池永寬，劉旭光，熊康寧*，肖 華，陳 滸

(1.貴州師范大學(xué) 喀斯特研究院/國家喀斯特石漠化防治工程技術(shù)研究中心, 貴州 貴陽 550001; 2.貴州省喀斯特山地生態(tài)環(huán)境國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地, 貴州 貴陽 550001)

肉牛產(chǎn)業(yè)是我國典型生態(tài)脆弱區(qū)(黃土、荒漠、寒區(qū)、喀斯特)的重要經(jīng)濟(jì)支柱，其經(jīng)濟(jì)價值的實(shí)現(xiàn)是生態(tài)治理取得突破的重要體現(xiàn)，生產(chǎn)性能的提高和品質(zhì)的改善直接關(guān)乎人民的切實(shí)利益。然而隨著牛肉市場需求的擴(kuò)大，現(xiàn)代養(yǎng)殖業(yè)和相關(guān)研究過度關(guān)注于提高肉牛的生產(chǎn)性能，忽略了品質(zhì)的改善，使得不同肉牛的胴體性狀差異較大，不利于培育高檔肉牛，影響產(chǎn)業(yè)價值的進(jìn)一步提升。肉牛的胴體主要由肌肉組織、脂肪組織、結(jié)締組織和骨骼組織四大部分構(gòu)成，其中肌肉與脂肪是消費(fèi)者選擇和購買最多的部分。國內(nèi)外科研工作者依據(jù)色澤、pH、系水力、眼肌面積、大理石花紋、脂肪顏色和質(zhì)地等評價指標(biāo)對肉牛肌肉和脂肪組織這兩部分的性狀改善進(jìn)行了大量研究報(bào)道。本文綜述了對這些肉質(zhì)性狀具有重要影響的候選基因，旨在為今后培育高檔肉牛提供理論參考。

1 肉牛胴體品質(zhì)常用評價指標(biāo)

牛肉色澤是肉中肌紅蛋白與氧氣結(jié)合時所呈現(xiàn)出的顏色與光澤，肉色等級主要取決于肌紅蛋白的含量和存在形式。因氧氣含量和血紅素輔基中鐵離子狀態(tài)的變化，肉中肌紅蛋白會先后以肌紅蛋白、氧合肌紅蛋白和正鐵肌紅蛋白的形式存在。通常，以氧合肌紅蛋白所表現(xiàn)出的櫻桃紅為最佳。

pH是肉中糖元酵解乳酸積累的結(jié)果。pH作為衡量肉品質(zhì)的一個重要指標(biāo)，不僅影響牛肉的嫩度、系水力和適口性，還與風(fēng)味、色澤顯著相關(guān)。研究表明，牛肉極限pH對肉色等級具有至關(guān)重要的影響，一般以5.4～5.6為最好。此外，pH的降低還可以減少微生物的滋生，利于肉類保存。

嫩度是最重要的評價牛肉品質(zhì)的性狀之一，主要受結(jié)締組織含量、肌纖維類型及比例和肌漿蛋白含量及化學(xué)結(jié)構(gòu)的影響。

系水力是指牛肉不因外力作用而使原有水分喪失的能力，通常以百分比(%)表示。牛肉的系水力與肌內(nèi)脂肪含量和蛋白質(zhì)含量密切相關(guān)，一般含量越高保水性越強(qiáng)。系水力是牛肉的一個重要經(jīng)濟(jì)性狀，它不僅影響鮮肉的色澤、適口性和營養(yǎng)成分，也影響加工時的產(chǎn)量。

眼肌面積是指牛屠宰后倒數(shù)第一、二胸肋間背最長肌的橫切面面積，與牛的活重、胴體重、分割肉重、屠宰率以及凈肉率均呈顯著的正相關(guān)，其遺傳力估計(jì)值為0.6～0.7。因此，生產(chǎn)中通常以眼肌面積來表明胴體中肌肉的比例和質(zhì)量，是預(yù)測胴體產(chǎn)量的一個關(guān)鍵指標(biāo)。

