李瑞強， 王玉祥， 孫玉蘭， 張 磊， 陳愛萍

(新疆農(nóng)業(yè)大學草業(yè)學院/西部干旱荒漠區(qū)草地資源與生態(tài)教育部重點實驗室/新疆草地資源與生態(tài)實驗室，新疆 烏魯木齊 830052)

土壤鹽漬化是造成土壤荒漠化的主要原因之一，不僅導致生物多樣性喪失及生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性下降，也嚴重影響農(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)力，是一個世界性的難題[1]。目前，全世界大約有10億hm2的土壤受到不同程度鹽漬化的影響，至少1/5的耕地存在鹽堿化現(xiàn)象[2]。中國鹽漬土總面積約2億hm2，潛在鹽堿地面積約1733萬hm2[3]，且主要分布在東北濱海地區(qū)以及降水較少的西北干旱、半干旱地區(qū)。新疆鹽漬土不僅分布廣泛，還具有明顯的區(qū)域特性，即不同地區(qū)積鹽的程度以及鹽分組成上有很大的差異。由于新疆有著其獨特的“三山夾兩盆”地貌，導致新疆各地區(qū)降雨分配不均勻[4]，新疆北部地區(qū)降水比較豐沛，易形成以硫酸鹽或氯化物-硫酸鹽為主的鹽漬土；新疆南部地區(qū)降水較少，鹽分的淋洗作用較弱，形成的鹽漬土則以氯化物或硫酸鹽-氯化物為主[5-6]。同時，新疆也是畜牧業(yè)大省，且家畜的飼養(yǎng)方式以放牧為主。天然草場的可持續(xù)利用發(fā)展是畜牧業(yè)良好發(fā)展的重要保障，但是由于新疆土壤植被較脆弱[7]，加上過度放牧和牧場的不合理利用等原因加速了當?shù)氐柠}堿地草場退化，導致新疆可放牧的天然草地面積減小，進而嚴重阻礙了畜牧業(yè)的發(fā)展。為了有效合理利用鹽漬化土地，發(fā)掘更多的耐鹽堿植物[8]，尤其是耐鹽堿的優(yōu)良牧草資源，是遏制鹽堿地退化，保護生物多樣性，促進生態(tài)環(huán)境良性循環(huán)以及保障畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展的最佳途徑[9]。

植物首先會通過改變形態(tài)結(jié)構(gòu)來應對鹽分脅迫[10]。葉片是裸露在空氣中且可被肉眼直接觀測的器官，也是反映植物對環(huán)境響應的最敏感器官[11]，易受水分、溫度、光照、降水量、海拔、鹽堿等環(huán)境因子的影響，主要表現(xiàn)為葉形的變化，葉片的大小、厚度及解剖結(jié)構(gòu)的差異[12-14]。鹽堿成分以及含量的不同，致使葉片在解剖結(jié)構(gòu)上表現(xiàn)出不同的適應規(guī)律。鹽脅迫下會導致葉片細胞失水使其變得更小更密集，導致葉片出現(xiàn)面積減小、葉片變短的特點，有研究指出，木槿(HibiscussyriacusLinn.)在鹽生環(huán)境中，葉片總數(shù)和葉片面積均顯著減小，其目的是減小植物葉片的蒸騰作用以降低體內(nèi)水分的損失[15]。而在解剖結(jié)構(gòu)上，中脈和機械組織變厚以便更好地支撐葉片，角質(zhì)層厚度增加進而減少葉片細胞水分的散失，同時葉脈維管束、木質(zhì)部面積增大來提高葉片吸收水分和養(yǎng)分的能力[16]。

