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        基于UPLC-ESI-TOF-MS技術(shù)的姬松茸和雙孢蘑菇酚化合物定性分析及體外抗氧化活性研究

        2022-06-15 05:18:44翟飛紅王艷趙文婧趙曉東韓建榮
        食品與發(fā)酵工業(yè) 2022年11期
        關(guān)鍵詞:數(shù)據(jù)庫(kù)

        翟飛紅,王艷,趙文婧,趙曉東,韓建榮

        1(太原師范學(xué)院 生物系,晉中 山西,030619)2(山西大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院,太原 山西,030006)

        多酚廣泛存在于植物中,根據(jù)其結(jié)構(gòu)不同可以分為酚酸類、黃酮類、芪類和木酚素等[1],對(duì)人體有抗氧化、抗炎癥、預(yù)防肥胖、糖尿病等功效[2]。食用菌中富含多酚,且多以酚酸化合物存在,包括苯甲酸類和黃烷-3-醇類等。姬松茸(Agaricusbrasiliensis)又名巴西蘑菇,是蘑菇屬的一種名貴食藥用真菌,其菌肉有杏仁味,營(yíng)養(yǎng)豐富,含有多糖、甾醇和維生素等營(yíng)養(yǎng)活性成分,具有較高的抗癌活性和增強(qiáng)免疫的功能[3]。雙孢蘑菇(Agaricusbisporus)栽培范圍廣、產(chǎn)量大,肉質(zhì)肥美、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,富含多酚、多糖、氨基酸、礦物質(zhì)等成分,抗過(guò)敏、抗腫瘤和抗氧化等作用顯著[4]。

        姬松茸和雙孢蘑菇栽培方式相似,作為2種重要的食用菌,關(guān)于其多酚組成已有一些文獻(xiàn)報(bào)道。如CARVAJAL等[5]從姬松茸子實(shí)體和菌絲體中均分離出沒(méi)食子酸、丁香酸和焦性沒(méi)食子酸。但現(xiàn)有的文獻(xiàn)均是采用高效液相色譜法對(duì)其組成進(jìn)行鑒定,僅可測(cè)得所選的酚化合物標(biāo)準(zhǔn)品是否存在于待測(cè)樣品中,而無(wú)法全面測(cè)得樣品中的酚化合物組成。

        本文擬采用超高效液相色譜-電噴霧飛行時(shí)間質(zhì)譜(ultra performance liquid chromatography-electrospray time- of- flight- mass spectrometry,UPLC-ESI-TOF-MS)對(duì)實(shí)驗(yàn)室栽培獲得的姬松茸和雙孢蘑菇子實(shí)體中的酚化合物組成進(jìn)行初步分離鑒定,并對(duì)其多酚提取液的DPPH自由基清除能力、Fe2+螯合能力和還原力進(jìn)行測(cè)定,綜合評(píng)價(jià)2種食用菌子實(shí)體多酚提取液的體外抗氧化活性。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        姬松茸與雙孢蘑菇子實(shí)體由本實(shí)驗(yàn)室采用常規(guī)方法栽培獲得。采摘子實(shí)體后,除去菇腳的泥土等雜質(zhì)后冷凍干燥,粉碎過(guò)80目篩,密封置于冰箱中保存。

        沒(méi)食子酸,上海源葉生物科技有限公司;福林酚、DPPH、啡咯嗪,北京索萊寶科技有限公司;甲醇(色譜純),天津市康科德科技有限公司;Na2CO3、乙醇、鐵氰化鉀、三氯乙酸、FeCl2等均為國(guó)產(chǎn)分析純。

        1.2 儀器與設(shè)備

        UV752紫外可見(jiàn)分光光度計(jì),上海赫爾普國(guó)際貿(mào)易有限公司;UPLC-Triple-TOF/MS系統(tǒng)、AcquityTMultra型高效液相色譜儀,美國(guó)Waters公司;Triple TOF 5600+型飛行時(shí)間質(zhì)譜(配有電噴霧離子源),美國(guó)AB SCIEX公司;ZORBAX-SB C18(100 mm×4.6 mm i.d.,1.8 μm)色譜柱,美國(guó)安捷倫公司。

