史瑋

213300 溧陽(yáng)市人民醫(yī)院輸血科，江蘇溧陽(yáng)

血型鑒定是各醫(yī)院輸血科都需開(kāi)展的一項(xiàng)常規(guī)工作，為安全輸血提供一定參考。以往對(duì)輸血前血型鑒定常采用傳統(tǒng)的手工方法，包括玻片法和試管法，其操作簡(jiǎn)單方便，但靈敏度差，且操作難以規(guī)范化，樣品必須人工核對(duì)，容易出現(xiàn)人為錯(cuò)誤[1-2]。此外，結(jié)果無(wú)法保存，具有即時(shí)性。隨著醫(yī)療科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，全自動(dòng)血型分析系統(tǒng)的出現(xiàn)有效預(yù)防并減少了如讀取樣本條碼、加樣、分配試劑、震蕩混勻、檢測(cè)時(shí)間及結(jié)果判定等過(guò)程中出現(xiàn)的偏差，操作變得更規(guī)范、更簡(jiǎn)便，重復(fù)性好、準(zhǔn)確率高，結(jié)果更易于保存，人為影響因素減少[3-4]。本文探討了ORTHO Auto Vue Innova全自動(dòng)血型儀在血型檢測(cè)中的應(yīng)用，現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法

選取2020年1月-5月溧陽(yáng)市人民醫(yī)院輸血科的200例患者血型樣本，男105例，女95例；年齡24～49歲，平均(38.62±6.17)歲；體重指數(shù)18.03～24.69 kg/m2，平均(21.04±1.67)kg/m2；文化程度：小學(xué)及以下79例，初高中80 例，大學(xué)及以上41 例，依次選用儀器法、玻片法與試管法進(jìn)行血型檢測(cè)。

方法：①玻片法：載玻片的雙側(cè)記為A 和B 點(diǎn)，分別滴入1 滴標(biāo)準(zhǔn)已知血清。吸取檢測(cè)樣本1～2 滴，滴在A 和B 中，等待2～5 min，記錄是否凝集；20～30 min 根據(jù)凝集反應(yīng)來(lái)判定血型[5]。同時(shí)計(jì)時(shí)。②試管法：將1 mL 生理鹽水與待測(cè)樣本混合、混勻，形成5%的紅細(xì)胞懸液；標(biāo)記2 根試管(A 和B)；分別滴入已知標(biāo)準(zhǔn)血清與5%的紅細(xì)胞懸液1～2滴，離心機(jī)上離心1 min(1 000 r/min)，觀察是否有沉淀物形成及狀態(tài)[6]；同時(shí)計(jì)時(shí)。③儀器法：采用美國(guó)強(qiáng)生ORTHO Auto Vue Innova全自動(dòng)血型儀，ABO 正反定型檢測(cè)玻璃微珠卡，單克隆抗A 抗B 標(biāo)準(zhǔn)血清(長(zhǎng)春博德生物)，反定型3%標(biāo)準(zhǔn)A 和B 細(xì)胞本室自配。將待測(cè)樣本以900～1000 g離心5 min，觀察是否發(fā)生凝集反應(yīng)，同時(shí)計(jì)時(shí)。

評(píng)價(jià)指標(biāo)：①三種檢測(cè)方法最終結(jié)果比較：玻片法、試管法及儀器法血型正定型最終結(jié)果與一致性比較，指標(biāo)為A型、B型、O型及AB型；②三種檢測(cè)方法血型鑒定所用時(shí)間比較：玻片法、試管法及儀器法共用時(shí)間、平均時(shí)間比較；③無(wú)法正確判讀結(jié)果統(tǒng)計(jì)：統(tǒng)計(jì)原因，分析處理措施，原因包括正反定型不一致、反定抗體弱、纖維蛋白干擾、冷抗體、儀器結(jié)果異常、溶血或黃疸反應(yīng)、反應(yīng)孔為空、找不到反應(yīng)孔、細(xì)胞過(guò)多或細(xì)胞過(guò)少。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：數(shù)據(jù)均用SPSS 19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件予以處理。計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示，比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以(±s)表示，比較采用t檢驗(yàn)。一致性檢驗(yàn)行Kappa 檢驗(yàn)，Kappa≥0.75 表明高度一致，P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié)果

三種檢測(cè)方法結(jié)果一致性比較：對(duì)200 例血型標(biāo)本檢測(cè)，三種方法Kappa=1.0(Kappa＞0.75)，表明上述檢測(cè)高度一致，見(jiàn)表1。

表1 三種檢測(cè)方法結(jié)果一致性比較

三種檢測(cè)方法血型鑒定所用時(shí)間比較：儀器法血型鑒定試驗(yàn)中檢測(cè)200例樣本的共用時(shí)間和平均時(shí)間少于玻片法和試管法，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表2。

表2 三種檢測(cè)方法血型鑒定所用時(shí)間比較(±s，min)

表2 三種檢測(cè)方法血型鑒定所用時(shí)間比較(±s，min)

注：與儀器法比較，*P＜0.05。

方法n共用時(shí)間平均時(shí)間玻片法200284*2.75±0.26*試管法200302*3.14±0.36*儀器法2001521.45±0.19

儀器無(wú)法正確判讀統(tǒng)計(jì)結(jié)果：200 例患者儀器法一次性正確判讀率97.00%(194/200)。無(wú)法正確判讀結(jié)果原因及處理措施，詳見(jiàn)表3。

