王菊萍

摘要 為了解不同季節(jié)祁連圓柏葉片內(nèi)含物差異，測定了同一植株不同季節(jié)葉片中不同色素含量、酶活性和可溶性有機(jī)物的含量。結(jié)果表明：葉片內(nèi)含物葉綠素、總酚含量由春季到冬季先升高后降低，類胡蘿卜素、花色苷、類黃酮含量、PAL酶、POD酶活性、可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)含量由春季到冬季先降低后升高。這些內(nèi)含物的季節(jié)性變化使祁連圓柏葉片呈現(xiàn)出不同的綠色，提高了葉片適應(yīng)低溫的能力。

關(guān)鍵詞 祁連圓柏;內(nèi)含物;季節(jié);葉片

中圖分類號：S791.44文獻(xiàn)標(biāo)識碼：Adoi：10.13601/j.issn.1005-5215.2022.04.010

Seasonal Variation of Leaf Components and Adaptability to Environment of Sabina przewalskii

Wang Juping

（Gucheng Nature Conservation Station of Gansu Qilianshan National Nature Reserve Management and Protection Center，Zhangye 733211，Gansu）

AbstractIn order to clarify the leaves inclusion contents difference of Sabina przewalskii in different seasons，the pigment contents，enzyme activity and soluble organic matter contents of leaves of the same plant were measured in different seasons. The result showed that the chlorophyll，total phenol contents were increased then decreased from spring to winter;the carotenoid，anthocyanin and flavonoid contents，PAL and POD activities，soluble sugar and protein contents were decreased first then increased from spring to winter. The seasonal change of inclusion contents makes S.? przewalskii leaves showing the different green colors，and increases the adaptability of leaves to low temperature.

Key words? Sabina przewalskii Kom;inclusion content;change;season;leaf

隨著我國生態(tài)建設(shè)力度的加大和園林城市建設(shè)的高質(zhì)量發(fā)展，四季常綠樹種越來越多地被應(yīng)用于各類綠化工程中，并在樹種配置上占據(jù)著重要的地位。常綠樹種葉片的色澤和適應(yīng)能力隨著光照、溫度和水分的變化呈季節(jié)性變化。葉色變化主要由葉綠素、類胡蘿卜素等色素含量和比例的變化引起;抗寒等適應(yīng)能力與葉片內(nèi)可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)含量及相關(guān)酶類的活性相關(guān)[1，2]。常綠樹種葉片內(nèi)含物的季節(jié)性動態(tài)變化是為了適應(yīng)不同季節(jié)生長環(huán)境的變化，是植物適應(yīng)環(huán)境能力的物質(zhì)基礎(chǔ)。

祁連圓柏（Sabina przewalskii ）為圓柏屬小喬木，是我國特有種，主要分布在青藏高原東北部和黃土高原西部邊緣地帶，在祁連山地區(qū)主要分布于2 600～3 400 m陽坡地帶，是祁連山天然林繼青海云杉（Picea crassifolia）之后的第二大建群樹種。由于其樹形美觀、四季常綠，耐寒、耐旱、耐瘠薄，被廣泛應(yīng)用到各類國土綠化工程中。目前，對祁連圓柏的研究主要集中在地理分布、引種繁殖、病蟲害防治等方面[3-5]，對其葉色、抗寒能力的季節(jié)性變化和適應(yīng)性研究尚未見報道。為了了解不同季節(jié)祁連圓柏葉片內(nèi)含物差異，本試驗以同一株上同一部位不同季節(jié)的葉片為試材，對比研究了不同季節(jié)葉片內(nèi)含物色素、酶活性和可溶性有機(jī)物含量的變化。

1 材料與方法

1.1 試驗地概況

樣品采于甘肅省天祝藏族自治縣華藏寺鎮(zhèn)城區(qū)，該區(qū)位于甘肅省中部，祁連山東段北麓，海拔2 450 m，大陸性高原季風(fēng)氣候，年均氣溫1.8 ℃，無霜期90～120 d，年降雨量400～500 mm，60%降雨分布在6—9月，雨熱同季。夏季氣溫冷涼，短暫，冬季寒冷漫長，是典型的高原高寒冷涼區(qū)。近年來，天祝藏族自治縣針對低海拔地區(qū)常見綠化樹種無法安全越冬等問題，就近引進(jìn)鄉(xiāng)土樹種祁連圓柏作為城區(qū)主栽樹種，通過孤植、片植等栽植方式和整形修剪措施，建成了以祁連圓柏球、祁連圓柏綠籬和祁連圓柏立體造型為景觀的公園多處，極大美化了城區(qū)環(huán)境，提高了綠化質(zhì)量。