        1.3 實(shí)驗(yàn)方法

        1.3.1 多酚的提取

        按照CHETHAN等[6]的方法略作改動(dòng)。分別準(zhǔn)確稱取2.00 g子實(shí)體粉末,用石油醚(30~60 ℃)脫脂,轉(zhuǎn)移至50 mL的錐形瓶中,分別加入20 mL甲醇,超聲提取30 min,離心取上清液,將濾渣采用相同方式進(jìn)行復(fù)提,合并2次上清液。將上清液冷凍干燥,用甲醇定容至一定體積,保存至冰箱中待測(cè)。

        1.3.2 多酚組成的鑒定

        液相條件:流動(dòng)相由0.1%甲酸溶液和0.1%甲酸乙腈組成,流速0.8 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm;進(jìn)樣量5 μL;柱溫箱30 ℃;梯度洗脫程序?yàn)椋?~2 min,5%B;2~25 min, 5%~35% B;25~35 min,35%~95% B;35~37 min,95% B;37~40 min,95%~5% B;柱溫30 ℃;進(jìn)樣量5 μL;流速0.8 mL/min。

        質(zhì)譜條件:UPLC-Triple-TOF 5600+飛行時(shí)間液質(zhì)聯(lián)用儀,由于蘑菇中的酚化合物多為酚酸[7],解離為陰離子,因此采用負(fù)離子掃描模式;掃描范圍:100~1 500m/z;霧化氣(GS1):50 psi;霧化氣(GS2):50 psi;氣簾氣(CUR):35 psi;離子源溫度(TEM):550 ℃(負(fù));離子源電壓(IS):-4 500 V;一級(jí)掃描:去簇電壓(DP):100 V,聚焦電壓(CE):10 V;二級(jí)掃描:使用TOF MS~Product Ion~I(xiàn)DA模式采集質(zhì)譜數(shù)據(jù),CID能量為-20、-40、-60 V,進(jìn)樣前,用CDS泵做質(zhì)量軸校正,使質(zhì)量軸誤差<2×10-6[8-9]。

        1.3.3 多酚提取液體外抗氧化活性的測(cè)定

        姬松茸和雙孢蘑菇多酚提取液中多酚含量的測(cè)定:采用福林酚比色法[10]。以沒(méi)食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:Y=7.167 1X-0.003 5(R2=0.999 8,X為沒(méi)食子酸的濃度,Y為對(duì)應(yīng)濃度下的OD值)。樣品中的多酚含量用每克樣品(干重)中的沒(méi)食子酸當(dāng)量來(lái)表示,單位為mg GAE/g DW。

        姬松茸和雙孢蘑菇多酚提取液DPPH自由基清除能力的測(cè)定[11]:在2 mL不同濃度的樣液中加入2 mL DPPH溶液(0.2 mmol/L),搖勻,靜置30 min,對(duì)照用甲醇代替樣品,空白管為樣品加70%的乙醇(即DPPH的溶劑)。517 nm處測(cè)OD值。按公式(1)計(jì)算DPPH自由基清除能力:

        (1)

        式中:A0,對(duì)照吸光度值;A1,樣品吸光度值;A2,空白吸光度值。

        姬松茸和雙孢蘑菇多酚提取液還原力的測(cè)定[12]:當(dāng)溶液中存在還原劑時(shí),F(xiàn)e3+和鐵氰化物復(fù)合物會(huì)接受還原劑給出的電子轉(zhuǎn)化為Fe2+形式的化合物,進(jìn)而兩者反應(yīng)生成普魯士藍(lán)(Fe4[Fe(CN)6]3),其在700 nm處有最強(qiáng)吸收峰,溶液顏色由原來(lái)的黃色變成不同程度的綠色-藍(lán)色,故測(cè)定700 nm處的OD值即可測(cè)定Fe2+濃度。OD值越大,表示還原力越強(qiáng)。

