干擾是由雙鏈RNA(dsRNA)誘導的與dsRNA同源的mRNA高效特異性降解現(xiàn)象，能夠抑制相關基因表達，在水生動物的生長發(fā)育和抗病毒入侵方面發(fā)揮重要作用[55-56]。白斑綜合征病毒是具有囊膜的雙鏈DNA病毒，利用RNA干擾技術可定向沉默編碼關鍵囊膜蛋白的mRNA來抑制白斑綜合征病毒的復制擴增。研究發(fā)現(xiàn)，從脊椎動物體內獲得的免疫球蛋白基因dsRNA導入對蝦可以誘導其表現(xiàn)出白斑綜合征病毒抗性[57]。由于對蝦體內不存在上述脊椎動物的免疫球蛋白，所以脊椎動物的dsRNA分子不會參與到對蝦的抗病毒免疫體系。這種抗病毒狀態(tài)的誘發(fā)是獨立于dsRNA序列的，引起染病對蝦死亡率降低的原因是注射到對蝦體內的脊椎動物免疫球蛋白基因dsRNA作為外源性物質激活了對蝦先天性的免疫反應[58]。白斑綜合征病毒的膜蛋白VP28或VP26的dsRNA注射免疫對蝦10 d后，對蝦累積死亡率均較低，其表現(xiàn)出較好的抗病毒保護效應[59]。在中國明對蝦幼體中注射與白斑綜合征病毒蛋白激酶基因、VP28和VP281基因相關的長鏈dsRNA能有效提高對蝦的存活率[60]。將VP28相關的短鏈dsRNA注射到對蝦體內也具有類似效果，若干靶向病毒復制相關酶的小干擾RNA和短發(fā)夾RNA誘導的特異RNA干擾均不同程度地抑制了白斑綜合征病毒的增殖，降低了對蝦的死亡率[61]。

作為對抗病毒入侵的一種新技術，RNA干擾技術具有安全、高效、無毒等特點，在對蝦白斑綜合征病毒防治過程中將發(fā)揮積極作用。首先在技術層面上，可通過篩選不同靶點和不同劑量的dsRNA解決RNA干擾脫靶和劑量效應問題；其次緣于RNA干擾的內生性調控機制，導入對蝦體內的dsRNA可以持續(xù)發(fā)揮作用。相比脊椎動物，對蝦的dsRNA注射用量較少，生產(chǎn)成本更低。

2 白斑綜合征防控技術發(fā)展趨勢

白斑綜合征的成功防控主要取決于流行病學的研究突破，查明傳染源、傳播途徑及暴發(fā)流行與環(huán)境的關系。早期是通過環(huán)境調控病原[62-63]，目前則是無特異性病原苗種生產(chǎn)技術和生物防控技術的融合，未來白斑綜合征等病害防控除了需要先進的檢測技術，還可能依賴于疫苗技術、生態(tài)防控技術、無特異性病原苗種、生物絮團環(huán)境調控技術的綜合應用與發(fā)展。

2.1 免疫防控技術

疫苗是水產(chǎn)動物疾病防控的最有效的手段，在對蝦類水產(chǎn)動物病毒病防治上的不可替代性展現(xiàn)了它的應用前景[64]。對蝦疫苗研制應該符合疫苗學的發(fā)展方向，如研制能控制多種疾病的聯(lián)合疫苗、開發(fā)出治療性疫苗、通過轉基因技術制備餌料食物疫苗等。飼料中添加免疫活性物質，使對蝦在攝取食物的同時，調動或激活自身的免疫系統(tǒng)，進而增強抗病力。一些研究顯示，β-葡聚糖、維生素C、海藻提取物(褐藻多糖)和其他免疫增強劑可能提高對白斑綜合征病毒感染的抵抗力[65-66]，如：飼料中添加適宜的卵黃抗體能有效提高對蝦抗白斑綜合征病毒免疫因子的活性[67]；飼料中添加適量的家蠅抗菌肽能夠減少白斑綜合征病毒引發(fā)的對蝦血細胞和造血組織的程序性凋亡，提高對蝦的免疫力[68]；飼料中添加畢赤酵母(Pichiapastoris)表達的Fortilin蛋白，能提高對蝦的免疫力和感染白斑綜合征病毒后的存活率[69]；飼料中添加殼聚糖衍生物殼聚糖硫酸酯可以明顯提高對蝦抵御白斑綜合征病毒感染的能力[70]；在對蝦餌料中包裹可表達VP26融合蛋白的枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)也能夠有效降低對蝦免受白斑綜合征病毒感染的概率[71]。