無芒雀麥(Bromusinermis)為禾本科(Graminear)雀麥屬(Bromus)多年生植物，因其具有耐放牧、產(chǎn)量高、適口性好、營養(yǎng)價值高等優(yōu)良特性，素來就享有“禾草飼料之王”的美譽[17]，其優(yōu)異的耐鹽堿能力、以及抗旱、耐寒性使得其也在生態(tài)修復、退化草地改良方面發(fā)揮著重大作用。目前，無芒雀麥這種優(yōu)良牧草已成為歐亞大陸干旱、半干旱以及寒冷地區(qū)的重要栽培草種[18]，也是我國新疆地區(qū)牧草產(chǎn)業(yè)化的主要栽培種[19]。近年來，由于新疆畜牧業(yè)的發(fā)展以及過度放牧造成草地退化、土壤鹽堿化程度日益嚴重[20]，人們對無芒雀麥的需求不斷增加。然而，目前用于生產(chǎn)栽培和生態(tài)修復的無芒雀麥品種大都存在選育年代久遠、優(yōu)良性狀退化、雜化嚴重的問題，無法滿足生產(chǎn)栽培和生態(tài)修復的需求[21]，因此選育出優(yōu)良高產(chǎn)且抗逆性強的品種是當前亟待解決的問題。目前國內(nèi)對無芒雀麥的研究多集中在其種子生產(chǎn)和發(fā)育、遺傳多樣性、逆境脅迫下的生理生化響應，種群結(jié)構(gòu)構(gòu)建以及栽培技術(shù)優(yōu)化等方面[22]，而有關(guān)鹽脅迫對無芒雀麥葉片解剖結(jié)構(gòu)影響的研究較少。為此，本試驗以‘烏蘇一號’無芒雀麥為試驗材料，分析葉片表觀形態(tài)與解剖結(jié)構(gòu)，探究不同配比組合及濃度的鹽脅迫處理對‘烏蘇一號’幼苗的影響，以期為探明無芒雀麥葉片結(jié)構(gòu)在鹽脅迫下的適應性特征提供科學理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料來源

‘烏蘇一號’無芒雀麥(BromusinermisLeyss.‘Wusu No.1’)種子由新疆維吾爾自治區(qū)烏蘇市草原工作站提供。

1.2 試驗設(shè)計

試驗在新疆農(nóng)業(yè)大學三坪試驗基地溫棚中進行[晝夜溫度為(25±3)℃(晝)/(15±3)℃(夜)，相對濕度約為55%]，于2020年8月10日播種在高11.5 cm，頂部直徑15.7 cm、底部直徑10 cm的花盆中，每盆裝900 g營養(yǎng)土，播種深度2 cm，每盆均勻播種5粒種子，期間正常供水，待幼苗長至三葉期開始間苗至1株/盆。當幼苗長至4～5片真葉時進行鹽脅迫處理，每3 d澆灌一次鹽溶液，每次澆灌200 mL，共澆灌10次，試驗結(jié)束后測定滲出液電導率(Electrical conductivity，EC)，見圖1。試驗共設(shè)置3種混合鹽，其中A，B兩種鹽為中性鹽，C鹽為堿性鹽。按照不同的摩爾比例設(shè)置NaCl∶Na2SO4∶Na2CO3=4∶1∶0(A鹽)、NaCl∶Na2SO4∶Na2CO3=1∶4∶0(B鹽)、NaCl∶Na2SO4∶Na2CO3=1∶1∶8(C鹽)3種混合鹽[23]，每種混合鹽各設(shè)置四個不同的EC梯度：5，10，15，20ms·cm-1，以澆灌自來水(EC值為0.27 ms·cm-1)為對照組(CK)。每處理10盆，每處理設(shè)置3次重復。

圖1 土壤滲出液電導率Fig.1 Electrical conductivity of soil exudate

1.3 試驗項目與方法

葉損傷評級：5完美、4-20%損傷、3-40%損傷、2-60%損傷、1-80%損傷、0死亡[24]。

用直尺測量倒數(shù)第二片完全展開葉片的長與寬并用系數(shù)法測定其葉面積。

葉面積=葉長×葉寬×K(K=0.667)[25]

葉片解剖結(jié)構(gòu)：采用石蠟切片法觀察葉片解剖結(jié)構(gòu)[26]。于Nikon-E100光學顯微鏡下觀察并拍照。用NIS-Elements D 4.10.00軟件測定葉片厚度、中脈厚度，上下表皮厚度、角質(zhì)層厚度、花環(huán)結(jié)構(gòu)厚度、維管束直徑、木質(zhì)部面積、韌皮部面積等指標。每個處理觀察10張切片，每張切片觀察5個葉片中部視野。

1.4 數(shù)據(jù)分析

用SPSS 22.0進行數(shù)據(jù)分析，單因素方差分析各指標間的差異，最后用Graphpad prism 7.00作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 鹽脅迫對無芒雀麥幼苗葉片形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