大理石花紋又稱脂肪雜交，指肌內(nèi)脂肪在肌肉組織中分布所形成的大理石狀花紋，由肌內(nèi)脂肪的含量和分布數(shù)量決定。國內(nèi)外研究表明，大理石花紋決定牛肉的風(fēng)味和嫩度，并認(rèn)為與牛肉的多汁性和營養(yǎng)價值密切相關(guān)。肌內(nèi)脂肪的含量越高、分布越均勻，越受消費(fèi)者的青睞，是評價牛肉質(zhì)量等級的一個重要指標(biāo)。

牛肉脂肪以潔白有光、質(zhì)地堅(jiān)實(shí)為最好。脂肪顏色取決于植物性飼料中胡蘿卜素和葉黃素的含量，一般含量越高牛肉脂肪色澤的等級越好。牛肉脂肪質(zhì)地則與不飽和脂肪酸密切相關(guān)，不飽和脂肪酸含量低時脂肪質(zhì)地堅(jiān)實(shí)而硬，適宜進(jìn)行牛肉的深加工。

2 肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)基因

2.1 Leptin基因

瘦素(Leptin，LEP)，是一種由白色脂肪組織合成、分泌的蛋白質(zhì)類激素，為肥胖基因的表達(dá)產(chǎn)物，和哺乳動物的體脂率密切相關(guān)，在皮下脂肪、大網(wǎng)膜、后腹膜和腸系膜都大量合成分泌，其它組織則少量表達(dá)?；蚨ㄎ挥谂?號染色體的q32區(qū)，基因總跨度約18.9 kb，包含有3個外顯子，共編碼167個氨基酸，其編碼區(qū)位于第2外顯子和第3外顯子。基因在脂質(zhì)代謝和能量平衡中起重要作用，通過調(diào)空攝食行為、能量消耗和脂肪分解而影響體重、嫩度、肌內(nèi)脂肪含量等指標(biāo)。因此，基因的突變必然會對畜禽的胴體性狀和肉品質(zhì)產(chǎn)生影響。目前為止科研工作者已對?；蚨鄳B(tài)性及其與胴體性狀和肉品質(zhì)的相關(guān)性進(jìn)行了大量研究，Schenkel等為驗(yàn)證前人的研究成果，對雜交公牛、小母牛的5種SNP(UASMS1、UASMS2、UASMS3、E2JW和E2FB)基因型進(jìn)行分析，結(jié)果表明E2JW和E2FB位點(diǎn)的多態(tài)性對嫩度、瘦肉率和脂肪等級影響顯著或極顯著。姜長生以新疆褐牛為試驗(yàn)對象，利用PCR-RFLP方法對基因第2外顯子E2JW和E2FB兩個位點(diǎn)的SNP進(jìn)行檢測，結(jié)果表明這兩個位點(diǎn)存在多態(tài)性，其中E2JW位點(diǎn)的多態(tài)性對肌內(nèi)脂肪含量和剪切力影響較大。薩吉代姆·麥麥提的研究也表明這兩個位點(diǎn)存在多態(tài)性，且顯著影響牛的體尺性狀和胴體性。李鋒為探討肉牛候選基因多態(tài)性與屠宰性狀的關(guān)系，對西門塔爾牛3、4、基因的多態(tài)性進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)3和4基因無多態(tài)位點(diǎn)，基因存在S978、S3521、S3822和S4091四個多態(tài)位點(diǎn)。相關(guān)性分析表明，S978突變會顯著影響肌內(nèi)脂肪含量，S3521突變既與肌內(nèi)脂肪含量相關(guān)，又顯著影響胴體重和眼肌面積。