2.2 生態(tài)防控技術

生態(tài)防控是通過生態(tài)學手段調控養(yǎng)殖水體的理化因子和生物因子，如生態(tài)調控溶解氧、鹽度、溫度、密度、pH、氨氮、硝態(tài)氮等因子，阻斷病原體傳播途徑，達到預防疾病的目的。水體生物因子的控制主要是利用養(yǎng)殖生物間的互利或偏利作用實現(xiàn)的。我國現(xiàn)在流行將對蝦與大型海藻、濾食性貝類、肉食性魚類等進行多營養(yǎng)層次綜合養(yǎng)殖，通過改善水質、提高對蝦抗病力、清除染病對蝦等途徑實現(xiàn)更高的養(yǎng)殖效益[72]。生產(chǎn)實踐表明，對蝦與河鲀混養(yǎng)的防病效果十分明顯，河鲀可以攝食感染白斑綜合征病毒游泳緩慢的對蝦，防止健康對蝦殘食病蝦而感染，客觀上起到防白斑綜合征病毒擴散的效果[72]。同時應注重調控浮游生物群落結構，壓制藍藻的生態(tài)優(yōu)勢，避免藍藻等與白斑綜合征病毒的雙重脅迫，降低養(yǎng)殖風險。

此外，高密度對蝦養(yǎng)殖系統(tǒng)中菌群結構和多樣性對水質和對蝦的生物安全都有很大影響。生物絮團是在成熟的集約化養(yǎng)殖系統(tǒng)中，水體懸浮的細菌、殘餌、糞團等顆粒有機物絮凝在一起自然形成的團狀聚合物[73]。典型的生物絮團以菌膠團或絲狀細菌作為基架，通過附著細菌分泌胞外聚合物或靜電引力作用而結合。生物絮團中含有多種有益微生物菌群及其分泌產(chǎn)物，如聚-β-羥基丁酸、多糖類等活性物質，對養(yǎng)殖對蝦具有促進生長發(fā)育和免疫增強作用[74]。基于生物絮團技術構建的零換水、高密度對蝦養(yǎng)殖模式，無需過濾、生物基反應、消毒等復雜處理環(huán)節(jié)，即可直接分解轉化養(yǎng)殖動物的代謝物及水體中的氨氮等有害物質。生物絮團中的微生物與病原菌發(fā)生空間與營養(yǎng)競爭，可以擾亂病原菌的密度感應系統(tǒng)，從而抑制水體中病原菌生長和繁殖[74]。因此，生物絮團在對蝦病害防控中的關鍵是構建封閉式生物絮團養(yǎng)殖系統(tǒng)，避免引入外源性病原，提高養(yǎng)殖生物安全。

2.3 無特異性病原苗種生產(chǎn)及抗病種群選育技術

自白斑綜合征病毒暴發(fā)以來，對蝦育苗和養(yǎng)成率均較低，嚴重阻礙其養(yǎng)殖業(yè)的健康快速發(fā)展，因此在積極研制各種抗白斑綜合征病毒藥物的同時，引進抗病力強的蝦種和開發(fā)對蝦無毒良種幼苗的培育技術尤為重要。無特異性病原蝦苗生產(chǎn)技術是通過建立家系選育無病毒親本，阻斷親本病毒的垂直傳播，保持選育親本優(yōu)良性狀的統(tǒng)一，最終獲得無特異性病原的苗種，從而遏制白斑綜合征病毒的危害。無特異性病原技術的應用是控制病害發(fā)生的有效手段。我國是對蝦白斑綜合征的重災區(qū)，得益于1999年引進美國無特異性病原對蝦種蝦和繁育技術，培育出了無特異性病原蝦苗，我國對蝦產(chǎn)量也已從1994年低谷期的約6.0×104t恢復到2018年的1.409×106t。目前經(jīng)過系統(tǒng)人工選育的“黃海1號”中國對蝦與“中興1號”凡納濱對蝦已是通過全國水產(chǎn)原種和良種審定委員會審核的抗白斑綜合征病毒新品種。