        測(cè)定方法為:在1 mL不同濃度的樣液中分別依次加入2.5 mL磷酸緩沖液(50 mmol/L,pH 7.0)和2.5 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%鐵氰化鉀溶液,50 ℃保溫20 min,然后迅速冷卻,加入2.5 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%三氯乙酸溶液,離心,取上清液。1.25 mL上清液中依次加入1.25 mL蒸餾水和0.25 mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%FeCl3溶液,混合均勻,靜置10 min,700 nm處測(cè)OD值。

        姬松茸和雙孢蘑菇多酚提取液Fe2+螯合能力的測(cè)定[13]:在1.6 mL不同濃度的樣液中分別依次加入1.6 mL蒸餾水、0.4 mL 0.5 mmol/L FeCl2、0.4 mL 0.5 mmol/L Ferrozine,然后劇烈搖動(dòng)1 min,室溫放置20 min后,562 nm處測(cè)OD值??瞻坠?A0)用蒸餾水代替樣液。按公式(2)計(jì)算Fe2+螯合能力:

        (2)

        式中:A1,樣品吸光度值,A0,空白吸光度值。

        1.4 數(shù)據(jù)處理

        實(shí)驗(yàn)設(shè)3次重復(fù),數(shù)據(jù)采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,多個(gè)均數(shù)間的兩兩比較用Duncan多重比較法進(jìn)行。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 姬松茸和雙孢蘑菇子實(shí)體中多酚組成的鑒定

        姬松茸子實(shí)體甲醇提取液經(jīng)過(guò)UPLC-ESI-TOF-MS分析后,根據(jù)其質(zhì)譜數(shù)據(jù)并結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,初步鑒定出以下10種酚類物質(zhì),其一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜圖及結(jié)構(gòu)圖和相關(guān)信息如電子版本中的附圖1和表1所示。

        化合物A:[M-H]-為237.089 0,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C11H14N2O4,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z219[M-18-H]和m/z193[M-44-H]等碎片離子,化合物結(jié)構(gòu)中存在1個(gè)羧基,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為甘氨酰-L-酪氨酸。

        表1 姬松茸和雙孢蘑菇酚化合物的信息表Table 1 Information of phenolic compounds from A.brasiliensis and A.bisporus

        化合物B:[M-H]-為264.099 8,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C12H15N3O4,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z246[M-18-H],m/z220[M-44-H]和m/z203[M-44-17-H]等碎片離子,化合物結(jié)構(gòu)中存在羧基和氨基,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為β-N-(γ-谷氨酰)-4-甲酰基苯肼。

        化合物C:[M-H]-為294.110 3,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C13H17N3O5,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z276[M-18-H],m/z250[M-44-H]和m/z233[M-44-17-H]等碎片離子,化合物結(jié)構(gòu)中存在羧基和氨基,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為甲基戊酸。

        化合物D:[M-H]-為219.078 4,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C11H12N2O3,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z201[M-18-H]和m/z219[M-28-H]等碎片離子,結(jié)構(gòu)中存在羧基,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為5-羥基色氨酸。

        化合物E:[M-H]-為194.047 2,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C9H9NO4,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z152[M-42-H]和m/z108[M-42-44-H]等碎片離子,化合物結(jié)構(gòu)中存在羧基和羰基,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為2-乙酰氨基-3-羥基苯甲酸。

        化合物F:[M-H]-為121.031 8,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C7H6O2,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜[M-29-H]等碎片離子,以及Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為4-羥基苯甲醛。

        化合物G:[M-H]-為293.079 0,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C13H14N2O6,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z249[M-44-H]和m/z204[M-45-44-H]等碎片離子,化合物結(jié)構(gòu)中存在羧基,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為acromelic acid E。