2.2 SCD基因

硬脂酰輔酶A去飽和酶(SCD)，屬于脫氫酶家族，是一類存在于細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上，對哺乳動物機(jī)體中脂肪酸的形成和含量具有重要影響的基因家族。目前已發(fā)現(xiàn)的哺乳動物基因家族包括SCD1、2、3、4和5這5個亞型，不同的物種擁有多種亞型。人基因在10號和17號染色體上各有一個座位，基因總長約24 kb，包含SCD1和SCD5 2個亞型。?；蛞灿?個亞型(SCD1和SCD5)，其中普通牛1基因位于26號染色體，基因長17 088 bp，包括6個外顯子，共編碼359個氨基酸。水牛的1基因包含6個外顯子，但在染色體上的具體位置尚不明確。目前關(guān)于?；虻谋磉_(dá)研究主要集中在1，5的研究較少。牛1主要在脂肪細(xì)胞和乳腺細(xì)胞中表達(dá)，與機(jī)體脂質(zhì)代謝密切相關(guān)。唐慧等利用PCR技術(shù)對蜀宣花牛、巴山牛和安雜牛三個種群共計(jì)30頭牛1基因的表達(dá)量進(jìn)行了研究，并分析其與肌內(nèi)脂肪含量的相關(guān)性。結(jié)果表明，牛背最長肌組織中該基因的表達(dá)量與不飽和脂肪酸含量顯著正相關(guān)。Ferreira等探討高含油性濕酒糟對F1安格斯-內(nèi)洛牛肉質(zhì)性狀的影響，實(shí)驗(yàn)表明隨著高含油性濕酒糟在日糧中比例的增加，胸最長肌中的大理石花紋減少，1等脂肪生成基因的表達(dá)降低，但對牛肉嫩度和顏色無影響。張海波等研究牦牛肌內(nèi)脂肪含量與脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)外脊通過增加1基因的表達(dá)，促進(jìn)肌內(nèi)脂肪的沉積，增加肌肉組織嫩度，從而改善肉品質(zhì)。同時，SCD1作為飽和脂肪酸轉(zhuǎn)化為不飽和脂肪酸的關(guān)鍵酶，對產(chǎn)奶量和乳脂成分也有顯著影響。

2.3 DGAT基因

二脂酰甘油?；D(zhuǎn)移酶(DGAT)是一種廣泛存在于真核生物體內(nèi)的微粒體酶，也是催化二酰甘油和脂肪酰輔酶A合成甘油三酯的唯一關(guān)鍵酶和限速酶，在細(xì)胞甘油脂質(zhì)的代謝中起重要作用。DGAT主要有二酰甘油酰基轉(zhuǎn)移酶(DGAT1)和二酞甘油酞基轉(zhuǎn)移酶(DGAT2)兩種亞型。1基因定位于牛的14號染色體，基因總跨度14 117 bp，含有17個外顯子，mRNA序列共編碼489個氨基酸，由245 bp的5'-UTR、275 bp的3'-UTR以及1 470 bp的編碼序列組成。它在乳腺、睪丸、小腸、皮膚以及脂肪組織中具有較高的表達(dá)量，被認(rèn)為與牛的乳脂率、脂肪含量和大理石花紋等存在相關(guān)性。田璐等利用PCR-SSCP方法對3個黃牛品種及4個雜交肉牛1基因第17 exon和3'UTR的多態(tài)性進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)3'UTR的8 402 bp、8 414 bp、8 445 bp、8 465 bp和8 545 bp存在SNP突變。通過和肉質(zhì)性狀的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，8 402 bp位點(diǎn)的突變和眼肌面積、大理石花紋、肌內(nèi)脂肪含量等指標(biāo)顯著相關(guān)，該位點(diǎn)CC基因型個體大理石花紋和肌內(nèi)脂肪含量顯著BB型，而眼肌面積BB型基因個體要顯著高于CC型。武香香發(fā)現(xiàn)中國西門塔爾牛1基因多態(tài)性和肌內(nèi)脂肪含量顯著相關(guān)，與K等位基因相比，具有A等位基因的個體有更好的肌內(nèi)脂肪含量和剪切力值。Kong等報(bào)道，韓宇肉牛1基因存在K232A和T11993C兩個多態(tài)位點(diǎn)，相關(guān)性分析表明這兩個位點(diǎn)的交互作用對大理石花紋的等級具有顯著影響。此外，Bernard等和Thaller等的研究結(jié)果也論證了1基因?qū)εＤ倘橹示哂杏绊戇@一觀點(diǎn)。牛的DGAT2定位于BTA15q25-26，基因長31 456 bp，包含8個外顯子，在肝臟、腎臟以及白色脂肪組織中具有較高的表達(dá)量，主要參與機(jī)體組織的脂肪代謝。目前關(guān)于DGAT2的研究主要集中在與泌乳性狀的相關(guān)性分析方面，因此2和1都被視作奶牛產(chǎn)奶性狀的候選基因。