3 應用前景展望

3.1 加強病毒受體及其封閉劑的研究

病毒感染細胞的第一步是病毒與細胞膜表面的受體結合，無論是抗白斑綜合征病毒疫苗，還是抗白斑綜合征病毒多克隆抗體和噬菌體展示的單鏈抗體，針對的都是病毒感染相關囊膜蛋白[75]。因此，通過精準定位并分離病毒受體，篩選出封閉病毒受體的高效藥物和方法，進而阻斷二者結合，加強相關研究有助于預防和控制包括白斑綜合征在內的對蝦病毒病。

3.2 加大疫苗給予途徑的研究

水產(chǎn)動物疫苗可預防疫病發(fā)生，已成為病害防控領域研發(fā)的主流產(chǎn)品。在抗白斑綜合征病毒感染途徑的研究中，目前還沒有針對白斑綜合征病毒感染開發(fā)出持續(xù)有效的疫苗接種方法，通過注射、口服、浸浴方式或其中兩種方式相結合均能達到一定的抗病毒效果。注射方式需對個體逐一進行，可推廣應用于親蝦的抗病防治。浸浴和口服是目前對蝦疫苗給予途徑的重點研究方向。浸浴則較適用于苗期幼體，但是需要確定免疫原量、提高免疫效果和降低疫苗成本；口服是對蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)上較為理想的疫苗給予方式，如英國水產(chǎn)養(yǎng)殖疫苗有限公司已開發(fā)出AquaVac抗弧菌口服疫苗和AquaVac ERM口服疫苗[64]，但有機體消化酶易削弱藥餌的抗病毒效果，因此需要開發(fā)可以封裝疫苗抗原而不損失疫苗效價的方法，如可作為蝦苗餌料的轉基因藍藻口服劑具有較高的免疫保護效果且食藥同源[76-78]，有望應用到對蝦口服疫苗的規(guī)模化生產(chǎn)中。

3.3 完善疫苗的評價系統(tǒng)

對蝦疫苗免疫效果的評價不僅關系到疫苗的本身，而且是對蝦疫苗能否進入商品流通領域的關鍵。評價系統(tǒng)應兼顧疫苗的質量和效果，包括疫苗安全性、免疫保護率、免疫學效應、免疫學指標及流行病學評價。

3.4 建設疫苗中試基地

中試基地是商品性對蝦疫苗應市的重要橋梁，也是對蝦疫苗再研究的一個重要場地。目前，我國商品性對蝦疫苗遲遲未能應市的原因之一就是缺乏中試基地。實驗室所研究的疫苗能否真正阻止傳染性疾病的流行，需要中試基地的進一步驗證，從而實現(xiàn)疫苗產(chǎn)業(yè)化與規(guī)模化使用。

3.5 注重疫苗佐劑研發(fā)

疫苗佐劑是非特異性免疫增強劑，與疫苗抗原共同使用能增強機體免疫應答能力，具有增加抗原表面積、延長抗原存留時間、增強細胞免疫活性、提高抗體水平等重要作用[79]。鑒于疫苗佐劑在水產(chǎn)動物疫苗免疫過程中的重要作用，新型疫苗佐劑的開發(fā)和應用可能是對蝦疫苗研究的重要方向，包括對蝦適宜佐劑的篩選、作用機理闡釋、產(chǎn)品開發(fā)與效果分析、安全性評價等。