        化合物H:[M-H]-為241.120 5,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C11H18N2O4,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z197[M-44-H]和m/z168[M-44-29-H]等碎片離子,化合物結(jié)構(gòu)中存在羧基和羰基,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索及大量文獻(xiàn),推測(cè)該化合物為L(zhǎng)-焦谷氨酰-L-亮氨酸。

        化合物I:[M-H]-為249.089 1,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C12H14N2O4,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z204[M-45-H]和m/z168[M-58-H]等碎片離子,化合物結(jié)構(gòu)中存在酰胺,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為鄰-丁二酰胺基-苯甲酸甲酯。

        化合物J:[M-H]-為275.104 7,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C14H16N2O4,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z231[M-44-H]等碎片離子,化合物結(jié)構(gòu)中存在羧基,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為L(zhǎng)-焦谷氨酰-L-苯丙氨酸。

        雙孢蘑菇子實(shí)體甲醇提取液經(jīng)過(guò)UPLC-ESI-TOF-MS分析后,根據(jù)其質(zhì)譜數(shù)據(jù)并結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,初步鑒定出12種酚類物質(zhì),其中有6種與從姬松茸中分離鑒定的酚化合物一樣,分別為:甘氨酰-L-酪氨酸、β-N-(γ-谷氨酰)-4-甲酰基苯肼、甲基戊酸、4-羥基苯甲醛、L-焦谷氨酰-L-亮氨酸和L-焦谷氨酰-L-苯丙氨酸。其余6種酚化合物的一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜圖及結(jié)構(gòu)圖和相關(guān)信息如附圖2和表1所示。

        化合物a:[M-H]-為257.078 4,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C10H14N2O6,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z239[M-18-H],m/z213[M-44-H]和m/z169[M-44-17-H]等碎片離子,化合物結(jié)構(gòu)中存在羧基,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為5-羥脯氨酰-L-谷氨酸。

        化合物b:[M-H]-為153.020 2,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C7H6O4,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z109[M-44-H]和m/z91[M-44-18-H]等碎片離子,該化合物結(jié)構(gòu)中存在羧基,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為3,4-二羥基苯甲酸。

        化合物c:[M-H]-為291.099 1,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C14H16N2O5,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z247[M-44-H]和m/z230[M-17-44-H]等碎片離子,化合物結(jié)構(gòu)中存在羧基和氨基,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為(2R,4R)-2-[(1H-吲哚-3-基)甲基]-4-氨基-2-羥基戊烷-1,5-二酸。

        化合物d:[M-H]-為222.077 9,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C11H13NO4,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜[M-30-H]和[M-30-15-H]等碎片離子,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為環(huán)磷酰胺。

        化合物e:[M-H]-為249.099 5,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C11H14N4O3,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z205[M-44-H]和m/z163[M-42-44-H]等碎片離子,化合物結(jié)構(gòu)中存在羧基,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為阿樸鳥(niǎo)嘌呤A。

        化合物f:[M-H]-為207.078 3,根據(jù)高分辨質(zhì)譜結(jié)果擬合的分子式為C10H12N2O3,根據(jù)二級(jí)質(zhì)譜m/z163[M-44-H],m/z121[M-44-42-H]和m/z121[M-44-42-17H]等碎片離子,化合物結(jié)構(gòu)中存在羧基和氨基,結(jié)合Scifinder和Reaxy數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,推測(cè)該化合物為犬尿氨酸。

        2.2 姬松茸和雙孢蘑菇子實(shí)體多酚提取液的體外抗氧化活性

        首先測(cè)定了姬松茸和雙孢蘑菇子實(shí)體中的多酚含量(圖1-a),結(jié)果顯示姬松茸中的多酚含量顯著高于雙孢蘑菇(P<0.05),分別為22.21和19.58 mg GAE/g。之后對(duì)2種子實(shí)體多酚提取液的體外抗氧化活性(DPPH自由基清除能力、還原力和Fe2+螯合能力)進(jìn)行了測(cè)定。

        a-多酚含量;b-DPPH自由基清除能力;c-還原力;d-Fe2+螯合能力圖1 姬松茸和雙孢蘑菇多酚提取液的多酚含量和體外抗氧化活性Fig.1 Polyphenols contents and antioxidant properties in vitro of extracts from A.brasiliensis and A.bisporus