由表1可知，葉長、葉面積、綠葉數(shù)、葉片損傷程度在不同EC值鹽處理下表現(xiàn)出不同的適應方式。EC值的增加導致了烏蘇一號無芒雀麥幼苗葉片受損程度增大，降低了單株綠葉數(shù)，且在相同EC值處理下，A，B鹽處理下的葉損傷評級均大于C鹽，但3種鹽處理對葉寬均無顯著影響。

表1 鹽脅迫對無芒雀麥幼苗葉片形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響Table 1 Effects of salt stress on leaf morphological structure of Bromus inermis seedlings

續(xù)表1

當EC≤10 ms·cm-1時，和CK相比，3種鹽處理均促進倒二葉葉長的生長，且均在EC值為10 ms·cm-1時葉片長度最大，A，B，C鹽處理分別比CK顯著增加了23.02%，31.89%，24.82%(P<0.05)。EC值為15 ms·cm-1時，A，B鹽處理下葉片長度與CK無顯著差異，此時C鹽處理的葉片出現(xiàn)枯黃死亡。EC為20 ms·cm-1時，C鹽處理地上部分完全干枯死亡，A，B鹽處理顯著抑制了無芒雀麥幼苗的生長且對葉片長度增加的抑制最大，分別較CK顯著降低了17.67%，35.08%(P<0.05)。葉面積對鹽脅迫的響應與葉長一致。

3種鹽處理下，綠葉數(shù)均表現(xiàn)為隨著EC值的升高而呈現(xiàn)不斷減少的變化趨勢。當EC值為5 ms·cm-1時，C鹽處理與CK相比無顯著差異，A,B鹽處理分別較CK顯著降低了18.25%和17.11%(P<0.05)；當EC值為10 ms·cm-1時，C鹽處理對綠葉數(shù)的抑制作用最大且較CK顯著降低了49.17%(P<0.05)，A，B鹽處理在EC為20 ms·cm-1時分別較CK顯著降低了56.25%，59.77%(P<0.05)；當EC值為5 ms·cm-1時，3種鹽處理葉損傷程度較CK無顯著差異。C鹽處理在EC值為10 ms·cm-1時基部葉片出現(xiàn)大面積枯黃，EC值為15 ms·cm-1時葉片完全枯黃；EC值為20 ms·cm-1時，A，B鹽處理葉損傷評級分別較CK顯著降低了40.60%，24.41%(P<0.05)，葉片表面出現(xiàn)大面積鹽漬癍，且葉尖開始出現(xiàn)發(fā)黃萎蔫，C鹽處理下無芒雀麥幼苗完全死亡。

2.2 鹽脅迫對無芒雀麥幼苗葉片解剖結(jié)構(gòu)的影響

由圖2所示，無芒雀麥葉片解剖結(jié)構(gòu)由表皮、葉肉和葉脈3部分組成。表皮為一層形狀不規(guī)則的橢圓狀細胞，表皮細胞表面附著一層角質(zhì)膜，葉脈之間的上表皮細胞分化為泡狀細胞嵌于葉肉組織中；葉肉細胞為不規(guī)則狀，無柵欄組織、海綿組織之分；葉脈為平行脈，由維管束和機械組織構(gòu)成，主脈較粗且維管束內(nèi)部分化出較發(fā)達的木質(zhì)部和韌皮部，具有較強的水分和營養(yǎng)物質(zhì)的運輸能力，維管束上下與表皮之間分布有發(fā)達的厚壁組織(機械組織)以增加輸導和支撐能力，維管束鞘細胞外側(cè)的葉肉細胞形成“花環(huán)型”結(jié)構(gòu)，屬于典型的C4植物。

圖2 無芒雀麥幼苗葉片解剖結(jié)構(gòu)Fig.2 Anatomical structure of leaves of Bromus inermis seedlings.注：A，中脈；B，葉尖；C，主維管束；D，葉片中部；le，下表皮；ph，韌皮部；vb，維管束；xy，木質(zhì)部；ue，上表皮；bc，泡狀細胞；kmc，花環(huán)細胞；tmv，中脈厚度；mt，機械組織。下圖同Note:A,Middle of blade;B:Leaf apex;C:Main vascular bundle;D:Middle part of leaf;le:Lower epidermis;ph:Phloem;vb:Vascular bundle;xy:Xylem;ue:Upper epidermis;bc:Bulliform cell;kmc:Kranz mesophyll cell;tmv:Thickness of middle vein;mt:Mechanical tissue. The same as below