1.2 試驗材料

2021年，在天祝藏族自治縣華藏寺鎮(zhèn)城區(qū)團(tuán)結(jié)路綠化帶隨機(jī)選取10年生祁連圓柏自然生長植株，掛牌標(biāo)記，春季（2月中旬）、夏季（5月中旬）、秋季（8月中旬）和冬季（11月中旬）分別采集同一植株同一著生部位葉齡相同的葉片。葉片采集后用冰盒帶回試驗室，用蒸餾水沖洗葉片外表，用濾紙吸干水珠后，用液氮速凍，置于-80 ℃冰箱保存待測，3次重復(fù)。

1.3 測定方法

葉綠素和類胡蘿卜素含量參照仝月澳等[6]的方法測定，花色苷、類黃酮、總酚含量參照Pirie等[7]的方法測定，苯丙氨酸解氨酶（PAL）和過氧化物酶（POD）活性參照高俊鳳[8]的方法測定，可溶性糖和可溶性蛋白質(zhì)含量參照朱廣廉等[9]的方法測定。試驗數(shù)據(jù)采用Excel2003、DPS6.01軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。073338A2-ABD6-4819-8ACD-7AE2FED2902A

2 結(jié)果與分析

2.1 不同季節(jié)葉片葉綠素和類胡蘿卜素含量變化

圖1不同季節(jié)葉片葉綠素含量葉綠素是植物呈現(xiàn)綠色的主要色素類物質(zhì)，類胡蘿卜素是植物呈現(xiàn)黃色、橙紅色或紅色的主要色素類物質(zhì)。由圖1可知，祁連圓柏葉片葉綠素含量由春季到冬季先升高后降低，秋季葉綠素含量最高，為9.62 mg·g^-1，較春季最低值3.17 mg·g^-1提高了200.32%。由圖2可知，葉片類胡蘿卜素含量由春季到冬季先降低后升高，秋季類胡蘿卜素含量最低，為0.14 mg·g^-1，較春季最高值0.25 mg·g^-1降低了44.00%。不同季節(jié)葉片葉綠素和類胡蘿卜素含量差異均達(dá)到極顯著水平（P<0.01）。

2.2 不同季節(jié)葉片花色苷、類黃酮和總酚含量變化

花色苷是一類水溶性植物色素，屬于類黃酮的一個亞類，花色苷具有特性很強(qiáng)的C₆-C₃-C₆骨架和與其他天然黃酮類化合物相同的生物合成來源[10]?；ㄉ詹煌亢捅壤龢?gòu)成了植物器官五彩繽紛的外觀色彩[11]。

由圖3、圖4可知，祁連圓柏葉片花色苷和類黃酮含量由春季到冬季先降低后升高，秋季花色苷和類黃酮含量均最低，分別為6.48 U·g^-1和39.16 U·g^-1，花色苷較春季最高值15.02 U·g^-1降低了56.86%，類黃酮較冬季最高值45.62 U·g^-1降低了14.16%。由圖5可知，總酚含量由春季到冬季先升高后降低，秋季總酚含量最高，為38.64 U·g^-1，較春季最低值36.75 U·g^-1降低了4.89%。不同季節(jié)葉片葉花色苷含量差異均達(dá)到極顯著水平（P<0.01），類黃酮含量差異均達(dá)到顯著水平（P<0.05），但葉片總酚含量差異未達(dá)到顯著水平（P>0.05）。

2.3 不同季節(jié)葉片PAL和POD酶活性變化

苯丙氨酸解氨酶（PAL）催化花色苷合成前體物質(zhì)L-苯丙氨酸解氨酸解氨生成反式肉桂酸，是催化花色苷生物合成反應(yīng)的第一個酶[12]。過氧化物酶（POD）是以血紅素為輔基的氧化酶，參與多種代謝活動，并能氧化成酚類[13]。由圖6和圖7可知，祁連圓柏葉片PAL酶活性和POD酶活性由春季到冬季先降低后升高，秋季PAL酶活性和POD酶活性均最低，分別為64.29和95.44 U·g^-1，較春季PAL酶活性最高值188.82 U·g^-1和POD酶活性最高值226.53 U·g^-1分別降低了65.95%和57.87%。不同季節(jié)葉片PAL活性和POD活性差異均達(dá)到極顯著水平（P<0.01）。