2.4 FABP基因

脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP)是一類廣泛存在于哺乳動物細(xì)胞質(zhì)中，對長鏈脂肪酸具有高親和力的低分子量可溶性蛋白質(zhì)，主要參與脂類代謝和脂肪的沉積調(diào)控。脂肪酸結(jié)合蛋白廣泛存在于脊椎和無脊椎動物中，目前在哺乳動物中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)9種具有不同結(jié)構(gòu)和功能的FABP，普遍認(rèn)為基因家族中對家畜肌內(nèi)脂肪含量(肌內(nèi)脂肪含量影響肉的嫩度、風(fēng)味、剪切力、多汁性和大理石花紋等)影響最大的是脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白(A-FABP)和心型脂肪酸結(jié)合蛋白(H-FABP)。

普通牛的-基因定位于14號染色體，基因全長4 391bp，包含4個外顯子，共編碼132個氨基酸，主要在脂肪細(xì)胞和巨噬細(xì)胞中表達(dá)，與甘油三酯的合成、分泌以及脂肪的代謝密切相關(guān)。劉艷妍等在秦川牛群體中，對-基因5'側(cè)翼區(qū)的1 441bp序列，使用DNA直接測序和PCR-SSCP進(jìn)行結(jié)合的方法檢測到轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)位上游-389 bp處存在1個SNP位點(diǎn)，分析發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)BB基因型個體的大理石花紋顯著優(yōu)于AB和AA基因型,有利于該群體的遺傳育種。唐紅杰對隴東肉牛-基因第2外顯子和第3外顯子上發(fā)現(xiàn)的多態(tài)位點(diǎn)進(jìn)行了檢測及其與肉質(zhì)性狀的相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)第2外顯子的突變點(diǎn)位與與剪切力相關(guān)，第3外顯子的GG基因型個體的剪切力、蒸煮損失、pH都顯著高于GC和CC基因型。劉瑞莉等對布萊特黑牛肌肉組織中-基因表達(dá)量和肌內(nèi)脂肪含量進(jìn)行測定，研究表明該基因在背最長肌中具有很高的表達(dá)量，且其多態(tài)性與肌內(nèi)脂肪含量顯著相關(guān)，但對大理石花紋等級的影響較小。-基因定位于牛的2號染色體，含有4個外顯子，共編碼133個氨基酸，主要在心臟組織中表達(dá)，對甘油三酯的沉積和脂肪酸的攝取起重要作用。李武峰等采用PCR-RFLP方法對3個雜交牛的-基因第2內(nèi)含子進(jìn)行多態(tài)性檢測，發(fā)現(xiàn)1006位點(diǎn)存在C→G突變，其中基因型對大理石花紋和嫩度有顯著相關(guān)性。周國利等使用測序技術(shù)與酶切位點(diǎn)相結(jié)合的新方法，在魯西黃牛-基因第2內(nèi)含子上發(fā)現(xiàn)1處突變。分析表明，該位點(diǎn)不同基因型間肉質(zhì)嫩度差異顯著，但對大理石花紋等級無顯著影響。李志才等對湘西黃牛-基因多態(tài)性與大理石花紋和肌內(nèi)脂肪含量的相關(guān)性差異進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)個體為純合基因型時，大理石花紋等級最優(yōu)，肌內(nèi)脂肪含量最高，H-FABP基因的多態(tài)性對湘西黃牛的大理石花紋和肌內(nèi)脂肪含量有顯著影響。