2.2.1鹽脅迫對葉片中脈厚度和機械組織厚度的影響 由圖3和圖4可知，在A，B鹽處理下，中脈厚度的總體變化表現(xiàn)為在EC值為5 ms·cm-1時較CK顯著增加，而當EC值≥10 ms·cm-1時顯著下降，C鹽處理則隨著EC值的增加呈現(xiàn)逐步降低的趨勢。方差分析結(jié)果顯示，當EC值為5 ms·cm-1時，A，B鹽處理顯著增加了中脈厚度，分別較CK增加了7.56%，5.83%(P<0.05)，而C鹽處理較CK顯著降低了14.45%(P<0.05)；當EC值為10 ms·cm-1時，3種鹽處理均顯著降低了中脈厚度(P<0.05)，且A，C兩種鹽對中脈厚度的抑制作用明顯大于B鹽，A，B兩種鹽處理在EC值為20 ms·cm-1時對中脈厚度的抑制作用最大，分別較CK顯著降低了38.52%，32.87%(P<0.05)。

圖3 鹽脅迫對無芒雀麥幼苗葉片中脈厚度和機械組織厚度的影響Fig.3 Effects of salt stress on leaf midvein thickness and mechanical tissue thickness of Bromus inermis seedlings注：不同小寫字母表示同一指標在不同鹽處理之間差異顯著(P<0.05)，下圖同Note:different lowercase letters showed significant difference in the same index among different salt treatments (P<0.05),the same as below

圖4 鹽脅迫對無芒雀麥幼苗葉片中脈結(jié)構(gòu)的影響Fig.4 Effects of salt stress on leaf midrib structure of Bromus inermis seedlings注:大寫字母表示鹽類型，數(shù)字表示EC值Note:Capital letters indicate salt type,numbers indicate EC value

方差分析結(jié)果顯示，當EC值為5 ms·cm-1時，3種鹽處理下的機械組織厚度與CK相比無顯著差異；當EC值為10 ms·cm-1時，A鹽處理較CK顯著降低了12.89%(P<0.05)，C鹽處理與CK相比無顯著差異。因此在此EC下，B鹽處理對機械組織厚度的抑制作用小于另外兩種鹽處理。隨著電導率的升高，機械組織厚度顯著降低，A和B兩種鹽在20 ms·cm-1時分別較對照組顯著降低了35.18%和25.18%(P<0.05)。

2.2.2鹽脅迫對無芒雀麥幼苗葉片表皮細胞厚度的影響 所有鹽脅迫處理均會引起植物葉片的上、下表皮細胞厚度下降(圖5)。A，B兩種鹽處理下，上、下表皮細胞厚度隨EC值的增加呈現(xiàn)顯著降低的變化趨勢。當EC值為10 ms·cm-1時，葉片上下表皮細胞厚度均達到最低值，A鹽處理下的上、下表皮細胞厚度分別較CK降低了46.18%和43.77%，B鹽處理下的上、下表皮細胞厚度分別較CK降低了28.25%和28.10%。C鹽處理下，EC值由5 ms·cm-1增加到10 ms·cm-1時，上、下表皮細胞厚度呈現(xiàn)降低趨勢，當EC≥15 ms·cm-1時，葉片完全干枯死亡。當A，B兩種鹽處理EC值相同時，B鹽處理下的上、下表皮細胞厚度均高于A鹽，且在EC值為20 ms·cm-1時，A鹽處理下的上、下表皮細胞較B鹽處理分別顯著降低了7.94%，12.32%(P<0.05)，說明EC值為20 ms·cm-1時A鹽對葉片上、下表皮細胞厚度的抑制作用強于B鹽。

圖5 鹽脅迫對無芒雀麥幼苗葉片表皮細胞的影響Fig.5 Effects of salt stress on leaf epidermal cells of Bromus inermis seedlings

2.2.3鹽脅迫對無芒雀麥幼苗葉片表皮角質(zhì)層厚度的影響 上、下表皮角質(zhì)層厚度隨著EC值的升高呈現(xiàn)先增后降的變化趨勢(圖6)。所有鹽處理下，上表皮角質(zhì)層厚度均高于CK。當EC值為5 ms·cm-1時，三種鹽脅迫下的上表皮角質(zhì)層厚度顯著大于CK且促進作用顯著高于其他EC值處理，分別較CK增加了45.95%，67.95%，79.54%(P<0.05)，當EC值>5 ms·cm-1時，3種鹽處理隨著EC的增加而顯著降低。