        從圖1可知,姬松茸和雙孢蘑菇多酚提取液的DPPH自由基清除能力、還原力和Fe2+螯合能力均隨著提取液濃度的提高而逐漸提高。姬松茸和雙孢蘑菇在提取液質(zhì)量濃度為4.0 mg/mL時(shí)對(duì)DPPH自由基清除能力達(dá)到最強(qiáng),分別為81.09%和72.98%。2種蘑菇子實(shí)體提取液質(zhì)量濃度為10.0 mg/mL時(shí),其還原力最強(qiáng),在此濃度下對(duì)Fe2+螯合能力也達(dá)到最強(qiáng),分別為93.02%和88.99%。

        為了更好地反映2種子實(shí)體的體外抗氧化活性,對(duì)各抗氧化指標(biāo)的EC50值進(jìn)行了計(jì)算,結(jié)果如表2所示。雙孢蘑菇提取液各抗氧化指標(biāo)的EC50值均顯著高于姬松茸,這說(shuō)明姬松茸子實(shí)體提取液的體外抗氧化活性顯著強(qiáng)于雙孢蘑菇(P<0.05)。

        表2 姬松茸和雙孢蘑菇多酚提取液抗氧化活性的EC50值Table 2 EC50values in antioxidant activities of A.brasiliensis and A.bisporus

        3 結(jié)論與討論

        本實(shí)驗(yàn)采用UPLC-ESI-TOF-MS對(duì)姬松茸和雙孢蘑菇子實(shí)體中的酚化合物組成進(jìn)行了初步分離鑒定,分離到了16種酚化合物,分別為:甘氨酰-L-酪氨酸、β-N-(γ-谷氨酰)-4-甲?;诫隆⒓谆焖?、5-羥基色氨酸、2-乙酰氨基-3-羥基苯甲酸、4-羥基苯甲醛、acromelic acid E、L-焦谷氨酰-L-亮氨酸、鄰-丁二酰胺基-苯甲酸甲酯、L-焦谷氨酰-L-苯丙氨酸、5-羥脯氨酰-L-谷氨酸、3,4-二羥基苯甲酸、(2R,4R)-2-[(1H-吲哚-3-基)甲基]-4-氨基-2-羥基戊烷-1,5-二酸、環(huán)磷酰胺、阿樸鳥(niǎo)嘌呤A和犬尿氨酸。在這16種酚化合物中,有6種是同時(shí)存在于2種食用菌中的。2種蘑菇子實(shí)體的多酚含量分別為22.21和19.58 mg GAE/g。并對(duì)姬松茸和雙孢蘑菇子實(shí)體多酚提取液體外抗氧化性進(jìn)行了測(cè)定,得出姬松茸和雙孢蘑菇子實(shí)體提取液的DPPH自由基清除能力、還原力和Fe2+螯合能力均隨著提取液濃度的提高而逐漸提高。且在提取液質(zhì)量濃度為4.0 mg/mL時(shí)對(duì)DPPH自由基清除能力達(dá)到最強(qiáng),分別為81.09%和72.98%;在提取液質(zhì)量濃度為10.0 mg/mL時(shí),其還原力最強(qiáng),在此濃度下對(duì)Fe2+螯合能力也達(dá)到最強(qiáng),分別為93.02%和88.99%。且通過(guò)計(jì)算EC50值得出,姬松茸子實(shí)體提取液的體外抗氧化活性顯著強(qiáng)于雙孢蘑菇。以上結(jié)果說(shuō)明姬松茸和雙孢蘑菇具有被開(kāi)發(fā)為功能食品或添加劑的潛力。