3 嫩度相關(guān)基因

3.1 CAPN基因

CAPN即鈣蛋白酶，是一類存在于生物細(xì)胞質(zhì)中依賴鈣離子激活的蛋白酶，pH7.2～8.2，它在機(jī)體各組織中普遍表達(dá)。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)CAPN基因家族中的16種亞型，廣泛存在于動物機(jī)體中的有2種，CAPN1(μ-鈣蛋白酶)和CAPN2(m-鈣蛋白酶)。它們分子質(zhì)量接近，分別擁有2個和4個結(jié)構(gòu)域，都有一個30 ku的小亞基和一個80 ku的大亞基組成，小亞基相同，大亞基則是兩個相關(guān)基因的產(chǎn)物。此外，二者激活活性時所依賴的鈣離子密度不同，CAPN1所需鈣離子密度為1～2 μ moL/L而CAPN2為250～750 μ moL/L。由GenBank公布的序列可知，牛的CAPN1和CAPN2都定位于29 號染色體連鎖群著絲粒末端56 cm處。其中1基因長約11 kb，包含24外顯子和23個內(nèi)含子，共編碼716個氨基酸。鈣蛋白酶對動物體內(nèi)各種肌纖維蛋白質(zhì)的降解起重要作用，是導(dǎo)致肌肉嫩化的主要因素。動物屠宰后，肌質(zhì)網(wǎng)釋放出鈣離子，引起細(xì)胞質(zhì)中游離鈣離子密度顯著升高，激活鈣蛋白酶，導(dǎo)致肌纖維蛋白質(zhì)降解，增加肉質(zhì)嫩度。Page等發(fā)現(xiàn)牛CAPN1中存在兩個錯義突變，一個是第9外顯子316位點(diǎn)發(fā)生G→C突變，使氨基酸由甘氨酸變?yōu)楸彼?，另一個是第14外顯子530位點(diǎn)發(fā)生A→G突變，導(dǎo)致編碼氨基酸由纈氨酸變?yōu)楫惲涟彼?，?dāng)標(biāo)記的核苷酸分別為C和G時，牛肉嫩度顯著提高。姜昊在中國草原紅牛CAPN1第5外顯子3717位點(diǎn)找到一個A→G突變，顯著影響肉質(zhì)性狀，其中G為優(yōu)勢等位基因，GG基因型個體肉質(zhì)嫩度顯著高于AG、AA基因型個體。華金玲等研究顯示，在牛的肌肉剪切力上攜帶B等位基因的個體顯著高于攜帶A等位基因的個體，但在其它肉質(zhì)性狀方面差異不顯著。近年來也有研究表明，牛1基因SNPs對pH、色澤、眼肌面積和大理石花紋等具有顯著影響。

3.2 CAST基因

鈣蛋白酶抑制蛋白(CAST)，是一種依賴鈣離子激活的胞內(nèi)專一性抑制CAPN活性的蛋白質(zhì)，和依鈣蛋白酶及骨骼肌特異性鈣蛋白酶共同組成鈣蛋白酶系統(tǒng)。CAST包含5個結(jié)構(gòu)域，即由N末端的L區(qū)和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ區(qū)構(gòu)成，L區(qū)對CA起輸送調(diào)節(jié)作用，Ⅰ～Ⅳ為抑制依鈣蛋白酶活性的功能區(qū)，其抑制能力：Ⅰ>Ⅱ>Ⅲ>Ⅳ。根據(jù)哺乳動物CAST的DNA片段在N末端編碼區(qū)的差異，可將其分為TypeⅠ、TypeⅡ、TypeⅢ和TypeⅣ四種類型，而牛的CAST則被測定為TypeⅡ型。定位于牛的7號染色體，包含30個外顯子和31個內(nèi)含子，在細(xì)胞內(nèi)普遍表達(dá)，主要參與肌肉細(xì)胞的生長代謝，通過抑制CAPN的自溶而影響牛肉的肉質(zhì)性狀。在畜禽屠宰后胴體的嫩化過程中，CAPN被鈣離子激活，附近的CAST會與之結(jié)合，影響自溶的穩(wěn)定性，導(dǎo)致CAPN只對局部的肌纖維蛋白質(zhì)進(jìn)行溶解。隨著熟化程度的加深，CAST活性會逐漸降低，肉質(zhì)會變得鮮嫩多汁。Woodward等通過對比牛宰前和宰后CAST的活性發(fā)現(xiàn)，宰后24 h牛背最長肌CAST活性與宰前肩胛骨表面肌CAST活性相似，為活體組織預(yù)測肉品質(zhì)的方式提供了支撐。Gandolfi等也論證了CAST活性與牛肉的嫩度顯著相關(guān)，可以作為嫩度指標(biāo)的候選基因。同時相關(guān)研究表明，基因的多態(tài)性與牛肉嫩度也存在很大的相關(guān)性。張立敏在2010年對620頭西門塔爾牛進(jìn)行全基因組關(guān)聯(lián)分析，在基因內(nèi)或基因20 kb范圍內(nèi)發(fā)現(xiàn)7對剪切力具有顯著影響的多態(tài)位點(diǎn)，其中BovineHD070028690位點(diǎn)對肌內(nèi)脂肪含量也有顯著影響。華金玲等利用DNA直接測序法檢測皖東牛基因的多態(tài)性，并分析其與肉質(zhì)性狀的相關(guān)性。研究發(fā)現(xiàn)，皖東?；虻?外顯子和第8內(nèi)含子存在5個突變位點(diǎn)，擁有CT和CC兩個基因型，不同基因型個體間除肌肉嫩度外其它肉質(zhì)性狀差異不顯著。Lee等為驗(yàn)證基因的多態(tài)性位點(diǎn)對牛肉質(zhì)嫩度的影響，利用TaqMan-SNP分型技術(shù)對韓宇肉牛的基因多態(tài)位點(diǎn)進(jìn)行測定，并通過WBSF實(shí)驗(yàn)評估胸長肌和半膜肌的嫩度，結(jié)果表明，1和基因中存在2個與剪切力值相關(guān)的多態(tài)位點(diǎn)。驗(yàn)證了CAST基因的多態(tài)位點(diǎn)可以用作標(biāo)記輔助選擇。