圖6 鹽脅迫對無芒雀麥幼苗葉片上、下表皮角質(zhì)層厚度的影響Fig.6 Effects of salt stress on cuticle thickness of upper and lower epidermis of Bromus inermis seedlings

下表皮角質(zhì)層厚度對EC的響應與上角質(zhì)層相同。在EC值為5 ms·cm-1時，B，C鹽處理顯著促進下表皮角質(zhì)層厚度的增加，分別較CK顯著增加了22.19%，21.90%(P<0.05)，A鹽處理較CK相比無顯著差異。在EC值為10 ms·cm-1時，A鹽處理較CK增加了14.12%，B鹽處理開始抑制下角質(zhì)層的增長，C鹽處理在EC值為5和10 ms·cm-1這兩個處理間并無顯著性差異。當EC值≥15 ms·cm-1時，A，B鹽處理開始抑制下表皮角質(zhì)層厚度的增長且EC值為20 ms·cm-1時抑制作用最強，其中B鹽處理較CK顯著降低了12.10%(P<0.05)，此時B鹽處理明顯抑制了下表皮角質(zhì)層厚度，A鹽處理較CK無顯著差異，說明B鹽處理對下表皮角質(zhì)層的抑制作用大于A鹽處理，并且鹽脅迫對下表皮角質(zhì)層厚度的抑制作用高于上表皮角質(zhì)層。

2.2.4鹽脅迫對無芒雀麥幼苗葉片維管束組織的影響 在3種鹽處理下，主脈維管束直徑、花環(huán)組織厚度、木質(zhì)部面積隨著EC值的增加呈現(xiàn)逐步降低的變化趨勢(圖7)，韌皮部面積隨著EC值的增加呈現(xiàn)低EC值顯著升高、高EC值顯著降低的變化趨勢。

圖7 鹽脅迫對無芒雀麥幼苗葉片維管束組織的影響Fig.7 Effects of salt stress on leaf vascular tissue of Bromus inermis seedlings

EC值為5 ms·cm-1時，A，C鹽處理下的主維管束直徑較CK分別顯著降低了10.54%，9.34%(P<0.05)，B鹽處理與CK并無顯著性差異；當EC值≥10 ms·cm-1時，3種鹽處理較CK均顯著降低(P<0.05)；在EC值為20 ms·cm-1時，A，B兩種鹽處理下的主維管束直徑受抑制程度顯著高于其他EC值處理，分別較CK顯著降低了25.13%和21.78%(P<0.05)。

在EC值為5 ms·cm-1時，3種鹽處理下的植物葉片花環(huán)細胞厚度與CK相比均無顯著差異，在EC值為10 ms·cm-1時，C鹽處理與CK相比無顯著差異，但A，B鹽處理顯著抑制了花環(huán)細胞厚度，分別較CK顯著降低了28.57%和24.55%(P<0.05)。A，B鹽處理下花環(huán)細胞厚度在EC為20 ms·cm-1時受抑制程度顯著高于其他EC值處理，分別較CK顯著降低了39.39%和30.35%(P<0.05)，當3種鹽處理EC值相同時，A鹽處理下的花環(huán)細胞厚度均小于其他兩種鹽處理。

A，B鹽處理在所有EC值下的木質(zhì)部面積較CK均顯著降低(P<0.05)。EC值為5 ms·cm-1時，A，B鹽處理下的木質(zhì)部面積與CK相比顯著降低了23.60%和21.81%(P<0.05)，C鹽處理與CK相比無顯著差異。A，B鹽處理在EC值為20 ms·cm-1時受到顯著抑制且分別較CK顯著降低了39.39%，30.35%(P<0.05)。

在EC值為5 ms·cm-1時，A鹽處理下的韌皮部面積與CK相比無顯著差異，在B，C鹽處理時受到顯著促進作用且分別較CK顯著增加了24.31%，30.39%(P<0.05)。A鹽處理對韌皮部面積的促進作用顯著高于B，C兩種鹽，較CK顯著增加了22.66%(P<0.05)。在EC值為20 ms·cm-1時，A鹽處理與CK并無顯著差異，B鹽處理對韌皮部面積的抑制作用最強，較CK顯著降低了39.24%(P<0.05)。