表3 儀器無(wú)法正確判讀結(jié)果統(tǒng)計(jì)

討論

本研究三種檢測(cè)方法的結(jié)果基本一致，表明全自動(dòng)血型儀檢測(cè)是一項(xiàng)有效的血型鑒定措施。200 例患者經(jīng)儀器法檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)一次性正確判讀率為97.00%(194/200)。本研究中強(qiáng)生ORTHO AutoVue Innova全自動(dòng)血型及配血分析系統(tǒng)采用玻璃珠柱凝集技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了檢測(cè)過(guò)程的標(biāo)準(zhǔn)化、自動(dòng)化，應(yīng)用微柱凝膠檢測(cè)卡，從加樣、離心、紅細(xì)胞懸液配制到檢測(cè)卡孵育、結(jié)果及保存?zhèn)鬏斁鶕?jù)預(yù)設(shè)程序完成。其缺點(diǎn)是檢測(cè)原理及操作十分復(fù)雜，對(duì)操作人員要求較高，需要定期保養(yǎng)和維護(hù)[7]。因此，筆者根據(jù)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)出以下幾點(diǎn)ORTHO Auto Vue Innova全自動(dòng)血型儀的操作要點(diǎn)：①血型標(biāo)本不可有凝塊，嚴(yán)重溶血的標(biāo)本不能上機(jī)檢測(cè)；②每3 d 更換1 次自配用的反定型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞，反定型細(xì)胞懸液的細(xì)胞濃度為3%，不能過(guò)濃或過(guò)淡，否則儀器會(huì)提示結(jié)果異常；③血漿量必須＞0.5 mL；④建議執(zhí)行雙人核對(duì)制度，觀察每個(gè)結(jié)果，杜絕機(jī)械誤差或由實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)傳輸誤差引起的血型報(bào)告錯(cuò)誤，進(jìn)一步提高檢測(cè)精確度。

ORTHO Auto Vue Innova全自動(dòng)血型儀通過(guò)其內(nèi)設(shè)的質(zhì)控監(jiān)測(cè)系統(tǒng)監(jiān)測(cè)假凝集的發(fā)生，提高了實(shí)驗(yàn)的特異性，對(duì)亞型、弱抗原、弱抗體的檢出敏感度高于傳統(tǒng)的試管法。血型卡的應(yīng)用實(shí)現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)微量化。此外，通過(guò)對(duì)樣本條碼的雙向識(shí)別，消除了人為因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。通過(guò)與實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)的連接，將實(shí)驗(yàn)結(jié)果自動(dòng)準(zhǔn)確地傳輸?shù)较鄳?yīng)的條形碼上，節(jié)省了試劑成本和人力資源，盡可能地確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確度[8-9]。

由于儀器法血型樣本需要經(jīng)過(guò)離心預(yù)處理，在急診情況下，玻片法具有操作簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)有效的特點(diǎn)，與儀器法比，其可以顯著減少檢測(cè)準(zhǔn)備時(shí)間。然而玻片法檢測(cè)結(jié)果極易受到多種因素的影響，包括人為因素、儀器及操作，因此在進(jìn)行輸血血型鑒定前，醫(yī)學(xué)界多選擇試管法進(jìn)行正反定型[10]。試管法是一種十分有效且安全的傳統(tǒng)血型鑒定方式，有助于保證血型鑒定的高效性。本研究結(jié)果顯示，儀器法血型鑒定試驗(yàn)中，檢測(cè)200 例樣本的共用時(shí)間和平均時(shí)間均明顯短于玻片法和試管法。試管法檢驗(yàn)用時(shí)較長(zhǎng)，操作復(fù)雜，需檢驗(yàn)科工作人員在各個(gè)環(huán)節(jié)加以控制，耗時(shí)耗力，當(dāng)有大量檢測(cè)樣本時(shí)有一定局限性。相反全自動(dòng)血型分析儀用時(shí)明顯少于手工法，證實(shí)儀器法自動(dòng)化的優(yōu)點(diǎn)。全自動(dòng)血型分析儀綜合玻片法和試管法的優(yōu)點(diǎn)，減少人為因素的影響，提高了檢出弱抗體的靈敏度[11-12]。在此前提下，ORTHO Auto Vue Innova全自動(dòng)血型分析儀更加規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化，適用于大批量標(biāo)本的血型檢測(cè)，減少了操作時(shí)間，且實(shí)驗(yàn)結(jié)果可自主傳輸，明顯提高了檢測(cè)效率。本研究總結(jié)全自動(dòng)血型分析儀的優(yōu)缺點(diǎn)，為臨床血型鑒定提供了指導(dǎo)，但本研究納入的血標(biāo)本量有限，分析不夠全面，仍需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本數(shù)研究。

綜上所述，ORTHO Auto Vue Innova全自動(dòng)血型儀檢測(cè)與傳統(tǒng)經(jīng)典手工法的一致性高，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，且實(shí)現(xiàn)了規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)操作，人為因素的影響明顯降低，可以長(zhǎng)期保存檢測(cè)結(jié)果，有利于后期查詢和醫(yī)療舉證。