2.4 不同季節(jié)葉片可溶性糖和可溶性蛋白質(zhì)含量變化可溶性糖和可溶性蛋白質(zhì)含量是植物體內(nèi)重要的有機(jī)物質(zhì)，是合成其他有機(jī)物質(zhì)不可缺少的成分，也是重要的細(xì)胞滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)之一[14]。

由圖8、圖9可知，祁連圓柏葉片可溶性糖和可溶性蛋白質(zhì)含量由春季到冬季先降低后升高，秋季可溶性糖含量和可溶性蛋白質(zhì)含量均最低，分別為0.032%和83.85 mg·g^-1，較春季可溶性糖含量最高值0.045%和可溶性蛋白質(zhì)含量最高值91.38 mg·g^-1分別降低了28.89%和8.24%。不同季節(jié)葉片可溶性糖含量差異達(dá)到極顯著水平（P<0.01），不同季節(jié)葉片可溶性蛋白質(zhì)含量春季、冬季和夏季、秋季之間均達(dá)到極顯著水平（P<0.01），夏季和秋季之間均未達(dá)到顯著水平（P>0.05）。

3 結(jié)論與討論

本試驗結(jié)果表明，祁連山東段北麓祁連圓柏葉片內(nèi)含物葉綠素、總酚含量由春季到冬季先升高后降低，類胡蘿卜素、花色苷和類黃酮含量，PAL酶和POD酶活性，可溶性糖和可溶性蛋白質(zhì)含量由春季到冬季先降低后升高。祁連圓柏葉片葉色隨著內(nèi)含物色素含量的變化，春季呈紫綠逐漸轉(zhuǎn)為翠綠，夏季轉(zhuǎn)為深綠，冬季來臨時逐漸轉(zhuǎn)為黃綠。

在所有影響色素合成的外部因子中，光照是最重要的，它可以激活光敏色素，促進(jìn)酶的合成或活化，通過光合作用提供反應(yīng)產(chǎn)物，促進(jìn)花色苷的合成[15]。溫度是影響花色苷合成的又一重要因子，生產(chǎn)實踐中發(fā)現(xiàn)，葡萄著色期溫度高的年份，即使果實已經(jīng)成熟，但因可溶性固形物含量很高，果實著色困難，嚴(yán)重影響果實的商品性[16]。水分通過不同形態(tài)、數(shù)量和持續(xù)時間的變化影響果實著色。蘇淑釵研究發(fā)現(xiàn)，一般干旱地上生長的葡萄著色較好[17]。植物葉片呈現(xiàn)的顏色是不同色素含量和比例的綜合反映。采樣因海拔高、氣溫冷涼，冬季氣溫更低，光照變短，土壤結(jié)冰，水分供應(yīng)受限等，在春季和冬季葉綠素含量降低，花色苷等其他色素含量提高，葉片呈現(xiàn)紫綠或黃綠;相反，在春季和夏季，氣溫較高，光照充足，葉片葉綠素含量提高，葉片呈現(xiàn)翠綠或深綠。

常綠樹種冬季葉片不脫落，為了適應(yīng)低溫環(huán)境，防止低溫冷害造成的生物膜透性改變和凍害造成的組織結(jié)冰，需增加細(xì)胞內(nèi)溶質(zhì)降低滲透勢，細(xì)胞自身合成的可溶性糖和可溶性蛋白質(zhì)是重要的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)之一[18]。PAL酶在催化合成水溶性花色苷類色素中有重要作用，可能除影響花色苷的含量外，也影響細(xì)胞滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的含量。POD酶參與多種物質(zhì)的代謝活動，也可能從氧化反應(yīng)層面影響調(diào)節(jié)物質(zhì)的合成。對祁連圓柏葉片內(nèi)色素、可溶性糖、可溶性蛋白質(zhì)含量的季節(jié)性變化研究，為今后抗寒引種、提高植物抗寒能力和通過栽培管理調(diào)控植物葉色、提高景觀效果等方面都有一定指導(dǎo)意義。

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