3 討論

3.1 鹽脅迫對無芒雀麥幼苗葉片形態(tài)的影響

鹽脅迫主要是通過滲透脅迫和離子毒害作用來影響植物的生長發(fā)育，使植物在外部形態(tài)上表現(xiàn)出受害癥狀。葉是植物進行同化功能的器官，也是對周圍環(huán)境變化反映最直接的器官[9]。葉片在鹽脅迫下會發(fā)生失水卷曲、枯黃、表面出現(xiàn)鹽癍等鹽害癥狀，通過觀測鹽害癥狀程度的大小，可直觀的評定植物耐鹽能力的強弱[27]。本試驗結(jié)果顯示，無芒雀麥幼苗葉片鹽害損傷程度隨EC值的增加而逐漸加重，且葉片在高EC值下出現(xiàn)鹽害現(xiàn)象的時間早于低EC值，在高EC值下，堿性鹽C對葉片的傷害明顯高于中性鹽A和B，說明堿性環(huán)境會加劇鹽離子對植物的脅迫作用，這與章英才的研究結(jié)果一致[28]。

植物為了適應一定程度的鹽堿環(huán)境，通常葉片的形態(tài)特征會發(fā)生改變，往往會通過葉片卷曲或減小葉片長度的方式來適當減少葉面積，進而降低植物葉片的蒸騰速率[29]。本研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，低EC值會促進葉片長度增加以增加對光能的捕獲，在高EC值下，葉片會選擇葉長變短的生存方式，從而造成葉面積的減少進而降低植物葉片的蒸騰速率。

本研究發(fā)現(xiàn)，無芒雀麥單株綠葉數(shù)受到鹽脅迫的影響，且單株綠葉數(shù)隨著EC值的升高顯著降低。在EC值為10 ms·cm-1時，C鹽處理比A，B兩種中性鹽更顯著減少了單株綠葉數(shù)，說明在同等EC值鹽脅迫下，堿性鹽比中性鹽對植物的損傷更大，此時無芒雀麥不僅受到離子毒害和滲透脅迫的影響[30]，還受到pH值對植株生長的抑制作用[31]。植物在鹽堿生境中，禾本科植物主要通過抑制植株生物量的增加和分蘗能力從而影響單株綠葉數(shù)[32]。鹽脅迫不僅會加速植物提前完成物候期，導致葉片早衰，還會因為滲透脅迫使葉片失水導致枯萎死亡[33]，本研究發(fā)現(xiàn)高EC值下無芒雀麥葉片損傷程度加大，枯黃率較CK顯著增加。

3.2 鹽脅迫對無芒雀麥葉片解剖結(jié)構(gòu)的影響

葉片解剖結(jié)構(gòu)可以體現(xiàn)植物在逆境環(huán)境下所選擇的適應性類型，是探究植物生態(tài)適應性的基礎(chǔ)[1,34-35]。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，植物的耐鹽性與葉片解剖結(jié)構(gòu)緊密相關(guān)[36-37]。李芳蘭[38]等人認為，在鹽脅迫下，葉片細胞直徑和細胞間隙減小，從而使表皮細胞、中脈厚度減小。張霞[39]發(fā)現(xiàn)象草(PennisetumpurpureumSchumach)葉片組織細胞在高濃度鹽生環(huán)境中受到滲透脅迫而失水變小，導致細胞排列稀疏以及葉片厚度減小。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在EC值為5 ms·cm-1時，A，B鹽處理下的中脈厚度較CK顯著增加，說明低EC值鹽脅迫會促進葉片生長發(fā)育。當EC值>5 ms·cm-1時，中脈厚度隨EC值的增加而逐步降低，于EC值為20 ms·cm-1時受到顯著抑制，且抑制程度顯著大于其他EC值處理。在相同EC值的鹽脅迫下，B鹽處理下的葉片中脈厚度均顯著大于A鹽處理，說明A鹽的抑制作用明顯高于B鹽。