4 眼肌面積相關(guān)基因

生肌調(diào)節(jié)因子(MRFs)，或稱生肌決定因子家族，是一類只在骨骼肌細(xì)胞中表達(dá)，參與肌肉發(fā)生過程的相關(guān)基因，家族中包括生肌決定因子(MyoD)、肌細(xì)胞生成素(MyoG)、生肌因子5(Myf5)和生肌因子6(Myf6)。MRFs家族成員被定位于牛的不同染色體，基因定位于15號染色體，基因定位于16號染色體，5基因和6基因都定位于5號染色體，它們均含有3個外顯子和2個內(nèi)含子，其第1外顯子都存在Basic 和 HLH 結(jié)構(gòu)域。該基因家族參與調(diào)控肌細(xì)胞分化和生長發(fā)育的整個階段，5和在肌肉生成初期表達(dá)，控制肌祖細(xì)胞的定型和成肌細(xì)胞增殖，而和6則在肌肉形成末期表達(dá)，負(fù)責(zé)成肌細(xì)胞分化為不同功能型的肌纖維。肌纖維類型和比例與色澤、剪切力、肌內(nèi)脂肪含量等指標(biāo)密切相關(guān)，因而MRFs被認(rèn)為是影響畜禽經(jīng)濟(jì)性狀和肉質(zhì)性狀的候選基因，并進(jìn)行了大量的研究。

和5主要通過調(diào)控肌衛(wèi)星細(xì)胞的增殖分化來影響肌纖維的粗細(xì)和數(shù)量，故其位點(diǎn)突變可能會對與肌肉相關(guān)的肉質(zhì)性狀產(chǎn)生影響。田璐等用PCR-SSCP對3個黃牛品種和4個雜交肉牛群體的基因SNP進(jìn)行檢測，發(fā)現(xiàn)基因第二內(nèi)含子39 bp和112 bp存在SNP突變。通過和肉質(zhì)性狀的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，第2內(nèi)含子的SNP對肉牛胴體重、凈肉重和眼肌面積的影響差異顯著，該基因座中這些性狀A(yù)A基因型個體均顯著高于AB型，但AA基因型個體的嫩度、大理石花紋和肌內(nèi)脂肪含量等指標(biāo)均低于AB型。甘乾福以8個品種的牛為試驗(yàn)對象，利用PCR-RFLP技術(shù)檢測MRFs家族基因的多態(tài)性，并分析其與胴體性狀和肉品質(zhì)的關(guān)系。結(jié)果表明，基因多態(tài)性與眼肌面積顯著相關(guān)，BB基因型個體的眼肌面積顯著優(yōu)于AB型和AA型個體。楊曉冰研究利木贊雜交牛育肥屠宰指標(biāo)和5基因的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)12月齡牛的5基因多態(tài)性對宰前活重、胴體重等屠宰指標(biāo)的影響差異顯著，且不同基因型個體之間的眼肌面積差異極顯著，但該基因的多態(tài)性對24月齡牛的屠宰指標(biāo)無明顯影響。因而該研究結(jié)果也進(jìn)一步論證了5基因只在肌肉形成初期表達(dá)的觀點(diǎn)。通過控制成肌細(xì)胞和肌纖維的發(fā)生來影響肌肉分化，其多態(tài)性與畜禽的生長速度、產(chǎn)肉率等經(jīng)濟(jì)性狀都密切相關(guān)。王珊基于基因克隆、電子克隆和PCR-RFLP技術(shù)，對秦川牛及其雜交后代共計(jì)4個群體基因的SNP進(jìn)行檢測，并分析其與生長發(fā)育性狀的相關(guān)性。發(fā)現(xiàn)-基因座多態(tài)位點(diǎn)對生長發(fā)育性狀有顯著影響，在群體內(nèi)部AA基因型個體的宰前活重、胴體長等指標(biāo)顯著高于AB型，即A為優(yōu)勢等位基因。薛梅等研究表明，基因的單核苷酸多態(tài)性對黃牛尻長、體高、體斜長等體尺性狀也有很高的相關(guān)性。目前關(guān)于Myf6的相關(guān)研究較少，一般認(rèn)為該基因可協(xié)同家族成員、和5對肉質(zhì)性狀產(chǎn)生影響。