        傘菌氨酸(β-N-(γ-谷氨酰)-4-羥甲基苯肼)具有明確的抗腫瘤、治療糖尿病、誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡等活性作用[14-16],近年來(lái)引起了普遍的關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)從姬松茸和雙孢蘑菇子實(shí)體中分離到β-N-(γ-谷氨酰)-4-甲?;诫率呛铣蓚憔彼岬闹虚g體[17]。CHULIA等[18]曾報(bào)道從四孢蘑菇(Agaricuscampestris)的子實(shí)體中分離到β-N-(γ-谷氨酰)-4-甲酰基苯肼,還未發(fā)現(xiàn)從姬松茸和雙孢蘑菇中分離到β-N-(γ-谷氨酰)-4-甲酰基苯肼的報(bào)導(dǎo)。CARVAJAL等[5]報(bào)道在姬松茸子實(shí)體和菌絲體中均分離到?jīng)]食子酸、丁香酸和焦性沒(méi)食子酸,而在本次實(shí)驗(yàn)中均沒(méi)有分離到這3種酚酸化合物。研究報(bào)道表明4-羥基苯甲酸存在于雙孢蘑菇、糙皮側(cè)耳(Pleurotusostreatus)、杏鮑菇(Pleurotuseryngi)、香菇(Lentinusedodes)等蘑菇的子實(shí)體和菌絲體中[7,19],YAO等[20]在裂褶菌(Schizophyllumcommune)的子實(shí)體中也分離到4-羥基苯甲酸。本實(shí)驗(yàn)從姬松茸中也分離到了4-羥基苯甲酸。REIS等[7]曾報(bào)道在雙孢蘑菇的菌絲體里發(fā)現(xiàn)有4-羥基苯甲酸,這與本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果是一致的。此外,還有文獻(xiàn)報(bào)道在姬松茸和雙孢蘑菇的子實(shí)體中存在沒(méi)食子酸、桂皮酸和焦性沒(méi)食子酸[5,19,21-23],而在本實(shí)驗(yàn)中卻沒(méi)有分離到。導(dǎo)致這些結(jié)果差異的原因,可能是由于子實(shí)體栽培條件或培養(yǎng)基質(zhì)不同導(dǎo)致的,也可能是由于檢測(cè)條件不同所導(dǎo)致的,亦有可能是因?yàn)樵诒敬螌?shí)驗(yàn)中還未鑒定出來(lái)。

        很多研究表明多酚含量與抗氧化性具有明確的正相關(guān)性,那酚類物質(zhì)的組成與抗氧化性是什么關(guān)系?REIS等[7]研究分析了雙孢蘑菇、糙皮側(cè)耳、杏鮑菇、香菇的子實(shí)體和菌絲體的抗氧化性以及樣品中的酚酸化合物,發(fā)現(xiàn)樣品中的單一酚酸化合物(含量)與抗氧化性之間沒(méi)有明確的相關(guān)性,也就是說(shuō),某一種高含量的酚酸不一定能導(dǎo)致高的抗氧化性。PALACIOS等[21]的研究結(jié)果也得到了相同的結(jié)論。在本實(shí)驗(yàn)中由于沒(méi)有測(cè)定分離到酚化合物的絕對(duì)含量,所以無(wú)法與抗氧化性的相關(guān)性進(jìn)行分析,具體的結(jié)論還有待進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究。本實(shí)驗(yàn)從姬松茸和雙孢蘑菇中分離到的多種酚化合物具有各自的活性作用,例如4-羥基苯甲酸的抗神經(jīng)衰弱功能[20]和抗炎作用[19],β-N-(γ-谷氨酰)-4-甲?;诫耓或β-N-(γ-谷氨酰)-4-羥甲基苯肼]的抗腫瘤、治療糖尿病等活性作用[14-16]。因此,該研究為雙孢蘑菇和姬松茸開(kāi)發(fā)成相關(guān)的功能食品或產(chǎn)品提供依據(jù)。

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