葉片組織在應對鹽脅迫時有較強的調(diào)節(jié)和適應能力，通常會調(diào)節(jié)角質(zhì)層和葉片厚度來適應輕度鹽脅迫環(huán)境，進而保護植物，這種變化在一定程度上減少了葉片水分的蒸騰，提高了葉片的保水性，是植物的一種適應性的反應[40]。角質(zhì)層主要能夠減少葉片水分流失而達到一定程度上的保水作用，因此，角質(zhì)層越厚，植物的保水能力和抗性越強[41]。鹽脅迫可能會誘導細胞加速細胞壁物質(zhì)如角質(zhì)、木栓質(zhì)、木質(zhì)素等的合成，從而增加角質(zhì)層厚度[42]。本研究結(jié)果表明：3種鹽處理在所有EC值時均能促進無芒雀麥葉片上表皮角質(zhì)層厚度的增加，說明無芒雀麥幼苗在鹽脅迫下會通過增加角質(zhì)層厚度來減小蒸騰作用，以避免在鹽脅迫壞境下葉片內(nèi)水分的過度散失。在EC值為5 ms·cm-1時，3種鹽處理的上表皮角質(zhì)層厚度均達到最高值，并且C鹽處理顯著高于A鹽處理；當EC值>5 ms·cm-1時，EC值的增加降低了上表皮角質(zhì)層厚度，這可能由于在高EC值下，幼苗生長發(fā)育受到顯著抑制且葉片上表皮細胞活性降低，導致合成分泌脂類和碳水化合物的能力降低，進而影響角質(zhì)層的生成[43]。

植物葉片中有發(fā)達的維管束組織和維管束鞘細胞。維管束鞘細胞是光合作用暗反應發(fā)生、吸收合成有效營養(yǎng)物質(zhì)的主要場所[44]，同時維管束鞘細胞與葉肉細胞間存在大量胞間連絲，有利于兩者之間的物質(zhì)交換和運輸，可保證植物水分和營養(yǎng)物質(zhì)的正常輸運以及保水、貯水功能的良好運行[45]。趙海燕等[46]通過NaCl脅迫海島棉(GossypiumbarbadenseL.)試驗發(fā)現(xiàn)，與對照相比，維管束組織面積在NaCl處理下隨處理時間的增加而逐步變小。而本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在3種鹽處理下，主維管束直徑、花環(huán)細胞厚度、木質(zhì)部面積均隨著EC的增加而逐步降低。說明鹽脅迫會抑制葉片維管束組織的發(fā)育，且抑制程度與脅迫時間以及脅迫程度顯著相關(guān)。陳旭等[47]通過研究不同鹽漬土生境下的樹種葉片解剖結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，輕度鹽堿下的樹種各項葉脈解剖結(jié)構(gòu)指標均最大，而重度鹽堿生境下的樹種葉片木質(zhì)部、韌皮部面積均最小，說明在低鹽脅迫下，有利于相應植物葉片的生長發(fā)育，促進葉片發(fā)育出更大的中脈厚度和較發(fā)達的維管束組織。洪文君等[48]研究發(fā)現(xiàn)，當鹽濃度高于0.5%時，竹柳(Salixspp.)幼苗根部輸導組織細胞結(jié)構(gòu)不正常，木質(zhì)部組織生長發(fā)育受限導致竹柳吸收、轉(zhuǎn)運、儲存養(yǎng)分和水分的能力降低。本研究也發(fā)現(xiàn)，當EC值為5 ms·cm-1時，B，C鹽處理下顯著增加韌皮部面積，且在EC值為20 ms·cm-1時顯著抑制了維管束組織的發(fā)育，此時無芒雀麥幼苗葉片各項葉脈解剖結(jié)構(gòu)指標均低于其他EC值處理。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，‘烏蘇一號’無芒雀麥幼苗葉片形態(tài)特征隨EC值的變化而發(fā)生較大變化。低EC值會促進葉片長度增加進而增加對光能的捕獲，在高EC值下葉片變短；葉片在高EC值下出現(xiàn)鹽害現(xiàn)象早于低EC值，且高EC值下葉片損傷程度加大；鹽脅迫會顯著增加上表皮角質(zhì)層厚度以減少蒸騰速率，且鹽脅迫對上表皮角質(zhì)層的抑制作用大于對下表皮角質(zhì)層；EC值為5 ms·cm-1時會促進韌皮部生長以增加對養(yǎng)分的吸收能力，EC值為20 ms·cm-1時顯著抑制維管束組織的發(fā)育。綜上所述，EC值<10 ms·cm-1時，堿性鹽比中性鹽更促進無芒雀麥葉片各項指標的增長，當EC值>10 ms·cm-1時，堿性鹽對幼苗的抑制作用顯著大于中性鹽。