5 脂肪顏色和質(zhì)地相關(guān)基因

生長激素(GH)是一種廣泛存在于脊椎動物體內(nèi)，由腦垂體前葉合成并分泌的蛋白質(zhì)類激素。它的表達(dá)量受生長激素基因調(diào)控，直接或經(jīng)由生長激素介質(zhì)間接對靶細(xì)胞發(fā)揮作用，可以參與糖類、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)的代謝調(diào)節(jié)，在機(jī)體生長發(fā)育中起著關(guān)鍵性作用。基因定位于牛的19號染色體，基因總跨度約2 856 bp，包括5個外顯子，在機(jī)體各組織中普遍表達(dá)，其單核苷酸多態(tài)性與牛的生產(chǎn)性能和肉質(zhì)性狀等均存在一定程度的關(guān)聯(lián)性。牛志剛等利用PCR-RFLP對新疆褐?；虻?外顯子進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)新疆褐牛GH/Alu Ⅰ位點(diǎn)為中度多態(tài)性，存在VV、LV和LL 3種基因型。相關(guān)性分析表明，該多態(tài)位點(diǎn)對新疆褐牛早期生長發(fā)育性狀具有影響，不同基因型個體間體重和體長差異顯著。谷朝勇研究了魯西黃?；虻?外顯子末端序列的多態(tài)性以及多態(tài)位點(diǎn)與生產(chǎn)性狀的相關(guān)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)2639位點(diǎn)發(fā)生C→G突變，存在AA、AB和BB 3種基因型。關(guān)聯(lián)分析結(jié)果表明，該突變位點(diǎn)與牛的體重、體高、胸圍、體斜長和肉用指數(shù)等生產(chǎn)性狀差異顯著。張超等利用PCR-RFLP方法和DNA測序技術(shù)研究中國西門塔爾牛基因P3位點(diǎn)的多態(tài)性以及多態(tài)位點(diǎn)對經(jīng)濟(jì)性狀的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)發(fā)生C/G顛換，存在AA、AB和BB 3種基因型。相關(guān)性分析表明，中國西門塔爾牛GH-P3位點(diǎn)對胴體重、凈肉率、背膘厚等經(jīng)濟(jì)性狀影響顯著。郝靈慧利用PCR-RFLP技術(shù)檢測草原紅牛群體GH基因的SNPs，并分析其多態(tài)位點(diǎn)與胴體性狀之間的相關(guān)性。研究發(fā)現(xiàn)在眼肌面積性狀中，基因3'UTR多態(tài)位點(diǎn)與眼肌面積顯著相關(guān)，其中BB基因型為優(yōu)勢基因型，可作為潛在的分子DNA標(biāo)記。趙敬賢等通過關(guān)聯(lián)分析研究發(fā)現(xiàn)，基因P3位點(diǎn)的多態(tài)性與雪龍黑牛個體的牛腩厚和脂色等級顯著相關(guān)，可將其作為與牛脂肪顏色和質(zhì)地性狀相關(guān)的候選基因。

6 其它潛在基因

6.1 PPARα基因

過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)，主要在肝臟、骨骼肌和棕色脂肪組織等線粒體脂肪酸氧化速率快的組織表達(dá)，是調(diào)節(jié)機(jī)體脂類代謝的關(guān)鍵蛋白。Everett等敲除小鼠PPARα，發(fā)現(xiàn)該鼠會出現(xiàn)脂類代謝功能紊亂的情況，說明PPARα對調(diào)節(jié)脂肪酸氧化和細(xì)胞外脂質(zhì)代謝具有重要作用。樊月圓等利用PCR-SSCP結(jié)合測序技術(shù)發(fā)現(xiàn)，秦川牛基因第5外顯子138位點(diǎn)存在一個錯義突變，擁有AA、BB和AB 3種基因型。相關(guān)分析結(jié)果表明，AA基因型個體具有更好背膘厚和眼肌面積，BB基因型與系水力差異顯著。同家族成員PPARβ/δ與PPARγ也被認(rèn)為和體內(nèi)脂質(zhì)代謝相關(guān)，但不如PPARα在各組織部位分布廣泛。

6.2 AGPAT6基因

磷酸甘油?；D(zhuǎn)移酶6(AGPAT6)屬于溶血磷脂酸?；D(zhuǎn)移酶家族，在機(jī)體許多組織中都存在，但主要表達(dá)于乳腺和褐色脂肪組織，是脂質(zhì)代謝的關(guān)鍵酶。研究發(fā)現(xiàn)小鼠缺乏AGPAT6會出現(xiàn)厭食行為和脂肪生成障礙，不僅機(jī)體相應(yīng)組織部位TAG含量大幅下降，肌內(nèi)脂肪中的DG和TG也會減少。龍小娟采用PCR-SSCP方法分析6基因多態(tài)性與肉牛經(jīng)濟(jì)性狀的關(guān)聯(lián)性，發(fā)現(xiàn)中國西門塔爾牛6基因存在E1-303T>C和E12-299G>A兩個多態(tài)位點(diǎn)。相關(guān)分析結(jié)果表明，E1-303T>C位點(diǎn)與胴體pH、脂肪顏色、亞油酸含量以及脂肪覆蓋率顯著相關(guān)，E12-299G>A位點(diǎn)與大理石花紋評分顯著相關(guān)。說明6對脂肪酸合成有重要影響，可能是影響牛肉肉質(zhì)性狀的候選基因。

6.3 Angptl3基因

血管生成素樣蛋白3基因(3)屬于血管生成素樣蛋白家族，是一種主要在肝臟表達(dá)的分泌性糖蛋白，通過對脂蛋白脂酶活性的控制而參與脂質(zhì)代謝調(diào)節(jié)。研究發(fā)現(xiàn)，敲除3基因會導(dǎo)致小鼠出現(xiàn)低血脂癥狀，對其注射重組蛋白又可短時間內(nèi)快速提升血脂，說明3有調(diào)節(jié)血脂的作用。此外，F(xiàn)ujimoto等認(rèn)為Angptl3還與脂肪產(chǎn)生相關(guān)。胡鑫等研究發(fā)現(xiàn)，中國西門塔爾牛3基因第4外顯子存在一個SNP位點(diǎn)(G7358C)，有CD和DD兩種基因型，其中C是優(yōu)勢等位基因。關(guān)聯(lián)分析表明，該位點(diǎn)不同基因型與眼肌面積、脂肪覆蓋率、肌內(nèi)脂肪含量和大理石花紋評分差異顯著。研究也表明該位點(diǎn)呈現(xiàn)低度多態(tài)性，在改善肉質(zhì)性狀中具有很大的選擇潛力。

7 小 結(jié)

綜上所述，雖然現(xiàn)階段針對肉牛肌肉組織和脂肪組織性狀改善的遺傳選育工作存在基因聯(lián)合研究不足、技術(shù)體系不健全、產(chǎn)學(xué)研融合深度不夠等問題，但是相較于傳統(tǒng)育種方法，動物分子標(biāo)記育種可以快速、高效的選擇繪制與質(zhì)量性狀相關(guān)的基因組區(qū)域，通過調(diào)控基因組合來提高育種的準(zhǔn)確性和時效性。基因組學(xué)技術(shù)的發(fā)展給肉牛遺傳改良工作注入了新的動力，大量與胴體性狀相關(guān)的基因不斷被發(fā)現(xiàn)，相信隨著上述問題的解決，這些與肉質(zhì)性狀相關(guān)的基因必將有助于培育高檔肉牛，進(jìn)一步推動我國畜牧業(yè)的發(fā)展。